Использование антител для количественного определения, очистки и локализации регуляторов роста растений и их метаболитов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, доктор биологических наук Веселов, Станислав Юрьевич

• Веселов, Станислав Юрьевич
• доктор биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации доктор биологических наук Веселов, Станислав Юрьевич

Введение 2

Объекты и методы исследования 9

1 Место ИФА среди методов анализа фитогормонов. 17

2.1. Характеристика иммуноферментной тест-системы для определения индолил-3-уксусной кислоты (ИУК). 25

2.2 Иммуноферментная тест-система для определения цитокининов. 36

2.3. Иммуноанализ абсцизовой кислоты. 47

2.4. Сравнение различных вариантов тест-систем и регулирование их чувствительности и специфичности. 53

2.4.1 Повышение чувствительности реакции (суперЕЬКА). 54

2.4.2 Сравнение чувствительности и специфичности тест-систем с сорбированными на твердую фазу антителами и антигеном.63

2.4.3 Влияние гормона, используемого для приготовления антигена, на специфичность реакции. 75

2.4.4 Расширение специфичности и отбор гормонопободных соединений. 80

2.4.5 Использование антител к ИУК для оценки количества ауксинподоб-ных гербицидов .85

3 Очистка гормонов перед определением. 90

3.1. Использование антител для очистки гормонов растений перед их определением с помощью физико-химических методов. 90

3.2. Типы интерференции в иммуноанализе. 97

3.2.1. Сецифическая интерференция и подготовка экстракта к определению ауксинов и АБК.98

3.2. Использование ИФА для оптимизации процедуры экстрагирования 106 гормонов

3.3. Хроматографическое разделение иммунореактивных цитокининов . 111

3.4 Неспецифическая интерференция и определение содержания цитокининов в культуральной жидкости гормонпродуцирующих бактерий. 124

3.5 Достоверность иммуноанализа гормонов растений. Сравнение данных ИФА и физико-химических методов. 140

4. ИФА в изучении метаболизма гормонов. 144

4.1. Метаболизм ауксинов. 152

4.2. Метаболизм АБК. . 163

4.3. Метаболизм цитокининов. 170

5. Использование антител для иммунолокализации гормонов. 200

5.1 Иммунолокализация цитокининов. Отработка условий постановки реакции. 205

5.2 Количественное определение и локализация цитокининов в листьях трансгенных и ^трансформированных растений табака . 210

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Веселов, Станислав Юрьевич

ВЫВОДЫ

1. Разработаны иммуноферментные тест-системы, позволяющие проводить количественное определение ИУК, АБК, и цитокининов: зеатина, дигид-розеатина, изопентениладенина и их производных, - отличающиеся высокой чувствительностью и специфичностью. Обоснованы подходы направленного регулирования уровня специфичности и чувствительности иммуноанализа путем изменения концентрации иммунореагентов, замены ре-ференс-гормонов на их структурные аналоги и амплификации сигнала за счет использования циклических окислительно-восстановительных реакций.

2. Применение тест-системы с усилением сигнала позволило разрешить проблему определения цитокининов в ксилемном эксудате на ранних стадиях развития проростков пшеницы. На основе этих данных были рассчитаны скорости поступления цитокининов в побег и их обмена в самом побеге, которые оказались на порядок более высокими по сравнению со значениями, описанными в литературе для взрослых растений.

3. Показана возможность определения ауксинподобных гербицидов с помощью тест-системы с антителами к ИУК с расширенной специфичностью и амплификацией сигнала в образце, в котором природные ауксины разрушены путем окисления. Этот подход освобождает от необходимости получения антител к каждому из известных ауксинподобных гербицидов при разработке тест-систем для опредления их остаточных количеств в пищевых продуктах и окружающей среде.

4. Показано, что обнаруженная возможность регулирования параметров иммуноанализа может быть использована для первичного скрининга синтетических гормоноподобных соединений по их способности реагировать с антителами в тест-системе с расширенной специфичностью. Эффективность и производительность метода показана на примере скрининга 600 соединений, синтезированных в Институте химии УНЦ РАН, среди которых отобрано несколько веществ, проявивших себя в биотестах и полевых испытаниях как перспективные регуляторы роста и устойчивости растений.

5. Предложена одностадийная очистка растительного материала на основе иммуноаффинной хроматографии перед исследованием цитокининов с помощью физико-химических методов (ГЖХ, ВЭЖХ-МС). Разработана схема иммуноаффинной очистки цитокининов, продуцируемых ризосфер-ными бактериями, позволяющая избежать влияния интерферирующих компонентов культуральной среды на количественное определение гормонов. В процессе исследования фитогормонов, продуцируемых В. БиЫШз, впервые обнаружен и охарактеризован высокомолекулярный комплекс цитокининов с полисахаридом.

6. Показана возможность увеличения надежности иммуноанализа ПУК и АБК за счет применения модифицированной очистки, обеспечивающей повышение селективности извлечения гормонов при уменьшении объема экстрагента на каждой стадии экстракции и реэкстракции. Предложена схема очистки и разделения цитокининов, основанная на использовании иммуноаффиной и тонкослойной хроматографии, а также модификации иммунореактивности за счет ферментативной и химической обработки образцов. Надежность определения гормонов подтверждена путем сопоставления результатов иммуноанализа и фихико-химических методов.

7. Изучение детальной динамики концентрации АБК в побегах растений с живыми и убитыми корнями при действии на корни осмотического шока и сопоставление гормональной и ростовой реакции растений позволили установить роль метаболических превращений гормона в органе, дистанцированном от места восприятия внешнего воздействия, в быстрой передаче сигнала по растению и его реализации.

8. Разработана оригинальная методика определения активности цитокинин-оксидазы, основанная на иммуноферментной оценке разрушения ИПА под влиянием белковой фракции из тканей растений. Реакция фермента на ингибиторы и стимуляторы цитокинин-оксидазы соответсвует описанным в литературе. С помощью данного подхода показано, что быстрое уменьшение концентрации цитокининов в побегах проростков пшеницы в ответ на резкое охлаждение их корней связано с активацией разрушения гормона.

9. Показана способность листьев проростков пшеницы, получавших азот в виде внекорневой подкормки, к накоплению зеатина к 4-5 дню после их отделения от растения. Сопоставление динамики зеатина, его нуклеотида и О-гликозиолированных производных, а также нерастворимых в спирте полимерных форм показало, что освобождение активной формы цитоки-нина из ее запасных форм в данном случае не могло быть причиной увеличения его содержания. Параллельное с зеатином накопление ИПА, который является первичным продуктом синтетических превращений, ведущих к образования цитокининов, указывает на способность изолированных листьев синтезировать цитокинины.

10.Обнаружено, что активация под влиянием теплового шока естественных процессов, направленных на снижение концентрации цитокининов в растении за счет их гликозилирования, предотвращает продолжительное накопление цитокининов у трансгенных растений табака, трансформированных с помощью конструкции, содержащей индуцируемый тепловым шоком //?/-ген ключевого фермента синтеза цитокининов. Эти результаты указывают на то, что при конструировании трансгенных растений необходимо учитывать их естественную реакцию на фактор, используемый в качестве индуктура трансгена.

11. Разработан метод иммуногистологической локализации гормонов. На примере сравнительного изучения срезов тканей исходных растений табака и растений, трансформированных с помощью конструкции, содержащей индуцируемый светом гр^-ген, показано, что интенсивность иммунного окрашивания зависит не только от количественного содержания иммунореактивных форм гормона, но их спектра и компартментизации, обеспечивающей доступность гормона для воздействия фиксирующих агентов.

12. Сравнение относительного содержания цитокининов в листьях разного яруса //?/-трансгенных и исходных растений табака показало, что нарушение нормального градиента гормонов, т.е. отсутствие снижения их общего содержания при переходе от верхних литьев к нижним, у трансформированных растений связано с накоплением нуклеотида зеатина. Полученные результаты указывают на существование в организме механизмов, предотвращающих избыточное накопление активной формы цитокининов и их сохранение в виде запасной формы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, анализ данных литературы и наших собственных результатов свидетельствует о перспективности использования антител для количественного определения, очистки и локализации гормонов и их метаболитов.

Хотя первоначальные надежды на то, что специфичность антител позволит определять с их помощью количество гормонов в неочищенном экстракте, не оправдались, тем не менее использование иммуноанализа позволяет значительно упростить процедуру очистки образцов по сравнению с той длительной и трудоемкой схемой, которая требуется перед применением физико-химических методов.

Насущная потребность физиологов и биохимиков растений в количественном анализе гормонов явилось причиной того, что несмотря на сложность физико-химических подходов, они все же довольно широко применялись исследователями и приобрели статус стандартных методов достоверного определения фитогормонов. Последнее обстоятельство позволило оценить надежность иммуноанализа гормонов путем сравнения результатов иммунохимиче-ских и физико-химических методов. Возможность такого сопоставления помогает выявить причину получения в некоторых случаях некорректных результатов иммуноанализа. Обнаруженные закономерности полезны не только для разработки принципов надежного определения гормонов растения с помощью иммунохимических методов, но накопленный в этой области опыт может быть использован также для решения проблем иммуноанализа самых различных природных и синтетических соединений.

При исследовании культуральной жидкости бактерий, продуцирующих гормоны, были охарактеризованы компоненты, вызывающие неспецифическую интерференцию, и разработаны способы их устранения. С помощью иммуноанализа нами были обнаружены новые формы гормонов и отобраны гормоноподобные соединения.

Применение антител позволило также сократить процедуру очистки гормонов, необходимую для их более надежной идентификации с помощью физико-химических методов.

Сравнительный анализ динамики гормонов и и их метаболитов, основанный на использовании иммунохимических методов определения, оказался полезным инструментом для изучения механизмов, регулирующих концен-тарцию гормонов в растениях.

Сочетание иммунохимических методов с техникой микроскопии сделало возможным изучение распределения гормонов в тканях и клетках. Оптимизация процедуры фиксации гормонов перед дегидртацией ткани обеспечила иммуноокрашивание полученных срезов, специфичность которого показана в ряде тестов. Сравнение результатов количественного определения гормонов и интенсивности иммуноокрашивания также подтвердило информативность, а также перспективность использования техники иммуногистоло-кализации для изучения различных аспектов биохимии и физиологии растений.

Таким образом, использование антител открывает новые возможности для решения насущных проблем фитогормонологии.

222

Список литературы диссертационного исследования доктор биологических наук Веселов, Станислав Юрьевич, 1999 год

1.Бурханова Э.А., Федина Ф.Б., Баскаков Ю.А., Кулаева О.Н. Сравнительное изучение действия 6-бензиламинопурина, тидиазурона и картолина нарост интактных проростков тыквы // Физиол. раст. - 1985. - Т. 31, N 1. - С. 13-19.

2. Веселов С.Ю., Кудоярова Г.Р. Принципы иммуноанализа применительно к определению гормонов//Иммуноферментный анализ регуляторов роста растений. Применение в физиологии растений и экологии. Уфа: Изд-во БНЦ УрО АН СССР, 1990. С. 8-21.

3. Веселов С.Ю., Кудоярова Г.Р., Усманов И.Ю. Иммуноферментный анализ фитогормонов: Методические указания. Уфа: Изд-во БГУ, 1992. - 27 с.

4. Веселов С.Ю. Исследование факторов, влияющих на иммунолокали-зацию цитокининов//Итоги научных исследований биологического факультета Башкирского госуниверситета за 1994. Уфа: Изд-во БГУ, 1995. - С. 7882.

5. Веселов С.Ю., Кудоярова Г.Р., Мустафина А.Р., Вальке Р. Сравнение динамики содержания эндогенных цитокининов в побегах трансгенных и ^трансформированных проростков табака под влиянием теплового шо-ка//Физиология растений. 1995. - 42, N 5. - С. 694-697.

6. Веселов С.Ю. Высокочувствительный иммуноферментный метод анализа цитокининов на основе циклических окислительно-восстановительных реакций//Результаты научных исследований преподавателей биологического факультета: Сборник трудов, посвященных 40-летию

7. Башгосуниверситета. Уфа: Изд-во БГУ, 1997. - С.25-30.

8. Веселов С.Ю., Веселов Д.С., Усманов И.Ю. Хроматографическое разделение и мммуноанализ цитокининов: Методические указания. Уфа: Изд-во БГУ, 1998. - 23 с.

9. Веселов С.Ю., Кудоярова Г.Р., Вальке Р. Состав и распределение цитокининов в листьях трансгенных растений табака в процессе их формирова-ния//Труды международной конференции по анатомии и морфологии растений. С-Петербург, 1997. - С. 167-168.

10. Веселов С.Ю., Иванова Т.Н., Симонян М.В., Мелентьев А.И., Исследование цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизма-ми//Прикладная биохимия и микробиология. 1998. - Т. 34, N 2. - С. 175-179.

11. Гусев М.В., Карташов Е.Р., Руденская Г.Н., Аффи P.A., Степанов В.М. Действие ингибитора ИУК-оксидазной активности на синтез белка в молодых и стареющих листовых тканях// Научн. докл. высш. шк. Биол. науки. 1986, №2ю-С. 79-83.

12. П.Дерфлинг К. Гормоны растений. Системный подход. М.: Мир, 1985. -206 с.

13. Егоров A.M., Осипов А.П. и др. Теория и практика иммунофермент-ного анализа. М.: Высшая школа, 1991. - 596 с.

14. Ефремов Д.П., Каравайко P.P., Кулаева О.Н. Влияние теплового шока и картолина-2 на рост проростков ячменя и содержание в них фитогор-монов// Доклады АН РАН. 1992. - Т. 323, N 2. - С. 362-366.

15. Жирмунская Н.М., Шаповалов A.A. Биотест для оценки способности химических соединений повышать устойчивость растений к засухе// Агрохимия,- 1988,-N1,- СЛ11-116.

16. Карташов Е.Р., Руденская Г.Н., Аффи P.A., Степанов В.М., Гусев М.В. Молекулярные формы пероксидазы и ИУК-оксидазы в молодых и стареющих листьях Arabidopsis thaliana// Научн. докл. высш. шк. Биол. наукию1985,№ 12.- С. 81-88.

17. Катаева Н.В., Александрова И.Г. и др. Возможности метода имму-ноферментного анализа для определения фитотормонов в культивируемых in vitro побегах // Физиол. раст. 1990. - Т. 3, N. 4. - С. 813-821.

18. Кефели В.И., Чайлахян М.Х., Турецкая Р.Х., и др. Комплексный метод определения регуляторов роста биотестами// Физиол. раст. 1975. - Т. 22, N6. - С. 7- 12

19. Кефели В.И., Кислин E.H. Газохроматографическое определение абсцизовой и индолил-3-уксусной кислот в растительных тканях// Физиол. раст. 1982. - Т. 29, N. 2. - С. 407-413.

20. Кефели В.И., Коф Э.М., Власов П.В., Кислин E.H. Природный ингибитор роста абсцизовая кислота// Москва: Наука, 1989,- 183с.

21. Кислин E.H., Кефели В.И. Абсцизовая кислота и ИУК в побегах винограда: Количественный подход к анализу// Физиол. раст. 1981. - Т. 28, вып. 1. - С. 48-56.

22. Клейн P.M., Клейн Д.Т. Методы исследования растений. М.: Колос, 1974. - 527 с.

23. Кобзарь Е.Ф., Сердюк О.П. Высокоэффективная жидкостная хроматография в анализе ауксинов// Биохимия. 1993. - Т. 58, N 1.- С. 50-62.

24. Кудоярова Г.Р., Веселов С.Ю., Еркеев М.И. и др. Иммунофер-ментное определение содержания индолилуксуной кислоты в семенах кукурузы с использованием меченых антител// Физиол. раст. 1986. - Т. 33, вып. 6. - С. 1221-1227.

25. Кудоярова Г.Р., Усманов И.Ю., Гюли-Заде В.З., и др. Влияние уровня минерального питания на рост, концентрацию цитокининов и ауксинов в проростках пшеницы // Физиология растений. 1989. - Т. 36, В. 5. - С. 10121015.

26. Кудоярова Г.Р., Веселов С.Ю., Каравайко H.H. и др. Иммуноферментная система для определения цитокининов// Физиол. раст,- 1990,- Т. 37, N1.-0. 193-199.

27. Кулаева О.Н. Влияние корней на обмен веществ листьев в связи с проблемой действия на лист кинетина // Физ. раст. 1962 - Т. 9, N 2. - С. 229-239.

28. Кулаева О.Н. Цитокинины, их структура и функции. М.: Наука, 1973.-263 с.

29. Кулаева О.Н. Гормональная регуляция физиологических процессов в растениях на уровне синтеза РНК и белков. 41-е Тимирязевское чтение. М.: Наука, 1982. - 82 с.

30. Кулаева О.Н., Хохлова В.А., Фофанова Т.А. Цитокинины и абсцизо-вая кислота в регуляции роста и процессов внутриклеточной дифференци-ровки // Гормональная регуляция онтогенеза растений. М.: Наука, 1984. - С. 71-86.

31. Кэбот Е., Мейер М. Экспериментальная иммунохимия. М.: Медицина, 1968. - 684 с.

32. Мелехов Е.И. Принцип регуляции скорости процесса повреждения клетки и реакция защитного торможения метаболизма (РЗТМ)// Хурнал Общей биологиию 1985. - Т. 46, № 2. - С. 174-189.

33. Мишке И.В. Микробные фитогормоны в растениеводстве. Рига: Зинатне, 1988. - 151 с.

34. Негрецкий В.А., Веренчиков С.П., Ложникова В.Н. Идентификация и выделение цитокининов из растений табака//Агрохимия. 1984, N1.-0. 89-91.34.0стерман Л.А. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот. Москва: Наука, 1981.-286 с.

35. Полевой В.В. Фитогормоны. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1985. - 248с.

36. Полевой А.В., Танкелюн О.В., Полевой В.В. Быстрая дистанционная передача сигнала о локальном стрессовом воздействии у проростков кукурузы// Физиол. раст,- 1997,- Т.44, вып.5,- С.645-651.*

37. Федтке К. Биохимия и физиология действия гербицидов. М.: Агро-промиздат. - 1985. - 385 с.

38. Чард Т. Радиоиммунологические методы. М.: Мир, 1981. - 246 с.

39. Чернядьев И.И. Фотосинтез растений в условиях водного стресса и протекторное действие цитокининов//Прикладная биохимия и микробиология 1997.-Т. 33, N1,-С. 5-17.

40. Чкаников Д.И. Метаболизм 2,4-дихлорфеноксиуксусной кислоты в растениях// Успехи современной биологии. 1985. - Т. 99, № 2. - С. 212-224.

41. Ainley W.M., McNeil К.J., Hill J.W., Lingle W.L., Simpson R.B., Brenner M.L., Nagao R.T., Key J.L. Regulatable endogenous production of cytokinins up to toxic levels in transgenic plants and plant tissues//Plant Mol. Biol. -1993.-V. 22, N1,-P. 1-23.

42. Anderson B.E., Ward J.M., Schroeder J.I. Evidence for an extracellular reception site for abscisic acid in Commelina guard cells// Plant Physiol. 1994. -V.104, N 6. - P. 1177-1183.

43. Atzmon N., van Staden J. The effect of zeatin and iso-pentenyladenine on root growth of Pinus pinea L.// J. Plant Physiol. 1993,- V. 141, N 2. - P. 366-369.

44. AuerC.A., Laloue M., Cohen J.D., Cooke T.J. Uptake and metabolism of benzyladenine during shoot organogenesis in Petunia leaf explants/ZPlant Growth Regulation.- 1992,-V.ll, N1. -P.105-114.

45. Badenoch-Jones J., Letham D.S., Parker C.W., Rolfe B.B. Quantification of cytokinins in biological samles using antibodies against zeatin riboside//Plant Physiol. 1984. -V. 75, N4. - P. 1117-1123.

46. Badenoch-Jones J., Parker C.W., Letham D.S. Use of isopentenyladenosine and dihydrozeatin riboside antibodies for the quantification of cytokinins//J.Plant Growth Regul. 19876. - V. 6, N 1. - P. 159-182.

47. Bandurski R.S., Schulze A. Concentration of IAA and its derivatives in plants// Plant Physiol. 1977 - V. 60, N 1. - P. 211-213.

48. Bandurski R.S. Homeostatic control of concentration of indole-3-acetic acid// In Plant Growth Substances (ed. J.F.Skoog). Berlin etc.: Springer-Verlag, 1979. - P. 37-49.

49. Banowetz G.M., Hess J.R., Carman J.G. A monoclonal antibody against rhw plant growth regulator, abscisic acid// Hybridoma. 1994. - V. 13, N 6. - P. 537-541.

50. Banowetz G.M. Monoclonal antibodies against the plant cytokinin, cis-zeatin riboside// Hybridoma. 1993. - V. 12, N 6. - P. 729-736.

51. Barry G.F., Rogers S.G., Fraley R.T., Brand L. Identification of a cloned cytokinin biosynthetic gene//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1984. - V. 81, N 12. - P. 5994-5998.

52. Bassi N.V., Mok D.W.S., Mok M.C. Partial purification of a cis-trans-isomerase of zeatin from immature seed of Phaseolus vulgaris L// Plant Physiol. -1993,- V.102.- P.867-872.

53. Beale M.H., Willis C.L. Gibberellins// In Methods in Plant Biochemistry. /Eds. B.V. Charlwood, D.V.Banthorpe. London: Academic, 1991,- V. 7,- P.-289-330.

54. Bearder J.R. Plant hormones and other growth substances then-background, structure and occurence// Hormonal Regulation of Development. I. -Berlin etc.: Springer-Verlag, 1980. - P. 9-112.

55. Beardsell M.F., Cohen D. Relationship between leaf water status, abscisic acid levels and stomatal resistance in maize and sorghum// Plant Physiol. 1975. -V. 56, N 1. - P. 207-212.

56. Beinsberger S., Valcke R., DeblaereR.Y. et al. Effects of the introduction of Agrobacterium tumefaciens T-DNA Ipt gene in Nicotiana tabacum L, cv. Petit Havana Sr-1 plant cells// Plant Cell Physiol. -1991. V. 32, N 4. - P. 489-493.

57. Bhattacharrya R.N., Chattopadhyaya K.K., Basu P.S. Auxin activity of 3-hydroxymethyl and 3-methylene oxindole in oat// Biol.Plant. 1986. - V. 28, N 3. -P. 219-226.

58. Bialek K., Cohen J.D. Isolation and partial characterization of the major amide-linked conjugate of indole-3-acetic acid from Phaseolus vulgaris L.//Plant Physiol. -1986. V. 80, N 1. - P. 99-104.

59. Binns A.N. Cytokinin accumulation and action: Biochemical, Genetic, and Molecular Approaches// Annu.Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 1994. -V.45.-P.173-196.

60. Blackman, P.G, Davies, W.J.: Modification fo the CO2 responses of maize stomata by abscisic acid and by naturally occuring and synthetic cytokinins. -J.Exp. Bot. 35:174-179. 1983.

61. Blatt M.R., Thiel G. Hormonal control of ion channel gating//Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol.Biol. 1993. - V. 44. - P. 543-567.

62. Brenner M.L. Modern methods for plant growth substance analysis// Ann. Rev. Plant Physiol.-1981,- V. 32. P. 511-538.

63. Brezinova A., Holik J., Chvoika L. Radioimmunoassay of iso-pentenyladenosine in plants //Physiology and Biochemistry of cytokinins in plants./

64. Eds. Kaminek M., Mok D.W.S., Zazimalova. The Hague: Academic Publishing, 1990.-P. 479-481.

65. Cekan Z. Assesment of reliability of steroid radioimmunoassay //J. Steroid Biochem. 1975. - V. 6, N 2. - P. 271-275.

66. Chazen O., Neumann P.M. Hydraulic signals from the roots and rapid cellwall hardening in growing maize (Zea mays L.) leaves are primary responses to polyethylene clycol-induced water deficits//Plant. Physiol. 1994,- V.104.- N 6. -P. 1385-1392.

67. Chen C.-M., Ertl J.R., Leisner S.M., Chang C.-C. Localization of cytokinin biosynthesis sites in pea plants and carrot roots//Plant Physiol. 1985. -V. 78, N2. - P. 510-513.

68. Chisnell J., Bandurski R.S. Translocation of radiolabeled indole-3-acetic acid and indole-3-acetyl-myo-inositol from kernel to shoot of Zea mays 1//Plant Physiol. 1988. - V. 1, N 1. - P. 79-84.

69. Cholodny N. Uber das keimungs hormon von gramineen/ZPlanta. 1935. -V. 23,N1.-P. 289-312.

70. Clark Z. Immunosorbent assays in plant virology// Annu. Rev. Pytopathol. 1981. -V. 19. - P. 83-106.

71. Clark Z, Bar-Joseph M. Enzyme immunosorbent assays in plant virology// Methodsin virology./Eds. K.Maramorisch, H. Koprowski. V. 7. New York: Academic Press, 1984. - P. 51-85.

72. Cohen J.D., Bandurski R.S. Chemistry and physiology of the bound auxins// Annu. Rev. Plant Physiol. 1982. - V. 33. - P. 403-430.

73. Constantinov H.A., Kozlowski T.T., Upper C.D. Binding capacity and possible analytical aplication of the cytokinin-binding antibody, anti-N 6-benzyladenin// Plant Physiol. 1978. - V. 62, N 3. - P. 969-974.

74. Creelman R.A., Gage D.A., Stults J.T., Zeevart A.D. Abscisic acid biosyntesis in leaves and roots of Xanthium strumarium//Plant Physiol. 1987. - V. 85, N3,-P. 726-732.

75. Creelman R.A. Abascisic acid physiology and biosynthesis in higher plants/ZPhysiol. Plant. 1989. - V. 75, N 1. - P. 131-136.

76. Crazier A., Sandberg G., Monteiro A.M., Sundberg B. The use of immunological technoques in plant hormone analysis// Plant Growth Substances./Eds. M.Bopp. Berlin, Geidelberg: Springer-Verlag, 1986. - P. 13-21.

77. Dolezal K., Faiss M., Strnad M., Hanus J., Van Onckelen H., Scmulling T. The effect of rolC p-glucosidase on metabolism of exogenous cytokinin-glucosides/ZPlant Physiol. Biochem. 1994. - SI. - P. 208.

78. Dziewanowska K., Lewak S. Non-decarboxylating transformation of indole-3-ylacetic acid in apple seeds/ZBiol. Pant. 1987. - V. 29, N 2. - P. 110-117.

79. Eberle J., Arnscheidt A., Klix D., Weiler E.W. Monoclonal antibodies to plant growth regulators. Zeatinriboside and dihydrozeatinriboside// Plant Physiol. -1986.-V. 81, N2.-P. 516-521.

80. Eberle J., Wang T.L., Cook S., Wellse B., Weiler E.W. Immunoassay and ultrustructural localization of isopentenyladenine and related cytokinins using monaclonal antibodies//Planta. 1987. V. 172, N 2. - P. 289-297.

81. Einset J.W. Zeatin biosynthesis from N6 -(isopentenyl)adenine in Actenidia and other woody plants// Proc. Natl. Acad. Sci USA. 1986. - V. 83, N 6. -P. 972-975.

82. Eklof S., Astot A., Moritz T., BlackwellJ., Olsson O., Sandberg G. Cytokinin metabolites and gradients in wild type and transgenic tobacco with moderate cytokinin over-production//Physiol. Plant. 1996. - V. 98, N 2. - P. 333344.

83. Epstein E., Baldi B.G., Cohen J.D. Identification of indole-3-acetylglutamate from seeds of Glysine max L.//Plant Physiol. 1986. - V. 80, N 2. -P. 256-258.

84. Erlanger B.F., Borek F., Beiser S.M., Leiberman S. Steroid-protein conjugates. I. Preparation and characterization of conjugates of bovine serum albumain with testosteron and with Cortisol// J. Biol. Chtm 1957. - V. 228, N 3. -P. 713-727.

85. Erlanger B.F., Beiser S.M. Antibodies for ribonucleosidesand ribonucleotides and their relation with DNA//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1964.-V. 52, N 1,- P. 68-71.

86. Ernst D., Schafer W., Oesterhelt D. Isolation and quantitation of isopentenyladenosin in anise cell culture by bigle ion monitoring, radioimmunoassay andbioassay//Planta. 1983. - V. 159, N3. -p.216-221.

87. Erstsen A., Sandberg G. Metabolism of indole-3acetiv acid in conifers//Physiology and Biochemistry of Auxins. Praha: Academia, 1988. - P. 4755.

88. Farhutdinov R.G., Veselov S.U., Kudoyarova G.R., Valcke R. Influence of temperature increase on évapotranspiration rate and cytokinin content in wheat seedlings// Biol. Plant. 1997 - V. 39, N 2. - P. 289-291.

89. Faulk W., Tailor G.M. An immunocolloidal method for electron microscop//Immunochem. -1971. V. 8, N 5. - P. 1081-1087.

90. Fensom D.S. Electrical and magnetic stimuli// Hormonal regulation of development (Pirson A., Zimmerman M.H. eds.). Berlin etc.: Spriger-Verlag, 1985. - P. 625-652.

91. Frens G. Controlled nucleition for the regulation of the particle size in monodisperse gold suspensions//Nature Phys. Sci. 1973. - V. 241, N 1. - P. 20-22.

92. Fuseder A., Wagner B., Beck E. Quantification by ELISA of cytokinins in root-pressure exudates of Urtica dioica plants grown under different nitrogen levels//Bot. Acta.- 1988,- V.101,N3.-P. 214-219.

93. Futchs S., Haimovich J., Futchs Y. Immunological studies of plant hormones: Detection and estimation by immunological assays// Eur. J. Biochem.-1971,-V. 18, N2,-P. 384-390.

94. Futchs S., Futchs Y. Immunological assay for plant hormones using antibodies to indoleacetic acid and gibberellic acid//Biochem. Biophys. Acta. -1969. V. 192, N 3. - P. 528-530.

95. Firn R.D. Too many binding proteins, not enough receptors?//In: Plant hormone receptors (ed. D.Klambt).- Berlin, New York, Tokyo :Springer-Verlag, 1987. P. 1-11.

96. Gerhauser D., Bopp M. Cytokinin oxidases in Mosses. 2. Metabolism of kinetin and benzyladenine in vitro// J. Plant Physiol. 1990. - V. 135, N 4. - P. 714718.

97. Geuns J.M.C., Van Loenhout H.E.M., Valcke R.L.M., Van Loven K„ Veselov S.Y., Kudoyarova G.R., Vendrig J.C. Sterols and polyamines in ipt transformed tobacco// Phytochemistry. 1997. - V. 44, N 5. - P. 797-804.

98. Gibson R.A., Schneider E.A., Wightman F. Biosynthesis and metabolism of indol-3yl-acetic acid//J. Exp. Bot. 1972. - V. 23, N 2. - P. 381399.

99. Greene E. Cytokinin production by microorganisms // Bot. Rev. 1980. -Vol. 46, N 1. - P.25-74.

100. Goring H., Mardanov A.A. Influence of nitrogen deficiency on K/Ca ratio and cytokinin content of pumpkin seedlings//Biochem. Physiol. Pflanzen.-1976,- V.170, N 3.- P. 261-264.

101. Hacker G.W. Silver-enhanced colloidal gold for light microscopy//Colloidal Gold: Principles, Methods and Applications./ Ed. M.A Hawat. 1989. - V. 1. Acad. Press, INC: San Diego etc. - P. 297-321.

102. Hansen C.E., Wenzler H., Meins F. Concentration gradients of trans-zeatin riboside and trans-zeatin in the maize stem //Plant Physiol. 1984. 75, N 4. -P. 959-963.

103. Harris M.J., Dugger W.M. The occurence of abscisic acid and abscisyl--D-glucopiranoside in developing and mature citrus fruit as determined by enzyme immunoassay// Plant Physiol. 1986. - V. 82, N 2. - P. 339-345.

104. Harris M.J., Outlaw W.H. Histochemical technique: a low-volume, enzyme amplified immunoassay with sub-fmol sensitivity. Application to measurement of abscisic acid in stomatal guard cells// Physiol. Plant. 1990. - V. 78, N2. - P. 495-500.

105. Hartung W. The site of action of abscisic acid at the guardcell plasmalemma of Valerianella locusta // Plant Cell Environ. 1983. - V. 6, N 2. - P. 427-428.

106. Hasegawa M., Hashimoto N., Zhang J., Nakajama M., Takeda K., Yamagushi I., Murofushi N. Immunohistochemistry of gibberellines in rice anthers/ZBiosci. Biothech. Biochem. 1995. V. 59, N 10. - P. 1925-1929.

107. Heckenberger U., Schurr U., Schulze E.D. Stomatal response to abscisic-acid fed into the xylem of intact Helianthus annus (L.) plants// Experimental Botany J./- 1996,- V.47.- P.1405-1412.

108. Hedden P. Modern methods for the quantitative analysis of plant hormones// Annu. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol.- 1993. V. 44, N 1. - P. 107129.

109. Hoagland R.E., Duke S.O. Biochemical effects of glyphosate//Biochemical Responses Induced by Herbicides. Washington: American Chemical Society, 1982. V. 181. - P. 175-205.

110. Holgate C.S., Jackson P., Cowen P.N., Bird C.C. Immunogold-silver staining: new method of immunostaining with enhanced sensitivity//J. Histichem. Cytochem. 1983. - V. 31, N 7. - P. 938-945.

111. Horgan G.M., Wareing P.F. Cytokinins and the growth responses of seedlings of Betula pendula Roth and Acer pceudoplatanus L. to nitrogen and phosporus deficiency//! Exp. Bot.- 1980. V.31, N 121,- P.525-532.

112. Horgan R. Present and future prospects for cytokinin research// Physiology and Biochemistry of cytokinins in plants /Eds. M. Kaminek, D.W.S. Mok, E. Zazimalova. The Hague: Academic Publishing, 1990. - P. 3-13.

113. Horgan R., Scott I.M. Cytokinins// In: Methods in Plant Biochemistry./ Ed. L.J.Rogers.- London: Academic Press, 1991,- V.5.- P. 91-120.

114. Incoll L.D., Jewer P.C. Cytokinins and water relations of whole plants// Plant Hormones in Search of a role// Monograph 14 (R.Horgan and B. Jeffcoat eds.). Bristol: British Plant Growth Regulator Group, 1987. - P. 85-97.

115. Ivanova M.I., Todorov I.T., Atanassova L. Dewitte W., Van Oncheken H.A. Co-localization of cytokinins with proteins related to cell proliferation in developing somatic embryos of Dactylis glomerate L.//J. Exp. Bot. 1994. - V. 45, N276. - P. 1009-1017.

116. Ivanova M., Atanasova L., Nadcheva G., Ivanchenko M., Ivanov P., Dimitrov I., Rost N. An immunological approach for studying cytokinin localization and distribution in plant nucleus// Plant Physiology and Biochemistry, 1996, special issue. P. 202.

117. Jackson M.B. Are Plant Hormones Involved in Root to Shoot Communications? 11 Advances in Botanical Research. 1993. - V. 19. - P. 104167.

118. Jackson M. Hormones from roots as signals for the shoots of stressed plants// Elsevier Trends J.- 1997,- V.2, №1,- P.22-288.

119. Jensen E., Emstsen A., Sandberg G. Analysis of picogram quantities of indole-3-acetic acid by gas chromatography with fused silica column and flameless nitrogen selective detector/ZPlant Growth Regul.- 1986,- V.4, N 1.- P. 55-63.

120. Jensen P.J., Bandurski R.S. Metabolism and synthesis of Indole-3-acetic acid (IAA)in Zea mays//Plant Physiol. 1994. - V. 106, N 1. - P. 343-351.

121. Jeschke W.D., Hartung W. Root/shoot interaction in mineral nutrition//Abstracts of the 5th International Symposium on Function and Structure of Roots (August 31 September 4, 1998, Stara Lesna, Slovakia). - P. 66/

122. Jia W.S., Zhang J.H. Comparison of exportation and metabolism of xylem-deliverred ABA in maize leaves at different water status and xylem sap pH// Plant Growth Regulation.- 1997,- V.21.- P.43-49.

123. Johannsson A., Ellis D.H., Bates D.L. et al. Enzyme amplifi- cation for immunoassay. Detection limit of one hundredth of an attomole// J. Immunol. Meth. -1986.-V. 87, N1.-P. 7-11.

124. Jones H. Correction for non-specific interference in competitive immunoassay// Physiol.Plant. 1987. - V. 70, N 2. - P. 146-154.

125. Jones R.J., Mansfield T.A. Effects of abscisic acid and its ethers on stomatal aperture and the transpiration ratio//Physiol. Plant. 1972. - V. 26, N 2. -P. 321-327.

126. Kaldewey H. Transport and other modes of movement of hormones, mainly auxins// Encycl. of Plant Physiol. 10,- Berlin, New York, Tokyo: SpringerVerlag, 1984.- 1984.-P.80-148.

127. Kannangara T., Wieczorek A., Lavender D.P. Immunoaffinity columns for isolation of abscisic acid in conifer seedlings// Physiol. Plant. 1989. - V. 75, N 2. - P. 369-373.

128. Karmoker D. Hormonal regulation of ion transport in plants//Plant Hormones and Their Role in Plant Growth and Development.- Dortrecht etc.: Martinus Neihoff Publ., 1987. 219-263.

129. Kawaguchi M., Syono K. The excesive production of indole-3-acetic acid and its significance in studies of the biosynthesis of this regulator of plant growth and development// Plant Cell Physiol.- 1996,- V.37, N 8,- P. 1043-1048.

130. Knox J.P., Galfre G. Use of monoclonal antibodies to separate the enantiomers of abscisic acid// Anal. Biochem. 1986. - V. 155, N 1. - P. 92-94.

131. Kudoyarova G.R., Veselov S.U., Valcke R.L. Cytokinin content in leaves of ipt-transgenic tobacco plants in relation to leaf maturation// Plant Hormone Signal Perception and Transduction :Abstracts of International Symposium. -Moscow, 1994. P. 36-38.

132. Kutacek M. Auxin biosunthesis and its regulation on the molecular level// Biol, plant.- 1985,- V. 27, N 2-3,- P. 145-153.

133. Liang J., Zhang J., Wong M.H. How do roots control xylem sap ABA concentration in response to soil drying// Plant And Cell Physiology.- 1997.- V.38.-P.10-16.

134. Le Page-Degivry M.Th., Duval D., Bulard C., Delaage M. A radioimmunossay for abscisic acid//J Immun. Meth. 1984. V. 67, N 1. - P. 119128.

135. Letham D.S., Singh S., Wong O.C. Mass spectrometric analysis of cytokinins in plant tissue. VII. Quantification of cytokinin bases by negative ion mass spectrometry// J. Plant Growth Regul.-1991.- V.10, N 2.- P. 107-113.

136. Lee T.T., Dumas T. Effect of glyphosate on indolew-3-acetic acid metabolism in tolerant and susceptible plants//! Plant Growht Regul. 1985. -V. 4, N 1. -P. 29-32.

137. Letham D.S. Cytokinin activities of compounds related to zeatin// Phytochemistry. -1972. -V. 11, N3. -P. 1023-1025.

138. Letham D.S., Palni L.M. The biosynthesis and metabolism of cytokinins// Ann. Rev. Plant Physiol.- 1983,- V. 34,- P. 163-197.

139. Letham D.S., Palni M.S., Tao G.-Q., Gallnnow B.I., Bates C.M. Regulators of cell devision in plant tissue. XXIX. The activities of cytokinin glucosides and alanine conjugates in cytokinin bioassays//J. Plant Growth Regul. -1983.-V. 2, N 1. P. 103-115.

140. Lopez R., Dathe W., Semdner G. Abscisic acid in different parts of developing soybean fraMBiochem. Physiol. Pflanzen. 1989. - V. 184, N 1. - P. 267-276.

141. MacDonald E., Akiyoshi D.E., Morris R.O. Combined HPLC-radi-oimmunoassay for cytokinins // J. Chromatgr. 1981 V. 214, N 1. - P.101-109.

142. Mansfield T.A., McAinsch M.R. Hormones as regulators of water balance// Plant Hormones (Davies P.J. ed.). Dortrecht, Berlin, London: Kluwer Academic Publisher, 1995. - P. 598-616.

143. Martin H.V., Elliott M.C. Ontogenic changes in the transport of indol-3yl-acetic acid into maize roots from shoot and caryopsis/ZPlant Physiol. -1984. -V. 74, N3. P. 971-974.

144. Martin H.V., Pilet P.E. Effect of pH on IAA uptake by maize root segments//Plant Physiol.- 1987,- V.83.- P.262-264.

145. Martin R.S., Mok M.S., Shaw G., Mok D.W.S. An enzyme mediating the conversion of zeatin to dihydrozeatin in Phaseolus embryos// Plant Physiol. -1989.-V.90.-P1630-1635.

146. Marx S., Grosse W., Schneider-Poetsch A.W. A combined HPLC-ELISA assay applied to measure abscisic acid (ABA) and abscisyl-D-glucopiranoside in ripening emryos of walnat (Jiglas regia L.)//J. Plant Physiol., 1988. V. 133, N 2. - P. 475-479.

147. McGaw B.A. Cytokinin metabolism/ZPlant Hormones in Search of a role. Monograph 14 (R.Horgan and B. Jeffcoat eds.). Bristol: British Plant Growth Regulator Group, 1987. - P. 9-17.

148. Medford J.I., Horgan R„ El-Sawi Z., Klee H.J. Alterations of endogenous cytokinins in transgenic plants using a chimeric isopentenyl transferase gene//Plant Cell. 1989. - V. 1, N. 3. - P. 403-413.

149. Mertens R., Stuning M., Weiler E.W. Metabolism of tretiated enantiomers of abscisic acid prepared by immunoaffininty chromatograghy// Naturwissenschaften. 1982. - V. 69, N 2. - P. 595-597.

150. Mertens R., Eberle J., Arnsteidt A., Ledebur A., Weiler E.W. Monoclonal antibodies to plant growth regulators. II. Indole-3-acetic acid// Planta. -1985.-V. 166,N3.-P. 389-393

151. McGaw B.A. Cytokinin metabolism// Plant Hormones in Search of a Role. Monograph 14./ Eds. R.Horgan and B. Jeffcoat. Bristol: British Plant Growth Regulator Group, - 1987. - P. 9-17.

152. Michael J., Beringer H. The role of hormones in yield formation//In: Physiol. Aspects. Crop. Prod.- Berlin: Wobflanfen, 1980. P. 85-116.

153. Milborrow B.V., Robinson D.R. Factors affecting the biosynthesis of abscisic acid// J. Exp. Bot. 1973. - V. 24, N 3. - P. 537-538.

154. Milborrow B.V. Pathways to and from abscisic acid// In: Abscisic acid ( ed. F.T.Addicott).-N.Y.: Praeger, 1983. -P. 79-111.

155. Milborrow B.V., Netting A.G. Abscisic acid and derivaties// In: Methods in Plant Biochemistry (ed. B.V.Charlwood, D.V.Banthorpe).-London: Academic, 1991,- V.7.- P. 213-261.

156. Morris R.O., Genes specifying auxin and cytokinin biosynthesis in phytopatogenesis//Ann Rev. Plant Physiol. 1986. - V. 509- 532.

157. Morris R.O., Jamerson P.E., Laloue M., Morris J.W. Rapid identification of cytokinins by an immunological method// Plant Physiol. 1991. - v . 95, N 5. - P. 1156-1161.

158. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassay with tobacco tissue cultures// Physiol, plant.- 1962,- V. 15,- P. 473-497.

159. Mustafina A., Veselov S., Valcke R., Kudoyarova G. ABA and cytokinins content in shoots of wheat seedlings during their dehydration// Biol. Plant. 1997/1998. - V. 40, N 2. - P. 291-293

160. Napier R.M. , Venis M.A. Receptors for plant growth regulators: recent advances//Plant Growth Regul. 1990. -V. 9,N 1. -P. 113-126.

161. Newman D.S., Smith B. Interference from xylem sap in an enzyme-linked immunosorbent assay for zeatin riboside// Physiol Plant. 1990. - V. 78, N 3. -P. 548-553.

162. Nicander B., Stahl U., Bjorkman P., Tillberg E. Immunoaffinity co-purification of cytokinins and analysis by high-performance liquid chromatograghy with ultraviolot-detection// Planta. 1993. - V. 189, N 2. - P. 312-320.

163. Nicholls P.B., Paleg L.G. A barley endosperm bioassay for gibberellins// Nature.- 1963,- V. 199,- P. 823-824.

164. Nieman R.H., Clark R.A. Measurement of plant nucleotides and its glucosides by high performance liquid chromatography//J.Cromatography 1984. -V. 317,N2.-P. 271-281.69

165. Nitsch J.P., Nitsch C. Studies on the growth of coleoptile and first internode sections: A new sensitive straight-growth test for auxins// Plant Physiol.-1956.-V. 31, N2.-P. 94-111.

166. Palmer M.V., Horgan R., Wareing P.F. Cytokinin metabolism in Phaseolus vulgaris L. I. Variation in cytokinin levels in leaves of decapitated plants in relation to bud outgrowth// J. Exp. Bot. -1981. V. 32. - P. 1231-1241.

167. Palmer M.V., Scott L.M., Horgan R. Cytokinin metabolism in Phaseolus vulgaris L. II. Comparative metabolism of exogenous cytokinins by detached leaves/ZPlant Science Letters. 1981. - V. 22, N 2. - P. 187-195.

168. Palni I.M.S., Horgan R., Darral N.M., Stuchbury N., Warieng P.F. Cytokinin biosynthesis in crown-gall tissue of Vicea rosea. The significance of nucleotides// Planta. 1983, - V. 159, N 1. - P. 50-59.

169. Parry A.D., Neill S.J., Horgan R. Xanthoxen levels and metabolism in wild-type and wilty mutant of tomato/ZPlanta. 1988. - V. 173, N 2. - P. 397-404.

170. Parry A.D., Horgan R. Physiological methods in ABA research// In: Abscisic Acid Physiology and Biochemistry./ Ed. W.J.Davies, H.G.Jones.- Oxford: BIOS Scientific, 1991 P. 5-22.

171. Penge V.C., Caruso J.L. Determination of IAA using antibodies against ring-linked IAA//Phytochemistiy. 1987. - V. 26, N 5. - P. 1251-1255.

172. Pengelly W.L. Validation of immunoassays // Plant Growth substanses: Proc. 12th Int. Conf., Heidelberg, August 26-91, 1985. Berlin etc.: SpringerVerlag, 1986. P. 35-43.

173. Pengelly W.L., Bandurski R.S., Schulze A. Validation of a radiommuassay for indole-3-acetic acid using gas chromatography-selected ion monitoring-mass-spectrometry//Plant Physiol. 1981. - V. 68, N 1. - P. 96-98. Rosher

174. Pengelly W.L., Bandurski R.S. Analysis of indole-3-acetic acid metabolism in Zea mays using deuterium oxide as a tracer// Plant Physiol. 1983. -V. 73, N 2. - P. 445-449.

175. Pengelly W., Meins F. A specific radioimmunoassay for nanogram quantities of the auxin, indole-3-acatic acid// Planta. 1977. - V. 136, N 1. - P. 173178.

176. Perata P., Vernieri P., Armallini D., Bugnoli M., Presentini P., Pecciareli P., Alpi A., Tognoni F. A monoclonal antibody for the determination of conjugated forms of abscisic acid in plant tissue// J. Plant Growth Regul. 1990. - V. 9, N 1. -P. 1-6.

177. Petrucz P. Essential requirements for the validity of immunochytochemical staining procedures// J. Histochem. Cytochem. 1983. - V. 31, N 1A. - P. 177-179.

178. Rademacher J.E., Graebe J.E. Isolation and analysis by gas-liquid chromatography of auxins, gibberellins, cytokinins and abscisic acid from a single sample of plant material// Ber. Deutsch Bot. Gas.- 1984,- V. 97, N 1. P. 75-85.

179. Rodriguez A., Tames R.S. Analysis of 3-indolylacetic acid by highperformance liquid chromatography and gas-liquid chromatography// Analytical Biochemistry.- 1985,- V. 146, N 1. P.184-190.

180. Ross G.S., Elder P.A., McWha J.A., Pearce D., Pharis R.P. The development of an indirect enzyme linked immunoassay for abscisic acid// Plant Physiol. 1987. - V. 85, N 1. - P. 45-50.

181. Rotman B. Measurement of activity of single molecules of galactosidase// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1961. V. 47. N 12. - P. 1981-1991.

182. Rivier L. GC-MS of auxins// In Gas Chromatography/Mass Spectrometry: Modern Methods of Plant Analysis. New Ser. ./ Eds. H.F.Linskens, J.F. Jackson. Berlin: Springer-Verlag, 1986,- V.3.-P. 146-188.

183. Rooke P., Baylis P. Effects of plasma interference on different vasopressin antisera/J. Immunoassay. 1982. - V. 3, N 1. - P. 133-144.

184. Saab IN, Sharp R E, Pritchard J and Voetberg G S 1990 Increased endogenous abscisic acid maintains primary root growth and inhibits shoot growth of maize seedlings at low water potentials. Plant Physiol. 93, 13291336.

185. Sanchez -Bravo J., Ortuno A., Acosta M., Sabater F. Evaluation of indole-3-acetic acid decarboxylation activity in hypocotyl sections of etiolated Lupinus albus seedlings// J. Plant Physiol. 1989. - V. 134, N 2. - P. 517-523.

186. Sandberg G., Crozier A., Ernsten A. Indole-3-acetic acid and related compounds// In: Principles and Practice of Plant Hormone Analysis./ Eds. L. Rivier, A. Crozier. Lonlon: Academic, 1987,- V.I.- P. 169-301.

187. Sandberg G., Ljing K., Aim P. Precision and accuracy of radioimmunoassay in the analysis of endogenous 3-indoleacetic acid from needles of scot pine// Phytochemistry. 1985. - V. 24, N 7. - P. 1439-1442.

188. Sandberg B., Sandberg G., Crozier A. Purification of indole-3-acetic acid in plant extracts by immunoaffinity chromatography// Phytochemistry. 1986. - V. 25, N 2. - P. 295-298.

189. Schmulling T., Beinsberger S., De Greef J. et al. Construction of a heat-inducible chimaeric gene to increase cytokinin content in transgenic plant tissues// FESPP Letters. 1989. - V. 249, N 2. - P. 401-405.

190. Schneider E.A., Gibson R.A., Wightman F. Biosynthesis and metaboism of indole-3yl-acetic acid// J.Exp.Bot. 1972. - V. 23, N 1. - P. 152-170.

191. Schwartz A., Wu W.H., Tucker E.B., Assmann S.M. Inhibition of inward K+ channels and stomatal response by abscisic-acid an intracellular locus of phytohormone action// Proc. Nation. Acad. Scien. USA.- 1994,- V.91.- P.4019-4023

192. Scott I.M., Horgan R. Root cytokinins of Phaseolus vulgaris L.// Plant Science Letters. 1984. - V. 34, N 1. - P. 81-87.

193. Self C.H. Enzyme amplification a general method applied to provide an immunoassisted assay for placental alkoline phosphatase// J. Immunol. Meth. -1985.-V. 76,N2.-P. 389-393.

194. Sembdner G., Gross D., Liebisch H.W., Schneider D. Biosynthesis and metabolism of plant hormones// Hormonal Regulation of Development. Berlin: Springer-Verlag.- 1980,-P.281-289.

195. Sircar S.M., Sircar P.K., Nagar R., Iver R.I., Chatopadhay K. Immunoassay for abscisic acid//Plant Bioch. J. 1980. - V. 7, N 1. - P. 83-88.

196. Skene D.S., Browning G., Jones H.G. Model systems for the immunolocalization of cis, trans abscisic acid in plant tissues//Planta. 1987. - V. 172, N 1. - P.192-199.

197. Skoog F., Hamzi H.Q., Szweykowska A.M., Leonard N.Y., Carraway K.L., Fujii T., Helgeson J.P., Loeppky R.N. Cytokinins: structure activity relationships//Phytochemistry. 1967. - V. 6, N 5. - P. 1169-1192.

198. Smith V.A., MacMillan J. An immunological approach to gibberellin purification and quantification// Plant Physiol.- 1989,- V. 90, N 6. P. 1148-1155.

199. Sossountzov L., Sotta B., Maldiny R., Sabbagh I., Miginiac E. Immunoelectron-microscopy localization of abscisic acid with colloidal gold on lowicryl-embedded tissues of Henopodium polyspermum L.//Planta. 1986. - V 168, N3. - P. 471-481.

200. Sossountzov L., Maldiney R., Sotta B., Sabbagh I., Habricot Y., Bonnet M., Miginiac E. Immunocytochemical localization of cytokinins in Graigella tomato and sideshootless mutant// Planta. 1988. -. V. 175, N 1. - P. 291-304.

201. Sotta B., Sossountzov L., Mandiny R., Sabbagh I., Tachon P., Miginiac E. Abscisic acid localization by light microscopic immunocytochemistry in Chenopodium polyspermum L. Effect of water stress//J. Histochem. cytochem. -1985. V 33, N3,- P. 201-208.

202. Stafford A.E., Corse J. Fused-silica capillary gas chromatography of permethylated cytokinins with flame-ionization and nitrogen-phosphorus detection// J. Chromatogr.- 1982,- V. 247, N 1. P. 176-179.

203. Stanley C.J., Johanssonn A., Self C.H. Enzyme amplification can enhance both the speed and the sensitivity of immunoassays// J. Immunol. Meth. -1985.-V. 83, N1,-P. 89-95.

204. Stoddart J.L., Venis M.A. Molecular and subcellular aspects of hormone action// Encycl. of Plant Physiol. (New Ser.). V. 9,- Berlin, New York, Tokyo : Springer-Verlag, 1980. P. 445-511.

205. Takatsuto S. Microanalysis of naturally occuring brassinosteroids// In: Brassinosteroids; Chemistry, Bioactivity, and Application./ Eds. H.G. Cutler, N. Yokota, G. Adam.- Washington, DC: Am. Chem. Soc., 1991,- P. 107-120.

206. Taneja R., Varma S.K., Dayal J., Datta K.S. Effect of kinetin on water relation, photosynthesis, respiration and chlorophyll and nucleic acid contents of wheat (Triticum aestivum L.) grown under salinity// Biol. Plant.- 1992,- V.34, №1-2.-P.85-91.

207. Tanno N., Takanashi M., Denboh T. et al. Enzyme-amplified enzyme-linked immunosorbent assay for gibberellin A4 based on the NAD-dependent redox cycle//Plant Growth Regul. 1992. - V. 12, N 3. - P. 391-396.

208. Tao G.-Q. Letham D.S., Palni M.S., Summons R.E. Cytokinin biochemistry in relation to leaf senescence. I. The metabolism of 6-benzylaminopurine and zeatin in oat leaf segments/ZPlant Growth Regul. 1983. -V. 1 ,N 1. - P. 89-102.

209. Taylor C.R., Chir B., Phil D. Immimoperoxidase techniques. Practical and theoritical aspects// Arch. Pathol. Lab. Med. 1978. - V. 102, N 3. - P. 113121.

210. Thaker V.S., Saroop S., Singh Y.D. Physiological and biochemical changes associated with cotton fibre development. III. Indolyl-3-acetaldehyde dehydrogenase/ZBiochem. Physiol. Pflanzen. -1981. V. 181, N 2. - P. 339-345.

211. Thimann K.V. The interaction of hormonal end enviromental factors in leaf senescence/ZBiol. Plant.- 1985. V. 27, N 2-3. -P. 83.

212. Thompson D.S, Wilkinson S., Bacon M.A., William J.D. Multiple signals and mechanisms that regulate leaf growth and stomatal behavior during water -deficit// Physiologia Plantarum.- 1997,- V.100.- P.303-313.

213. Torrey J.G. Root hormones and plant growth//Ann. Rev. Plant Physiol.-1976,- V.27.- P.435-459.

214. Trewavas A. How do plant growth substances work? Plant Cell Environ. -1981. V. 4, N 1,-P. 203-228.

215. Trione E.J., Krygier B.B., Banowetz G.M., Kathrein J.M. The development of monoclonal antibodies against the cytokinin zeatin riboside// J. Plant Growth Regul. 1985. - V. 4, N 1. - P. 101-109.

216. Trione E.J., Banowetz G.M., Krygier B.B., Kathrein J.M, Sayavedra-Soto L.A. A quantative fluorescence enzyme immunoasay or plant cytokinins// Anal. Biochem. 1987. V. 162, N2. - P. 301-308.

217. Trione E.J., Krygier B.B., Banowetz G.M., Sayavedra-Soto L.A. Monoclonal antibodies against the plant cytokinin isopentenyl adenosine// Physiol. Plant. 1987. - V. 70, N 3. - P. 467-472.

218. Truelsen T.A. Indole-3-pyruvic acid as an intermediate in the conversion of tryptophan to indole-3-acetic acid.l. Some characteristics of tryptophantransaminase from mnnp bean seedlings// Phvsiol Plant. 1972. - V. 26. N 1 P.

219. Ueda M., Bandurski R.S. A quantitative estimation of alkali labile indole-3-acetic acid compounds in dormant and germinating maize kernels/ZPlant Physiol. -1969.-V. 44, N 5,- P.l 175-1181.

220. Van Staden J., Papaphlippou A.P. Biological activity of 0-|3-D-glucopyranosylzeatin//Plant Physiol. 1977. - V. 60, N 3. - P. 649-650.

221. Van Staden J., Drewes F.E. The biological activity of cytokinin derivatives in the soybean callus bioassay// Plant Growth Regulation. 1991. V. 10, N 1. - P. 109-115.

222. Vang T.L., Horgan R. Quantitative analysis of plant hormones// Cytokinins Plant Hormones in Search of a Role./ Ed. H. Horgan. - British Plant Growth Regulator Group. Monograph 14. 1987. - P. 35-43.

223. Vankova R., Gaudinova A., Sussenbekova H., Stran M., Holik J. Immunoaffinity chromatograghy of cytokinins comparison of oriented and random antibody immobilization techniques// Plant Physiol. Biochem. - 1996. - Special issue. - P. 204.

224. Veselov S., Kudoyarova G., Hairullina L., Valcke R. Comparison of two variants of ELISA for indoleacetic acid //Acta Bot.Neerl. 1994. - V. 43, N 3. - P. 292-293.

225. Veselov S., Ivanova T., Hismatullina A., Usmanov I, Valcke R. Immunoaffinity chromatography is prevented by the substances cytokinins are to be purified of7/Acta Bot. Neerl. 1994. - V. 43, N 3. - P. 293.

226. Void B., Nelson J.L. Production and characterization of antibodies and establishment of a radioimmunoassay for ribosylzeatin// Plant Physiol. 1981. - V. 67, N2.-P. 401-403.

227. Vonk C.R., Davelaar E., Ribot S.A. The role of cytokinins in relation to fower-bud biasing in Iris cv. Ideal: Cytokinin determination by an improved enzyme-linked immunosorbent assay/ZPlant Growth Regulcation. 1986. - V. 4, N 1. p. 65-74.

228. Vreman H.J., Skoog F., Frihart C.R., Leonard N.L. Cytokinins in Pisum transfer in ribonucleic acid// Plant Physiol.- 1972,- V. 49, N 5. P.848-851.

229. Wagner BM, Beck E. Cytokinins in Urtica Dioica plants: production, metabolism and fluxes//Physiology and Biochemistry of Cytokinins in Plants. -Amsterdam: Kluwer Publ., 1992. 53-57.

230. Walker-Simmons M. ABA levels and sensitivity in developing wheat embryos of sprouting resistant and susceptible cultivars/ZPlant Physiol. 1987. - V. 84, N1,-P. 61-66.

231. Walton D.C., Dashek W., Galson E. A radioimmunoassay for abscisic acid // Planta.- 1979. V. 146, N 1. - P. 139-145.

232. Walton D.C. Abscisic acid biosynthesis and metabolism/ZPlant Hormones and Their Role in Plant Growth and Development. Dortrecht etc.: Martinus Nijhoff Publishers, 1987. - P. 113-129.

233. Wang T.L., Griggs P., Cook S. Immunoassay for plant growth regulators a help or a hindrance?//Plant Growth Substances (M.Bopp ed.). - Berlin, Geidelberg: Springer-Verlag, 1986. - P. 26-34.

234. Wang T.L., Thompson A.G., Horgan R. A cytokinin glucoside from the leaves of Phaseolus vulgaris L.// Planta. 1977. - V. 135, N 2. - P. 258-288.

235. Weiler E.W. Radioimmunoassay for the determination of free and conjugated abscisic acid// Planta.- 1979,- V. 144, N1.- P. 255-263.

236. Weiler E.W. Radioimmunoassays for trans-zeatin and related cytokinins// Planta.- 1980,- V. 149, N 1,- P. 155-162.

237. Weiler E.W. Radioimmunoassays for differential and direct analysis of free and conjugated abscisic acid in plant extracts// Planta. 1980. - V. 148, N 2. -P. 262-272

238. Weiler E.W. Radioimmunoassay for pmol-quantities of indole-3-acetic acid for use with highly stable 125I.- and [3H]IAA derivatives as radiotracers// Planta. -1981. V. 153, N 2. - P. 319-325.

239. Weiler E.W. Plant hormone immunoassay/ Plant Physiol. 1982. - V. 54, N 1. - P. 233-234.

240. Weiler E.W. An enzyme-immunoassay for cis-+.-abscisic acid// Physiol. Plant. 1982. - V. 54, N 2. - P. 510-514

241. Weiler E.W. Immunoassay of plant constituents// Biol. Sci. Trans. -1983.-V. 11, N 3. P. 485-492.

242. Weiler E.W., Joourdan P.S., Conrad W. Levels of indole-3-acetic acid in intact and decapitated coleoptiles as determinated by a specific and highly sensitive solid-phase immunoassay// Planta.-1981,- V. 153, N 4,- P. 561-571.

243. Weiler E.W., Weeczorek U. Determination of fentamol quantities of gibberellicacid by radioimmunoassay // Planta. -1981. V. 152, N 2. P. 159-167.

244. Whenham R.J. Evaluation of selective detectors for the rapid and sensitive gas chromatographic assay of citokinins, and application to the analysis of cytokinins in plant extracts// Planta.- 1983,- V. 157, N 3. P. 554-560.

245. Wodzicki T.J., Abe H., Wodzicki A.B., Pharis R.P., Cohen J.C. Investigations on the nature of the auxin-wave in the cambial region of pine stems// Plant Physiol. 1987. - V. 84, N 1. - P. 135-143.

246. Wodziki T.J. Auxin apical control of the auxin polar transport and its oscillation a suggested cellular transduction mechanism// Acta Societatus Botanicorum Poloniae. - 1993. - V. 62, N 1-2. - P. 37-41.

247. Woodsworth M.L., Latimer L.J.P., Jancer J.J., McLennan, B.D., Lee J.S. Charactirization of monoclonal antibodies specific for isopentenyl adenosine derivatives occuring in transfer RNA//Bioch. Biophys. Res. Com. 1983. - V. 114, N2.-P. 791-796.

248. Wright S.T., Hiron R.W. Abscisic acid, the growth inhibitor induced in detached leaves by a period of wilting // Nature. 1969. - V. 224. - P. 719-720.

249. Yakovleva L.A., Cheredova E.P., Karavaiko N.N. Cytokinins and cytokinin binding sites in transgenic potato plants//Plant Growth Regul. 1997. - V. 21, N1,-P. 71-73.

250. Yamamoto N., Yasuda K. Use of a water soluble carbodiimide as a fixing reagent// Acta Histochem. Cytochem. 1977. - V. 10, N 1. - P. 14-37

251. Yokoto T., Murofushi N., Takahashi N. Extraction, purification and identification //Hormonal Regulation of development I.- Berlin, New York, Tokyo: Springer-Verlag, 1984,-P. 113-201.

252. Zavala E., Brandon D. Localization of a phytohormone using immunocytochemistry//J. Cell Biol. 1983. - V 97, N 10. - P. 1235-1239.

253. Zazimalova E., Kutacek M. Auxin-binding site in wheat shoots: inteaction between indol-3-ylacetin acid and its halogenated derivatives// Biol. Plant. 1985. - V. 27, N 2-3. - P. 114-118.

254. Zeevaart J.A.D. Changes in the levels of abscisic acid and its metabolites in excised leaf blades of Xanthium strumari um during and after water stress //Plant. Physiol.- 1980,- V. 66. P, N 4. - P. 672-678.

255. Zhang J., Davies W.J. Changes in concentration of ABA in xylem sap as a function of changing soil water status can account for changes in leaf conductance and growth // Plant Cell Environ. 1990. - V. 13, N 1. - P. 277-285.

256. Zhang J., Davies W.J. Does ABA in the xylem control the rate of leaf growth in soil-dried maize and sunflower plants?// Exp. Bot. J.- 1990a.- V.41.-P.l 125-1132.

257. Zhang J.H. Accumulation of ABA in maize roots in response to root severing//New Phytologist.- 1994,- V.127.-P.309-314.259