Характеристика и диагностическое значение белков смешанной слюны при депрессивных расстройствах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Григорьев, Игорь Владимирович

• Григорьев, Игорь Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Григорьев, Игорь Владимирович

Введение.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Слюна как предмет лабораторной диагностики.

1.1.1. Биохимический состав слюны.

1.1.2. Механизмы регуляции состава слюны.

1.1.3. Использование слюнного секрета для диагностических целей

1.1.4. Влияние психики на состав слюны.

1.2. Депрессивные расстройства и методы их тестирования.

1.2.1. Характеристика депрессивных расстройств.

1.2.2. Методы тестирования депрессивных заболеваний.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Анализ белкового спектра смешанной слюны.

2.1.1. Получение препаратов смешанной слюны.

2.1.2. Электрофорез белков смешанной слюны.

2.1.3. Денситометрический анализ электрофореграмм.

2.2. Количественная оценка общего белка в слюне.

2.3. Оценка активности амилазы.

2.4. Выделение реперных белков.

2.5. Определение природы реперных белков.

2.5.1. Аминокислотный анализ реперного белка.

2.5.2. Определение природы белка.

2.6. Количественная оценка содержания реперных белков в слюне.

2.7. Тестовая оценка депрессивных состояний.

2.8. Статистическая обработка данных.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ 3.1. Особенности белкового спектра смешанной слюны у здоровых лиц.

3.1.1. Разнообразие белковых спектров смешанной слюны.

3.1.2. Динамика белкового спектра смешанной слюны отдельного человека в течение дня.

3.1.3. Белковый спектр смешанной слюны в отсутствии изменений психоэмоционального состояния.

3.1.4. Влияние полярных психоэмоциональных состояний на белковый спектр смешанной слюны.

Позитивные психоэмоциональные состояния.

Негативные психоэмоциональные состояния.

3.1.5. Характеристика белкового спектра смешанной слюны после обморока.

3.1.6. Обсуждение и предварительные выводы.

3.2. Особенности белкового спектра смешанной слюны пациентов с депрессивным синдромом.

3.2.1. Характеристики основной контрольной группы.

3.2.2. Характеристика основных групп пациентов с депрессией.

Аффективные расстройства.

Ревматоидный артрит.

3.2.3. Характеристика дополнительных групп.

Реактивный артрит.

Хроническая почечная недостаточность.

Желчно-каменная болезнь.

3.2.4. Обсуждение и предварительные выводы.

3.3. Характеристика белков, формирующих в смешанной слюне фракцию с молекулярной массой 55 кДа.

3.3.1. Выделение белковой фракции 55 кДа.

3.3.2. Очистка и определение природы белков, формирующих фракцию 55 кДа.

3.3.3. Количественная оценка содержания пролин-обогащённого белка в фракции 55 кДа и общего белка в смешанной слюне.

3.3.4. Измерение амилазной активности.

3.3.5. Обсуждение и предварительные выводы.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Характеристика и диагностическое значение белков смешанной слюны при депрессивных расстройствах»

Актуальность проблемы. Одной из важных проблем современной биохимии является отсутствие достаточно чувствительных методов объективной диагностики нарушений высшей нервной деятельности и, в частности, депрессивных расстройств. Особое значение эта проблема приобретает в связи с интенсивным ростом числа пациентов с различными формами депрессии. Предполагается, что в первые десятилетия XXI века депрессия выйдет на второе место после сердечно-сосудистых заболеваний как причина утраты трудоспособности среди населения. Около 15% населения развитых стран когда-либо на протяжении своей жизни имели классические формы депрессивных расстройств (Холмогорова А.Б., Гаранок Н.Г., 1998). С другой стороны, считается, что от наиболее трудно выявляемой формы депрессии, так называемой скрытой, страдают в тот или иной период жизни до 25% населения земного шара (Demel А., 1973). Причём ситуация с пациентами, болеющими скрытыми формами депрессии, создаёт не только медицинскую, но и серьёзную экономическую проблему, т.к. такие больные (из-за частых ложно соматических симптомов) отнимают много времени: проходят всевозможные дорогостоящие обследования, получают разные виды лечения, занимают место в стационаре, пока, наконец, часто спустя месяцы и годы, не попадут на приём к психиатру. Позднее распознавание подобных состояний таит в себе также и определённую опасность, ибо больные скрытой депрессией часто обнаруживают тенденцию к суицидам (Десятников В. Ф., 1979).

В настоящее время на практике для диагностики депрессивных расстройств используется преимущественно клинический опыт врача-психиатра и при необходимости специальные психологические тесты, однако эти подходы так или иначе подвержены определённому влиянию субъективных оценок пациента и врача. Существующий биохимический метод с использованием дексаметазонового теста имеет значительные недостатки (относительно невысокие чувствительность и специфич6 ность; длительность теста; инвазивность и др.), что затрудняет его внедрение в практику.

В этой связи продолжается поиск таких биологических маркеров, которые могли бы эффективно отражать состояние психики человека. Большое внимание исследователей в последние годы привлекает изучение корреляционных зависимостей между биохимическим составом слюнного секрета и особенностями психической деятельности. Так, обнаружено, что различные виды психологического стресса изменяют содержание разных биохимических веществ в слюне человека (Okumura Т. et al., 1997; Clow A. et al., 1997; Smith-Hanrahan S., 1997). Эти данные подтверждают, что слюна является чутким индикатором текущего состояния нервной системы. Как известно, этот факт был впервые зафиксирован ещё в начале XX века в опытах академика И.П.Павлова.

В целом ряде работ российских учёных было показано, что депрессивные расстройства сопряжены со значительными сдвигами в активности вегетативной нервной системы (Протопопов В.П., 1948; Каменская В.М., 1982). Последняя, как известно, регулирует функционирование слюнных желёз (Бабаева А.Г., Шубникова Е.А., 1979). Поэтому представляет большой научный и практический интерес исследовать качественные и количественные изменения в биохимическом составе слюны и произвести отбор показателей, которые могли бы быть носителями информации о депрессивном состоянии психики человека.

В этом отношении слюна является очень удобным объектом для таких наблюдений по причине целого ряда преимуществ: неинвазивность метода, возможность взятия проб в любое время, неограниченная частота взятия проб и т.п.

Как известно, важнейшими элементами секреторной деятельности слюнных желёз являются вещества белковой природы. До сих пор при изучении психической активности оценивались уровни только отдельных веществ слюны белковой природы (Okumura Т. et al., 1997; Clow А. et al., 1997; Smith-Hanrahan S., 1997). Мы предполагаем, что гораздо бо7 лее плодотворным может быть наблюдение одновременно целого ряда белковых компонентов в виде картины белкового спектра слюны. С технической точки зрения это также выгодно, т.к. анализ белкового спектра слюны можно эффективно проводить с помощью традиционных методов белковой химии и, в частности, вертикального электрофореза в полиакриламидном геле.

При этом представляется целесообразным изучить особенности белкового спектра не «чистой», а смешанной слюны, или ротовой жидкости, что является существенным по следующим причинам: а) смешанная слюна несёт в себе, так сказать, интегрированный результат, отражающий особенности функционирования разных слюнных желёз, что позволяет иметь возможность получения наибольшей биологической информации при анализе именно этого вида слюны; б) использование смешанной слюны является более удобным , чем слюны отдельных желёз, в медицинской практике (отсутствие необходимости в специальных приспособлениях для взятия чистой слюны, максимальная стерильность для пациента и врача при взятии проб и т.д.).

Цель исследования. Целью настоящей работы является отбор определённых показателей белкового спектра смешанной слюны (БССС), наиболее эффективно отражающих наличие депрессивных расстройств.

Основные задачи исследования. Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Изучить особенности белкового спектра смешанной слюны у здоровых лиц в относительно нейтральном психоэмоциональном состоянии (ПЭС) и на фоне полярных эмоций.

2. Исследовать особенности белкового спектра смешанной слюны у пациентов с депрессивными расстройствами.

3. Определить возможность количественной оценки белковых компонентов смешанной слюны, уровень которых наиболее показательно меняется на фоне депрессивных расстройств. 8

Научная новизна исследования. Обнаружено, что изменение ПЭС у здоровых лиц определённым образом отражается на картине БССС. При этом полярные ПЭС имеют свои характерные картины БССС: позитивные ПЭС сопровождаются обогащением БССС фракциями, негативные - обеднением.

Показано, что у пациентов с депрессивным синдромом, независимо от того, является ли основная причина патологического состояния психической или соматической природы, наблюдается устойчивое обеднение БССС относительно здорового контроля.

Установлено, что наиболее эффективно и достоверно наличие депрессивного расстройства отражается на уровне фракции БССС с молекулярной массой (ММ) в области 55 кДа, концентрация которой отчётливо уменьшается в ответ на депрессию. С помощью методов аналитической биохимии обнаружено, что в формировании этой фракции принимает участие пролин-обогащённый белок. Показано, что наиболее целесообразным методом оценки уровня фракции 55 кДа является определение её оптической плотности после электрофореза слюны.

Практическая ценность работы. Предложен высокоинфомативный метод для изучения психической активности человека с помощью средств аналитической биохимии. Предложен эффективный биохимический метод для определения наличия депрессивного расстройства. Простота метода позволяет говорить о том, что он может найти важное приложение в медицинской практике.

Основные положения, выносимые на защиту

1. Белковый спектр смешанной слюны подвержен существенному влиянию психоэмоционального состояния.

2. Депрессивные эпизоды у здоровых людей сопровождаются снижением концентрации фракций и их количества в белковом спектре смешанной слюны. 9

3. Белковый спектр смешанной слюны у пациентов с аффективными расстройствами при психических и соматических заболеваниях значительно обеднён фракциями.

4. Уровень белковой фракции смешанной слюны с молекулярной массой 55 кДа является наиболее эффективным показателем депрессивного расстройства.

По теме диссертации опубликовано 11 работ.

Структура и объём работы. Диссертация изложена на 87 страницах машинописи и состоит из введения, общей характеристики работы, обзора литературы, объектов и методов исследования, трёх разделов с описанием собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и научно-практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 6 таблицами и 18 рисунками. Список литературы состоит из 153 источников, в том числе 28 на русском и 125 на иностранных языках.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Григорьев, Игорь Владимирович

ВЫВОДЫ

1. У конкретного человека в состоянии покоя белковый смешанной состав слюны постоянен в интервале часы-месяцы. В 98,5% случаев преобладают белки с молекулярной массой в области 55 к Да. Белковый состав смешанной слюны имеет специфические индивидуальные особенности.

2. Белковый состав смешанной слюны в течение непродолжительного времени (секунды, минуты) может изменяться, отображая индивидуальные состояния психики: при при позитивных психоэмоциональных состояниях увеличением, а при негативных психоэмоциональных состояних уменьшением белковой фракции с молекулярной массой 55 кДа.

3. У больных с наличием депрессивного синдрома выявлена стереотипная реакция белкового спектра смешанной слюны, включающая уменьшение белков с молекулярной массой 55 кДа и обеднение белкового спектра.

4. Белковая фракция смешанной слюны с молекулярной массой 55 кДа включает пролин-обогащённый белок и белок с амилазной активностью.

5. Для диагностики депрессивных расстройств целесообразно использовать метод электрофореза белков смешанной слюны с последующим определением оптической плотности белковой фракции с молекулярной массой 55 кДа.

70

Научно-практические рекомендации

1. Анализ белкового спектра смешанной слюны может иметь важное значение для определения групп риска в отношении аффективных заболеваний, в частности депрессий. В этом отношении метод может быть рекомендован для использования при массовых профилактических обследованиях населения (диспансеризации), а также при поступлении пациентов в клиники психиатрического и общего профиля. Существенным при этом являются возможности метода: простота взятия проб смешанной слюны, проведение анализа одновременно нескольких десятков образцов, относительно высокая скорость получения предварительного результата (3-4 часа) и простота его оценки.

2. Метод может быть ценным при необходимости объективного наблюдения за психоэмоциональным состоянием пациентов, находящихся на стационарном лечении.

3. Изучение особенностей белкового спектра смешанной слюны может быть рекомендовано для фундаментальных исследований психики человека как высокоинформативный метод.

4. Метод может быть рекомендован для внедрения в учебный процесс в медицинских ВУЗах (кафедры биохимии, психиатрии, психологии, эндокринологии) как исключительно наглядно демонстрирующий влияние психики на физиологию в организме человека.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Григорьев, Игорь Владимирович, 2000 год

1. Артемонова Р.Н. Возрастные особенности белкового состава слюны в норме // Стоматология. - 1978. - Т. 57. - № 4. - С. 93-94.

2. Бабаева А. Г., Шубникова Е. А. Структура, функция и адаптивный рост слюнных желез. М.: Московский университет, 1979. - 190 с.

3. Березин Ф.Б., Мирошников М.П., Рожанец Р.Б. Методика многостороннего исследования личности в клинической медицине и психогигиене. М.: Медицина, 1976. - 186 с.

4. Грошиков М.И., Староселъцева JI.K., Пожарицкая М.М. Исследование белковых фракций слюны при пародонтозе // Стоматология. 1977. -Т. 56, №5. - С. 28-31.

5. Десятников В.Ф. Соматовегетативные маски депрессии. // Клиническая медицина. 1979. - Т.9. - С. 100-104.

6. Десятников В.Ф., Сорокина Т.Т. Скрытая депрессия в практике врачей. Минск: Вышейшая школа, 1981. - 240 с.

7. Заболотных В.А., Иезуитова Н.Н., Кассиль В.Г. Пищеварение в полости рта. Руководство по физиологии. Физиология пищеварения. -Л.: 1974-С. 136-155.

8. Кадиров Ш.К., Бутабаев М.Т., Давронов Л.В. Эмоциональное напряжение и спектр ферментов слюнных желёз // Тез. Всесоюзной науч. конф. Нейрогуморальные механизмы регуляции висцеральных систем. -Томск, 1989.-С. 45-46.

9. Каменская В.М., Михайлова Е.С. Изучение соотношений электроэнцефалографических и вегетативных показателей в стрессовой ситуации у больных с различными типами депрессий // Журн. невропатологии и психиатрии. 1982. - Т. 82, № 9. - с. 57-62.

10. Каплан Г.И., Сэдок Б.Дж. Клиническая психиатрия. Из синопсиса по психиатрии. 2 т. Пер. с анг. М.: Медицина, 1994. - 672 с.72

11. Лаврецкая Э.Ф., Тенидиева В.Д., Лаврецкая Г.И. Гормональный профиль больных при депрессиях // Журн. невропатологии и психиатрии. 1987. - Т. 87, № 4. - С. 555-558.

12. Левицкий А.П. Пищеварительные ферменты слюнных желёз: Авто-реф. дис. канд. биол. наук. Одесса, 1974. -21 с.

13. Луканина С.К. Дексаметазоновый тест и клиника депрессивных состояний (обзор) // Журн. невропатологии и психиатрии. 1986. - Т. 86. -№ 9. - С. 1417-1427.

14. Лукаш И.А., Внуков В.В., Кучеренко А.О. и др. Свободнорадикаль-ные процессы в слюне людей при эмоциональном стрессе // Физиология человека. 1997. - Т. 23, № 6. - С. 106-109.

15. Маркова М.Н., Смирнова Л.К., Прохорова И.С. Исследование межсистемных гормональных взаимосвязей у больных депрессией // Журн. невропатологии и психиатрии. 1989. - Т. 89, № 4. - С. 105-110.

16. Наикин А.Н., Михайлов А.А., Кустикова Ю.Г. и др. Использование слюны для изучения в иммунодефицитном анализе поствакционально-го и постинфекционного иммунитета к гриппу // Вопр. вирусологии. -1993.-Т. 38,№5.-С. 201-204.

17. Пожарицкая М.М., Старосельцева Л.К., Грошиков М.И. Исследование белковых фракций слюны человека // Стоматология. 1975. - Т. 54, №5. -С. 14-17.

18. Пожарицкая М.М., Старосельцева Л.К., Князева А.П. Белковые фракции слюны у больных синдромом Шегрена // Стоматология. -1985.-Т. 64,№4.-С. 13-14.

19. Покидова Н.В., Бабаян С.С., Журавлёва Т.П., Ермольева З.В. Химические и физико-химические свойства лизоцима человека // Антибиотики. 1974. - Т.19. - С. 721-724.73

20. Протопопов В.П. Соматическая характеристика маниакально-депрессивного психоза // Невропатология и психиатрия. 1948. - Т. 4. -С. 57-64.

21. Саградян A.JI. Изменение общего белка и белковых фракций в секрете слюнных желёз у больных вирусным гепатитом // Сообщ. АН Груз. ССР. 1975. - Т. 80, № 1. - С. 209-212.

22. Сукманский О.И. Биологически активные вещества слюнных желез. -Киев: Здоровье, 1991. 111 с.

23. Татаринов Ю.С., Тагорова А.К., Терентьев А.А. Иммунологическое определение бета-глобулина в семинальной плазме человека // Бюлл. эксперим. биологии и медицины. 1990. - Т. 110. - С. 469-71

24. Темирбаев М.А., Хасенова Б.Д. Электрофоретическое исследование белков секрета слюнных желёз человека // Здравоохранение Казахстана. -1982.-№ 8. С. 51-54.

25. Удут В.В., Наумов С.А., Карпов А.Б. и др.// Вопр. онкологии. -1992. -Т. 38, №2. -С. 177-181.

26. Шараев П.Н., Рябов В.И., Гумиярова Г.К. и др. Определение свободной и связанной форм сиаловых кислот в биологических объектах // Клиническая лабораторная диагностика. 1993. - Т. 4. - С. 44-46.

27. Aguirre A., Testa-Weintraub L.A., Banderas J.A. et al. Sialochemistry: a diagnostic tool? // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. - V. 4, № 3.4. p. 343. 350.74

28. Akiyama К., Kimura H. Isolation of a new actin-binding protein from human seminal plasma. // Biochim. Biophys. Acta. 1990. - V. 1040. - P. 206-210.

29. Amano A., Sojar N.T., Lee J.Y. et al. Salivary receptors for recombinant fimbrillin of Porphiromonas gingivalis. // Infect. Immun. 1994. - V. 62, № 8.-P. 3372-3380.

30. Azen E.A., Kim H.S., Goodman P. et al. Alleles at the PRH1 locus coding for the human salivary-acidic prolin-rich proteins Pa, Db, and PIF // Am. J. Hum. Genet. 1987. - V. 41. - P. 1035-1047.

31. Babu J.P., Beachey E.H., Hasty D.L. et al. Isolation and characterization of a 60-kilodalton salivary glycoprotein with agglutinating activity against strains of Streptococcus mutans // Infect. Immun. 1986. - V. 51. -P. 405-413.

32. Babu J.P., Beachey E.H., Simpson W.A. Inhibition of the interaction of Streptococcus sanguis with hexadecane droplets by 55- and 60-kilodalton hydrophobic proteins of human saliva // Infect. Immun. 1986. - V. 53, № 2. - P. 278-284.

33. Babu J.P., Dabbous M.K., Abraham S.N. Isolation and characterization of a 180-kiloDalton salivary glycoprotein which mediates the attachment of Actinomyces naeslundii to human buccal epithelial cells // J. Periodontal. Res. 1991.-V. 26.-P. 97-106.

34. Baum В .J., Dai Y., Hiramatsu Y. et al. Signalling mechanisms that regulate saliva formation. // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. - V. 4. - P. 379384.

35. Ben-Aryeh H., Gordon N., Szargel R. et al. Whole saliva in systemic lupus erythematosus patients // Oral. Surg. Oral. Med. Oral. Pathol. 1993. -V. 75. - P. 696-699.

36. Bennick A. Structural and genetic aspects of proline-rich proteins // J. Dent. Res. 1987. - V. 66. - P. 457.75

37. Bergler W., Petroianu G., Metzler R. Disminucion del factor de cre-cimiento epidermico en la saliva en pacientes con carcinoma de la orofar-inge // Acta Otorinolaringol. Esp. 1992. - V. 43. - P. 173-175.

38. Bradford M.M. Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantitative of protein utilizing dry binding // Anal. Biochem. -1976.-P. 248-254.

39. Brummer-Korvenkontio H., Lappalainen P., Reunala Т., Palosuo T. Detection of mosquito saliva-specific IgE and IgG4 antibodies by immunoblot-ting // J. Allergy Clin. Immunol. 1994. - V. 93. - P. 551-555.

40. Clow A., Patel S., Najafi M. The Cortisol response to psychological challenge is preceded by a transient rise in endogenous inhibitor of monoamine oxidase // Life Sci. 1997. - V. 61, № 5. - P. 567-575.

41. Dasberg H, Assael M. // Dis. Nerv. Syst. 1968. - V. 29. - P. 399-404.

42. Da-Silva M.V., Dias-Camargo E., Vaz A.J., Batista L. Immunodiagnosis of human leptospirosis using saliva // Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. -1992. V. 86, №5.-P. 560-561.

43. Davies R.H., Harris В., Thomas D.R. et al. Salivary testosterone levels and major depressive illness in men // Br. J. Psychiatry. 1992. - V. 161. - P. 629-632.

44. Demel H. Maskedepression. Stutigard-Vienna, 1973. - P. 247-252.

45. Demuth D.R., Davis C.A., Corner A.M. et al. Cloning and expression of a Streptococcus sanguis surface antigen that interacts with a human salivary agglutinin // Infect. Immun. 1988. - V. 56. - P. 2484-2490.

46. Edman P. Protein sequence determination. Berlin: Springer, 1975. - P. 232-279.

47. Evans P., Bristow M., Hucklebridge F. et al. The relationship between secretory immunity, mood and life-events // Br. J. Clin. Psychol. 1993. - V. 32. - P. 227-236.

48. Fekete Z., Korec R., Feketeova E. et al. Salivary and plasma insulin levels in man // Biochem. Mol. Biol. Int. 1993. - V. 30. - P. 623-629.

49. Fisher S.J., Prakobphol A., Kajisa L., Murray P.A. External radiolabel-ling of components of pellicle on human enamel and cementum // Arch. Oral. Biol. 1987. - V. 32. - P. 509-517.

50. Gasior-Chrzan В., Falk E.S. Lysozyme and IgA concentrations in serum and saliva from psoriatic patients // Acta Derm. Venereol. 1992. - V. 72. -P. 138-140.

51. Gehris T.L., Kathol R.G. Comparison of time-integrated measurement of salivary corticosteroids by oral diffusion sink technology to plasma Cortisol // Endocr. Res. 1992. - V. 18. - P. 77-89.

52. Goldberg D. G., Tappin D. M., Cameron S. et al. Saliva and HIV testing // Lancet. 1993. - V. 341, № 8841. - P. 382.

53. Grander D.A., Weisz J.R., Kauneckis D. Neuroendocrine reactivity, internalizing behavior problems, and control-related cognitions in clinic-referred children and adolescents // J. Abnorm. Psychol. 1994. V. 103, № 2. - P. 267-276.

54. Haeckel R., Hanecke P. The application of saliva, sweat and tear fluid for diagnostic purposes // Ann. Biol. Clin. Paris. 1993. V. 51, № 10-11. - P. 903-910.

55. Hajeer A.H., Balfour A.H., Mostratos A., Crosse B. Toxoplasma gondii: detection of antibodies in human saliva and serum // Parasite Immunol. -1994-V.16.-P. 43-50.77

56. Hakeem V., Fifield R., al-Bayaty H.F. et al. Salivary IgA antigliadin antibody as a marker for coeliac disease // Arch. Dis. Child. 1992. - V. 67, № 6. - P. 724-727.

57. Hasty D.L., Simpson W.A. Effects of fibronectin and other salivary macromolecules on the adherence of Escherichia coli to buccal epithelial cells // Infect. Immun. 1987. - V. 55. - P.2103-2109.

58. Henskens Y.M., van-der-Weijden F.A., van-den-Keijbus P.A. et al. Effect of periodontal treatment on the protein composition of whole and parotid saliva // J. Periodontal. 1996. - V. 67. - P. 205-212.

59. Ichikawa S., Tsukano K., Ito A. et al. Studies on the usefulness of saliva for detection of antibodies to HIV-1 // Kansenshogaku Zasshi. 1993. - V. 67, № 10.-P. 1031-1037.

60. Ino M., Ushiro K., Ino C. et al. Kinetics of epidermal growth factor in saliva//Acta Otolaryngol. Suppl. Stockh. 1993. - V. 500. - P. 126-130.

61. Isemura S., Saitoh E., Sanada K. Characterization of a new cysteine proteinase inhibitor of human saliva, cystatin SN, which is immunologically related to cystatin S // FEBS Lett. 1986. - V. 198. - P. 145-149.

62. Jensen J.L., Xu Т., Lamkin M.S. et al. Physiological regulation of the secretion of histatins and statherins in human parotid saliva // J. Dent. Res. -1994.-V. 73.-P. 1811-1817.78

63. Jenzano J.W., Su H.W., Featherstone G.L., Lundblad R.L. Molecular diversity of tissue kallikrein in human saliva // Agents. Actions. Suppl. -1992.-№38.-P. 137-144.

64. Kajisa L., Prakobphol A., Schiodt M., Fisher S.J. Effect of plasma on composition of human enamel and cementum pellicle // Scand. J. Dent. Res. 1990.-V. 98.-P. 461-471.

65. Kanehisa J., Doi S., Yamanaka Т., Takeuchi H. Salivary flbronectin in man: an immunoblotting, radioimmunoassay and immunohistochemical study // Arch. Oral. Biol. -1991. V. 36. - P. 265-272.

66. Kauffman D., Hofmann Т., Bennick A., Keller P. Basic proline-rich proteins from human parotid saliva: complete covalent structures of proteins IB-1 and IB-2 // Biochemistry. 1986. - V. 25. - P. 2387-2392.

67. Kauffman D., Wong R., Bennick A. Basic prolin-rich proteins from human parotid saliva: complete covalent structure of protein IB-9 and partial structure of protein IB-6, members of a polymorphic pair // Biochemistry. -1982.-V. 21.-P. 6558.

68. Kim H.S., Maeda N. Structures of two Haelll-tipe genes in the human salivary proline-rich protein multigene family // J. Biol. Chem. 1986. - V. 261.-P. 6712-6718.

69. Kirkpatrick S.W., Campbell P.S., Wharry R.E., Robinson S.L. Salivary testosterone in children with and without learning disabilities // Physiol. Be-hav. 1993. - V. 53. - № 3. - P. 583-586.

70. Kirschbaum C., Wust S., Hellhammer D. // Psychosom. Med. 1992. -V. 54, № 6. - P. 648-657.

71. Kirstila V., Tenovuo J., Ruuskanen O. et al. Salivary defense factors and oral health in patients with common variable immunodeficiency // J. Clin. Immunol. 1994. - V. 14. - P. 229-236.

72. Kishimoto E., Hay D.I., Kent R. Polymorphism of submandibular-sublingual salivary proteins which promote adhesion of Streptococcus mu79tants serotype-c strains to hydroxyapatite I I J. Dent. Res. 1990. - V. 69. - P. 1741-1745.

73. Kraines S. Mental depression and their treatment. New York, 1957. -112 p.

74. Kugler J., Hess M., Haake D. Secretion of salivary immunoglobulin A in relation to age, saliva flow, mood states, secretion of albumin, Cortisol, and catecholamines in saliva // J. Clin. Immunol. 1992. - V. 12. - P. 45-49.

75. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 // Nature. 1970. - V. 227. - P. 680-684.

76. Lamkin M.S., Oppenheim F.G. Structural features of salivary function // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. - V. 4, № 3-4. - P. 251-259.

77. Levine M.J., Reddy M.S., Tabak L.A. et al. Structural aspects of salivary glycoproteins // J. Dent. Res. 1987. - V. 66. - P. 436-441.

78. Lundy F.T., Al-Hashimi I., Rees T.D., Lamey P.J. Evaluation of major parotid glycoproteins in patients with burning mouth syndrome // Oral. Surg. Oral. Med. Oral. Pathol. Oral. Radiol. Endod. 1997. - V. 83. - P. 252258.

79. Lyons K.M., Azen E.A., Goodman P.A., Smithies O. Many protein products from a few loci: assignment of human salivary proline-rich proteins to specific loci // Genetics. 1988. - V. 120. - P. 255-265.

80. Mackinnon L.T., Hooper S. Mucosal (secretory) immune system responses to exercise of varying intensity and during overtraining // Int. J. Sports Med. 1994. - V. 3. - P. 179-183.

81. Maeda N., Kim H.S., Azen E.A., Smithies O. Differential RNA splicing and post-translational cleavages in the human salivary proline-rich protein gene system // J. Biol. Chem. 1985. - V. 260. - P. 11123-11130.

82. Makela M., Salo Т., Uitto V.J., Larjava H. Matrix metalloproteinases (MMP-2 and MMP-9) of the oral cavity: cellular origin and relationship to periodontal status // J. Dent. Res. 1994. - V. 73. - P. 1397-1406.80

83. Martin R.B., Guthrie C.A. Pitts C.G. Emotional crying, depressed mood, and secretory immunoglobulin A // Behav. Med. 1993. - V. 19, № 3. - P. 111-114.

84. Mayer-Gross W., Slater E., Roth M. // Clinical psychiatry. London, 1954.-96 p.

85. Mednieks M.I., Epstein P.M., Hachisu R. et al. Cyclic AMP-reactive proteins in human saliva // Arch. Oral. Biol. 1994. - V. 39. - P. 869-875.

86. Medof M.E., Walter E.I., Rutgers J.L., Knowles D.M., Nussenzweig V. Identification of the complement decay-accelerating factor (DAF) on epithelium and glandular cells and in body fluids // J. Exp. Med. 1987. - V. 165. P. 848-864.

87. Minakata K., Asano M. New protein inhibitors of cysteine proteinases in human saliva and salivary glands // Hoppe. Seylers Z. Physiol. Chem. -1984. V. 365, № 3. - P. 399-403

88. Moghissi K.S. Ovulation detection // Endocrinol. Metab. Clin. North. Am. 1992. - P. 21, № 1. - p. 39-55.

89. Mogi M., Harada M., Kage T. et al. Two-dimensional electrophoresis of human salivary proteins from patients with sialoadenopathy // Arch. Oral. Biol. 1993. - V. 38, № 12. - P. 1135-1139.

90. Moran M.J., Santos J.L., Fontanellas A. et al. Salivary porphyrin concentration in porphyria cutanea tarda // J. Dermatol. Sci. 1993. - V. 6, № 2. -P. 155-158.

91. Muller F., Holberg-Petersen M., Rollag H. et al. Nonspecific oral immunity in individuals with HIV infection // J. Acquir. Immune. Defic. Syndr. 1992.-V. 5, № i. p. 46-51.

92. Musumeci V., Cherubini P., Zuppi C. et al. Aminotransferases and lactate dehydrogenase in saliva of diabetic patients // J. Oral. Pathol. Med. -1993.-V. 22, №2.-P. 73-76.81

93. Neuhaus T.J., Shah V., Barratt T.M. Salivary excretion of endogenous proteins in nephrotic syndrome in children // Pediatr. Nephrol. 1997. - V. 11, №4. -P. 411-414.

94. Nieuw-Amerongen A.V., Strooker H., Oderkerk C.H. et al. Changes in saliva of epileptic patient // J. Oral. Pathol. Med. 1992. - V. 21, № 5. - P. 203-208.

95. Nigg H.N., Wade S.E. Saliva as a monitoring medium for chemicals // Rev. Environ. Contam. Toxicol. 1992. - V. 129. - P. 95-119.

96. Oberg S.G., Izutsu K.T., Truelove E.L. Human parotid saliva protein composition: dependence on physiological factors // Am. J. Physiol. 1982. V. 242, №3.-G231-236.

97. Ogawa Y., Hong S.S., Toyosawa S. et al. Imunoelectron microscopy of carbonic anhydrase isozyme VI in human submandibular gland: comparison with isozymes I and II // J. Histochem. Cytochem. 1993. - V. 41, № 3. - P. 343-351.

98. Oho Т., Rahemtulla F., Mansson R. В., Hjerpe A. Purification and characterization of a glycosylated proline-rich protein from human parotid saliva // Int. J. Biochem. 1992. - V. 24, № 7. - P. 1159-1168.

99. Okumura Т., Nakajima Y., Matsuoka M. et al. Study of salivary catecholamines using fully automated column-switching high-performance liquid chromatography // J. Chromatogr. Biomed. Appl. 1997. - V. 694, № 2. -P. 305-316.

100. O'Sullivan J.M., Cannon R.D., Sullivan P.A. et al. Identification of salivary basic prolin-rich proteins as receptors for Candida ablicans adhesion // Microbiology. 1997. - V. 143. - P. 341.

101. Parris W.C., Sastry B.V., Kambam J.R. et al. Immunoreactive substance P in human saliva. A possible marker of chronic pain // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1993. - V. 694. - P. 308-310.82

102. Perinpanayagam H.E., Van-Wuyckhuyse B.C., Ji Z.S., Tabak L.A. Characterization of low-molecular-weght peptides in human parotid saliva // J. Dent. Res. 1995. - V. 74, № 1. - P. 345-350.

103. Piacentini S.C., Thieme T.R., Beller M., Davidson S.L. Diagnosis of hepatitis A, B, and С using oral samples // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1993.- V. 694. - P. 334-336.

104. Pikula D.L., Harris E.F., Dasiderio D.M. et al. Methionine enkephalin-like, substance P-like, and beta-endorphin-like immunoreactivity in human parotid saliva // Arch. Oral. Biol. 1992. - V. 37, № 9. - P. 705-709.

105. Piotrowski J., Czajkowski A., Murty V.L. et al. Identification of human salivary protease activity toward mucin: differences with caries // Bio-chem. Int. 1992. - V. 28, № 5. - P. 939-947.

106. Pollit J. // Practitioner. 1958. - V. 1081. - P. 72-78.

107. Price P.A., Rice J.S., Williamson M.K. Conserved phosphorylation of serines in the Ser-X-Glu/Ser (P) sequences of the vitamin K-dependent matrix Gla protein from shark, lamb, rat, cow, and human // Protein Sci. 1994. - V. 3, № 5. - P. 822-830.

108. Rahim Z.H., Yaakob H.B. Electrophoretic detection of salivary alpha-amylase activity // J. Nihon. Univ. Sch. Dent. 1992. V. 34, № 4. - P.273-277.

109. Rammasubbu N., Reddy M.S., Bergey E.J. et al. Large-scale purification and characterization of the major phosphoproteins and mucins of human submandibular-sublingular saliva // Biohem. J. 1991. - V. 280. - P. 341-352.

110. Rathman W.M., van-den-Keybus P.A., van-Zeyl M.J. et al. Localization of mucin, cystatin-like 14 kD protein and 20 kD glycoprotein in the human submandibular gland// J. Biol. Buccale. 1990. - V. 18, № 1. - P. 19-27.83

111. Robberecht P., De Neef P., Vandermeers A. et al. Presence of heloder-min-like peptides of the VIP-secretin family in mammalian salivary glands and saliva //FEBS. Lett.- 1985.-V. 190,№ l.-P. 142-146.

112. Robinovitch M.R., Iversen J.M., Resnick L. Anti-infectivity activity of human salivary secretions toward human immunodeficiency virus // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. - V. 4, № 3-4. - P. 455-459.

113. Rose J.E., Levin E.D., Benowitz N. Saliva nicotine as an index of plasma levels in nicotine skin patch users // Ther. Drug. Monit. 1993. - V. 15, №5.-P. 431-435.

114. Rudney J.D. Does variability in salivary protein concentrations influence oral microbial ecology and oral health? // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. -1995.-V. 6, №4.-P. 343-367.

115. Russel M.W., Mansson-Rahemtulla B. Interaction between surface protein antigens of Streptococcus matants and human salivary components // Oral. Microbiol. Immunol. 1989. - V. 4, № 2. - P. 106-111.

116. Scannapieco F.A., Torres G., Levine M.J. Salivary alpha-amylase: role in dental plaque and caries formation // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1993. -V. 4,№34. .p. 301-307.

117. Scerbo A.S., Kolko D.J. Salivary testosterone and Cortisol in disruptive children: relationship to aggressive, hyperactive, and internalizing behaviors // J. Am. Acad. Child. Adolesc. Psychiatry. 1994. - V. 33, № 8. - P. 11741184.

118. Schenkels L.C., Veerman E.C., Nieuw Amerongen A.V. Biochemical composition of human saliva in relation to other mucosal fluids // Crit. Rev. Oral. Biol. Med. 1995. -V. 6, № 2. - P 161-175.

119. Schlesinger D.H., Hay D.I. Complete covalent structure of a prolin-rich phosphoprotein, PRP-2, an inhibitor of calcium phosphate crystal growth from human parotid saliva // Int. J. Peptide Protein Res. 1986. - V. 27. - P. 373-379.

120. Schramm W., Smith R.H., Craig P.A., Grates H.E. Testosterone concentration is increased in whole saliva, but not in ultrafiltrate, after tooth-brushing // Clin. Chem. 1993. - V. 39, № 3. - P. 519-521.

121. Schwartz S.S., Zhu W.X., Sreebny L.M. Sodium dodecil sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis of human whole saliva // Arch. Oral. Biol. 1995. - V. 40, № 10. - P. 949-958.

122. Sharaev P.N., Riabov V.I., Gumiarova G.Kh. et al. Determination of free and bound forms of sialic acids in biologic objects // Klin. Lab. Diagn. -1993.-V. 4.-P. 44-46.

123. Shern R.J., Fox P.C., Li S.H. Influence of age on the secretory rates of the human minor salivary glands and whole saliva // Arch. Oral. Biol. -1993. V. 38, № 9. - P. 755-761.

124. Shiba A., Shiba K.S., Suzuki K. Analysis of salivary proteins by thin layer sodium dodecylsulphate polyacrylamide gel electrophoresis // J. Oral. Rehabil. 1986. - V. 13, № 3. - P. 263-271.

125. Shinkai S., Watanabe S., Kurokawa Y. Salivary Cortisol for monitoring circadian rhythm variation in adrenal activity during shiftwork // Int. Arch. Occup. Environ. Health. 1993. - V. 64, № 7. - P. 499-502.

126. Slomiany B.L., Piotrowski J., Czajkowski A. et al. Control of mucin molecular forms expression by salivary protease: differences with caries // Int. J. Biochem. 1993. - V. 25, №> 5. - P. 681-687.

127. Smith-Hanrahan C. Salivary kallikrein output during the stress response to surgery // Can. J. Physiol. Pharmacol. 1997. - V. 75, № 4. - P. 301-304.

128. Spielman A.I., D'Abundo S., Field R.B., Schmale H. Protein analysis of human von Ebner saliva and a method for its collection from the foliate papillae//J. Dent. Res. 1993. - V. 72, № 9. - P. 1331-1335.85

129. Spielman A.I., Zeng X.N., Leyden J.J., Preti G. Proteinaceous precursors of human axillary odor: isolation of two novel odor-binding proteins // Experientia. 1995. - V. 51, № 1. - P. 40-47.

130. Sprindrich J., Sprindrichova D. Human saliva protein patterns in polyacrylamide gel // Scripta Medica. - 1970. - V. 43, № 3-4. - C. 123-131.

131. Stark K., Warnecke C., Brinkmann V. et al. Sensitivity of HIV antibody detection in saliva // Med. Microbiol. Immunol. Brl. 1993. - V. 182, № 3. - P. 147-151.

132. Takeuchi T. Human amylase isoenzymes separated on concovalin A-sepharose // Clin. Chem. 1979. - V. 25, № 8. - P. 1406-1410.

133. Thomsen K.K., Vuust J., Lund T. Isolation and characterization of al-pha-amilase messenger RNA from bank vole parotid glands // Eur. J. Bio-chem. 1981. - V. 117, № 1.-P. 81-86.

134. Tobin G., Ekstrom J. Parasympathetic NANC-secretion of saliva in the mink, and effects of substance P and VIP // Regul. Pept. 1992. - V. 39, № l.-P. 95-101.

135. Tomana M., Zikan J., Kulhavy R. et al. Interactions of galactosyltrans-ferase with serum and secretory immunoglobulins and their component chains // Mol. Immunol. 1993. - V. 30, № 3. - P. 277-286.86

136. Uitto V.J., Suomalainen К., Sorsa Т. Salivary collagenase. Origin, characteristics and relationship to periodontal health // J. Periodontal. Res. -1990.-V. 25, №3.-P. 135-142.

137. Usdin G.L. Practical lectures in psychiatry for the medical practitioner.- England: Springfield III, ch. C.Thomas, 1966. 86 p.

138. Vanden-Abbeele A., Courtois P., Pourtois M. The antiseptic role of saliva // Rev. Beige. Med. Dent. 1992. - V. 47, № 3. - P. 52-58.

139. Vanden-Abbeele A., Courtois P., Pourtois M. Peroxidase activity loss after filtration and centrifugation of whole saliva. Influence of citrate // J. Biol. Buccale. 1992. - V. 20, № 2. - P. 91-96.

140. Veerman E.C., Ligtenberg A.J., Schenkels L.C. et al. Binding of human high-molecular-weight salivary mucins (MG1) to Hemophilus parain-fluenzae // J. Dent. Res. 1995. - V. 74, № 1. - p. 351-357.

141. Vissink A., Panders A.K., Nauta J.M. et al. Applicability of saliva as a diagnostic fluid in Sjogren's syndrome // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1993. - V. 694. - P. 325-329.

142. Wong R.S.C., Hofmann Т., Bennick A. The complete primary structure of a proline-rich phosphoprotein from human saliva // J. Biol. Chem. 1979.- V. 254, № 11. p. 4800-4808.

143. Wu A.M., Csako G., Herp A. Structure, biosynthesis, and function of salivary mucins // Mol. Cell Biochem. 1994. - V. 137, № 1. - P. 39-55.

144. Yan Q., Bennick A. Identification of histatins as tanin-binding proteins in human saliva // Biochem. J. 1995. - V. 311. - P. 341-347.

145. Yongg M., Stanford J. The dexamethasone supressi test for the detection, diagnosis, and management of depression // Arch. Int. Med. 1984. -V. 100.-P. 309-312.

146. You X.Y., Jiang J., Yin F.Z. Preliminary observation on human saliva alpha-fetoprotein in patients with hepatocellular carcinoma // Clin. Med. J. Engl. 1993. - V. 106, № 3. - P. 179-182.87

147. Zhang Z.Q. An assay method for herpes simplex virus type 1 sero-prevalence survey-detection of antibody in saliva by avidin-biotin complex enzyme-linked immunosorbent assay (ABC-ELISA) // Microbiol. Immunol. 1993. - V. 37, № 10. - P. 773-777.