Химический состав экстрактивных веществ копеечника щетинистого: Hedysarum setigerum Turcz. ex Fisch. Et Meyer тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.03, кандидат химических наук Неретина, Ольга Владимировна

• Неретина, Ольга Владимировна
• кандидат химических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат химических наук Неретина, Ольга Владимировна

Введение.

Глава 1. Химический состав растений рода Hedysarum (Литературный обзор)

1.1. Алифатические соединения

1.1.1. Углеводороды и производные циклогексана.

1.1.2. Спирты, кислоты и их производные.

1.2. Изопреноиды

1.2.1. Бициклические монотерпеноиды и сесквитерпеноиды.

1.2.2. Пентациклические тритерпеноиды.

1.2.3. Тритерпеновые гликозиды (сапонины).

1.2.4. Стерины.

1.3. Ароматические соединения

1.3.1. Фенолокислоты.

1.3.2. Аллильные фенилпропаноиды и другие производные бензола.

1.3.3. Халконы.

1.3.4. Бензофураны.

1.3.5. Ксантоны.

1.3.6. Кумарины.

1.3.7. Флавоноиды.

1.3.8. Изофлавоноиды.

1.3.9. Птерокарпаны.

1.3.10. Кумэстаны.

1.3.11. Антоцианидины и антоцианины.

1.4. Алкалоиды и другие азотсодержащие соединения.

1.5. Прочие продукты вторичного метаболизма.

1.5.1. Моносахариды, дисахариды и полисахариды.

1.5.2. Свободные аминокислоты и аминокислоты белка.

1.5.3. Витамины.

1.5.4. Неорганические элементы.

1.5.5. Другие продукты вторичного метаболизма.

1.6. Некоторые вопросы хемотаксономии рода Hedysarum.

1.7. Биологическая активность соединений растений рода Hedysarum.

1.8. Применение современных "мягких" ионизационных методов массспектрометрии в установлении строения флавоноидов.

Глава 2. Химический состав экстрактивных веществ из надземной части копеечника щетинистого Hedysarum setigerum Turcz. ex Fisch. Et Meyer (Обсуяадение результатов).

2.1. Флавоноиды Н. setigerum.

2.1.1. Флавонолы.

2.1.2. Флавоны.

2.2. Изучение флавоноидов, выделенных из Я. setigerum, методами FAB-. и MALDI масс-спектрометрии.

2.3. Идентификация берберина.

2.4. Идентификация 9'-0-р-0-глюкопиранозид 4,9,4',9'-тетрагидрокси-3,3'-диметокси-Р8,а8',р7'-циклолигнана.

2.5. Стерины Н. setigerum.

2.6. Идентификация гидроксибензойных кислот.

2.7. Возможные пути биосинтеза некоторых фенольных соединений в растениях рода Hedysarum.

2.8. Биологическая активность вторичных метаболитов Н. setigerum.

Глава 3. Экспериментальная часть.

3.1 Методы исследования.

3.2. Хроматографические методы.

3.3. Экстракция Hedysarum setigerum и первичное разделение экстракта.

3.4. Выделение агликонов и гликозидов флавоноидов.

3.4.1. Кверцетин, кверцитрин.

3.4.2. Изорамнетин.

3.4.3. З-Метоксикемпферол, кемпферол-З-О-а-Ь-арабинофуранозид, авикулярин.

3.4.4. Необудоффицид, роифолин, лоницерозид, рутин.

3.4.5. Линарин, диосмин.

3.5 Выделение гидроксибензойных кислот.

3.6 Выделение берберина.

3.6.1. Получение йодида берберина.

3.7 Выделение 9'-0-Р-0-глюкопиранозид 4,9,4',9'-тетрагидрокси-3,3'диметокси-Р8,а8',Р7'-циклолигнана.

3.8. Выделение фракции стеринов.

3.8.1. Ацетилирование стеринов.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Химический состав экстрактивных веществ копеечника щетинистого: Hedysarum setigerum Turcz. ex Fisch. Et Meyer»

Химии принадлежит ведущая роль в деле создания новых лекарств. В последнее десятилетие, несмотря на огромное количество синтетических фармацевтических средств, неуклонно возрастает интерес к привлечению химии природных соединений для создания лекарственных препаратов на основе растительного сырья, обладающих эффективным действием.

Одна из наиболее актуальных и нерешенных проблем - лечение внутриклеточных инфекций. В настоящее время, практически нет надежных способов борьбы с хламидиозом и такими вирусными инфекциями, как гепатит С. Тем не менее, в народной медицине накоплен значительный положительный опыт борьбы с заболеваниями вирусной природы с использованием лекарственных растений, в частности, растений из рода Hedysarum (копеечник) [1-3].

Работами Куваева В.Б. и др. [4] и Смирновой Л.П. и др. [5] показано, что противовирусное действие копеечников секции Obscura обуславливает гликозилированный ксантон - мангиферин.

Виды растений рода Hedysarum других секций (Fruticosa В. Fedtsch, Spinosissima В. Fedtsch., Multicaulia Boiss, Crinifera Boiss., Subacaulia Boiss) no литературным данным не содержат мангиферин, но также обладают противовирусным действием. Поэтому актуальной задачей является изучение химического состава копеечников вышеперечисленных секций. Эти исследования позволят выделить и установить структуры вторичных метаболитов, которые определяют противовирусное действие копеечников, а также могут служить хемотаксономическими маркерами внутри секций.

В качестве объекта исследования был выбран ранее неизученный вид Н. setigerum Turcz. ex Fischer et Meyer (копеечник щетинистый), принадлежащий к малоисследованной секции Multicaulia Boiss. Этот вид имеет достаточно широкие ареалы обитания в Западной, Средней и Восточной Сибири.

Выделение индивидуальных соединений из экстракта надземной части Я. setigerum осуществляли методами препаративной хроматографии на различных сорбентах. Изучение их строения проводили спектральными методами с привлечением ID и 2D ЯМР спектроскопии, в ряде случаев с использованием необходимых химических превращений.

Для определения молекулярной формулы выделенных соединений использовали метод масс-спектрометрии высокого разрешения (HR-MC), а для изучения фрагментации труднолетучих гликозидов современные «мягкие» (soft) методы ионизации - FAB и MALDI масс-спектрометрии. Учитывая, с одной стороны, новизну интерпретации этими методами фрагментации агликоновой части гликозидов, и, с другой стороны, значительное число выделенных нами соединений -интересной задачей явилось изучение особенностей масс-спектрального распада гликозидов флавоноидов. Таким образом, целью нашей работы явилось:

- исследование химического состава и установление физико-химическими и спектральными методами структуры соединений, выделенных из надземной части копеечника щетинистого;

- изучение закономерностей фрагментации, выделенных гликозидов флавоноидов, «мягкими» методами масс-спектрометрии (FAB и MALDI); выявление биологически активных веществ обуславливающих противовирусное действие копеечника щетинистого.

В результате проведенных исследований нами в надземной части Н. setigerum идентифицировано 20 соединений. Доминирующими компонентами являются флавоноиды и их гликозиды, стерины и фенолокислоты. Несмотря на большое число химически изученных ранее видов копеечника (более 40 видов), нами впервые обнаружены в роде Hedysarum восемь флавоноидов и два стерина. Интересно отметить, что выделенный тригликозид метоксифлавона (необудоффицид) является вторым примером нахождения этого соединения в природе.

Об обнаружении в растениях рода Hedysarum алкалоидов и лигнанов ранее в научной литературе не сообщалось. Нам удалось препаративно выделить и идентифицировать алкалоид протоберберинового и лигнан тетрагидронафталинового типов.

В ходе масс-спектрометрического анализа гликозидов флавоноидов «мягкими» методами масс-спектрометрии исследованы некоторые закономерности их фрагментации.

В рамках биогенеза растений рода Нейувагит рассмотрены пути биосинтеза некоторых фенольных соединений растений этого рода. На основании полученных результатов предложены группы соединений, в частности флавоны, ранее не выделенные из этого рода, но ожидаемые по рассмотренным путям биосинтеза. Нами найдены представители этой группы соединений, ранее не обнаруженные ни в одном из растений рода Нес1у$агит.

Диссертация состоит из трех глав: литературного обзора, обсуждения результатов, экспериментальной части.

Литературный обзор посвящен химическому составу растений рода НеЛузагит и охватывает литературу вплоть до 2004 года. Кроме того, в него включены вопросы хемотаксономии рассматриваемого рода и раздел по применению «мягких» ионизационных методов масс-спектрометрии в установлении строения флавоноидов. В приложении приведена таблица по распределению вторичных метаболитов в растениях рода Нес1у8агит.

Заключение диссертации по теме «Органическая химия», Неретина, Ольга Владимировна

129 Выводы

1. Впервые изучен химический состав надземной части копеечника щетинистого {Hedysarum setigerum Turcz. ex Fisch. Et Meyer). Хроматографическими методами (аналитическая и препаративная хроматография на силикагеле, полиамиде, сервацеле, сефадексах) выделено и идентифицировано шестнадцать индивидуальных соединений: из них двенадцать флавоноидов, один лигнан, один алкалоид и две фенолокислоты. Идентификация всех соединений проведена химическими (получение производных) и спектральными методами: 1D и 2D ЯМР спектроскопией, масс-спектрометрией высокого (HR-EI и HR-FAB) и низкого (El, FAB, MALDI) разрешения, а также ИК- и УФ-спектроскопией.

Четыре стерина идентифицированы методами ГЖХ и хромато-масс-спектрометрией их ацетатных производных.

2.Установлено, что флавоноидный состав копеечника щетинистого представлен гидроксилированными и метоксилированными агликонами флавонолов и их гликозидами. В изученном виде растения идентифицированы 3,5,7,3',4' -пентагидроксифлавон (кверцетин), З-О-а-Ь-арабинофуранозид 3,5,7,3',4'-пентагидроксифлавона (авикулярин), 3 -O-a-L-рамнопиранозид 3,5,7,3',4'-пентагидроксифлавона (кверцитрин), 3-0-а-Ь-рамнопиранозил-( 1 —>6)-ß-D-глюкопиранозид 3,5,7,3',4'-пентагидроксифлавона (рутин) ранее обнаруженные в других видах рода Hedysarum.

3.Из растений рода Hedysarum впервые выделены и идентифицированы следующие флавоноиды: 5,7,4'-тригидрокси-3-метоксифлавон (3-метоксикемпферол), 3,5,7,4'-тетрагидрокси-З'-метоксифлавон (изорамнетин); З-О-а-Ь-арабинофуранозид 3,5,7,4'-тетрагидроксифлавона (кемпферол-З-О-арабинофуранозид), 7-O-a-L-рамнопиранозил-(1->2)-р-0-глюкопиранозид 5,7,4'-тригидроксифлавона (роифолин), 7-0-а-Ь-рамнопиранозил-( 1 ->2)-Р-0-глюкопиранозид 5,7,3 ',4'-тетрагидроксифлавона (лоницерозид); 7-0-а-Ь-рамнопиранозил-( 1 —>6)-ß-D-глюкопиранозид 5,7-дигидрокси-4'-метоксифлавона (линарин), 7-O-a-L-рамнопиранозил-( 1 ->6)-р-0-глюкопиранозид 5,7,3'-тригидрокси-4'-метоксифлавона (диосмин), и 7-0-а-Ь-рамнопиранозил-(1->6)-[а-Ь-рамнопиранозил-(1-»2)]-Р-0-глюкопиранозид 5,7-дигидрокси-4'-метоксифлавона необудоффицид). Выделение необудоффицида из изучаемого растения является вторым примером обнаружения этого соединения в природе.

4. Из растения рода Неёузагит впервые препаративно выделены представители класса алкалоидов и лигнанов. Идентифицирован алкалоид протоберберинового типа - 5,6-дигидро-9,10-диметокси-бензо|^]-2,3-бензодиоксоло[5,6а]хинолизиниум (берберин). Обнаружен карбоциклический лигнан, тетрагидронафталинового типа -9-0- Р-Э-глюкопиранозид 4,9,4',9-тетрагидрокси-3,3'-диметокси- Р 8,а8', Р71-циклолигнана [(+)-изоларицирезинол-9'-0-Р-0-глюкопиранозид].

5. Выделены и идентифицированы п-гидроксибензойная и протокатеховая кислоты. Изучен качественный и количественный состав стериновой фракции растения. Идентифицированы стигмастерин, Р-ситостерин, кампестерин, и стигмастанол. Кампестерин и стигмастанол обнаружены в растениях этого рода впервые.

6. Изучены РАВ+ и МАЬ01+ масс-спектры выделенных агликонов и гликозидов флавоноидов. Показано, что отсутствие интенсивного иона, характерного для отрыва внутреннего углеводного остатка (ион У*) в ЕАВ+-масс-спектрах гликозидов флавоноидов, позволяет провести отнесение агликона к группам флавонов или флавонолов. Методом ЯМР подтверждено, что наличие или отсутствие в РАВ+-масс-спектрах осколочных ионов, соответствующих отрыву терминального углеводного остатка вместе с гликозидным атомом кислорода или без него (ионы Ъ\ и У]), позволяет определить порядок связи 1-6 или 1-2 в биозидах флавоноидов.

7. Выявлены компоненты растения, обусловливающие противовирусное действие копеечника щетинистого, на основе которых планируется создание средства для борьбы с вирусными инфекциями.

Благодарности

Автор выражает искреннюю благодарность своим научным руководителям в.н.с., к.х.н. Луцкому Владиславу Илларионовичу, д.х.н. Семенову Аркадию Алексеевичу, являющимися соавторами всех работ, за неоценимую помощь и поддержку, при выполнении данной работы.

Также автор выражает глубокую признательность с.н.с., к.х.н. лаборатории химии и технологии новых лекарств ИрГТУ Громовой Александре Степановне, за помощь в работе, совместные дискуссии и обсуждение полученных результатов, внимание и поддержку.

Автор выражает признательность сотруднику лаборатории физических методов исследования ИрИХ СО РАН Федорову Сергею Викторовичу, и бывшему сотруднику этой лаборатории Зинченко Сергею Викторовичу, а также сотруднику Ушакову Игорю Алексеевичу за съемку ЯМР-спектров. Торяшиновой Тамаре Доржиевне, с.н.с. лаборатории физических методов исследования ИрИХ СО РАН, за съемку ИК- и УФ- спектров. Сотрудникам Тихоокеанского института биоорганической химии СО РАН, с.н.с., к.ф.-м.н. Глазунову Виктору Петровичу., с.н.с. Моисеенко Ольге Петровне, к.х.н. Денисенко Владимиру Анатольевичу, к.х.н. Дмитренок Павлу Сергеевичу, Полянскому Владимиру Андреевичу, к.х.н. Елькину Юрию Николаевичу за регистрацию ИК-, УФ-, масс- и ЯМР-спектров. Доктору Noel L. Owen, департамента химии BYU, за помощь в съемке FAB масс-спектров. Сотруднику Тихоокеанского института биоорганической химии СО РАН д.х.н. Макарьевой Татьяне Николаевне за помощь в работе со стеринами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Неретина, Ольга Владимировна, 2004 год

1. Гаммермаи А.Ф., Кадаев Г.Н., Яцеико-Хмелевский А.А. Лекарственные растения. -М.: Высшая школа. 1990. - С. 542.

2. Минаева В.Г. Лекарственные растения Сибири. Новосибирск: Наука. - 1991. - С. 428.

3. Телятьев В.В. Полезные растения центральной Сибири. Иркутск. - 1985. - С. 118.

4. Куваев В.Б., Глызин, В.И., Глызина Г.С., Баньковский А.И. Перспективы поисков мангиферина в отечественной флоре. // Растит, ресурсы. 1972. - Вып. 3. - С. 367371.

5. Смирнова Л.П., Шейченко В.И., Тохтабаева Г.М. Изучение химического состава алпизарина из листьев манго. // Хим.-фарм. журнал. 2000. - Т. 34. - № 2. - С. 2225.

6. Флора Сибири Fabaceae (Leguminosae). Под ред. Положия А.В., Малышевой Л.И. -Новосибирск.: Наука. 1994. - Т.9. - С. 280.

7. Положий А.В. Флора Красноярского края. Бобовые Papilionaceae. Томск.: Изд-во Томского университета - 1960. - Вып. VI. - С. 93.

8. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. В 3 т. Л.:Наука. - 1987. - Т. 3 - С. 328.

9. Chriki АН, Harborne Leffrey В. Anthocyanins of Hedysarum coronarium and their contribution to flower colour variation. // Phytochemistry. 1983. - V. 22. - n. 10. - P. 2322-2323.

10. Soltani A., Briens M., Goas M. Carbohydrate metabolism of Hedysarum coronarium L. cultivated in the presence of sodium chloride. // C. R. Seances Acad. Sci. 1981. - Ser. 3. - V. 293. - n.5. - P. 297-300. // C.A. 1982, 96:49054s.

11. Soltani A., Bernard T. Nitrogen metabolism of Hedysarum coronarium L. growing in the presence of sodium chloride. // C. R. Seances Acad. Sci. 1978. - Ser. D. - V. 287. -П.12.-Р. 1123-1126. // C.A. 1979, 90:100182n.

12. Soltani A., Bernard T. Nitrogen metabolism of Hedysarum carnosum desfontaines, growing in the presence of sodium chloride. // C. R. Hebd. Seances Acad. Sci. 1977. -Ser. D.-V. 284.-П.З.-Р. 175-178.//C.A. 1977, 86:117835t.

13. Maymone В., Bergonzini E. Essential amino acids content and biological value of proteins of some forage plants of Southern Italy Aliment. // Animale. 1964. - V. 8. -n.l.-P. 9-28. // С .A. 1965, 62:16685b.

14. Lotti G. Analytical characteristics of Leguminosae seed oils. // Ric. Sci., Rend. 1964. -Sez. В. - V. 4. - n.4. - P. 503-510. // C.A. 1965, 62:1852f.

15. Johnston A., Bezeau L.M. Chemical composition of range forage plants of the Festuca scabrella association. // Can. J. Plant Sci. 1962. - n.42. - P. 105-115. // C.A. 1962, 56:15905d.

16. Lin H.-H., Chang H.-L., Hou H.-Y. Chemical composition of oxylophilous, calciphilous and halophilous plants. // T'u Jang Hsueh Pao. 1957. - n.5. - P. 247-270. // C.A. 1959, 53:1241 li.

17. Fratteggiani-Bianchi R. Meaning and practical importance of the lignin determination in feedingstuffs. // Atti Soc. Ital. Sci. Vet. 1957. - n.ll. - P. 396-400. // C.A. 1958, 52:18955f.

18. Plouvier V. A new cyclitol, L-pinotol, isolated from Artemisia dracunculus. // Compt. Rend. 1956. - V. 243. - P. 1913-1915. // C.A. 1957, 52:5909c.

19. Hikino H. Constituents and physiological action of Astragalus and Hedysarum II Gendai Toyo Igaku. 1982. - V. 3. - n.2. - P. 46-50.

20. Комиссаренко A.H., Надежина Т.П., Комиссаренко Н.Ф. Флавоноиды и ксантоны Hedysarum connatum и Н. alpinum. II Химия природн. соедин. 1994. - № 4. - С. 564-565.//С.А. 1995,122:251377f.

21. Шаин С.С., Климакин Г.И., Кузнецова Г.К., Романенко В.И., Романов Ю.С., Ярош Е.А., Шемерянкина Т.Б., Вандушев В.В. Увеличение содержания мангиферина в Hedysarum alpinum II Изобретения. 1996. - № 13. - С. 131. // С.А. 1996, 124:Р 33902 In.

22. Агафонова О.В., Володарская С.Б. Продуктивность и содержание олигомерных катехинов у Hedysarum theinum Krasnob. в центральном и юго-западном Алтае. // Растит, ресурсы. 2000. - Вып. 4. - С. 47-52.

23. Хамидуллина Е.А., Зинченко С.В., Семенов А.А. Качественный состав сапониновой фракции из надземной части Hedysarum alpinum L. // Растит, ресурсы. -2002.-Вып. 1.-С. 78-82.

24. Xianglin Y., Yukui Z., Hanfa Z. Study on identification of traditional Chinese medicine-Radix Astragali by matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry. // Yaowu Fenxi Zazhi. 2001. - V. 21. - n. 1. - P. 7-10.

25. Ma X.Q., Duan J.A., Zhu D.Y., Dong T.X., Tsim K.W.K. Chemical comparison of Astragali radix (Huangqi) from different regions of China. // Nat. Med.- 2000. V.54. -n.5. - P. 213-218. IIC.A. 2001, 134:227463.

26. Xing G., Hao J., Wang L. Relation of free amino acids and astragalin-I in callus of Hedysarum polybotrys Hand-Mass. // Lanzhou Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 1999. - V. 35. - n.4. - P. 90-93. // С .A. 2000, 133:56055.

27. Wang Y., Hou J., Zhang C., Ni G., Gao J. Spectrophotometric determination of trace selenium in Hedysarum polybotrys by catalytic kinetics. // Xibei Shifan Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 1999. - V. 35. - n.2. - P. 44-46. // C.A. 1999, 130:357268f.

28. Liu F., Li Z., Meng Y., Chen Y. Purification and structure of polysaccharide RHG from Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz. // Yaoxue Xuebao. 1997. - V. 32. - n.8. - P. 603-606.//C.A. 1998, 129:51122f.

29. Mizutani Т., Tanabe K., Watanabe K., Goto M. Selenium contents in Astragalus and uncultivated soils in Japan. // Jpn. J. Toxicol. Environ. Health. 1996. - V. 42. - n.4. - P. 360-366.//C.A. 1996, 124:327352h.

30. Zhou L., Hu G. Determination of y-aminobutyric acid in manyinflorescenced sweetvetch (.Hedysarum polybotrys) and its granular preparation. // Zhongcaoyao. 1995. - V. 26. -n.10.-P. 518-521.//C.A. 1996, 124:127257y.

31. Zhao C., Li G., Wang J. TLC-densitometric determination of hypotensive constituent y-aminobutyric acid in Hongqi. // Xibei Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 1995. - V. 25. -п.З.-Р. 277-278. // C.A. 1995, 124:66745g.

32. Anetai M., Katsura E., Katoh Y., Yamagishi T. Chemical evaluation of Astragali Radix. // Nat. Med. 1994. - V. 48. - n.4. - P. 244-252. // C.A. 1994, 120:56357f.

33. Tanner G.J., Moore A.E., Larkin P.J. Proanthocyanidins inhibit hydrolysis of leaf proteins by rumen microflora in vitro. // Br. J. Nutr. 1994. - V. 71. - n.6. - P. 947-958. //СЛ. 1994, 120:56357f.

34. Yang Z., Liu J., Wang F., Cui S., Le C. Chemical constituents of Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz. // Zhongguo Zhongyao Zazhi. 1992. - V. 17. - n.l0. - P. 615-616. II C.A. 1993,118:56211s.

35. Duan Z., Sun L., Zheng H., Yin W. Determination of inorganic elements and amino acids in the roots of Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz. // Lanzhou Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 1990. - V. 26. - n.2. - P. 79-82. // C.A. 1993, 118:19272s.

36. Saura-Calixto F. Carbohydrates and other major constituents in Spanish sainfoin {Hedysarum coronarium L.). // Agrochimica. 1989. - V. 33. - n.4-5. - P. 238-247. II C.A. 1990, 112:210453c.

37. Wang B., Pang Z., Yang Y. Determination of microtrace amounts of selenium in Radix Astragali seu Hedysari by chemiluminescence extinction. // Zhongguo Yaoke Daxue Xuebao. 1989. - V. 20. - n.6. - P. 360-362. II C.A. 1990, 112:204833q.

38. Jiang W. Comparative studies on quality between the wild and cultivated Hedysarum polybotrys roots from Sichuan province. // Zhongcaoyao. 1989. - V. 20. - n.8. - P. 373374. // C.A. 1990, 112:42313r.

39. Wang R., Chen Y. Analysis of the constituents of Hedysarum polybotrys. II Lanzhou Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 1988. - V. 24. - n.3. - P. 46-50.

40. Beji A., Boukef K., Biard J.F. Effects of artificially introduced autotetraploidy on the free phenolic acid proline in leaves of five species of the genus Hedysarum. II Biruniya. -1988.-V. 4.-n.2.-P. 133-144.//C.A. 1989, 110:209453j.

41. Chen Y., Wang R., Xue D., Li Z., Han H. Analysis of volatile constituents of Hedysarum polybotiys Hand.-Mazz by capillary gas chromatography-mass spectrometry. // Gaodeng Xuexiao Huaxue Xuebao. 1987. - V. 8. - n.6. - P. 538-541.

42. Lan Z., Zhang Z., Cheng G., Wang F., Xi S. Effects of radix hedysari polysaccharides on immunological function and transplanted tumors in mice. // Zhongguo Yaoli Xuebao.- 1987. V. 8.-n.3.-P. 275-277. II C.A. 1987, 106:17403j.

43. Saura-Calixto F. Dietary fiber complex in a sample rich in condensed tannins and uronic acids. // Food Chem. 1987. - V. 23. - n.2. - P. 95-103. II C.A. 1987, 106:6016j.

44. Pan J., Liu W., Wei D., Han G. Chemical constituents of Hedysarum polybotrys Hand-Mazz (Hong Qi). // Beijing Yixueyuan Xuebao. 1984. - V. 16. - n.3. - P. 248-250. // C.A. 1986,105:187579x.

45. Chriki A., Combes D., Marrakchi M. Genetic control of the conversion of dihydroflavonols into anthocyanins in flowers of Hedysarum carnosum Desf. // C. R. Acad. Sci. 1986. - Ser. 3. - V. 302. -n.16. - P. 585-588. // C.A. 1986, 105:39526n.

46. Katsura E., Katoh Y., Yamagishi T. Chemical studies on Astragali Radix. Part 2. Free amino acids in the roots of Astragalus membranaceus and other allied plants. // Hokkaidoritsu Eisei Kenkeushoho. 1984. - n.34. - P. 80-82. // C.A. 1984,100:82817s.

47. He K., Ouyang Z. Gas chromatographic analysis of selenium in Astragalus. // Zhongcaoyao. 1985. - V. 16.-n.2.-P. 54-55.//C.A. 1985, 102:172761q.

48. Miyase T., Fukushima S., Akiyama Y. Studies on the constituents of Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz. // Chem. Pharm. Bull. 1984. - V. 32. - n.8. - P. 3267-3270.

49. Hikino H., Funayama S., Endo K. Validity of Oriental medicines. 2.Hypotensive principle of Astragalus and Hedysarum roots. // Planta Med. 1976. - V. 30. - n.4. - P. 297-302. // C.A. 1977, 86:101061b.

50. Wang W., Chen H., Wang W., Zhao Y. Studies on flavonoid constituents of Hedysarum multijugum. II Yaoxue Xuebao. 2002. - V. 37. - n.3. - P. 196-198.

51. Li Y., Chen J., Liao X., Wang H., Luo S. Studies on flavonoid constituents of Hedysarum sikkimense // Zhongcaoyao. 2001. - V. 32. - n.6. - P. 489-490. II C.A. 2001, 136:17967.

52. Wang W., Chen W., Chen H., Liu J., Zhao Y. Studies on chemical constituents of Hedysarum multijugum // Beijing Daxue Xuebao, Yixueban. 2001. - V. 33. - n.3. - P. 205-208. // C.A. 2001,136:276025.

53. Wang W., An D.G., Chen H.B., Tu G.Z., Zhao Y.Y. Two new pterocarpenes from Hedysarum multijugum. // J. Asian. Nat. Prod. Res. 2003. - V. 5 - n.l. - P. 31-34.

54. Hai L.Q., Liang H., Zhao Y.Y., Du N.S. Studies on chemical constituents in the root of Hedysarum polybotrys. // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2002. - V. 27. - n.l 1. - P. 843845.

55. Hai L.Q., Zhang Q.Y., Liang H., Zhao Y.Y., Du N.S. Studies on chemical constituents of Hedysarum polybotrys. // Yao Xue Xue Bao. 2003. - V. 38. - n.8. - P. 592-595.

56. Блинова К.Ф., Стуккей K.JI. Качественное фитохимическое исследование растений тибетской медицины Забайкалья. В сб.: Вопр. фармакогнозии. JI. - 1961. -Вып. 1.-С. 135-155.

57. Глызин В.И., Николаева Г.Г., Даргаева Т.Д. Природные ксантоны. Новосибирск - 1986.-С. 173.

58. Глызина Г.С., Быков В.И. Фенольные соединения Hedysarum neglectum II Химия природн. соедин. -1969. № 4. - С. 322.

59. Алания М.Д. Флавоноиды Hedysarum sericeum и Н. caucasicum. II Химия природн. соедин. 1983. - № 5. - С. 646.

60. Денисова О.А., Глызин В.И., Русакова С.В., Пименов М.Г. Ксантоновые С-гликозиды Hedysarum denticulatum. II Химия природн. соедин. 1977. - № 2. - С. 283.

61. Глызин В.И., Баньковский А.И., Павлова Н.С. Фенольные соединения Hedysarum sachalinense и Н. brandtii. II Химия природн. соедин. 1970. - № 3. - С. 369.

62. Кривут Б.А., Федюнина Н.А., Кочерга С.И., Русакова С.В. Спектрофотометрическое определение мангиферина. // Химия природн. соедин.1976.-№ 1.-С. 44-46.

63. Русакова С.В., Нухимовский ЕЛ. Некоторые биологические особенности Hedysarum neglectum Ledeb. и содержание в нем мангиферина. // Растит, ресурсы.1977. Т. 13. - Вып. 3. - С. 478-480.

64. Фомина Л.И., Сацыперова И.Ф., Бандюкова В. А. Оптимизация хроматографического разделения мангиферина и гиперозида, выделенных из надземной части Hedysarum alpinum L. // Растит, ресурсы. 1990. - Вып. 3. - С. 431-437.

65. Русакова С.В., Глызин В.И., Кочерга С.И., Солдатова О.В., Мулевич В.М. Способ получения мангиферина. // Открытия, Изобретения, Промышленные образцы, Товарные знаки. 1978. - № 9. - С. 19.

66. Соловьева Е.В., Хоциалова Л.И., Кривут Б.А., Глызин В.И., Майсурадзе Н.И. Содержание мангиферина у видов Hedysarum L., выращиваемых в Московской области. // Растит, ресурсы. 1983. - Т.19. - Вып. 3. - С. 356-360.

67. Рыбаченко А.И., Кривут Б.А., Георгиевский В.П. Флуороденситометрическое определение мангиферина и изомангиферина в Hedysarum flavescens и Н. alpinum. II Химия природн. соедин. 1976. - № 4. - С. 448-450.

68. Borkowski В., Milkowska К. Selected polyphenols compounds. Part I. Xanthones. // Herba Pol. 1999. - V. 45. - n.l. - P. 33-42. // C.A. 1999, 132:216376.

69. Глызин В.И., Баньковский А.И., Пименов М.Г., Боряев К.И. Ксантоновые гликозиды Hedysarum flavescens. II Химия природн. соедин. 1973. - № 3. - С. 434435.

70. Захаров A.M., Боряев К.И. Химическое изучение растений флоры Тянь-Шаня // Аптечное дело. 1965. - Т. 14 - № 5. - С. 44-48. 132.

71. Волхонская Т.А., Ханминчун В.М., Фролова О.И. Обследование растений горного массива Монгун-Тайга и нагорья Сангилен (Южная Тува) на содержание флавоноидов // Растит, ресурсы. 1983. - Т.19. - Вып. 4. - С. 455-464.

72. Toker G., Turkoz S., Sener В. The determination of rutin in some plants by ultra violet spectroscopy. // J. Fac. Pharm. Gazi Univ. 1997. - V. 14. - n.l. - P. 51-54. // C.A. 1997, 128:8603 lg.

73. Toker G., Turkoz S., Erdemoglu N. High performance liquid chromatographic analysis of rutin in plants. Part 1. // Pharmazie. 1998. - V. 53. - n.7. - P. 494-495. // C.A. 1998, 129:1061 lOh.

74. Семенов A.A. Очерк химии природных соединений. Новосибирск: Наука. - 2000. - С. 664.

75. Skadhauge В., Gruber M.Y., Thomsen К.К., von Wettstein D. Leucocyanidin reductase activity and accumulation of proanthocyanidins in developing legume tissues. // Am. J. Bot. 1997. - V. 84.-П.4.-Р. 494-503.//C.A. 1997, 127:303In.

76. Амангельдин E.A. К фотохимическому изучению копеечника желтоватого // Труды Инст. Физиол. АН Каз. ССР. 1968. - Т. И. - С. 144-145. // С.А. 1969, 71:57609а.

77. Шухободский Б.А. К вопросу об алкалоидоносности флоры центральных Саян. // Труды Ботан. Института АН СССР. 1961. - Серия V. - Вып. 9. - С. 320-346.

78. Марина Т.Ф., Краснов Е.А., Никифоров Ю.В. Химико-фрмакологическое исследование копеечника южносибирского. В сб.: Проблемы освоения лекарственных ресурсов Сибири и Дальнего Востока. Новосибирск. - 1983. - С. 127-129.

79. Павлова Н.С. Полисахариды дальневосточных видов Hedysarum L. и их хемотаксономическое значение. // Растит, ресурсы. 1971. - Т. VII. - Вып. 4. - С. 561-563.

80. Киселев В.Е., Пеккер Е.Г. Азотсодержащие вещества некоторых представителей рода копеечник. // Извест. Сиб. Отдел. Акад. Наук СССР. сер. Биол. - 1978. - № 1. -С. 75-82.

81. Ермаков А.И., Арасимович В.Е., Смирнова-Иконникова М.И., Ярош Н.П., Луковникова Г.А. Методы биохимического исследования растений. Л.: Колос. -1952. - С. 456.

82. Пеккер Е.Г. К биохимической характеристике растений рода Hedysarum L. Юго-восточного Алтая. В кн.: Актуальные вопросы ботанического ресурсоведения в Сибири. Новосибирск. - 1976. - С. 146-149.

83. Пеккер Е.Г. Аминокислотный состав видов Hedysarum L. при различных способах фиксации. // В книге: Актуальные вопросы ботанического ресурсоведения в Сибири, Новосибирск. 1975. - С. 193-197.

84. Мадоян О.О., Празян К.А. Содержание фитоэстрогенов в кормовых растениях Армянской ССР. // Изв. с.-х. наук. 1972. - № 12. - С. 53-61. // С.А. 1973, 78:133379п.

85. Birdsong В.А., Alston R., Turner B.A. Distribution of canavanine in the family Leguminosae as related to phyletic groupings. // Can. J. Bot. 1960. - V. 38 - n.4. - P. 499-505. // C.A. 1960, 54:19881g.

86. Бандюкова B.A., Шинкаренко А.Л. Определение методом бумажной хроматографии флавоноидов в высокогорных растениях Тибердинского района // Фармацев. журнал. 1965. - № 6. - С. 37-41. // С.А. 1967, 67:57253х.

87. Соколов П.Д. Таннидоносные растения центральных Саян. // Труды Ботан. Института АН СССР. 1961. - Серия V. - Вып. 9. - С. 270-290.

88. Глызина Г.С., Комиссаренко Н.Ф. Флавоноиды Hedysarum gmelini. II Химия природн. соедин. 1967. - № 2. - С. 138-139.

89. Глызин В.И., Быков В.И., Глызина Г.С. Фенольные соединения Hedysarum komarovii. И Химия природн. соедин. 1968ю - № 4. - С. 382-383. // С.А. 1969, 70:75090h.

90. Кузнецова М.А. Лекарственное растительное сырье и препараты. М.: Высшая школа.-1987.-С. 190.

91. Губанов И.А. Лекарственные растения. М.: Изд-во МГУ. - 1993. - С. 272.

92. Пленник Р.Я. и др. Полезные растения Хакасии. Ресурсы и интродукция. -Новосибирск: Наука. 1989. - С. 269.

93. Гринкевич Н.И. Лекарственные растения: Справочное пособие. М.: Высшая школа. - 1991.-С. 148

94. Wang W., You С., Wang С., Ни J., Zheng Н. Effect of Radix hedysari total saponins on mouse immunocytes and relation with CaM levels in cells. // Lanzhou Daxue Xuebao, Ziran Kexueban. 2000. - V. 36. - n.5. - P. 107-111.

95. Wang J., Ito H., Shimura K. Enhancing effect of antitumor polysaccharide from Astragalus or Radix hedysarum on C3 cleavage production of macrophages in mice. // Jpn. J. Pharmacol. 1989. - V. 51. - n.3. - P. 432-434. // C.A. 1990, 112:5805g.

96. Мао X., Wang J., Wang F. Effect of Hedysari and Astragali polysaccharides on humoral immune function in mice. // Zhongguo Mianyixue Zazhi. 1988. - V. 4. - n.3. - P. 158-161.//C.A. 1989, 110:463t.

97. Huang Z., Cui Z., Ren Y., Zhang J., Cran M. Antiaging effects of Hedysarum polysaccharide. // Zhongcaoyao. 1992. - V. 23. - n.9. - P. 469-473. // C.A. 1993, 118:774k.

98. Molan A. L., Waghorn G. C., Min B. R., McNabb W. C. The effect of condensed tannins from seven herbages on Trichostrongylus colubriformis larval migration in vitro. // Folia Parasitol. 2000. - V. 47. - n. 1. - P. 39-44. // C.A. 2000, 133:174873.

99. Stobiecki M. Application of mass spectrometry for identification and structural studies of flavonoid glycosides. // Phytochemistry. 2000. - V.54. - P. 237-256.

100. Wang J., Sporns P. MALDI-TOF MS analisis of food flavonol glycosides. // J. Agric. Food Chem. 2000. - V. 48. - P. 1657-1662.

101. Franski R., Bednarek P., Wojtaszek P., Stobiecki M. Identification of flafonoid diglycosides in yellow lupin (.Lupinus luteus L.) with mass spectrometric techniques. // J. Mass Spectrom. 1999. - V. 34. - P. 486-495.

102. Hughes J. R., Croley R. Т., Chris D. M., March E. R. A tandem mass spectrometric study of selected characteristic flavonoids. // International Journal of Mass Spectrometry.- V.210.-n.211.-P. 371-385.

103. Chen M., Song F., Guo M., Liu Z., Liu S. Analysis of flavonoid constituents from leaves of Acanthopanax senticosus Hams by electrospray tandem mass spectrometry. // Rapid communications in mass spectrometry. 2002. - V. 16. - P. 264-271.

104. Cuyckens F., Rozenberg R., Hoffmann de E., Claeys M. Structure characterisation of flavonoid O-diglycosides by positive and negative nano-electrospray ionization ion trap mass spectrometry. // J. of mass spectrometry. 2001. - V. 36. - P. 1203-1210.

105. Franski R., Matlawska I., Bylka W., Sikorska M., Fiedorow P., Stobiecki M. Differentiation of interglycosidic linkages in permethylated flavonoid glycosides from linked-scan mass specta (B/E). // J. Agric. Food Chem. 2002. - V.50. - P. 976-982.

106. Жунке А. Ядерный магнитный резонанс в органической химии М.: Мир. - 1974. -С. 175.

107. Mabry T.J., Markham K.R., Thomas М.В. The systematic identification of flavonoids.- Berlin, Heidelberg, New York. Springer-Verlag. - 1970. - P. 354.

108. Ковалев И.П., Титов E.B. Инфракрасные спектры поглощения некоторых групп природных соединений. Харьков. — 1966 - С. 201.

109. Markham K.R., Ternai В., Stanley R., Geiger H., Mabry T.J Carbon-13 NMR of flavonoids-III. Naturally occurring flavonoid glycosides and their acylated derivatives // Tetrahedron. 1978. - V.34. - P. 1389-1397.

110. Li J.S., Zhao Y.Y., Wang В., Li X.L., Ma I.B. Separation and identification of the flavonoids from Buddleia officinalis Maxim. // Acta Pharmaceutica Sinica. 1996. - V. 31. - n.l 1.-P. 849-854.

111. Kim Y.C., Higuchi R., Kitamura Y., Komori T. Degradation of flavonoid glycosides. // Liebigs Ann.Chem. 1991. - P. 1285-1289.

112. Chari V.M., Jordan M., Wagner H., Thies P.W. A ,3C-NMR study of the structure of an acyl-linarin from Valeriana wallichii. II Phytochemistry. 1977. - V. 16. - P. 11101112.

113. Liao Y.-H., Houghton P.J., Hoult J.R.S. Novel and known constituents from Buddleja species and their activity against leukocyte eicosanoid generation. // J. Nat. Prod. 1999.- V. 62.-П.9.-Р. 1241-1245.

114. Blasko G., Cordell G.A., Bhamarapravati S., Beecher C.W.W. Carbon 13 NMR assignments of berberine and sanguinarine // Heterocycles. - 1988. - V. 27. - n.4. - P. 911-916.

115. Achenbach H., Lowel M., Wathel H., Cupta M., Solta P. New lignan glucosides from Stemmadenia minima. // Planta Med. 1992. - V. 58. - P. 270-272.

116. Thieme H., Benecke R. Isolation and clarification of a cyclolignan glucoside from the leaves of Populus nigra. II Pharmazie. 1969. - V. 24. - n.9. - P. 567-572. // C.A. 1970, 72:21908d.

117. Benecke R., Nishibe S., Kitagawa S., Hanschmann H. Structure of (+)-isolariciresinol-monoglucoside from Populus nigra. II Pharmazie. 1989. - V. 44. - P. 357-358. // C.A. 1990,112:56463b.

118. Kanchanapoom Т., Chumsri P., Kasai R., Otsuka H., Yamasaki K. Lignan and megastigmane glycosides from Sauropus androgynus II Phytochemistry. 2003. - V. 63.- P. 985-988.

119. Marinos V., Tate M.E., Williams P.J. Lignan and phenylpropanoid glycerol glucosides in wine. // Phytochemistry. 1992. - V. 31. - n.l2. - P. 4307-4312.

120. Еляков Г.Б., Стоник B.A. Стероиды морских организмов. М.: Наука. - 1988. -С. 208.

121. Ralph J. NMR database of lignin and cell wall compounds. www.acdlabs.com

122. Биохимия фенольных соединений. Под ред. Харборна Дж. М.: Мир. - 1968. - С. 451.

123. Yoshinori Т., Mineo S., Yoshiyuki Н., Kiyoshi I., Yoshinobu H. Antiviral activity of natural occurring flavonoids in vitro // Chem. Pharm. Bull. 1985. - V. 33. - n.9. - P. 3881-3886.

124. Plant flavonoids in biology and medicine II. Biochemical, cellular and medicinal properties. Edit. Cody V., Middleton E., Harborne J.B., Beretz A, Alan R. Liss. INC.: New York. - 1987.-P. 461.

125. Shi Y., Shi R.B., Liu В., Lu Y.R. Studies on antiviral flavonoids in Yinqiaosan powder. // Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 2001. - V. 26. - n.5. - P. 320-323.

126. Bae E.A., Han M.J., Lee M., Kim D.H. In vitro inhibitory effeect of some flavonoids on rotavirus infectivity. // Biol. Pharm. Bull. 2000. - V. 23. - n.9. - P. 1122-1124.

127. Mucsi I., Praigai B.M. Inhibition of virus multiplication and alteration of cyclic AMP level in cell cultures by flavonoids. // Experienta. 1985. - V. 41. - n.7. - P. 930-931.

128. Chiang L.C., Chiang W., Liu M.C., Lin C.C. In vitro antiviral activities of Caesalpinia pulcherrima and its related flavonoids. // J. Antimicrob. Chemother. 2003. - V. 52. -n.2. - P. 194-198.

129. Wacker A., Eilmes H.G. Antiviral activity of plant components. Flavonoids. // Arzneimittelforschung. 1978. - V. 28. - n.3. - P. 347-350. // C.A. 1978, 88:164029j.

130. Babbar O.P., Chhatwal V.K., Ray I.B., Mehra M.K. Effect of berberine chloride eye drops on clinically positive trachoma patients. // Indian J. Med. Res. 1982. - V. 76. - P. 83-82.

131. Khosla P.K., Neeraj V.I., Gupta S.K., Satpathy G. Berberine, a potential drug for trachoma. // Rev. Int. Trach. Pathol. Ocul. Trop. Subtrop. Sante Publique. 1992. - V. 69.-P. 147-165.

132. Cho J.Y., Kim A.R., Park M.H. Lignans from the rhizomes of Coptis japonica differentially act as anti-inflammatory principles. // Planta Med. 2001. - V. 67. - n.4. -P. 312-316.

133. Kapeli E., Erdemolu N., Yeayilada E., Sener B. Anti-inflammatory and antinociceptive activity of taxoids and lignans from the heartwood of Taxus baccata L. // J. Ethnopharmacol. 2003. - V. 89. - n.2-3. - P. 265-270.

134. Braca A., De Tommasi N., Di Bari L., Pizza C., Politi M., Morelli I. Antioxidant principies from Bauhinia tarapotensis. II J.Nat.Prod. 2001. - V. 64. - n.7. - P. 892-895.

135. Головкин Б.Н., Руденская P.H., Трофимова И.А., Шретер А.И. Биологически активные вещества растительного происхождения. В 3 т. М.: Наука. - 2001. - Т. И.-С. 350.

136. Георгиевский В.П., Комиссаренко Н.Ф., Дмитрук С.Е. Биологически активные вещества лекарственных растений. Новосибирск.: Наука. - 1990. - С. 333.

137. Куркин В.А., Браславский В.Б., Запесочная Г.Г., Толкачев В.О. Флавоноиды почек Populus deltoides // Химия природн. соедин. 1990. - № 4. - С. 548-550.

138. Karrer W. Konstitution und vorkommen der organischen pflanzenstoffe. Birkhauser verlag basel. Stuttgart. - 1958. - P. 699.

139. Джанашия H.M., Глызин В.И. Флавоноловые гликозиды Eucaliptus viminalis II Химия природн. соедин. 1970. - № 6. - С. 764-765.

140. Wollenweber Е., Egger К. Methylather des myricetins, quercetins und kampferols im knospenol von aesculus hippocastanum. // Tetrahedron Letters. 1970. - n.19. - P. 16011604.

141. Спиридонов B.H. Изучение кверцетиновых гликозидов каштана конского СAesculus hyppocastanum L.) II Доклады АН СССР. 1966. - Т. 169. - № 1. - С. 126127.

142. Wagner Н., Aurnhammer G., Horhammer L., Farkas L. Endgultide konstitutionsaufklarung und synthese der flavonglykoside fortunellin, rhoifolin und isorhoifolin. // Chem. Ber. 1969. - V. 102. - P. 2083-2088.

143. Сальникова Е.И., Комиссаренко Н.Ф., Деркач А.И., Дмитрук С.Е., Калинкина Г.И. Фенолокислоты полыней рода Frigidae II Химия природн. соедин. 1993. -№ 5. - С. 759.

144. Каррер П. Курс органической химии. Л.: Изд-во хим. литер. - 1962 - С. 1216.

145. Dobhal М.Р., Goel V.K., Joshi B.C. Chemical investigation of Berberís chitria Ham. Isolation and characterization of some isoquinoline alkaloids. // Pharmazie. 1988. - V. 43. - n.9. - P. 659-660. // C.A. 1989, 129:287805g.

146. Таджибаев M.M., Заторская И.Н., Лутфуллин К.Л., Шакиров Т.Т. О выделении берберина // Химия природн. соедин. 1974. -№ 1. - С. 48-50.