Применение фемтосекундного лазера для трансплантации лимбальных эпителиальных стволовых клеток при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности. Экспериментальное исследование тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Нефедова Ольга Николаевна

• Нефедова Ольга Николаевна
• кандидат наук
• 2026

Оглавление диссертации кандидат наук Нефедова Ольга Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Синдром лимбальной недостаточности: этиология, патогенез, клиника, классификация

1.2. Особенности строения лимба роговицы

1.3. Хирургические методики лечения одностороннего синдрома лимбальной недостаточности

1.3.1. Простая трансплантация лимбального эпителия

1.3.2. Бесклеевая простая трансплантация лимбального эпителия

1.4. Исторические аспекты применения энергетических и традиционных технологий микрохирургии глаза

1.5. Применение фемтолазерных систем в хирургии роговицы

1.6. Особенности конструкции и работы фемтосекундного лазера Femto

LDV

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Дизайн исследования

2.2. Характеристика использованного донорского материала

2.3. Материалы и методы разработки технологии получения лимбальных фрагментов

2.3.1. Определение глубины залегания ниши лимбальных стволовых клеток

2.3.2. Моделирование траектории работы низкоэнергетического фемтосекундного лазера

2.3.3. Подбор оптимальных энергетических параметров лазера для формирования и фрагментации лимбального трансплантата

2.4. Материалы и методы экспериментального исследования по изучению биологической безопасности применения фемтосекундного лазера

для трансплантации лимбальных стволовых клеток

2.4.1. Первый этап. Оценка морфологических особенностей лимбальной ткани после воздействия фемтосекундного лазера с выбранными энергетическими параметрами

2.4.2. Второй этап. Изучение особенностей роста и фенотипа лимбальных стволовых клеток в выделенных мини-трансплантатах и моделирование формирования монослоя клеток в эксперименте in vitro

2.4.3. Третий этап. Оценка жизнеспособности и апоптоза лимбальных стволовых клеток в полученных мини-трансплантатах

2.5. Перечень использованного лабораторного оборудования, расходных

материалов и инструментов

ГЛАВА 3. РАЗРАБОТКА ТЕХНОЛОГИИ ПОЛУЧЕНИЯ ЛИМБАЛЬНЫХ ТРАНСПЛАНТАТОВ

3.1. Оценка глубины залегания ниши лимбальных стволовых клеток

3.2. Результаты моделирования траектории работы фемтосекундного лазера

3.3. Определение оптимальных уровней энергии фемтосекундного лазера

для выкраивания и фрагментации лимбального трансплантата

ГЛАВА 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПО ИЗУЧЕНИЮ БИОЛОГИЧЕСКОЙ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ ФЕМТОСЕКУНДНОГО ЛАЗЕРА ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ ЛИМБАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

4.1. Результаты первого этапа. Оценка морфологических особенностей лимбальной ткани после воздействия фемтосекундного лазера с выбранными энергетическими параметрами

4.2. Результаты второго этапа. Изучение особенностей роста и фенотипа лимбальных стволовых клеток в выделенных мини-трансплантатах и моделирование формирования монослоя клеток в эксперименте in vitro

4.2.1. Результаты культивирования роговичных лимбальных мини-трансплантатов

4.2.2. Статистическая обработка данных

4.2.3. Результаты иммунофенотипирования культуры клеток из роговичных лимбальных мини-трансплантатов методом проточной цитофлуориметрии

4.2.4. Результаты изучения способности полученных лимбальных стволовых клеток к формированию монослоя на бесклеточной донорской роговице в эксперименте in vitro

4.3. Результаты третьего этапа. Изучение жизнеспособности и апоптоза лимбальных стволовых клеток в полученных мини-трансплантатах

4.3.1. Оценка жизнеспособности лимбальных стволовых клеток

методом флуоресцентной окраски красителем Live&Dead

4.3.2. Оценка обратимого и необратимого апоптоза методом

иммуногистохимического исследования

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ И УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение фемтосекундного лазера для трансплантации лимбальных эпителиальных стволовых клеток при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности. Экспериментальное исследование»

ВВЕДЕНИЕ

По данным Всемирной организации здравоохранения, заболевания роговицы, приводящие к слепоте и слабовидению, составляют 5,1% и находятся на 4-м месте в структуре инвалидности по зрению (Avadhanam V. S., 2014; World Health Organization, Priority eye diseases, Corneal opacities, 2017). В Российской Федерации около 21% от общего числа роговичной патологии у пациентов составляют помутнения и рубцы роговицы, приводящие к частичной или полной слепоте (Либман Е. С., Калеева Э. В., Рязанов Д. П., 2012). В числе других заболеваний выделяют: кератоувеиты - 27%, кератиты - 37%, дистрофии роговицы - 6%, язвы роговицы - 9% (по данным мониторинга регионов Российской Федерации за 2012 год). Важно отметить, что вышеуказанные заболевания в конечном итоге также приводят к развитию помутнений и рубцов роговицы.

Синдром лимбальной недостаточности является одной из причин слепоты и слабовидения. При гибели, дефектах популяции местных унипотентных прогениторов, называемых «лимбальные эпителиальные стволовые клетки» (Davanger M., Evensen A., 1971; Shermer A., 1986), либо разрушении места их локализации - «ниш», нарушается цикл обновления эпителия роговицы (Le Q., Xu J., Deng S., 2018). Это приводит к исчезновению естественного барьера между эпителием роговицы и конъюнктивы (Dua H. S., Saini J. S., Azuara-Blanco A., Gupta P., 2000), происходит замещение многослойного плоского неороговевающего эпителия роговицы фиброваскулярной тканью конъюнктивального происхождения с наличием в составе бокаловидных клеток и кровеносных сосудов (Sacchetti M., Lambiase A., Cortes M., 2005). Изменение поверхности роговицы сопровождается снижением остроты зрения, слезотечением, светобоязнью, синдромом красного глаза, хроническим болевым синдромом (Le Q., Xu J., Deng S., 2018). Появление рецидивирующей эрозии

роговицы на фоне синдрома лимбальной недостаточности повышает риск возникновения язвы и перфорации роговицы (Lim P., Fuchsluger T., Jurkunas U., 2009).

Согласно литературным данным, самым безопасным и эффективным вариантом хирургической реконструкции эпителия роговицы при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности является «простая трансплантация лимбального эпителия» ("simple limbal epithelial transplantation"), предложенная Sangwan V. S. в 2012 году (Sangwan V. S., Basu S., MacNeil S., Balasubramanian D., 2012). Суть данной операции заключается в выделении поверхностного лимбального аутотрансплантата из «здорового» глаза протяженностью около 2 мм с дальнейшей его фрагментацией на 8-10 маленьких частей и фиксацией их фибриновым клеем на поверхности амниона (Amescua G., Atallah M., Nikpoor N., 2014), закрепленного по всей площади роговицы пораженного глаза с предварительно проведенной поверхностной кератэктомией. После полимеризации клея, на глаз устанавливается бандажная контактная линза. Полная стабильная реэпителизация роговицы составляет 80% у взрослых пациентов и 72% у детей на протяжении 12 месяцев наблюдения (Sangwan V. S., Basu S., MacNeil S., Balasubramanian D., 2012; Holland E. J., 2015; Basu S., Sureka S. P., Shanbhag S. S., 2016).

Все манипуляции при выкраивании и фрагментации трансплантата проводятся мануально с использованием микрохирургических инструментов (расслаиватель, алмазный нож, пинцет роговичный). Ряд вышеприведенных манипуляций не исключает повреждения клеточных структур, неравномерности толщины трансплантата (Bouchard C., 2010).

Внедренные в офтальмологическую практику фемтосекундные технологии, обеспечивающие формирование равномерных по толщине трансплантатов, уже давно зарекомендовали себя в роговичной и рефракционной хирургии. Высокая предсказуемость результата, благодаря встроенным высокоточным системам визуализации и программного интерфейса, значительно расширяет область применения фемтосекундных лазеров в различных областях офтальмохирургии.

Однако вопрос о возможности использования фемтосекундных лазеров в трансплантации лимбальных стволовых клеток до настоящего времени остается открытым, как и вопрос безопасности воздействия фемтосекундного лазера на лимбальные стволовые клетки, а также его влияния на потерю лимбальных стволовых клеток в послеоперационном периоде.

Таким образом, вышеперечисленные проблемы указывают на актуальность проведения сравнительного анализа результатов исследования двух методик (с использованием фемтосекундного лазера и с использованием микрохирургических инструментов) и определения реальных преимуществ и недостатков технологий заготовки трансплантата при выполнении трансплантации лимбальных стволовых клеток.

Цель исследования

Разработать технологию применения фемтосекундного лазера для трансплантации лимбальных стволовых клеток при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности в эксперименте.

Для реализации поставленной цели был сформулирован ряд задач.

Задачи исследования

1. На основании анализа клинико-функциональных результатов изучения лимбальной зоны методом оптической когерентной томографии и гистологического исследования образцов ткани кадаверных глаз определить глубину залегания лимбальной ниши.

2. Разработать хирургическую технику иссечения фрагментов лимба, содержащих лимбальные стволовые клетки, с помощью фемтосекундного лазера для их последующей трансплантации при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности.

3. Разработать и морфологически определить безопасные и эффективные энергетические параметры фемтосекундного лазера для выкраивания и фрагментации лимбального трансплантата.

4. На органотипической культуре фрагментов лимба, выкроенных с помощью фемтосекундного лазера и мануальной техники, оценить особенности роста и фенотипа полученной культуры клеток.

5. На основании иммуногистохимического исследования и применения флуоресцентных красителей изучить жизнеспособность лимбальных стволовых клеток в фрагментах лимба, полученных с использованием фемтосекундного лазера, и доказать безопасность его применения в сравнительном аспекте с мануальной техникой.

Научная новизна

1. Впервые доказана возможность применения фемтосекундного лазера в условиях непрозрачной ткани лимба и определены оптимальные энергетические параметры фемтосекундного лазера для выкраивания лимбального трансплантата.

2. Впервые на основании анатомо-морфологических исследований показано, что использование фемтосекундного лазера при выкраивании и фрагментации лимбального трансплантата позволяет получить прецизионный, равномерный по толщине и полноценный по составу трансплантат.

3. Впервые изучено влияние различных уровней энергии фемтосекундного лазера на пролиферативную активность и жизнеспособность лимбальных стволовых клеток и предложены наиболее эффективные и безопасные параметры энергии фемтосекундного лазера.

4. Впервые изучены особенности фенотипа культуры стволовых клеток лимбального трансплантата, выкроенного с помощью фемтосекундного лазера.

5. Впервые разработан метод простой трансплантации лимбальных стволовых клеток с использованием фемтосекундного лазера.

6. Впервые показаны особенности (преимущества и недостатки) технологии выкраивания лимбального трансплантата с использованием фемтосекундного лазера для дальнейшей трансплантации лимбальных стволовых клеток по сравнению с традиционной мануальной методикой.

Практическая значимость

1. Показано, что использование фемтосекундного лазера обеспечивает безопасное выкраивание лимбального трансплантата с полным захватом лимбальной ниши и ее микроокружения.

2. Установлено, что технология выкраивания и фрагментации лимбального трансплантата с помощью фемтосекундного лазера не оказывает влияния на морфофункциональные характеристики лимбальных стволовых клеток.

3. Разработана технология проведения операции простой трансплантации лимбального эпителия с использованием фемтосекундного лазера на этапе выкраивания и фрагментации лимбального трансплантата.

Основные положения, выносимые на защиту

Разработанная технология простой трансплантации лимбального эпителия, заключающаяся в применении низкоэнергетического фемтосекундного лазера на этапе выкраивания и фрагментации лимбального трансплантата с выбранными эффективными параметрами его работы, является безопасной и способствует снижению риска ятрогенного повреждения глазного яблока, обеспечивает сохранность ниши лимбальных стволовых клеток, позволяет получить полноценный клеточный состав лимбального трансплантата с возможностью к дальнейшей пролиферации, миграции лимбальных стволовых клеток и восстановлению эпителиального слоя роговицы поврежденного глаза при лечении одностороннего синдрома лимбальной недостаточности.

Степень достоверности и апробация работы

Достоверность результатов определяется репрезентативным объемом проведенных экспериментальных исследований, использованием современных методов исследования и методов статистической обработки.

Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на следующих научно-практических конференциях и съездах: Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Роговица 2020: инновации диагностики, лечения и хирургии» (Москва, 2020); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием Сочи - Корнеа 2021 (Сочи, 2021); Юбилейной конференции «Общая и военная офтальмология» (Санкт-Петербург, 2021); Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Федоровские чтения» (Москва, 2021), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Федоровские чтения» (Москва, 2022), 21-м и 22-м Всероссийских конгрессах с международным участием «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии» (Москва, 2021, 2022); 39-м Конгрессе Европейского Общества катарактальных и рефракционных хирургов (39th Congress of ESCRS, Нидерланды, Амстердам, 2021); 40-м Конгрессе Европейского Общества катарактальных и рефракционных хирургов (40th Congress of ESCRS, Италия, Милан, 2022).

Публикации

По теме диссертации опубликовано 3 печатные работы в журналах, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства науки и высшего образования Российской Федерации для публикации результатов диссертационного исследования; получены 2 патента Российской Федерации на изобретение № 2741411 от 25.01.2021, № 2806509 от 01.11.2023.

Внедрение результатов работы

Результаты исследований внедрены в работу лаборатории трансплантологии и клеточных технологий Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» Минздрава России, а также на кафедре офтальмологии НОИ клинической медицины ФГБОУ ВО Российского университета медицины Минздрава России.

Личный вклад автора в проведенное исследование

Автор принимал непосредственное участие в постановке задач исследования и разработке концепции, осуществлял сбор материала для исследования. Автором были проведены все этапы научной работы: самостоятельно проводился забор исследуемого материала в условиях операционной, принято активное участие в экспериментальных исследованиях in vitro при культивировании, проведении окрашивания для иммуногистохимического исследования, проточной цитофлуориметрии, проведении окрашивания и сканирующей электронной микроскопии лимбальной ткани. Автором освоены методики, применяемые для получения и оценки результатов, выполнен анализ и описание результатов, полученных в ходе исследования, сформулированы выводы, практические рекомендации и основные положения, выносимые на защиту.

Структура и объем работы

Диссертационное исследование изложено на 139 страницах машинописного текста, иллюстрировано 36 рисунками, 14 таблицами. Работа состоит из введения, обзора литературы, главы, посвященной характеристике материалов и методов исследования, двух глав собственных исследований, заключения, выводов,

практических рекомендаций и списка литературы, включающего 163 источника, из них 20 отечественных и 143 зарубежных.

Работы выполнялись на базе отдела трансплантационной и оптико-реконструктивной хирургии переднего отрезка глаза под руководством заместителя генерального директора по научной работе, доктора медицинских наук, профессора Малюгина Б. Э. (зав. отделом - доктор медицинских наук Измайлова С. Б.) и операционного блока (заведующий операционным блоком -кандидат медицинских наук Головин А. В.) ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» Минздрава России. Экспериментальные исследования in vitro выполнены на базе Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» Минздрава России под руководством заведующего Центром, доктора медицинских наук, профессора Борзенка С. А. при участии младшего научного сотрудника Герасимова М. Ю. и старшего научного сотрудника, кандидата биологических наук Островского Д. С.

Гистологические исследования выполнены на базе лаборатории патологической анатомии и гистологии глаза ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» Минздрава России (заведующий лабораторией - кандидат медицинских наук Шацких А. В.).

Оригинальное программное обеспечение и траектория работы фемтосекундного лазера Femto LDV Z8 были разработаны инженерами компании Ziemer Ophthalmic Systems AG (Швейцария) Вернером Бернау и Фабианом Мюллером.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Синдром лимбальной недостаточности: этиология, патогенез, клиника,

классификация

Синдром лимбальной недостаточности (СЛН) (англ. limbal stem cell deficiency, LSCD) - это заболевание глазной поверхности, вызванное снижением популяции и/или функции лимбальных стволовых клеток (ЛСК) при обширном повреждении палисад Вогта либо развитии дефектов ЛСК, что приводит к неспособности поддерживать нормальный гомеостаз эпителия роговицы [128, 142].

Биомикроскопически картина СЛН проявляется наличием мутного нестабильного эпителия, покрывающего роговицу, с точечными либо обширными дефектами поверхности роговицы, эрозиями, выявляемыми при окрашивании флюоресцеином, обильным ростом новообразованных сосудов, конъюнктивализацией роговицы. На более поздних стадиях заболевания происходит формирование на поверхности роговицы фиброваскулярного паннуса, рубцов и кальцификатов [136]. Клинически данное состояние сопровождается снижением остроты зрения, болевым синдромом, слезотечением, покраснением глаза, светобоязнью и в дальнейшем может привести к изъязвлению и перфорации роговицы [88].

Частичный СЛН характеризуется неполной конъюнктивализацией поверхности роговицы, тотальный СЛН - конъюнктивализацией всей поверхности роговицы вследствие полной потери ЛСК. Данное заболевание может иметь одно- или двусторонний характер поражения [55].

Среди причин, вызывающих СЛН, выделяют наследственные и приобретенные факторы. К первым относятся заболевания, связанные с дефектом

гена РАХ6 [134], такие как аниридия и аномалия Петерса [57], синдром ЕЕС (эктродактилия - эктодермальная дисплазия - расщелина губы и неба) [87], КГО-синдром (кератит - ихтиоз - тугоухость) [102], пигментная ксеродерма [50], наследственный кератит [85], синдром Тернера [137] и врожденный дискератоз [44]. Наиболее распространенными приобретенными причинами заболевания являются: химические и термические ожоги [88]; хронические лимбиты на фоне ношения мягких контактных линз [84], синдром Стивенса - Джонсона [126], рубцовый пемфигоид [154], реакция «трансплантат против хозяина» [120], хронические длительные кератиты и кератоконъюнктивиты [88], нейротрофические и буллезные кератопатии [92], токсико-аллергические реакции, опухоли глазной поверхности [128] и др.

СЛН можно разделить на три стадии в зависимости от степени поражения роговицы и лимбальной зоны, выявленной при клиническом обследовании [55] (Рисунок 1, Таблица 1).

т

ЗЕьН -ГХш

Стадия III

Рисунок 1 - Стадии синдрома лимбальной недостаточности

Стадии СЛН классифицируются по степени вовлеченности центральной (5 мм) зоны роговицы (см. Рисунок 1, Таблица 1). На I стадии поражается только

периферия роговицы, имеется нормальный эпителий в пределах 5 мм оптической зоны роговицы. Ее подразделяют на подстадии (А, В, С) по проценту вовлеченности лимбальной области (более или менее 50%). Для II стадии характерно поражение как периферии, так и центральной зоны роговицы (5 мм). Она подразделяется на подстадии (А и В) аналогично по проценту вовлеченности лимбальной области (более или менее 50%). На III стадии тотально поражается поверхность роговицы и вовлеченность лимба составляет 100% [55]. Определение стадии СЛН важно для определения терапевтических рекомендаций и тактики хирургического лечения [55].

Таблица 1 - Стадии синдрома лимбальной недостаточности на основе клинических проявлений

Стадия Признак А В С

Стадия I Нормальный эпителий роговицы в пределах центральной 5-миллиметровой зоны роговицы Поражение лимбальной области составляет <50% Вовлечение лимбальных клеток составляет >50%, но <100% 100%-е поражение лимбальных клеток

Стадия II Поражена центральная 5-миллиметровая зона роговицы Поражение лимбальной области составляет < 50% Вовлечение лимбальных клеток составляет >50%, но <100%

Стадия III Поражается вся поверхность роговицы

1.2. Особенности строения лимба роговицы

Лимб представляет собой переходную зону от склеры к роговице с высоким уровнем васкуляризации, иннервации и представляет собой своеобразный барьер,

препятствующий миграции на область роговицы конъюнктивального эпителия, в составе которого имеются бокаловидные клетки и кровеносные сосуды [31, 42].

Основной компонент лимба - палисады Вогта, имеющие вид волнистых пигментированных гребней, более заметных при биомикроскопическом исследовании на 6 и 12 ч [89]. Базальный слой лимбального эпителия в этих структурах анатомически называется лимбальными криптами, или нишами, - это место локализации лимбальных эпителиальных стволовых клеток (ЛЭСК) [100]. Базовая функция ЛЭСК заключается в поддержании целостности эпителия роговицы и обеспечении его перманентной регенерации. Обновление роговичного эпителия происходит за счет миграции ЛЭСК из их тканевой ниши, локализующейся в палисадах Вогта [3, 33, 41].

Эти углубления имеют уникальную генную экспрессию и внеклеточный протеиновый профиль (внеклеточный матрикс), которые специфичны и критически значимы для функционирования ЛЭСК. В базальном эпителиальном слое лимбальных ниш ЛЭСК делятся на идентичные клетки в горизонтальной плоскости или асимметрично, продуцируя тем самым клетки, идентичные ЛЭСК, а в горизонтальной и вертикальной плоскостях - на транзиторные амплифицирующиеся клетки (ТАК). Затем ТАК делятся на постмитотические клетки, которые мигрируют центростремительно. Далее постмитотические клетки дифференцируются в терминально-дифференцированные клетки (ТДК) и слущиваются с поверхности роговицы. Помимо клеток-предшественников лимбального эпителия в лимбальной нише располагаются мезенхимальные мультипотентные стромальные/стволовые клетки (ММСК), меланоциты, иммунные клетки, кровеносные и лимфатические сосуды, суббазальные нервные сплетения, а также внеклеточный матрикс и сигнальные молекулы (факторы роста и цитокины) (Рисунок 2) [23, 61, 64, 123, 143, 146, 147]. Весь указанный состав лимбальной ниши входит в понятие ЛСК.

Рисунок 2 - Схема строения лимбальной ниши (Источник: Yazdanpanah G. et al., 2021): TDC (ТДК) - терминально-дифференцированные клетки; PMC (ПМК) - постмитотические клетки; TAC (ТАК) - транзиторно-амплифицирующие клетки; LESC (ЛЭСК) - лимбальные эпителиальные стволовые клетки; MSC (ММСК) - мезенхимальные мультипотентные

стромальные клетки

Особую роль в регулировании ЛЭСК играют мезенхимальные ММСК. ММСК с характерными для них маркерами CD90 и CD105 располагаются под базальной мембраной лимбальной крипты и тесно взаимодействуют с ЛЭСК [63, 90, 101]. ММСК соприкасаются с ЛЭСК через ряд молекулярных субстратов и сигнальных путей, которые включают аквапорин-1 и виментин [26], хондроитин сульфат [101], SDF-1/CXCR4 [86], ВМР/№П [68] и ^-6/СТАТ3 [60]. Дополнительные механизмы взаимодействия осуществляются через межклеточные контакты, секрецию факторов роста и экспрессию цитокинов (Рисунок 3) [52].

Рисунок 3 - Схема взаимодействия ЛЭСК и ММСК в лимбальной нише (Источник: Yazdanpanah G. et а1., 2021): LESC (ЛЭСК) - лимбальные эпителиальные стволовые клетки;

MSC (ММСК) - мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки

Данные о строении лимбальной ниши и ее микроокружения, необходимого для ее полноценного функционирования, говорят о принципиальной важности сохранения всех компонентов лимбальной ниши при операциях, направленных на восстановление эпителиального слоя роговицы.

Важно также учитывать данные о глубине залегания лимбальной ниши для ее полноценного забора при трансплантации ЛСК. Le Qihua в своих исследованиях с помощью ОКТ переднего отрезка определял параметры лимбальной ниши (толщину лимбального эпителия и лимбальное эпителиальное пространство). Исследования проводили на пациентах азиатской расы из Китая и европеоидной расы из США. Оказалось, что имеются различия в толщине лимбального эпителия

в зависимости от расовой принадлежности пациентов. Так, например, толщина лимбального эпителия в верхнем сегменте лимба у пациентов из Китая в среднем составляет 96,9 мкм, а у пациентов из США - 102,5 мкм [66, 99].

1.3. Хирургические методики лечения одностороннего синдрома

лимбальной недостаточности

С момента осознания значимости ЛЭСК в поддержании гомеостаза глазной поверхности (70-е годы прошлого столетия) ученые находятся в поиске наиболее эффективного и доступного способа лечения пациентов с СЛН. Трансплантация ЛСК может предотвратить конъюнктивализацию роговицы путем переноса здоровой лимбальной ткани, содержащей ЛСК, со здорового глаза-донора на больной глаз-реципиент. В зависимости от источника донорской ткани трансплантация ЛСК может быть аутологичной (из неповрежденного парного глаза того же человека) или аллогенной (из глаза другого человека). Со временем появилось несколько различных хирургических методов трансплантации ЛСК.

Впервые в мире методику хирургической реконструкции эпителия роговицы при СЛН предложили последовательно Barraquer J. (1964) и Thorft R. (1977). Она получила название «роговично-конъюнктивальной лимбальной трансплантации со здорового глаза» [58] и «конъюнктивальной пересадки с последующей трансплантацией поверхностных слоев периферической части роговицы» [144, 145]. Однако данные методы не показали высокой эффективности на практике, так как в послеоперационном периоде стабильной регенерации эпителия роговицы добиться не удавалось.

Позднее Kenyon К. и Tseng S. (1989) предложили метод «конъюнктивально-лимбальной аутотрансплантации» (англ. conjunctival limbal autograft, CLAU),

заключающийся в пересадке двух конъюнктивально-роговичных лоскутов протяженностью по лимбу до 3-6 часов со здорового глаза на пораженный [73, 74]. Данный способ использовали многие хирурги, и он на протяжении ряда лет оставался ведущим для лечения СЛН [74]. По мере накопления опыта и количества наблюдений за результатами и появления ряда модификаций данной методики было замечено, что совместное использование лимбальных аутотрансплантатов с амниотической мембраной повышает эффективность восстановления глазной поверхности [124]. Несмотря на то, что размер конъюнктивального аутотрансплантата при CLAU составляет 6 и менее часов (по условному циферблату), риск развития СЛН на здоровом глазу полностью не может быть исключен. Для предотвращения подобного осложнения был предложен метод трансплантации культивированного лимбального эпителия (англ. cultivated limbal epithelial transplantation, CLET) как альтернативный вариант, успешно вошедший в практику [91]. Но потребность в высокоспециализированной и оснащенной лаборатории для культивации эпителиальных клеток в условиях ex vivo значительно увеличивает расходы на проведение данной операции, ограничивая ее повсеместное использование.

В 2012 году индийский врач Sangwan V. c соавторами описали метод, названный ими «простая лимбальная эпителиальная трансплантация» (англ. simple limbal epithelial transplantation, SLET), как новую хирургическую технику восстановления эпителиальной поверхности роговицы при СЛН, доказав эффективность методики в пилотном исследовании на 6 пациентах, а позднее опубликовав результаты наблюдений за 125 пациентами в течение двух лет после операции [9, 130, 131, 133]. Сочетая в себе элементы техники CLAU и CLET, простая лимбальная эпителиальная трансплантация сводит возможные осложнения на донорском глазу к минимуму [129].

1.3.1. Простая трансплантация лимбального эпителия

Суть метода SLET заключается в пересадке лимбального аутотрансплантата размерами 2*2 мм, выделенного из верхней части лимба здорового глаза, на заранее очищенную от фиброваскулярной ткани поверхность поврежденного глаза [130]. Технически пересадка ЛСК осуществляется путем механической фрагментации полученного лимбального аутотрансплантата на 8-10 равных фрагментов, их фиксации фибриновым клеем к поверхности амниотической мембраны, уложенной на поверхность пораженного глаза, и последующего укрытия пересаженных фрагментов мягкой контактной линзой. Амниотическая мембрана используется в данной операции, поскольку содержит факторы роста и обладает антиангиогенными, противовоспалительными, противомикробными и антифиброзными свойствами, что в совокупности способствует пролиферации стволовых клеток и их миграции [130].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Нефедова Ольга Николаевна, 2026 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алгоритм инфекционного скрининга доноров роговиц в Глазном тканевом банке ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С. Н. Федорова» / С. А. Борзенок, М. Ю. Герасимов, Ю. А. Комах [и др.]. // Офтальмохирургия. - 2022. - № 2. - Текст : непосредственный.

2. Андреев, Ю. В. Лазерная экстракция катаракты : специальность 14.00.08 «Глазные болезни» : автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук / Андреев Юрий Владиславович ; [ФГУ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова]. - Москва, 2007. - 50 с. - Текст : непосредственный.

3. Афанасьева, Ю. И. Гистология / Ю. И. Афанасьева, Н. А. Юрина. -Москва : Медицина, 2002. - 146 с. - Текст : непосредственный.

4. Балашевич, Л. И. Лазер и заболевания глазного дна: вчера и сегодня / Л. И. Балашевич // Лазеры в офтальмологии: вчера, сегодня, завтра : материалы научно-практической конференции (Москва, 24-25 сентября 2009 г.) - Москва, 2009. - С. 63-69. - Текст : непосредственный.

5. Бойко, Э. В. Диодный лазер в офтальмологической операционной : методические рекомендации / Э. В. Бойко, М. М. Шишкин, Ю. Д. Березин. - Санкт-Петербург : Военно-медицинская академия, 2000. - 32 с. - Текст : непосредственный.

6. Бойко, Э. В. Лазеры в офтальмологии: теоретические и практические основы : учебное пособие / Э. В. Бойко. - Санкт-Петербург : Военно-медицинская академия, 2004. - 40 с. - Текст : непосредственный.

7. Калинникова, С. Ю. Экспериментально-клиническое обоснование новой технологии реконструкции эпителия роговицы у пациентов с односторонним синдромом лимбальной недостаточности : специальность 3.1.5 «Офтальмология», 3.1.14 «Трансплантология и искусственные органы» : автореферат диссертации на

соискание ученой степени кандидата медицинских наук / Калинникова Светлана Юрьевна ; ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза им. акад. С.Н. Федорова» Министерства здравоохранения Российской Федерации. - Москва, 2023. - 53 с. -Текст : непосредственный.

8. Керимов, Т. З. Разработка и обоснование технологии вирусной деконтаминации донорских роговиц на этапе консервации : 3.1.5 «Офтальмология», 3.1.14 «Трансплантология и искусственные органы» : диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук : / Керимов Тимур Захирович ; [Место защиты: ФГАУ «Национальный медицинский исследовательский центр «Межотраслевой научно-технический комплекс «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова» Министерства здравоохранения Российской Федерации]. - Москва, 2021. - 151 с. : ил. - Текст : непосредственный.

9. Клеточная хирургия при дисфункции стволовых клеток лимба / Б. Э. Малюгин, М. Ю. Герасимов, С. А. Борзенок, А. В. Головин. - Текст : непосредственный // Офтальмохирургия. - 2019. - № 1. - С. 77-86.

10. Краснов, М. М. Микрохирургия глаза / М. М. Краснов. - Текст : непосредственный // Вестник офтальмологии. - 1969. - № 1. - С. 7-13.

11. Краснов, М. М. Микрохирургия глауком / М. М. Краснов. - 2-е изд. -Москва : Медицина, 1980. - 248 с. - Текст : непосредственный.

12. Краснов, М. М. Морфологическое изучение цилиарного тела при контактной циклокоагуляции человеческих и свиных глаз / М. М. Краснов, Л. П. Наумиди, А. А. Федоров. - Текст : непосредственный // Вестник офтальмологии. -1988. - № 5. - С. 11-13.

13. Лазерная экстракция катаракты / С. Н. Федоров [и др.]. - Текст : непосредственный // Офтальмохирургия. - 1998. - № 4. - С. 3-9.

14. Малюгин, Б. Э. Клинические результаты трансплантации аутологичного культивированного эпителия полости рта при дисфункции стволовых клеток лимба роговицы / Б. Э. Малюгин, С. А. Борзенок, М. Ю. Герасимов. - Текст : электронный // Офтальмохирургия. - 2020. - № 4. - С.

77-85. - URL: https://doi.org/10.25276/0235-4160-2020-4-77-85 (дата обращения: 03.06.2025).

15. Методические основы трансплантации аутологичного культивированного эпителия полости рта / С. А. Борзенок, Б. Э. Малюгин, М. Ю. Герасимов, Д. С. Островский. - Текст : электронный // Вестник трансплантологии и искусственных органов. - 2021. - Т. 23, № 1. - С. 171-177. - URL: https://doi.org/10.15825/1995-1191-2021-1-171-177 (дата обращения: 05.07.2025).

16. Патент № 2741411 Российская Федерация, МПК A61F 9/007 (2006/01) Способ восстановления эпителиального слоя роговицы при одностороннем синдроме лимбальной недостаточности : № 2020125264 : заявл. 30.07.2020 : опубл. 25.01.2021 Бюл. № 3 / Малюгин Б. Э., Борзенок С. А., Герасимов М. А., Нефедова О. Н. : заявитель ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза им. акад. С. Н. Федорова» МЗ РФ. - 9 с. - Текст : непосредственный.

17. Преображенский, П. В. Световые повреждения глаз / П. В. Преображенский, В. И. Шостак, Л. И. Балашевич. - Ленинград : Медицина, 1986. -198 с. - Текст : непосредственный.

18. Результаты 1000 лазерных экстракций катаракты / С. Н. Федоров [и др.]. - Текст : непосредственный // Офтальмохирургия. - 1999. - № 3. - С. 3-14.

19. Результаты задней послойной кератопластики с использованием трансплантатов, выкроенных при помощи двух различных фемтосекундных лазеров / Б. Э. Малюгин, А. Н. Паштаев, Н. Ф. Шилова [и др.]. - Текст : электронный // Офтальмохирургия. - 2020. - № 4. - С. 36-42. - URL: https://doi.org/10.25276/0235-4160-2020-4-36-42 (дата обращения: 07.07.2025).

20. Торопыгин, С. Г. Разработка технологии низкоэнергетической фемтосекундной лазерной нанохирургии и микроскопии тонких интраокулярных структур (экспериментальное исследование) : специальность 14.01.07 «Глазные болезни», 14.03.02 «Патологическая анатомия» : автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук / Торопыгин Сергей Григорьевич ; ГОУ ВПО Тверской ГМА Минздравсоцразвития России, ГОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Росздрава,

клиника глазных болезней университета Саарланда. - Москва, 2011. - 48 с. -Текст : непосредственный.

21. A 60 kHz IntraLase femtosecond laser creates a smoother LASIK stromal bed surface compared to a Zyoptix XP mechanical microkeratome in human donor eyes / M. A. Sarayba, T. S. Ignacio, D. B. Tran [et al.]. - Text : immediate // J Refract Surg. -2007. - № 23. - PP. 331-337.

22. A simple method for establishing adherent ex vivo explant cultures from human eye pathologies for use in subsequent calcium imaging and inflammatory studies / S. Andjelic, X. Lumi, Z. Vereb [et al.]. - DOI 10.1155/2014/232659. - Text : electronic // Journal of immunology research. - 2014. - № 2014. - P. 232659.

23. Advanced imaging and tissue engineering of the human limbal epithelial stem cell niche / I. Massie, M. Dziasko, A. Kureshi [et al.]. - Text : immediate // Methods Mol Biol. - 2015. - № 1235. - PP. 179-202.

24. Agarwal, K. Femtosecond Laser Assisted Cataract Surgery: A Review / K. Agarwal, K. Hatch. - DOI 10.1080/08820538.2021.1890792. - Text : electronic // Ophthalmol. - 2021. - Vol. 36, № 8. - PP. 618-627.

25. Amirikia, A. Lasers for vitreoretinal disease / A. Amirikia, C. A. Puliafito. -Text : immediate // Vitreoretinal Disease: The Essentials. - New York : Thieme Medical Publishers Inc., 1999. - PP. 609-629.

26. Aquaporin 1-positive stromal niche-like cells directly interact with N-caderin-positive clustersin the basal limbal epithelium / K. Higa, N. Kato, S. Yoshida [et al.]. - Text : immediate // Stem Cell Res. - 2013. - № 10. - PP. 147-155.

27. Autologous simple limbal epithelial transplantation for unilateral limbal stem cell deficiency: Multicentre results / J. Vazirani, M. H. Ali, N. Sharma [et al.]. -Text : immediate // Br J Ophthalmol. - 2016. - № 100. - PP. 1416-1420.

28. Berger, J. W. Modeling of erbium:YAG laser-mediated explosive photovaporisation: implications for vitreoretinal surgery / J. W. Berger, D. J. D'Amico. -Text : immediate // Ophthalmic Surg. Lasers. - 1997. - Vol. 28, № 2. - PP. 133-139.

29. Biomedical experimentation with optical masers / M. M. Zaret, H. Ripps,

I. M. Siegel, G. M. Breinin. - Text : immediate // Journal of the Optical Society of America. - 1962. - Vol. 52. - Р. 607.

30. Blumenthal, M. The round capsulorhexis capsulotomy and the rationale for

II.0 mm diameter IOL / M. Blumenthal, E. Assia, D. Neumann. - Text : immediate // Eur. J. Implant. Refract. Surg. - 1990. - Vol. 2, № 1. - PP. 15-19.

31. Buskirk, E. M. Van. The anatomy of the limbus / E. M. Van Buskirk. -Text : immediate // Eye (Lond). - 1989. - № 3. - PP. 101-108.

32. Cellular responce to near-infrared femtosecond laser pulses in two-photon microscopes / K. König, P. T. So, W. W. Mantulin, E. Gratton. - Text : immediate // Opt. Lett. - 1997. - Vol. 22, № 2. - PP. 135-136.

33. Characterization of the limbal stem cell niche: novel imaging techniques permit in vitro observation and targeted biopsy of limbal epithelial stem cells / A. J. Shortt, G. A. Secker, P. M. Munro [et al.]. - Text : electronic // Stem Cells. - 2007. -№ 25. - PP. 1402-1409. - URL: https://doi.org/10.1634/stemcells.2006-0580 (дата обращения: 13.08.2025).

34. Charles, S. Vitrectomy for retinal detachment / S. Charles. - Text : immediate // Trans. Ophthalmol. Soc. UK. - 1980. - Vol. 100, № 4. - PP. 542-549.

35. Choi, S. A New Surgical Technique: A Femtosecond Laser-Assisted Keratolimbal Allograft Procedure / S. Choi, J. Kim, D. Lee. - Text : immediate // Cornea. -2010. - № 29. - PP. 924-929.

36. Clinical studies in laser photocoagulation / C. J. Campbell, C. Koester, V. Curtice. - Text : immediate // Archives of Ophthalmology. - 1965. - Vol. 74. - PP. 57-65.

37. Comparative study of nJ- and ^J-energy level femtosecond lasers: evaluation of flap adhesion strength, stromal bed quality, and tissue responses / A. K. Riau, Y.-C. Liu, N. C. Lwin [et al.]. - DOI 10.1167/iovs.14-14434. - Text : immediate // Invest Ophthalmol Vis Sci. - 2014. - № 55. - PP. 3186-3194.

38. Corneal refractive surgery with femtosecond lasers / T. Juhasz, F. H. Loesel, R. M. Kurtz [et al.]. - Text : immediate // IEEE J. Selected Topics Quantum Electron. - 1999. - Vol. 5. - PP. 902-910.

39. Corneal trephination with the femtosecond laser / C. Meltendorf, J. Schroeter, R. Bug [et al.]. - Text : immediate // Cornea. - 2006. - № 25. - PP. 10901092.

40. Cosmetic outcome of femtosecond laser-assisted pterygium surgery / D. S. J. Ting, Y.-C. Liu, Y. F. Lee [et al.]. - DOI 10.1186/s40662-021-00230-w. - Text : electronic // Eye Vis (Lond). - 2021. Vol. 8, № 1. - P. 7.

41. Davanger, M. Role of the pericorneal psapillary Structure in renewal of corneal epithelium / M. Davanger, A. Evensen. - Text : electronic // Nature. - 1971. -Vol. 229, № 5286. - PP. 560-561. - URL: https://doi.org/10.1038/229560a0 (дата обращения: 07.07.2025).

42. Del Monte, D. W. Anatomy and physiology of the cornea / D. W. Del Monte, T. Kim. - Text : immediate // J Cataract Refract Surg. - 2011. - № 37. -PP. 588-598.

43. Dye yellow vs. argon green laser in panretinal photocoagulation for proliferative diabetic retinopathy: A comparison of minimum power requirements / D. Castillejos-Rios, R. Devenyi, K. Moffat, E. Yu. - Text : immediate // Can. J. Ophthalmol. - 1992. - № 27. - PP. 243-244.

44. Dyskeratosis congenita with corneal limbal insufficiency / D. Aslan, S. Ozdek, O. Camurdan [et al.]. - DOI 10.1002/pbc.21960. - Text : electronic // Pediatric blood & cancer. - 2009. - Vol. 53, № 1. - PP. 95-97.

45. Endoexcimer laser intraocular ablative photodecomposition / M. J. Pellin, G. A. Williams, C. E. Young [et al.]. - Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1985. - Vol. 99, № 4. - P. 483-484.

46. Erbium:YAG laser ablation of retinal tissue under perfluorodecalin. Determination of laser-tissue interaction in pig eyes / T. Wesendahl, P. Janknecht, B. Ott, M. Frenz. - Text : immediate // Invest. Ophthalmol. Vis. Sei. - 2000. - Vol. 41, № 2. - PP. 505-512.

47. Erbium:YAG laser photothermal retinal ablation in enucleated rabbit eyes / D. J. D'Amico, R. S. Moulton, P. G. Theodossiadis, J. M. Yarborough. - Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1994. - Vol. 117, № 6. - PP. 783-790.

48. Femtosecond laser keratome creation of partial thickness donor corneal buttons for lamellar keratoplasty / M. A. Sarayba, E. Maguen, J. Salz [et al.]. - Text : immediate // J Refract Surg. - 2007. - № 23. - PP. 58-65.

49. Femtosecond near-infrared laser pulses elicit generation of reactive oxygen species in mammalian cells leading to apoptosis-like death / U. K. Tirlapur, K. König, C. Peuckert [et al.]. - Text : immediate // Exp. Cell. Res. - 2001. - Vol. 263, № 1. - PP. 88-97.

50. Fernandes, M. Limbal stem cell deficiency and xeroderma pigmentosum: a case report / M. Fernandes, V. S. Sangwan, G. K. Vemuganti. - DOI 10.1038/sj.eye.6700717. - Text : electronic // Eye. - 2004. - Vol. 18, № 7. - PP. 741743.

51. Fiji: an open-source platform for biological-image analysis / J. Schindelin, I. Arganda-Carreras, E. Frise [et al.]. - DOI 10.1038/nmeth.2019. - Text : immediate // Nature Methods. - 2012. - Vol. 9, № 7. - PP. 676-682.

52. Gene expression profile of epithelial cells and mesenchymal cells derived from limbal explant culture / N. Polisetti, P. Agarwal, I. Khan [et al.]. - Text : immediate // Mol Vis. - 2010. - № 16. - PP. 1227-1240.

53. Gimbel, H. V. Development, advantages, and methods of the continuous circular capsulorhexis technique / H. V. Gimbel, T. Neuhann. - Text : immediate // J. Cataract Refract. Surg. - 1990. - Vol. 16, № 1. - PP. 31-37.

54. Gimbel, H. V. Posterior capsule tears using phacoemulsification. Causes, prevention and management / H. V. Gimbel. - Text : immediate // Eur. J. Implant. Refract. Surg. - 1990. - Vol. 2, № 1. - PP. 63-69.

55. Global Consensus on Definition, Classification, Diagnosis, and Staging of Limbal Stem Cell Deficiency / S. X. Deng, V. Borderie, C. C. Chan [et al.]. - Text : immediate // Cornea. - 2019. - Vol. 38, № 3. - PP. 364-375.

56. Grabner, G. Advantages and limitations of different femtosecond lasers / G. Grabner. - Text : immediate // XXVI Congress of the European Society of Cataract and Refractive Surgeons : book of abstracts (13-18 Sept. 2008). - Berlin, 2008. -P. 322.

57. Hatch, K. M. The structure and function of the limbal stem cell and the disease states associated with limbal stem cell deficiency / K. M. Hatch, R. Dana. - DOI 10.1097/II0.0b013e3181924e54. - Text : electronic // International ophthalmology clinics. - 2009. - Vol. 49, № 1. - PP. 43-52.

58. Holland, E. J. Management of limbal stem cell deficiency: a historical perspective, past, present, and future / E. J. Holland. - Text : immediate // Cornea. -2015. - № 34, Suppl 10. - P. S9-15.

59. Holzer, M. P. Penetrating keratoplasty using femtosecond laser / M. P. Holzer, T. M. Rabsilber, G. U. Auffarth. - Text : immediate // Am J Ophthalmol. -2007. - № 143. - PP. 524-526.

60. IL6 and the human limbal stem cell niche: a mediator of epithelial-stromal interaction / M. Notara, A. J. Shrott, G. Galatowicz [et al.]. - Text : immediate // Stem Cell Res. - 2010. - № 5. - PP. 188-200.

61. Immunofluorescence tomography of mouse ocular surface epithelial stem cells and their niche microenvironment / G. J. Parfitt, B. Kavianpour, K. L. Wu [et al.]. -Text : immediate // Investig Ophthalmol Vis Sci. - 2015. - № 56. - PP. 7338-7344.

62. In vivo assessment of human skin aging by multiphoton laser scanning tomography / M. J. Koehler, K. König, P. Elsner [et al.]. - Text : immediate // Opt. Lett. -2006. - Vol. 31, № 12. - PP. 2879-2881.

63. In vivo confocal microscope analysis of normal human anterior limbal stroma / S. Mathews, J. D. Chidambaram, S. Lanjewar [et al.]. - Text : immediate // Cornea. - 2015. - № 34. - PP. 464-470.

64. In vivo confocal microscopy assessment of the corneoscleral limbal stem cell niche before and after biopsy for cultivated limbal epithelial transplantation to restore corneal epithelium / B. E. Ramirez, D. A. Victoria, G. M. Murillo [et al.]. - Text : immediate // Histol Histopathol. - 2015. - № 30. - PP. 183-192.

65. In vivo drug screening in human skin using femtosecond laser multiphoton tomography / K. König, A. Ehlers, F. Stracke, I. Riemann. - Text : immediate // Scin Pharmacol. Physiol. - 2006. - Vol. 19, № 2. - PP. 78-88.

66. In Vivo Evaluation of the Limbus Using Anterior Segment Optical Coherence Tomography / Q. Le, D. Cordova, J. Xu, S. X. Deng. - DOI 10.1167/tvst.7.4.12. - Text : immediate // Transl Vis Sci Technol. - 2018. - Vol. 7, № 4. - P. 12.

67. Initial clinical experience with an erbium:YAG laser for vitreoretinal surgery / D. J. D'Amico, P. D. Brazitikos, G. R. Marcellino [et al.]. - Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1996. - Vol. 121, № 4. - PP. 414-425.

68. Integration of BMP/Wnt signaling to control clonal growth of limbal epithelial progenitor cells by niche cells / B. Han, S. Y. Chen, Y. T. Zhu, S. C. Tseng. -Text : immediate // Ctem Cell Res. - 2014. - № 12. - PP. 562-573.

69. IntraLase femtosecond laser vs mechanical microkeratomes in LASIK for myopia: a systematic review and meta-analysis / S. Chen, Y. Feng, A. Stojanovic [et al.]. - Text : immediate // J Refract Surg. - 2012. - Vol. 28, № 1. - PP. 15-24.

70. Intraocular temperature changes produced by laser coagulation / C. J. Campbell, K. Noyori, M. C. Rittler, C. Koester. - Text : immediate // Acta Ophthalmologica. - 1963. - Suppl. 76. - P. 22-31.

71. Inverse mushroom-shaped nonmechanical penetrating keratoplasty using a femtosecond laser / B. Seitz, H. Brunner, A. Viestenz [et al.]. - Text : immediate // Am J Ophthalmol. - 2005. - № 139. - PP. 941-944.

72. Kaatz, M. Multiphoton microscopy and in vivo tomography in dermatologic imaging / M. Kaatz, K. König. - Text : immediate // Hautartz. - 2010. -Vol. 61, № 5. - PP. 397-409. [Epub ahead of print].

73. Kenyon, K. R. Limbal autograft transplantation for chemical and thermal burns / K. R. Kenyon. - Text : immediate // Dev Ophthalmol. - 1989. - № 18. -PP. 53-58.

74. Kenyon, K. R. Limbal autograft transplantation for ocular surface disorders / K. R. Kenyon, S. C. Tseng. - DOI 10.1016/S0161-6420(89)32833-8.17. - Text : electronic // Ophthalmology. - 1989. - Vol. 96, № 5. - PP. 709-722.

75. Kim, J. H. Flap thickness reproducibility in laser in situ keratomileusis with a femtosecond laser: optical coherence tomography measurement / J. H. Kim, D. Lee, K. I. Rhee. - Text : immediate // J Cataract Refract Surg. - 2008. - № 34. - PP. 132136.

76. König, K. 3D resolved two-photon fluorescence microscopy of living cells using a modified confocal laser scanning micoscope / K. König, U. Simon, K. J. Halbhuber. - Text : immediate // Cell Moi. Biol. - 1996. - Vol. 42, № 8. - PP. 11811194.

77. König, K. High-resolution multiphoton tomography of human skin with subcellular spatial resolution and picosecond time resolution / K. König, I. Riemann. -Text : immediate // J. Biomed. Opt. - 2003. - Vol. 8, № 3. - PP. 432-439.

78. König, K. Nanodissection of human chromosomes with near-infrared femtosecond laser pulses / K. König, I. Riemann, W. Fritzsche. - Text : immediate // Opt. Lett. - 2001. - Vol. 26, № 11. - PP. 819-821.

79. König, K. Robert Feulgen Prize Lecture. Lasers tweezers and multiphoton microscopes in life sciences / K. König. - Text : immediate // Histochem. Cell. Biol. -2000. - Vol. 114, № 2. - PP. 79-92.

80. Kohnen, T. Laser-in-situ-Keratomileusis mit Mikrokeratom oder Femtosekundenlaser [Laser in situ keratomileusis with microkeratome or femtosecond laser] / T. Kohnen, G. Steinwender. - DOI 10.1007/s00347-017-0517-8. - Text : electronic // Ophthalmologe. - 2017. - Vol. 114, № 7. - PP. 661-665.

81. Krauss, J. M. Lasers in ophthalmology / J. M. Krauss, C. A. Puliafito. -Text : immediate // Lasers Surg. Med. - 1995. - Vol. 17. - PP. 102-159.

82. Labial mucosal epithelium grafting in an ex vivo human donor cornea model / M. Y. Gerasimov, D. S. Ostrovskiy, A. V. Shatskikh. - DOI 10.1016/j.exer.2022.108931. - Text : electronic // Exp Eye Res. - 2022. - № 216. - P. 108931.

83. Lamellar refractive surgery with scanned intrastromal picosecond and femtosecond laser pulses in animal eyes / R. M. Kurtz, C. Horvath, H. H. Liu [et al.]. -Text : immediate // J. Refract. Surg. - 1998. - Vol. 14, № 5. - PP. 541-548.

84. Lee, S. C. Contact lens induced limbal stem cell deficiency: clinical features in corean patients / S. C. Lee, J. H. Hyon, S. J. Hyun. - Text : immediate // Korean J Ophthalmol. - 2019. - Vol. 33, № 6. - PP. 500-505.

85. Lim, P. Limbal stem cell deficiency and corneal neovascularization / P. Lim, T. A. Fuchsluger, U. V. Jurkunas. - DOI 10.1080/08820530902801478. - Text : electronic // Seminars in ophthalmology. - 2009. - Vol. 24, № 3. - PP. 139-148.

86. Limbal epithelial stem/progenitor cells attract stromal niche cells by SDF-1/CXCR4 signaling to prevent differentiation / H. T. Xie, S. Y. Chen, G. G. Li, S. C. Tseng. - Text : immediate // Stem Cell. - 2011. - Vol. 29. - PP. 1874-1885.

87. Limbal stem cell deficiency and ocular phenotype in ectrodactyly-ectodermal dysplasia-clefting syndrome caused by p63 mutations / E. Di Iorio, S. B. Kaye, D. Ponzin [et al.]. - DOI 10.1016/j.ophtha.2011.06.044. - Text : electronic // Ophthalmology. - 2012. - Vol. 119, № 1. - PP. 74-83.

88. Limbal stem cell deficiency: concept, aetiology, clinical presentation, diagnosis and management / H. S. Dua, J. S. Saini, A. Azuara-Blanco, P. Gupta. - Text : immediate // Indian journal of ophthalmology. - 2000. - Vol. 48, № 2. - PP. 83-92.

89. Limbal Stem Cell Deficiency: Current Treatment Options and Emerging Therapies / M. Haagdorens, S. I. Van Acker, V. Van Gerwen [et al.]. -DOI 10.1155/2016/9798374. - Text : electronic // Stem Cells Int. - 2016. - № 2016. - P. 9798374.

90. Localisation of epithelial cells capable of holoclone formation in vitro and direct interaction with stromal cells in the native human limbal crypt / M. A. Dziasko, H. E. Armer, H. J. Levis [et al.]. - Text : immediate // PLoS One. - 2014. - № 9. - P. e94283.

91. Long term restoration of damaged corneal surfaces with autologous cultivated corneal epithelium / G. Pellegrini, C. E. Traverso, A. T. Franzi [et al.]. - DOI

10.1016/S0140-6736(96)11188-0. - Text : electronic // Lancet. - 1997. - № 349. - PP. 990-993.

92. Long-standing bullous keratopathy is associated with peripheral conjunctivalization and limbal deficiency / Y. Uchino, E. Goto, Y. Takano [et al.]. -DOI 10.1016/j.ophtha.2006.01.034. - Text : electronic // Ophthalmology. - 2006. -Vol. 113, № 7. - PP. 1098-1101.

93. Long-Term Cultures of Human Cornea Limbal Explants Form 3D Structures Ex Vivo - Implications for Tissue Engineering and Clinical Applications / D. J. Szabo, A. Noer, R. Nagymihaly [et al.]. - DOI10.1371/journal.pone.0143053. - Text : electronic // PLoS One. - 2015. - Vol. 10, № 11. - P. e0143053.

94. Long-Term Outcomes of the Boston Type I Keratoprosthesis in the Management of Corneal Limbal Stem Cell Deficiency / C. Aravena, T. K. Bozkurt, F. Yu, A. J. Aldave. - DOI 10.1097/Iœ.0000000000000933. - Text : electronic // Cornea. - 2016 - Vol. 35, № 9. - PP. 1156-1164.

95. Machemer, R. Surgical approaches to subretinal strands / R. Machemer. -Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1980. - Vol. 90, № 1. - P. 81-85.

96. Maiman, T. H. Stimulated optical radiation in ruby / T. H. Maiman. - Text : immediate // Nature. - 1960. - Vol. 187. - PP. 493-494.

97. Malyugin, B. E. Glueless Simple Limbal Epithelial Transplantation: The Report of the First 2 Cases / B. E. Malyugin, M. Y. Gerasimov, S. A. Borzenok. - DOI 10.1097/Iœ.0000000000002467. - Text : electronic // Cornea. - 2020. - Vol. 39, № 12. - P. 1588-1591.

98. Marshall, J. Endoexcimer laser intraocular ablative photodecomposition / J. Marshall, D. H. Sliney. - Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1986. - Vol. 101, № 1. - P. 130-131.

99. Measurement of corneal and limbal epithelial thickness by anterior segment optical coherence tomography and in vivo confocal microscopy / Q. Le, Y. Chen, Y. Yang, J. Xu. - DOI 10.1186/s12886-016-0342-x. - Text : electronic // BMC Ophthalmol. - 2016. - Vol. 16, № 1. - PP. 163.

100. Mesenchymal cells from limbal stroma of human eye / N. Polisetty, A. Fatima, S. L. Madhira [et al.]. - Text : immediate // Mol Vis. - 2008. - № 14. - PP. 431-442.

101. Mesenchymal-epithelial cell interactions and proteoglycan matrix composition in presumptive stem cell niche of the rabbit corneal limbus / K. Yamanda, R. D. Young, P. N. Lewis [et al.]. - Text : immediate // Mol Vis. - 2015. - Vol. 21. - PP. 1328-1339.

102. Messmer, E. M. Ocular manifestations of keratitis-ichthyosis-deafness (KID) syndrome / E. M. Messmer, K. R. Kenyon, O. Rittinger. - DOI 10.1016/j.ophtha.2004.07.034. - Text : electronic // Ophthalmology. - 2005. - Vol. 112, № 2. - P. e1-6.

103. Meyer-Schwickerath, G. Experiments with light-coagulation of the retina and iris / G. Meyer-Schwickerath. - Text : immediate // Doc. Ophthalmol. - 1956. -Vol. 10. - PP. 91-131.

104. Meyer-Schwickerath, G. Light coagulation; a method for treatment and prevention of the retinal detachment / G. Meyer-Schwickerath. - Text : immediate // Albrecht Von Graefes Arch. Ophthalmol. - 1954. - Vol. 156, № 1. - PP. 2-34.

105. Meyer-Schwickerath, G. Photo-coagulation of the ocular fundus and the retina / G. Meyer-Schwickerath. - Text : immediate // Ann. Ocul. - 1954. - Vol. 189, № 6. - P. 533-548.

106. Meyer-Schwickerath, G. Prophylactic treatment of retinal detachment by light-coagulation / G. Meyer-Schwickerath. - Text : immediate // Trans. Ophthal. Soc. UK. - 1956. - Vol. 76. - P. 739-750.

107. Microsurgery of the retina with a needle-guided 193-nm excimer laser / A. Lewis, D. Palanker, I. Hemo [et al.]. - Text : immediate // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 1992. - Vol. 33, № 8. - P. 2377-2381.

108. Morris, R. Hemorrhagic macular cyst (letter) / R. Morris, F. Kuhn, C. D. Witherspoon. - Text : immediate // Ophthalmology. - 1994. - Vol. 101, № 1. -P. 1.

109. Multicenter clinical experience using an erbium:YAG laser for vitreoretinal surgery / D. J. D'Amico, M. S. Blumenkranz, M. J. Lavin [et al.]. - Text : immediate // Ophthalmology. - 1996. - Vol. 103, № 10. - PP. 1575-1585.

110. Multiparametric high-resolution imaging of barley embryos by multiphoton microscopy and magnetic resonance micro-imaging / M. Stark, B. Manz, A. Ehlers [et al.]. - Text : immediate // Microsc. Res. Tech. - 2007. - Vol. 70, № 5. - P. 426-432.

111. Multiphoton autofluorecence imaging of intratissue elastic fibers / K. König, K. Schenke-Layland, I. Riemann, U. A. Stock. - Text : immediate // Biomaterials. - 2005. - Vol. 26, № 5. - PP. 495-500.

112. Multiphoton fluorescence lifetime imaging of human hair / A. Ehlers, I. Riemann, M. Stark, K. König. - Text : immediate // Microsc. Res. Tech. -

2007. - Vol. 70, № 2. - PP. 154-161.

113. Multiphoton microscopy for monitoring intratissue femtosecond laser surgery effects / B.-G. Wang, I. Riemann, H. Schubert [et al.]. - Text : immediate // Lasers Surg. Med. - 2007. - Vol. 39, № 6. - PP. 527-533.

114. Multiphoton tissue imaging using high-NA microendoscopes and flexible scan heads for clinical studies and small animal research / K. König, M. Weinigel, D. Hoppert [et al.]. - Text : immediate // J. Boiphotonics. -

2008. - Vol. 1, № 6. - PP. 506-513.

115. Multiplex FISH and three-diamentional DNA imaging with near infrared femtosecond laser pulses /K. König, I. Riemann, P. Fischer, K. J. Halbhuber. - Text : immediate // Histochem. Cell. Biol. - 2000. - Vol. 114, № 4. - PP. 337-345.

116. Neuhann, T. Theory and surgical technique of capsulorhexis / T. Neuhann. -Text : immediate // Klin. Monatsbl. Aigenheilkd. - 1987. - Vol. 190, № 6. - PP. 542545.

117. Niemz, M. H. Laser-tissue interactions: fundamentals and applications / M. H. Niemz. - Berlin : Springer Verlag, 1996. - Text : immediate.

118. Novel technique of corneal biopsy by using a femtosecond laser in infectious ulcers / J. H. Kim, J. H. Yum, D. Lee [et al.] - Text : immediate // Cornea. -2008. - № 27. - PP. 363-365.

119. Ocular lesions produced by an optical maser (laser) / M. M. Zaret, G. M. Breinin, H. Schmidt [et al.]. - Text : immediate // Science. - 1961. - Vol. 134, № 3489. - PP. 1525-1526.

120. Ocular surface reconstruction in graft-versus-host disease with HLA-identical living-related allogeneic cultivated limbal epithelium after hematopoietic stem cell transplantation from the same donor / D. Meller, T. Fuchsluger, M. Pauklin, K. P. Steuhl. - DOI 10. 1097/ICO.ObO 13e31818526a6. - Text : electronic // Cornea. -2009. - Vol. 28, № 2. - PP. 233-236.

121. Optical knock out of stem cells with extremely ultrashort femtosecond laser pulses / A. Uchugonova, A. Isemann, E. Gorjup [et al.]. - Text : immediate // J. Boiphotonics. - 2008. - Vol. 1, № 6. - PP. 463-469.

122. Osterloh, M. D. Surgical decompression of branch retinal vein occlusions / M. D. Osterloh, S. Charles. - Text : immediate // Arch. Ophthalmol. - 1988. - Vol. 106, № 10. - PP. 1469-1471.

123. Pathological changes of the anatomical structure and markers of the limbal stem cell niche due to inflammation / M. Nubile, C. Curcio, H. S. Dua [et al.]. - Text : immediate // Mol Vis. - 2013. - № 19. - PP. 516-525.

124. Postoperative complications of conjunctival limbal autograft surgery / A. Baradaran-Rafii, M. Eslani, H. Jamali [et al.]. - DOI 10.1097/iœ.0b013e31823f095d. - Text : electronic // Cornea. - 2012. - Vol. 31, № 8. -PP. 893-899.

125. Primary limbal stem cell transplantation in the surgical management of extensive ocular surface squamous neoplasia involving the limbus / P. Narang, V. Mittal, V. Menon [et al.]. - Text : immediate // Indian J Ophthalmol. - 2018. - № 66. -PP. 1569-1573.

126. Puangsricharern, V. Cytologic evidence of corneal diseases with limbal stem cell deficiency / V. Puangsricharern, S. C. Tseng. - Text : immediate // Ophthalmology. - 1995. - Vol. 102, № 10. - PP. 1476-1485.

127. Refractive surgery / T.-I. Kim, J. L. Alió Del Barrio, M. Wilkins [et al.]. -DOI 10.1016/S0140-6736(18)33209-4. - Text : electronic // Lancet. - 2019. - Vol. 393, № 10185.- PP. 2085-2098.

128. Sangwan, V. S. Limbal stem cells in health and disease / V. S. Sangwan. -Text : immediate // Bioscience reports. - 2001. - Vol. 21, № 4. - PP. 385-405.

129. Simple limbal epithelial transplantation (SLET) in failed cultivated limbal epithelial transplantation (CLET) for unilateral chronic ocular burns / S. Basu, S. Mohan, S. Bhalekar [et al.]. - DOI 10.1136/bjophthalmol-2017-311506. - Text : electronic // Br J Ophthalmol. - 2018. - Vol. 102, № 12. - PP. 1640-1645.

130. Simple limbal epithelial transplantation (SLET): A novel surgical technique for the treatment of unilateral limbal stem cell deficiency / V. S. Sangwan, S. Basu, S. MacNeil, D. Balasubramanian. - DOI 10.1136/bjophthalmol-2011-301164. -Text : electronic // Br J Ophthalmol. - 2012. - Vol. 96, № 7. - PP. 931-934.

131. Simple limbal epithelial transplantation (SLET): Review of indications, surgical technique, mechanism, outcomes, limitations, and impact / S. S. Shanbhag, C. N. Patel, R. Goyal [et al.]. - DOI 10.4103/ijo.IJO_117_19. - Text : electronic // Indian J Ophthalmol. - 2019. - Vol. 67, № 8. - PP. 1265-1277.

132. Simple limbal epithelial transplantation for recurrent pterygium: A case series / Z. Mednick, T. Boutin, A. Einan-Lifshitz [et al.]. - Text : immediate // Am J Ophthalmol Case Rep. - 2018. - № 12. - PP. 5-8.

133. Simple limbal epithelial transplantation: long-term clinical outcomes in 125 cases of unilateral chronic ocular surface burns / S. Basu, S. P. Sureka, S. S. Shanbhag [et al.]. - Text : immediate // Opthalmology. - 2016. - Vol. 123, № 5. - PP. 1000-1010.

134. Skeens, H. M. Congenital aniridia variant: minimally abnormal irides with severe limbal stem cell deficiency / H. M. Skeens, B. P. Brooks, E. J. Holland. - DOI 10.1016/j.ophtha.2010.11.021. - Text : electronic // Ophthalmology. - 2011. - Vol. 118, № 7. - PP. 1260-1264.

135. Steinert, R. F. ''Top hat''-shaped penetrating keratoplasty using the femtosecond laser / R. F. Steinert, T. S. Ignacio, M. A. Sarayba. - Text : immediate // Am J Ophthalmol. - 2007. - № 143. - PP. 689-691.

136. Stem cell differentiation and the effects of deficiency / H. S. Dua, A. Joseph, V. A. Shanmuganathan, R. E. Jones. - DOI 10.1038/sj.eye.6700573. - Text : electronic // Eye. - 2003. - Vol. 17, № 8. - PP. 877-885.

137. Strungaru, M. H. Focal limbal stem cell deficiency in Turner syndrome: report of two patients and review of the literature / M. H. Strungaru, D. Mah, C. C. Chan. - DOI 10.1097/ITO.0000000000000040. - Text : electronic // Cornea. - 2014. -Vol. 33, № 2. - PP. 207-209.

138. Studier, H. Comparison of broadband and ultrabroadband pulses at MHz and GHz pulse-repetition rates for nonlinear femtosecond-laser scanning microscopy / H. Studier, H. G. Breunig, K. König. - Text : immediate // J. Biophotonics. - 2010. -[Epub. ahead of print].

139. Sugar, A. Ultrafast (femtosecond) laser refractive surgery / A. Sugar. -Text : immediate // Curr. Opin. Ophthalmol. - 2002. - Vol. 13, № 4. - P. 246-249.

140. Targeted transfection of stem cells with sub-20 femtosecond laser pulses / A. Uchugonova, K. König, R. Bueckle [et al.]. - Text : immediate // Opt. Express. -2008. - Vol. 23, № 13. - PP. 9357-9364.

141. Terry, M. A. A practical femtosecond laser procedure for DLEK endothelial transplantation: cadaver eye histology and topography / M. A. Terry, P. J. Ousley, B. Will. - Text : immediate // Cornea. - 2005. - № 24. - PP. 453-459.

142. The culture and transplantation of human limbal stem cells / S. Ahmad, C. Osei-Bempong, R. Dana, U. Jurkunas. - DOI 10.1002/jcp.22251. - Text : electronic // Journal of cellular physiology. - 2010. - Vol. 225, № 1. - PP. 15-19.

143. The impact of age on the physical and cellular properties of the human limbal stem cell niche / M. Notara, A. J. Shortt, A. R. O'Callaghan, J. T. Daniels. - Text : immediate // Age. - 2013. - № 35. - PP. 289-300.

144. Thoft, R. A. Conjunctival transplantation / R. A. Thoft. - DOI 10.1001/archopht.1977.04450080135017.10. - Text : electronic // Arch Ophthalmol. -1977. - Vol. 95, № 8. - PP. 1425-1427.

145. Thoft, R. A. Keratoepithelioplasty / R. A. Thoft. - DOI 10.1016/0002-9394(84)90438-0. - Text : electronic // Ophthalmology. - 1984. - Vol. 97, № 1. - PP. 1-6.

146. Thoft, R. A. The X, Y, Z hypothesis of corneal epithelial maintenance / R. A. Thoft, J. Friend. - Text : unmediated // Investigative Ophthalmology and Visual Science. - 1983. - Vol. 24, № 10. - P. 1442-1443.

147. Three-dimensional structure of the mammalian limbal stem cell niche / K. Grieve, D. Ghoubay, C. Georgeon [et al.]. - Text : immediate // Exp Eye Res. -2015. - № 140. - PP. 75-84.

148. Tirlapur, U. K. Femtosecond near-infrared laser pulse induced strand breaks in mammalian cells / U. K. Tirlapur, K. König. - Text : immediate // Cell. Mol. Biol. - 2001. - Vol. 47, № 1. - PP. 131-134.

149. Tirlapur, U. K. Femtosecond near-infrared laser pulses as a versatile non-invasive tool for intra-tissue nanoprocessing in plants without compromising viability / U. K. Tirlapur, K. König. - Text : immediate // Plant J. - 2002. - Vol. 31, № 3. -PP. 365-374.

150. Tirlapur, U. K. Targeted transfection by femtosecond laser / U. K. Tirlapur, K. König. - Text : immediate // Nature. - 2002. - Vol. 418, № 2. - PP. 290-291.

151. Tirlapur, U. K. Technical advance: near-infrared femtosecond laser pulses as a novel non-invasive means for dye-permeation and 3D imaging of localized dye-coupling in the Arabidopsis root meristem / U. K. Tirlapur, K. König. - Text : immediate // Plant J. - 1999. - Vol. 20, № 3. - PP. 363-370.

152. Tirlapur, U.K. Femtosecond near-infrared lasers as a novel tool for non-invasive real-time high-resolution time-lapse imaging of chloroplast division in living bundle sheath cells of Arabidopsis / U.K. Tirlapur, K. König. - Text : immediate // Planta. - 2001. - Vol. 214, № 1. - P. 1-10.

153. Transscleral and intravitreal contact Nd:YAG laser application. An experimental study / G. A. Peyman, N. Katoh, M. Tawakol [et al.]. - Text : immediate // Retina. - 1987. - Vol. 7, № 3. - P. 190-197.

154. Tsai, R. J. Reconstruction of damaged corneas by transplantation of autologous limbal epithelial cells / R. J. Tsai, L. M. Li, J. K. Chen. - DOI 10.1056/NEJM200007133430202. - Text : electronic // The New England journal of medicine. - 2000. - Vol. 343, № 2. - PP. 86-93.

155. Two-photon exited lifetime imaging of autofluorecence in cells during UVA and NIR photostress / K. König, P. T. So, W. W. Mantulin [et al.]. - Text : immediate // J. Microsc. - 1996. - Vol. 183 (Pt 3). - P. 197-204.

156. Two-photon microscopes and in vivo multiphoton tomographs-powerful diagnostic tools for tissue engeneering and drug delivery / K. Schenke-Layland, I. Riemann, O. Damour [et al.]. - Text : immediate // Adv. Drug Deliv. Rev. - 2006. -Vol. 58, № 7. - PP. 878-896.

157. Uchugonova, A. Two-photon autofluorecence and second-harmonic imaging of adult stem cells / A. Uchugunova, K. König. - Text : immediate // J. Biomed. Opt. - 2008. - Vol. 13, № 5. - PP. 540-548.

158. Ultra-short pulse (femtosecond) laser surgery: initial use in LAS1K flap creation / I. Ratkay-Traub, T. Juhasz, C. Horvath [et al.]. - Text : immediate // Ophthalmol. Clin. Noth. Am. - 2001. - Vol. 14, № 2. - PP. 347-355.

159. Ultrastructural features of progressive idiopathic epiretinal membrane removed by vitreous surgery / A. Kampik, W. R. Green, R. G. Michels, P. K. Nase. -Text : immediate // Am. J. Ophthalmol. - 1980. - Vol. 90, № 6. - PP. 797-809.

160. Ultrastructure and reproduction behaviour of single CHO-K1 cells exposed to near infrared femtosecond laser pulses / H. Oehring, I. Riemann, P. Fischer [et al.]. -Text : immediate // Scanning. - 2000. - Vol. 22, № 4. - PP. 263-270.

161. Vitreoretinal ablation with the 193-nm excimer laser in fluid media / D. Palanker, I. Hemo, I. Turovets [et al.]. - Text : immediate // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 1994. - Vol. 35, № 11. - PP. 3835-3840.

162. Vitreoretinal surgery assisted by the 193-nm excimer laser / I. Hemo, D. Palanker, I. Turovets [et al.]. - Text : immediate // Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. - 1997. - Vol. 38, № 9. - PP. 1825-1829.

163. Wang, B. G. Two-photon microscopy of deep intravital tissues and its merits in clinical research / B. G. Wang, K. König, K. J. Halbhuber. - Text : immediate // J. Microsc. - 2010. - Vol. 238, № 1. - PP. 1-20.