Разработка полимеразной цепной реакции с гнездовыми праймерами для выявления Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Некрасова, Надежда Владимировна

• Некрасова, Надежда Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Некрасова, Надежда Владимировна

1 ОЕЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 Характеристика возбудителя некробактериоза.

1.1.1 Морфология РизоЬао1ег1ит песгорпогшп.

1.1.2 Культуральные и биохимические свойства.

1.1.3 Патогенные свойства Р. песгорЬогш).

1.2 Диагностика некробактериоза.

1.3 Схема разработки диагностической тест-системы.

1.3.1 Выделение хромосомной ДНК.

1.3.2 Полимеразная цепная реакция. Подбор праймеров.

1.3.3 Параметры температурных циклов.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка полимеразной цепной реакции с гнездовыми праймерами для выявления Fusobacterium necrophorum subsp. necrophorum»

Актуальность проблемы. Некробактериоз - инфекционное заболевание домашних животных и птиц, проявляющееся гнойно-некротичес-кш поражением различных тканей и органов. Болезнь встречается у многих видов диких животных, болеет им также человек. Возбудитель заболевания - Fusobakterium necrophorum.

Болезнь распространена во многих странах Европы,, Северной Америки. Южной Африки, в Австралии (A.L. Lundstrom, 1981: A.M. Russell et al,, 1982). В нашей стране некробактериоз регистрируется почти повсеместно, наблюдается у разных видов животных, но чаде среди северных оленей и рогатого скота (Б.М. Львов, 1971).

У оленей, лошадей, овец и крупного рогатого скота некробактериоз наблюдается чаще всего в виде поражений, развивающихся в области пясти, путового, венечного и копытного суставов; у сеи-ней, телят, кроликов и кур патологический процесс локализуется главным образом в полости рта. У крупного рогатого скота некротический распад тканей захватывает также половой аппарат. ПерЕичные поражения почти во всех случаях и притом у всех видов животных осложняются образованием абсцессов ео внутренних органах (печень, почки, легкие, сердце, мозг) (И.В. Захаров, 1949; K.M. Голосов, 1969: С.М. Scanlan, T.L. Hathcock, 1983; Z.L. Tan et al., 1996: L. Hageisk.iaer, J. Prag-, 2000).

Ущерб, причиняемый некробактериозом, весьма значительный. Он складывается из потери продуктивности животных, падежа, вынужденного убоя, абортов, удлинения серЕис-периода, затрат на лечение (Я.Р. Коваленко, 1954; М.М. Прасолова» 1969; П.Н. Никоноров, l«öü; D. взни.01х, 1Уос}

- !=,

По данным Д.Н. Бондарько (1972), поражения пальцев у крупного и мелкого рогатого окота в хозяйствах Западной Сибири и Казахстана составляет 3-5%. а в отдельных случаях до 60%. По наблюдениям Я.Р. Коваленко (1954), смертность и вынужденный убой больного некробактериозом крупного рогатого скота составляли 12,5% от общего числа заболевших, по данным В.В. Максимовича и Э.И. Беремен (1999), до 40% коров в неблагополучном стаде приходится выбраковывать но причине некробактериоза. В отдельных овцеводческих хозяйствах некробактериозом заболевало до 25-30% поголовья, при этом смертность овец достигала 10%, а при поражениях полового аппарата смертность у овцематок достигала 20%. Суягные оецы обычно абортировали. При контагиозной эктиме ягнят г. песгорЬогшл выделяли в 3.9-60,6% случаев, при этом падеж достигал 6% от заболевших (М.М. Прасолова, 1969). М.Ф. Шумилов (1973) указывал, что в оленьих стадах ежегодно в среднем регистрируется около 30 тысяч оленей, заболевших некробактериозом (1,3-5,5%), из них отход составляет 1'о, 2- 52/*.

Борьба с некробактериозом до сих пор не увенчалась успехом. В связи с этим очень важно знать как этиологию, патогенез, так и другие аспекты данной инфекции, с тем, чтобы эффективнее проводить мероприятия, направленные на профилактику и ликвидацию этой болезни. Для профилактики и для ликвидации некробактериоза первостепенное значение имеет своевременный и достоверный диагноз. Для его установления применяют многочисленные методы: клинический, эпизоотологический, бактериологический, биологический, а также патологоанатомическое вскрытие. Обычно эти методы используют комплексно.

ОСНОВНЫМ ПрИёМОМ ЕЫЯЕЛеНйЯ Р. ПеОГОриОГиГи, ПрИЕбДбННЫЫ Е

Методических указаниях по лабораторной диагностике некробактери-оза" (1987), является бактериологическое исследование: микроскопия мазка, посев на питательные среды и биопроба на лабораторных животных. Зти методы диагностики имеет свои минусы. Так. из очагов поражения, наряду с патогенной Р. песгорЬогиш зиЬзр. (биотипы А, АВ, Б), выделяют и непатогенный биотип С. находящийся в рубце, который никогда не вызывают заболевание. По морфологическим признакам все биотипы очень схожи (Нос^зоп А.Ь.М. е1. а!., 1993; О. И. Соломаха, Л.В. Кириллов с соавт., 2000). Одновременно в больших количествах выделяется сопутствующая микрофлора: стафилококки, стрептококки, микрококки, сенная, кишечная палочки и другие микроорганизмы (Н.Е. Гришаев, 1971; А. А. Самоловов, 1998). Поэтому выделить возбудителя заболевания достаточно сложно. При постановке биопробы выяснили, что лабораторные животные (кролики, белые мыши) чувствительны не только к возбудителю некробактериоза, но и к сопутствующей микрофлоре. В целом на постановку диагноза затрачивается 12-16 суток. В случае значительного обсеменения биологических обпазпов вульгарной микоофлооой это воемя увеличивается на

6-10

В настоящее время наиболее чувствительными и специфичными признаны методы, основанные на выявлении фрагментов генома возбудителя в биологическом материале с помощью молекулярной гибридизации и полимеразной цепной реакции (Ю.И. Еравве, 2001). Необходимо отметить, что зти методы позволяют обнаружить концентрацию возбудителя в несколько раз меньшую, чем при традиционном бактериологическом исследовании. Это часто приобретает определяющее значение при постановке диагноза, так как в пораженном участке, помимо возбудителя заболевания Р. песгорЬогиш, находятся в оольшом количестве различные ассоциации микроорганизмов. Поэтому выявление генома возбудителя в исследуемом материале с помощью ген-ноинженернык методов: ДНК-ДНК гибридизации и ДНК-технологий - по-лимеразной цепной реакции, позволяет сократить сроки диагностических исследований до 1-2 дней и даже до нескольких часов. Специфичность, высокая чувствительность, простота и удобство проведения анализа, сравнительно небольшие затраты времени являются признанными достоинствами данных методов (А.Б. Масленников, Ю.й. Бравве, 2001; Л.А. Нагубнова, 2001).

Цель и задачи исследований.

С учетом вышеизложенного, определена цель работы: разработать с помощью полимеразной цепной реакции и гнездовых праймеров лабораторный образец тест-системы, обладающий специфичностью, достаточно высокой чувствительностью и способностью дифференцировать Р. песгорЬогигп зиЬгр. пеогорпогшп от Р. рзеисЗопесгорпогш! к другой микрофлоры, присутствующей в очагах поражения. для достижения поставленной цели определены следующие задачи исследований:

1. Отработать методику выделения хромосомной ДНК РизоЬас1е-г!ш1 песгорЬогиш.

2. Провести подбор праймеров, проанализировав последовательности генома возбудителя некробактериоза разных штаммов.

3. Подобрать оптимальный режим для проведения ГЩР с эталонным штаммом РизоЬаЫ:ег1игп песгорЬогигп зиЬзр. песгорЬогигп и иволя-тами. выделенными из патологического материала.

4. На основе ПИР с гнездовыми праймерами сконструировать лабораторный образец тест-системы для выявления хромосомной ДНК патогенных биотипов ЕизоЬас1егиш) песгорпогшп.

Научная новизна.

1. Отработана методика выделения хромосомной ДНК РизоЬас1е-г1шт пеогорЬогит.

2. Впервые в Российской Федерации выбраны и синтезированы гнездовые праймеры. позволяющие в отработанном режиме проведения ЩР выявлять геномную ДНК патогенных биотипов РизоЬао1егз.ит песгорЬогиш.

3. Разработан вариант ГЩР-ПДРФ для Р. пеогорЬогит зиЬзр. песгорЬогиш бкотип АБ и проведено генетическое типирование депонированного штамма "Чик" ИЗВОиДВ.

Теоретическая и практическая ценность работа:

Разработаны метод выделения геномной ДНК РизоЬас1ег1ш1 пес-горЬогшп из биологических образцов и полимеразная цепная рекция о гнездовыми (вложенккмк) праймерами. позволяющая выявлять патогенные штаммы возбудителя некробактериоза.

Подана заявка на изобретение "Способ выявление РизоЬаоЬег1шп песгорЬогиш е гнездовой ЩР", получена приоритетная справка №2001133577/13 (035645) от 20 декабря 2001г.

Апробация работы: материалы диссертации доложены на международной научно-практической конференции (Покров, 2002), на 5-й международной научно-практической конференции (Абакан. 2002), на 1-м международном ветеринарном конгрессе (Алматк, 2002), на ученых советах ГНУ ИЗВОиДВ СО РАСХН (2000-2002 гг).

Публикации: по теме диссертации опубликовано 3 научные работы.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Разработан опытный образец ЩР тест-системы, дифференцирующий с помощью полимерааной цепной реакции к гнездовых праймеров РизиЬ£о1.ег1шп песгорЬогшп зиЬзр. песгорЬогиш биотип АВ от другой микрофлоры., б том числе от слаоопатогенного биотипа В и непатогенной Ри5оЬасЬег1ш] рзеииопеогорпогшп, обладающий специфичностью и высокой Чувствительностью.

2. Разработан способ генетического типирования штаммов Риго-Ьас^ег1игп песгорЬогигп биотипа АВ методом ЩР-ЦДРФ с помощью специфических праймеров и рестрикцией змпликона эндокуклеазой НраП (МерI).

Структура и объем работы. Диссертация изложена ка 97 страницах, содержит 5 таблиц, 5 рисунков. Состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения результатов исследований, выводов, практических предложений, списка литературы и приложения. Список литературы включает в себя 197 источников, ив них 86 иностранных.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Некрасова, Надежда Владимировна

4. ВЫВОДЫ

1. Оптимальный способ выделения хромосомной ДНК F. necropho-rum из культуры и патологического материала - метод фенол-хлороформной экстракции с предварительной обработкой протеиназой К при +55°С в течении 20 часов.

2. Подобраны праймеры, специфичные к оригинальному повтору в гене лейкотоксина Р. necrophorum subsp. necrophorum биотип AB, не реагирующие с микроорганизмами, наиболее часто встречающимися в очагах поражения вместе с возбудителем некробактериоза (Е. coli, Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris, Bacillus subtil is, Salmonella dublin). Чувствительность выявления ДНК из чистой культуры F. necrophorum subsp. necrophorum составляет 0,1 nr.

3. Разработан опытный образец ПЦР тест-системы с использованием гнездовых праймеров и временное наставление к нему, позволяющий выявлять ДНК F. necrophorum subsp. necrophorum биотип AB.

4. Исследование с помощью ПЦР тест-системы позволяет выявлять в патологическом материале патогенные штаммы F. necrophorum, что повышает точность диагноза и требует меньше затрат времени по сравнению с традиционными методами.

5. Разработанная ЩР-ПДРФ тест-система позволяет проводить генетическое типировакие внутри подвида Р. necrophorum subsp. necrophorum путем получения паттерна (генетического профиля) с помощью наружных праймеров и эндонуклеазы Hpall (Mspl).

6. Высокая специфичность, сокращение сроков исследования в 4-5 раз с помощью ПЦР тест-системы с гнездовыми праймерами позвоw т.п т »r.-i T~r ."I rfT r^ n уп т .«•. .-ч "r* »» т nrtf гт» т* дч m '»■ч . -г"» .—i rtrwrt» /« //ч TT juних ииишшcJUiSdXi t?e? мм ллшшурвмшсщик iicixui'tfiiiiui'u шхсиома г . necrophorum subsp. necrophorum оиотип Ab. г-згз I Л

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Методические рекомендации "Выделение геномной ДНК Ризо-Ьасйеггиш песгорЬогиш из биологических образцов", утвержденные Ученым советом ГНУ ИЭВОиДВ СО РАОХН (протокол Ш от 22 февраля 2002г.) и подсекцией "Инфекционная патология животных в регионе Сибири и Дальнего Востока" Отделения ветеринарной медицины Рос-сельхозакадемии (протокол М 3 от 22 февраля 2002г.).

2. "Способ выявления Ри5оЬас1ег1ит пеогорЬогиш в гнездовой ПЦР" - заявка на предполагаемое изобретение № 2001133577/13 (035645) с приоритетом от 20 декабря 2001г.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Некрасова, Надежда Владимировна, 2002 год

1. Авроров 5.Н. 0 некробациллезе лошадей/ В.Н. Авроров// Тр.

2. Воронежского зооветинститута.- 1947.- Т.10.- С.124-132.

3. Анакина Ю.Г. Болезни конечностей рогатого скота в условиях интенсивной технологии/ Ю.Г. Анакина- М., 1988.- 50 с.

4. Андо Т. Применение ферментов в исследовании работы генов/ Перевод ГПНТБ СО АН/ Т. Андо- Новосибирск, 1982.- 37 с.

5. Баатар Б. Изучение микрофлоры копыт больных некробацилле-зом овец и коз в МНР/ Б. Баатар// Инфекционные болезни животных и вопросы природной очаговости в Киргизии.- Фрунзе, 1967.

6. Балабанов В.А. Некробактериоз животных/ В.А. Балабанов-М.: Колос, 1971.- 136 с.

7. Белявский A.B. Амплификация тотальной кДНК in vitro/ A.B. Белявский, К. Раевский/7 Докл. АН ССР.- 1988.- Т.303.-С.1498-1501.

8. Бобылева Е.А. Ускоренный метод биологической диагностики некробациллеза и выделения чистых культур Бас. necrophorus/ Е.А. Бобылева// Сборник работ молодых ученых в области ветеринарии, -М. 1940.- 0.148-151.

9. Борисова Л.М. Количественные закономерности роста и размножения бактерии некроза/ Л.М. Борисова, A.A. Пилипенко// Поиски новых методов профилактики и лечения болезней животных на Крайнем

10. Севере/ Науч.-технич. бюллетень ВАСХНИЛ. Сиб. отд-ие.- Новосибирск, 1982,- Вып. 30.- С.53-58.

11. Бреслер O.E. Молекулярная биология/ O.E. Боеслер- Л.: Наука, 1973.- 0.208-203.

12. Бартапетян А.Б. Полимеразная цепная реакция/ А.Б. Барта-петян// Молекулярная биология.- 1991.- Т.25.- Вып.4.- С.926-936.

13. Бейнберг М. Анаэробные микроорганизмы и их роль в патологии/ М. Бейнберг, Б. Гинзбург.- М.: Гос. медиц. изд-во, 1927.п ч-i p,qvr U. ОJ.U u£.U .

14. Волкова A.A. Некробапиллез овец/ A.A. Волкова, Р.0. Га-лиев, В.И. Овчаренко.- Фрунзе: Илим, 1965.- С. 7-17, 79-104.

15. Волкова A.A. Чувствительность бактерии некроза к различным антибиотикам/ A.A. Волкова, P.C. Галиев, В.Г. Стародубцев// Инфекционные болезни животных и вопросы природной очаговости.-Фрунзе, 1965.- С.89-96.

16. Вощинин Б.А. Изучение особенностей размножения возбудителя некробапиллеза/ Б.А. Вощинин// Тр. ин-та ветеринарии Казахского филиала ВАСХНИЛ.- Алма-Ата.- 1957.- Т.8.- С.255-230.

17. Галиев P.C. Источники некробациллезной инфекции в природе: Автореферат . канд. вет. наук/ P.C. Галиев- Фрунзе, 1963.15 с.

18. Глазко Б.И. ДНК-технологии животных/ В.И. Глазко- Киев:пииа-ишШх. хУа с . и. и! .

19. Глебов Н.Х. К вопросу о выяснении "фактора распространения" (гиалуронидазы) у Еасг. песгорпогют/ Н.Х. Глебов// Учен, записки Казанского вет. ин-та им. Н.Э. Баумана.- 1957.- Т.65.-С.219-223.

20. Голосов й.М. Некробациллез северных оленей/ й.М. Голосов, Б.Б. Маслухин.- Норильск, 1969.- С. 7-27. 73-78.

21. Горбунов Е.И. Аллергический метод диагностики некроба-циллеза северных оленей/ Е.И. Горбунов// Тр. НИИ полярного земледелия, животноводства и промыслового хозяйства/ сер. Оленеводство . М.- Л., 1941.- вып.15.- С.29-57.

22. Гришаев Н.Е. Сопутствующая микрофлора и ее роль при нек-робациллезе копыт овец/ Н.Е. Гришаев// Инфекционные и незаразные болезни сельскохозяйственных животных/ Тр. Казахского НИШ.- Алма-Ата: Кайнар, 1971.- Т. 14.- 0.404-410.

23. Гришаев Н.Е. Биологическая диагностика некробациллеза/ Н.Е. Гришаев, Д.П. Бахтин// Ветеринария.- 1969.- N17.- С.37-38.

24. Гришаев Н.Е. и выживаемости ЕасЬ. песгорпогигп на полужидком МППБ/Н.Е. Гришаев, Д.П. Бахтин // Инфекционные и незаразные болезни сельскохозяйственных животных/ Тр. Казахского НИБИ.-Алма-Ата: Кайнар, 1971.- Т.14.- С.411-413.

25. Дебабов В.Г. Локальная амплификация нуклеиновых кислот -новый метод исследования/ Б.Г. Дебабов// Молекулярная биология. 1990.- Т.24.- Вып.2.- С.304-308.

26. Девис Р. Методы генетической инженерии. Генетика бактерий/ Р. Девис, Д. Бодстайн, Дж. Рот.- М.: Мир, 1984.- 176 с.

27. Захаров И.В. Диагностика некробактериоза лошадей методом РОК/ И.В. Захаров// Ветеринария, 1949.- №7.- С.54-58.со. Иванова М.М. Современные методы дНК-диагностики: Лекция/r-г- / и

28. М.М. Иванова, Б.Н. Лазарев, P.E. Белоусова, Б.С. Народницкий.

29. М.: МГАБМиБ им. К.И. Скрябина, 1997.- 20с.

30. Каган Ф.И. К биологии возбудителя некробациллеза северных оленей/ Ф.И. Каган, Я.Р. Коваленко// Советская ветеринария.-1934.- W?.- С.64-71.

31. Кайзер К. Выделение высокомолекулярной хромосомной ДНК из клеток эукариот/ К. Кайзер. Н. Мюррей// Клонирование ДНК. Методы/ Под ред. Д. Гловера.- М.: Мир, 1988.- С.59-61.

32. Коваленко Я.Р. Некробациллез сельскохозяйственных животных/ Я.Р. Коваленко- М.: ОГИЗ-Сельхозгиз, 1948.- 271 с.

33. Коваленко Я.Р. Типовое отождествление возбудителя некро-бациллеза (Вас. necropnorus}/ Н.Р. Коваленко//' Тр. Гос. контрольного института вет. препаратов.- 1952.- Т.З.- С.173-180.

34. Коваленко Я.Р. Анаэробные инфекции сельскохозяйственных животных/ Я.Р. Коваленко- М.: Сельхозгиз. 1954.- С.66-73,j. w 7 twhwl«w «

35. Козловский E.B. Лммунофлуоресцентный метод идентификации Bact. necrophorum/ E.B. Козловский. О.И. Соломаха// Ветеринария. 1972.- М,- С. 102-104.

36. Колычев Н.М. Зоопатогенные бактерии и меры борьбы с ними/ K.M. Колычев, В.Г. Ощепков.- Омск: Изд-во ОмГАУ, 2001.-С.399-406.

37. Корнберг А. Синтез ДНК/ А. Корнберг- М.: Мир, 1977.359с.

38. Краев A.C. Методы изучения первичных структур нуклеиновых кислот/ A.C. Краев, K.P. Скрябин// Итоги науки и техники. Сер. Молекулярная биология/ ВИНИТИ.- М., 1980.- Т.12: Генетичеслеш. yihjnxheyyiЯ ^мугц^ыу . Ч.А." о.¿зс.

39. Краснобаев A.K. К вопросу о сохраняемости лабораторных штаммов палочки некрова/ А.К. Краснобаев, A.A. Тимофеева// Советская ветеринария, 1939.- №7.- С.50.

40. Краснобаев А.К. Желудочно-кишечный тракт северного оленя как резервуар возбудителя некробациллеза/ А.К. Краснобаев// Ветеринария.- 1947.-т.- С. 19-22.

41. Ландер З.С. Анализ с рестрикционными фрагментами/ 3.0. Ландер// Математические методы для анализа последовательностей ДНК/ Под ред. М.С. Уотермена.- М.: Мир, 1999.- С.63-84.

42. Лайшев А.Х. Клинико-рентгенологичеокач картина некроба-циллезных поражений в области пальцев у северного оленя/ А.Х. Лайшев// Матер. Есесоюз. межвуэ. конш. по Еопр. вет. хирургии.-Л. 1957.- С.293-295.

43. Лайшев А.Х. Некробактериоз северных оленей (этиология, патогенез, профилактика и лечение)/ А.Х. Лайшев, Н.С. Семенов.-Якутск: Якутское кн. изд-во, 1971.- 147 с.

44. Львов В.М. Лабораторная диагностика анаэробных заболеваний сельскохозяйственных животных/ В.М. Львов- М.-Л.: Оельхозгиз, I960.- С.87-95.

45. Львов В.М. Анаэробные инфекции и борьба с ними/ В.М. Львов- Л.: Колос, 1971.- С.48-60.

46. Мазин A.B. Методы молекулярной генетики и генной инженерии/ A.B. Мазин. К.д. КузнеделоБ, А.и. Краев и др.- Новосибирск:1. Наука. 1990.- 248 с.

47. Майерс Р. Обнаружение единичных нуклеотидных замен в ДНК: расщепление РНКазой и денатурирующий градиентный гель-электрофорез/ Р. Майерс. Б. Шеффилд, Д. Кокс// Анализ генома. Методы/ Под ред. К. Дейвиса.- М.: Мир, 1990.- 0.123-175.

48. Максимович Б.Б. Некробактериоз сельскохозяйственных животных/ В.Б. Максимович, Э.й. Веремей// Материалы к Республиканскому семинару гет. специалистов по проблеме некробактериоза.- Мо-зырь, 1999.- 55 с.

49. Маниатис Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование/ Т. Маниатис, Э. Фрич, Д. Сэмбрук.- М.: Мир, 1984.480 о.

50. Маслухин Б.Б. Морфологические и физиологические особенности возбудителя некробактериоза северных оленей/ Б.Б. Маслухин, A.A. Пилипенко, Л.М. Борисова, А.Г. Маслухина// Сибирский вестник сельскохозяйственной науки, 1972,- №2.- С.66-69.

51. Межиева З.Х. Испытание некоторых сред высушивания для стабилизации свойств F. necrophorum/' З.Х. Межиева, О.И. Соломаха, H.H. Кружнов// Вопросы ветеринарии и ветеринарной биологии.-2000.- Бып.1.- С.16-22.

52. Меньшенин В.В. Питательные среды для промышленного культивирования F. necrophorum/ B.B. Меньшенин, Е.Г. Лавченко, О.И. Соломаха, Е.й. Бондаренко// Ветеринария.- 1997.- №3.- С.27-28.

53. Методические указания по лабораторной диагностике некробактериоза/" A.A. Самоловов- М. 1987.- 4 с.

54. Момыналиев К.Т. Перспективы применения методов ДНК-диагностики в лабораторной службе. Часть 1. (Лекция)/ К.Т. Момыналиев, В.М. Говорун//" Клиническая лабораторная диагностика.- 2000.i-i-rr . и . С-, xJ ОН, .

55. Муромцев С.Н. В. necrophorum и его роль в патологии сельскохозяйственных животных/ С.Н. Муромцев, Л.С. Новикова// Советская ветеринария.- 1935.- №5.- С. 14-17.

56. Муромцев С.Н. Копытная болезнь северных оленей/' С.Н. Муромцев- Л.: Изд-во Главсевморпути. 1935.- 48с.

57. Нагубнова Л.А. Современное оборудование для молекуляр-но-биологических исследований/ Л.А. Нагубнова// Молекулярно-биологические технологии в медицинской практике/ Под ред. А.Е. Масленникова.- Новосибирск, Издательский дом "Манускрипт". 2001.-С.71-77.

58. Никоноров П.Н. Зоогигиеническая и ветеринарная оценка технологических систем на скотоводческих комплексах/ П.Н. Никоноров// Науч.-техн. бюллетень/ ВАСХНйл. Сиб. отл-кие.- 1980.1. Вып.17.- С.18-22.

59. Овчаренко Б.И. Рентгеноскопическая диагностика некроба-циллева внутренних органов ягнят/ В.И. Овчаренко// Бюл. науч. -техн. инфор. Киргиз. НИИ1В.- i960.- №5.

60. Определитель бактерий Берджи/ Под ред. Дж. Хоулта, Н. Крита. П. Онита и др.- М.: Мир,1997.- Т.1.- 0.300, 328-330.

61. Патрушев Л.И. Экспрессия генов/ Л.И. Патрушев- М.: Наука, 2000.- 527с.

62. Пилипенко A.A. Реакция преципитации в геле агара при некробактериове северных оленей/ A.A. Пилипенко// Вопросы методологии и методики научных исследований по сельскому хозяйству.-Новосибирск, 1972.- вып.2.- С.120-121.

63. Пилипенко A.A. Об использовании серологических реакций при изучении некробактериоза/ A.A. Пилипенко// Сибирский вестник сельскохозяйственной науки.- 1974.- Ш,- С.79-83.

64. Пилипенко A.A. Прещшитины к Bact. necrophorum у северных оленей/ A.A. Пилипенко// Проблемы животноводства и пушного звероводства на Крайнем Севере/ Сб. науч. тр. БАСХНИЛ. Сиб. отд-ие.- Новосибирск, 1977.- С.47-52.

65. Писаренко Н.И. Подбор и изучение изменений питательных сред в процессе роста бактерии некроза/ Н.И. Писаренко. A.A. Кор-зенкова. В.П. Шишова// Доклады ВАСХНИЛ.- 1973.- МО.- С.35-37.

66. Полякова O.A. Использование метода люминесцентного анализа в микробиологии/ O.A. Полякова// Тр. ВИЗВ.- М., 1959.-Т.22.- С.142-163.

67. Прасолова М.М. Смешанная инфекция у ягнят с поражением слизистой ротовой полости (Контагиозная эктима и некробациллез) и меры борьбы: Автореферат . канд. вет. наук/ М.М. Прасолова-Фрунзе. 1969.- 18с.

68. Приходько Г.Г. Обпшй метод определения участков расщепления ДНК эндонуклеазами рестрикции/ Г.Г. Приходько. С.Х. Дегтярев, Н.И. Речку нов а и др.// Биотехнология.- 1990.- М.- С. 12-16.

69. Пузырев В.П. Патологическая анатомия генома человека/'

70. B.П. Пузырев, Б.А. Степанов.- Новосибирск: Наука, 1997.- 224 с.

71. Пушменков Е.П. Реакция агглютинации в диагностике так называемой копытной болезни северных оленей/ Е.П. Пушменков// Сб. работ молодых ученых в области ветеринарии/ ВАСХНИЛ.- 1940.1. C.145-147.

72. Пушменков Е.П. Реакция агглютинации в диагностике так называемой копытной болезни северных оленей/ Е.П. Пушменков// Ветеринария.- 1941.- №1.- С.19.

73. Пфайффер Ф. Регистр методик генной инженерии института биохимии Макса Планка/ Перевод ГПНТБ СО АН/ Ф. Пфайффер- Новосибирск, 1987.- 110с.

74. РеЕнивых А.Г. Копытная болезнь северных оленей и ее возбудитель/'/Сборник по оленеводству, тундровой ветеринарии и зоотехнике/ А.Г. Ревнивых- М.: Изд-во "Власть Советов" при Президиуме БЦИК, 1932.- С.209-233.

75. Ревнивых А.Г. Этиология так называемой "копытной болезни" северных оленей/ А.Г. Ревнивых// Советская ветеринария, 1935.- Ш.- С. 18-24.

76. Ревнивых А.Г. К вопросу этиологии, клиники и патогенеза летне-осенних заболеваний северных оленей/ А.Г. Ревнивых// Советская ветеринария,- 1940.-№2-3.- С.59-65.

77. Ревнивых А.Г. Аллергическая диагностика некробациллеза у северных оленей/ А.Г. Ревнивых, S.A. Балабырдина// Вестник сельскохозяйственной науки. Ветеринария.- М.: ОГИЗ: Сельхозгиз, 1940.- вып.3.- С.10-14.

78. Саики Р. Полимеразная цепная реакция/ Р. Саики, У. Ги-ленстен, Г. Эрлих// Анализ генома. Методы/ Под ред. К. Дейвиса.-U.: Мир, 1990.- С.176-190.

79. Самоловов A.A. Оценка способов доставки материала для выделения возбудителя некробактериоза/ A.A. Самоловов// Эпизоотология и иммунопрофилактика болезней сельскохозяйственных животных/ Сб. науч. тр. ВАСХНИЛ Сиб.отд-ие.- Новосибирск, 1983.-С.39-41.

80. СамоловоЕ A.A. диагностическая ценность культурально-биохимических свойств F. necrophorum/ A.A. Самоловов// Диагностика болезней животных и профилактика их на ферма-: и комплексах/ Сб. науч. тр. ВАСХНИЛ. Сиб.отд-ие.- Новосибирск, 1984,- С.53-58.

81. Самоловов A.A. Среда для культивирования возбудителя некробактериоза/ A.A. Самоловов// Ветеринария.- 1985.- №3,-Ü.Dö-D9.

82. Самоловов A.A. Совершенствование лабораторной диагностики некробактериова/ A.A. Самоловов// Ветеринария.- 1986.- №5.-и. ш-iü.

83. Самоловов A.A. Испытание иммунофлуоресцентного метода для диагностики некробактериова крупного рогатого скота/ A.A. Самоловов// Диагностика и профилактика инфекционных болезней животных/ Сб. науч. тр. БАСХНИЛ. Сиб. отд-ие.- Новосибирск, 1989.-С.21-24.

84. Самоловов A.A. Некробзктериоз животных/ A.A. Самоловов-Новосибирск, 1993.- 128с.

85. Сшоловов A.A. Некробактериоз крупного рогатого скота/ A.A. Самоловов- Новосибирск. 1998.- 140с.

86. Самоловов A.A. Fusobaoierium necrophorurn: морфологические. биологические свойства, классификация/ A.A. Самоловов// Научное обеспечение ветеринарных проблем в животноводстве: Сб. науч. тр./FÄCXH. Сиб. отд-ие. ИЗВСиДВ.- Новосибирск. 2000.-С.399-406.

87. Самоловов A.A. Роль Fusobacterium necrophorurn в патологии человека/ A.A. Самоловов// Научное обеспечение ветеринарных проблем в животноводстве: Сб. науч. тр./РАСХН. Сиб. отд-ие. ИЗВСиДВ. Новосибирск. 2000.- С.154-159.

88. Самоловов A.A. Изучение и состояние проблемы некробактериова северных оленей/ A.A. Самоловов, В.П. Кечин, К.А. Лайшев.-Новосибирск: Ревик-К, 2001.- 178с.

89. Сидорчук A.A. Система мероприятий по борьбе с кекробак-териозом крупного рогатого скота и копытной гнилью овец/ A.A. Сидорчук. С.Д. Панасюк. H.H. Кружнов и др.// Ветеринария.- 1999.-Шэ.- С.23-27.

90. Соломаха О.И. Серогруппы возбудителя некробактериоза/ О.И. Соломаха// Научно-технический бюллетень ЮШСХ Крайнего Севера. Норильск.1972.- вып.2(5).- С.20-21.

91. Соломаха О.И. Обнаружение бактерий некроза в патологическом материале/ О.И. Соломаха// Научно-технический бюллетень НИИСХ Крайнего Севера.- Норильск.1972.- вып.2(5).- С.22-23.

92. Соломаха О.И. Серологическая идентификация Bact. песгор-horuin и обнаружение антител к ним в сыворотках крови северных оленей иммунофлуоресцирующим методом: Автореферат . канд. вет. наук/ О.И. Соломаха- М. 1973.- 16с.

93. Соломаха О.И. Получение люминесцирующих сывороток против Bacterium necrophorum/ О.И. Соломаха// Тр. НИИСХ Крайнего Севера. 1974.- Т.20.- С.88-90.

94. Соломаха О.И. Некоторые морфологические особенности Fu-sobacterlum necrophorum/ О.И. Соломаха, Л.Б. Кириллов, И.Б. Павлова// Аграрная Россия.- 2000.- Ш,- С.59-61.

95. Тютиков Ф.М. Некоторые вопросы микробиологии возбудителя некробактериоза северных оленей/ Ф.М. Тютиков// Труды Магаданского Зонального НИИСХ Северо-Востока.- 1973.- вып.2.-С.51-58.

96. Цыпанов Д.М. Реакция оседания эритроцитов и формоловая реакция при некробациллезе северных оленей/ Д.М. Цыпанов// Советская ветеринария.- 1940.- Ш.- С.27-29.

97. Чан Б, Т.-Б. Выделение нуклеиновых кислот из клинических образцов и клеточных культур/ Б. Т.-Б. Чан// Молекулярная клиническая диагностика. Методы/ Под ред. С. Херрингтона, дж. Макги.- М.: Мир, 1999.- С.302-328.

98. Чеботарев А.Н. Опыт применения серологической диагностики некробациллеза оленей/ А.Н. Чеботарев// Тр. НИИ полярного земледелия, животноводства и промыслового хозяйства: Сер. "Оленеводство".- М.- Л., 1941.- вып. 15.- С. 9-27.

99. Черкасский Б.Л. Некробациллез/ Б.Л. Черкасский// Руководство по 3gghg2sm/ ас/д рёд. н.л. ПиКриБиКОГи." л.: М&дицик2,1983.- С.189-191.

100. Шагинян И. А. ЩР генетическое типирование патогенных микроорганизмов/ И.А. Шагинян, А.Л. Гинцбург// Генетика.- 1995.1.31.- С.600-510.

101. Шибата Д.К. Полимеразная цепная реакция и молекуляр-но-генетический анализ биоптатов/ Д. К. Шибата/'/ Молекулярная клиническая диагностика. Методы/ Под ред. С. Херрингтона, Дж. Мак-ги.- М.: Мир, 1999.- С.395-427.

102. Шумилов М.Ф. Некробактериоз северных оленей. Состояние, рекомендации/ М.Ф. Шумилов- Магадан: Кн. изд-во, 1973.- 55с.

103. Аглоако К.К. Comparison of extracellular enzymes of Fu-sobacterium necrophorum subps. necrophorum and Fusobacteriurn nec-rophorum subsp. funduliforme/" K.K. Arnoako, Y. Soto, I. Shinio// J. Clin. Microbiol.- 1993.- V.31.- Ш,- P.2244-2247.

104. Arnoako K.K. Study on the factors affecting- the hemolytic activity of Fusobacteriurn necrophorum/ K.K. Arnoako. Y. Goto, I. Shinjo// Vet. Microbiol.- 1994.- V.41.- №1-2.- P.11-18.

105. Attwood G. T. Ammonia hyperproducing1 bacteria from New Zealand ruminants/ G.I. Attwood, А.У. Klieve, D. Ouwerkerk et al.// Appl. Environ. Microbiol.- 1998.- V.64.- BIS.- P. 1796-1804.

106. Baffott D. Hoof lameness in dairy cattle/ D. Bamiott// In Pract.- 1982.- V74.- Ш.- P. 133-141.

107. Berg J.N. Fusobacteriurn necrophorum and Bacteroides me-laninogenicus as etiological agents of foot rot in cattle/ J.N. Berg, R.W. Loan// Am. J. Vetsr. Res.- 1975.- V.36.- №8.-P. 1115-1122.

108. Berg1 J.N. Studies of Fusobacteriurn necrophorum from bovine nepatic aosoesses: Diotypes, Quantitation, virulence and antibiotic susceptibility/ J.N. Беге, С.M. Scanlan// Am. J. Veter. Res.- 1982.- V.43.- №9.- P.1580-1536.

109. Berg" J.N. Identification of common antigens in riboso-rne-ricn extracts from Fusobacterium necrophorum/ J.N. Berg. J.W. Evans// Am. J. Veter. Res.- 1985.- V.45.- №1.- P.127-131.

110. Bicle T.A. The ATP-dependent restriction endonucleases/ T.A. Bicle// Proc. of Nuclease meet. Cold Spring- Harbor, 1981 -1982.- №8.- P. 85-108.

111. Birnboim H.C. A rapid alkaline extraction method for screening recombinant plasmid DNA/ И.О. Birnboim. J. Doly// Nuol. Acids Res.- 1979.- Vol.7- №6.- P.1513-1522.

112. Brook I. The relationship between Fusobacterium species and other flora in mixed infection/ I. Brook, I.J. Walker// Med, Microbiol.- 1986.- V.21.- Ш.- P.93-100.

113. Brown R. Phenotypic characteristics and lipopolysaccha-rides of human and animal isolates of Fusobacterium necrophorum/ R. Brown, H.6. Lough, I.R. Poxton// J. Med. Microbial.- 1997.-V.46.- №10.- P.873-878.

114. Clark B.L. Studies into immunization of cattle against interdigital necrobacillosis/ B.L. Clark, D.L. Emery, D.J. Stewart et al.// Aust. Vet. J.- 1986.- V.63.- №4.- P.107-110.

115. Clewell D.B. Supercoiled circular DNA-protein complex in Escherichia coli: purification and induced conversion to an open circular DNA form/ D.B. Clewell, D.R. Helinski// Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1969.- Vol.62.- N14.- P. 1159-1166.

116. Conrads G. 16S-2SS rRNA internal transcribed spacer sequences for analysis of the ohylogenetio relationships among spe„¿S 4-U.- rr, .^.-.V.4 / ¡-1 ,-(.,„ л rn П hi

117. Ultti Ui Lilt? '¿fiiUw Г USUUCHJLCi lLilii/ U, OUlUdUÛ, iVi.'w. Uidi UÛ. U.lVl.

118. Citron et ai./V Int. J. Syst. Evol. Microbiol.- 2002.- V.52.-N13.- P. 493-499.

119. Coyle-Dsnnis j.E. Biological and biochemical characteristics of Fusobacteriurn necrophorum leukocidin/ J.E. Coyle-Den-nis. L.H. Lauerrnan/7 Am. J. Vet. Res.- 197*8.- V.39.- №11.-F.1790-1793.

120. Dale J.W. Preparation of chromosomal DNA from E. coli/ J.W. Dale, P.J. Greenaway/V Methods in Molecular Biology. Vol.2. Nucleic Acids/ Ed. J.M. Walker.- Clifton, New Jersey: Humana Press. 1984.- P.197-200.

121. Emery D.L. Biochemical -and functional properties of a leukocidin produced by several strains of Fusobacteriurn necrophorum/ D.L. Emery, J.H. Dufty, B.L. Clark// Austral. Vet. J.-1984.- V.61.- N112.- P. 382-386.

122. Emery D.L. Cultural characteristics and virulence of strains of Fusobacteriurn necrophorum isolated from the feet of cattle and sheep/ D.L. Emery. J.A. Vaughan, B.L. Clark et al.// Aust. Vet. J. 1985.- V.62.- M2.- P.43-46.

123. Emery D.L. Generation of immunity against Fusobacteriurn necrophorum in mice inoculated with extracts containing ieukoto-xin/ D.L. Emery. J.A. Vaughan// Vet. Microbiol.- 1986.- V.12.-j\I3.- P. 255-268.

124. Eriich H.A. PGR-Technology/ H.A. Erlich- Perkin-Elmer Oetus, 1993.- 247p.

125. Fales W.H. Fluorescent antibody technique for identifying isolates of Sphaerophorus necrophorus of bovin hepatic abso ess origin/ W.H. Fales, G.W. Teresa// Am. J. Vet. Res.- 1972.

126. Ferris S. A meg-abase DMA electrophoresis system/ S. Ferris. S. Freeby, F. Zolier et al./7 Amer. Biotechnoi. Lab.-1989.- V. 7. P.36-42.

127. Forrester L.J. Aggregation of platelets by Fusobacteri-um necrophorum/ L.J. Forrester. B.J. Campbell, J.N. Berg, J.T. Barrett// J. Clin. Microbiol.- 1985.- ¥.22.- №2.- P.245-249.

128. Garcia M.M. Application of immunofluorescence to studies on the ecology of Sphaerophorus necrophorus/ M.M. Garcia, D.H. Neil, K.A. Mckay// Appl. Microbial.- 1971.- V.21.- №5.-P.809-814.

129. Hagelsl-qaer L.H. Incidence and clinical epidemiology of necrobacillosis, including Lemierre's syndrome, in Denmark 1990-1995/ L.H. Hagelsknaer, J. Prag, J. Malczynski, J.K. Kres-tensen// Eur. J. Clin. Infect. Dis.- 1998.- V.17.- №.-P.561-565.

130. Hagelsk.iaer L.H. Humen necrobacillosis, with emphasis on Lemierre's syndrome/ L.H. Hagelskjaer, J. Prag// Clin. Infec. Diseases.- 2000.- V.31.- №9.- P.524-532.

131. Highlander 5.K. DMA sequence of the Pasteurella Haerno-lytioa leukotoxin gene cluster/ S.K. Highlander, M. Chidambaram. M.J. Engler, G.M. Weinstock// DMA.- 1989.- V.8.- Ml.- P.15-28.

132. Innis M.A. PGR Protocols: A Guide to Methods and Applications/ M.A. Innis. D.H. Gelfand, J.J. Sninskv.- San Diego: Acadernic Press. 1090.- P. 177-183.

133. Jensen R. Unexpected cross-reaction with Fusobacterium neorophorum in a PGR for detection of micoplasmas/ R. Jensen, B. Bruun, B. Gabra-Hansen// J. Clin. Microbiol.- 1999.- V.27.- №3.-P.828-829.

134. Jin J. Characterization of the 16S-233 rRNA intergenio spacer regions among strains of the Fusobacterium neorophorum cluster/ J. Jin, D. Xu, W. Narongwanichgarn et al. // J. Vet. Med. Sci.- 2002.- V.64.- №3.- P.273-276.

135. Jonson D.W. Clinical investigation of infection foot rot of cattle/ D.W. Jonson, A.R. Dommert, D.G. Kiger// J. Am. Vet. Assoc.- 1959.- V.155.- №12.- P.1885-1891.

136. Kanoe M. Isolation of Fusobacterium neorophorum from bovine rurninai lesions/ M. Kanoe, Y. Izuohi, M. Toda// Jpn. J. Vet. Sci.- 1978.- V.40.- №3.- P.275-281.

137. Kanoe M. Attempt to detect bovine antibody against Fusobacterium neorophorum by the agar gel double diffusion test/ M. Kanoe, M. Toda// Japan. J. Veter. Sci.- 1979.- V.41.- №2.-P.97-102.

138. Kanoe M., Iwaki K. Adherence of Fusobacterium neorophorum to bovine rurninai cells/ M. Kanoe, K. Iwaki/7 J. Med. Microbiol.- 1987.- V.23.- №1.- P.69-73.

139. Keohavong P. Enzymatic amplification and characterization of large DNA fragments from genomic DMA/ P. Keohavong, C.C. Wang, R.S. Cha, W.G. Thilly/7 Gene.- 1988.- V.71.- P.211-216,

140. Khorana H.G. Total synthesis of the structural gene for the precursor of a tyrosine suppressor transfer RNA from E. coii/n.cs. ruiuj. ctwa. hheuvcii, r. otfainej. si cti. / / j. diujl. uieln."1976.- V.251.- P.565-670.

141. Kirn H.5. Recombinant fragment assay for gene target ting based on the polymerase chain reaction/ H.S. Kirn. u. Smithies// Nuci. Acids Res.- 1968.- ¥.16.- P.8887-8903.

142. Lechtenberg K.F. Bacterioiogio aid histologic studies of hepatic abscesses in cattle/ K.F. Lechtenberg. T.G. Nagarala, H.W. Leipold, M.M. Chengappa// Am. J. Vet. Res.- 1988.- V.49.n tr-~ cn

143. Lechtenberg K.F. Hepatic ultrasonography and blood changes in cattle with experimentally induced liver abscesses/ K.F. Lechtenberg, T.G. Nagarala// Am. J. Yet. Res.- 1991.- V.52.-M5.- P.803-809.

144. Lechtenberg K.F. Antimicrobial susceptibility of Fuso-bacteriurn necropnorum isolated from bovine hepatic abscess/ K.F. Lechtenberg. T.G. Nagarala, M.M. Chengappa''"/ Am. J. Veter. Res.-1998.- ¥.59,- N»1.- P.44-47.

145. Lundstrom A. The influence of bread, age, body weight and season on digital diseases and hoof size in dairy cows/ A. Lundstrom// Zentralbiatt fur Vetrinerkundizen.- 1981.- V.28.

146. Marmur J. A procedure for the isolation of deoxyribonucleic acid from microorganisms/ J. Marmur// J. Moi. Biol. -1961.- Vol.3.- P.208-218.

147. Marshall M.J. Characterization of Staphylococcus aureus beta-toxin induced leukotoxicity/ M.J. Marshall, G.A. Bohaoh, D.F. Boehm// J. Natural. Toxins.- 2000.- V.9.- P.125-138.

148. Mullis K. Specific enzymatic amplification of DNA in vitro: the polirnerase chain reaction/ K. Mullis, F. Faloona. S.- 9S

149. Scharf et ai.// Cold Spring' Harbor Symp. Quant. Biol., 1986.-V.51.- P.263-273.

150. Narayanan S.K. Cloning, Sequencing, and Expression of the Leukotoxin Gene from Fusobaoterium necrophorum/ S.K. Narayanan, T.G. Nagara.la, M.M. Cnengappa, G.C. Stewart // Infect. Immun.- 2001.- ¥.69.- >19.- P. 5447-5455.

151. Narayanan S.K. Leukotoxins of gran-negative bacteria/ S.K. Narayanan, T.G. Nagaraia, M.M. Chengappa, G.C. Stewart// Yet. Microbiol.- 2002.- ¥.84.- №4.- P.337-356.

152. Narongwanichgarn W. Differentiation of Fusobaoterium necrophorum subspecies from bovin pathological lesions by RAPD-PCR/ W. Narongwanichgarn, E. Kawaguohi, N. Misawa et ai.// Vet. Miorob.- 2001.- V.82.- N15.- P.383-388.

153. SB PCR/ H. Ochrnan. M.M. Medhora, D. Garza, D.L. Hart I// M. A. In-nis, D.H. Gelfand, J.J. Sninsky, T.J. White. PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications.- San Diego: Academic Press, 1990.- P.219-227.

154. Paabo S. Polymerase chain reaction reveals cloning artefacts/ S. Paabo, A.C. Wilson// Nature.- 1988.- ¥.334.-P.387-388.

155. Price S.B. Studies on bacterial synergism in mice infected with Bacteroides interrnedius aid Fusobakterium necrophorum/ S.B. Price, R.E, MoCallum// J. Basic. Microbial.- 1987.-¥.27.- M7.- P.377-386.

156. Resenchuk S.M. Alignment service: creation and processing of alignments of sequences of unlimited length/ S.M. Resenchuk, V.M. Blinov// Comput. Appl.Biosoi.- 1995,- №11.- P.7-11.

157. Rolfs A. PCR topics: Use of polymerase chain reaction in genetic and infections diseases/ A. Rolfs, H.O. Schumacher, P. Marx.- Springer Verlag, 1993.

158. Roberts D.S. Toxic, allergenic and immunogenic factors of Fusiformis necrophorus/ D.S. Roberts// J. Comp. Pathol.-1970,- ¥.80,- №8.- P.247-257.

159. Russell A.M. Survey of lameness in British dairy cattle/ A.M. Russell, G.J. Roulands, S.R. Shaw et ai.// Veter. Re-1 r.nn ir -1 -1 •*. \sn n -i c=r -1 en uuiu.- isoic.- v.xxj.,- riid.- f. xüü-1uu,

160. Ryohlin W. Optimization of the anneal im temperature for DNA amplification in vitro/ W. Rychlin. W.Y. Spencer, R.E. Rhoads// Nucleic Acids Res.- 1990.- V.1S.- P.6400-6414.

161. Saiki R.K. Enzymatic amplification of" b-globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia/ R.K. Saiki. S. Scharf, P.A. Faloona et al. // Science.- 1965.- V.230.- P.1350-1354.

162. Saiki R.K. Primer directed enzymatic amplification of DM with a thermostable DM polymerase/ R.K. Saiki, D.H. Galfand, S. Stoffel et al.// Science.- 1988.- V.239.- P.487-491.

163. Saginala 3. Effect of Fusobakterium necrophorum leukotoxoid vaccine on susceptibility to experimentally induced liver abscesses in cattle/ S. Saginala, T.G. Nagaraja, K.F, Lichtenberg et ai./7 J. Anim. Sei.- 1997.- V.75.- №4.- P.1160-1156.

164. Scanlan C.M. Comparative in vitro leukotoxin production of three bovine strains of Fusobakterium necrophorum/ C.M. Scanlan, J.N. Berg, w.H. Fales/V Am. J, Vet. Res.- 1982.- V.43.- №8.1. F. 1 oie a -1 Co 3.

165. Scanlan C.M. Comparative biological features of a rat liver abscess model induced with three Fusobacterium necrophorum strains/ C.M. Scanlan. J.N. Berg'., M.D. Lairmore// Am. J. vet. Res.- 1983.- V.44.- N19.- P. 1789-1792.

166. Scanlan C.M. Bovine rumenitis liver abscess complex: a bacteriological review/ C.M. Scanlan. T.L. Hathcock// Cornell Vet.- 1983.- V.73.- P.288-297.

167. Scanlan C.M. Comparative changes in a rat liver abscess model induced with three Fusobacterium necrophorum strains/ C.M. Scanlan. J.N. Berg// Am. J. Vet. Res.- 1986.- V.47.- №4.-?.924-927.

168. Scanlan C.M. Biochemical characterizationof leukotoxins of three bovine strains of Fusobacterium necrophorum/ C.M. Scanlan. J.N. Berg. F.F. Campbell// Am. J. Vet. Res.- 1986.- Vol.47.-M7.- P.1422-1425.

169. Scanlan C.M. A semiquantitative enzyme method for identifying Fusobacterium necrophorum biovars A and B/ C.M. Scanlan, A.H. Hoyumpa, P.O. Ainsworth// J. Vet. Diasn. Invest.- 1992.-V.4.- 111.- P.85-87.

170. Simon P.C. Cultivation and maintenance anaerobic medium for aerobic incubation/ P.C. Simon// Canad. J. Oomp. Med.- 1974.-V.38.- Nil.- P.94-98.

171. Simon P.C. A simple method for rapid identification of Sphaerophc-rus necrophorus isolates/" P.C. Simon// Canad. J. Comp. Med.- 1975.- V.39.- №3.- P.349-353.

172. Shinjo T. Adherence of Fusobacterium necrophorum biovar A and B strains to erythrocytes and tissue culture cells/ I. ¿ninju, b. MiyazsLG. H. Riyoysrns// Ann. lust. Psstsiir. MiGroDiol.- 198S.- V. 139.- M.- P.453-460.

173. Shinjo I. Recognition of biovar 0 of Fusobacteriurn necrophorum Moore and Hoideman as Fusobacteriurn pseudonecropnorum sp. nov., norn., rev/ T. Shin,jo. K. Hiraiwa. S. Miyazato// Int. Syst. Bacterid.- 1990.- V.40.- M.- P.71-73.

174. Shinjo I. Comparison of haemolytic activity between Fusobacteriurn necrophorum. subps. necrophorum and Fusobacteriurn necrophorum, subsp. funduliforme in vitro and in vivo/ T. Shinjo, N. Misawa, Y. Goto// AMPIS.- 1996.- V.104.- №1.- P.75-78.

175. Smith G.R. Pathogenicity of Fusobacteriurn necrophorum strains from man and animals/ G.R. Smith, E.A. Thornton// Epidemiol. Infect.- 1993.- V.110.- №3.- P.499-506.

176. O. Tan Z.L. Factors affecting' the leukotoxin activity of Fusobacteriurn necrophorum/ Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengap-pa// Vet. Microbiol.- 1992.- V.32.- №1.- P.15-28.

177. Tan Z.L. Biochemical and biological characterization of ruminal Fusobacteriurn necrophorum/ Z.L. Tan, T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa/7 FEMS Microbial. Lett.- 1994.- V.120.- №1-2.- P.81-86.

178. Tan Z.L. Biological and hiochmioai characterization of Fusobacteriurn necrophorum leukotoxin/ Z.L. Tan. T.G. Nagaraja, M.M. Chengappa. J.S. Smith// Am. J. Vet. Res.- 1994.- V.55.- №4.

179. Tail Z.L. Selective enumeration of Fusobaoteriurn neorophorum from the bovine rumen/ Z.L. Tan, T.G. Naearaja, M.M. Chen-gappa// Appl. Environ. Microbiol.- 1994.- V.60.- №4.

180. Tan Z.L. Fusobaoteriurn neorophorum infections: virulence factors, pathogenic mechanism, and control measures/ Z.L. Tan, T.G. Nagarala, M.M. Chengappa// Vet. Res. Commun.- 1995.- V.20.-N12.- P.113-140.

181. Warner J.P. Endotoxin from Fusobaoteriurn neorophorum of bovine hepatic abscess origin/ J.F. Warner, W.H. Fales, R.C. Sutherland, G.W. Teresa// Am. J. Vet. Res.- 1975.- V.36.- №7.-P.1015-1019.

182. Werner H. A serological study of strains belonging1 to Sphaerophorus necrophorus, Sphaerophorus varius, -and Sphaeropho-rus freundii/ H. Werner// Med. Microbiol. Immunol.- 1972.-V.157.- №4.- P.315-324.

183. Williams J.G.K. DNA polimorphisms amplified by arbitrary primers are useful as genetic markers/ J.G.K. Williams, A.R. Kubelik, K.J. Livan et al.// Nucleic Acids Res.- 1990.- V.18.-P.6531-6535.