Сравнительная эффективность живых вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» против эймериоза кур тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.11, кандидат наук Брылина Мария Александровна

  • Брылина Мария Александровна
  • кандидат науккандидат наук
  • 2019, ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина»
  • Специальность ВАК РФ03.02.11
  • Количество страниц 191
Брылина Мария Александровна. Сравнительная эффективность живых вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» против эймериоза кур: дис. кандидат наук: 03.02.11 - Паразитология. ФГБОУ ВО «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина». 2019. 191 с.

Оглавление диссертации кандидат наук Брылина Мария Александровна

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ключевые данные этиологии и патогенеза эймериоза кур

1.2. Морфологическая характеристика возбудителя эймериоза кур

1.3. Эпизоотологические данные эймериоза кур

1.4. Иммунитет против эймерий

1.4.1. Иммунная система желудочно-кишечного тракта птиц

1.4.2. Гуморальный иммунный ответ при эймериозе кур

1.4.3. Роль клеточного иммунитета при эймериозе кур

1.4.4. Роль цитокинов в иммунном ответе при эймериозе кур

1.5. Диагностика эймериоза кур

1.5.1. Оценка степени поражений кишечника характерных для эймериоза кур

1.5.2. Молекулярно - биологические методы диагностики эймериоза кур

1.6. Средства профилактики эймериоза кур и лечения больной птицы

1.6.1. Дезинвазия

1.6.2. Химиопрофилактика эймериоза кур

1.6.3. Иммунопрофилактика эймериоза кур

1.7. Заключение по обзору литературы

ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материалы и методы

2.1.1. Вакцинация цыплят аттенуированными вакцинами против

эймериоза

2.1.2. Метод подсчета количества ооцист эймерий в помете кур

2.1.3. Выделение, концентрирование и накопление ооцист эймерий из помета кур

2.1.4. Патологоанатомическое вскрытие и оценка степени поражений слизистой оболочки кишечника кур характерных для эймериоза

2.1.5. Гистологические и гистоморфометрические методы исследования слизистой оболочки кишечника кур

2.1.6. Метод ПЦР-РВ для анализа уровня экспрессии генов цитокинов в слизистой оболочке кишечника кур

2.1.7. Иммуногистохимический метод оценки локального иммунитета кишечника кур после вакцинации против эймериоза

2.1.8. Оценка иммуногенности вакцин методом экспериментального заражения кур вирулентными эймериями

2.2. Результаты исследований

2.2.1. Вакцинация цыплят против эймериоза кур

2.2.2. Оценка динамики прироста живой массы птицы и конверсии корма после вакцинации

2.2.3. Динамика выделения ооцист эймерий, входящих в состав вакцин

2.2.4. Патологоанатомическое и гистоморфологическое исследование слизистой оболочки кишечника кур

2.2.5. Гистоморфометрический анализ функционального состояния слизистой оболочки кишечника кур

2.2.6. Анализ уровня экспрессии генов цитокинов в слизистой

оболочке кишечника кур

2.2.7. Иммуногистохимическая оценка общего пула sIgA слизистой оболочки кишечника в поствакцинальный период

2.2.8. Содержание клеток-продуцентов sIgA в слизистой оболочке тонкого и толстого отделов кишечника кур после вакцинации

2.2.9. Создание биологической модели эймериоза кур для оценки эффективности исследуемых вакцин

ГЛАВА 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

ГЛАВА 4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

4.1. Выводы

4.2. Практическое использование полученных научных результатов

4.3. Рекомендации по использованию научных результатов

ГЛАВА 5. СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Перечень сокращений и условных обозначений

sIgA секреторный иммуноглобулин класса А

НЭ некротический энтерит

ИЛ-ip интерлейкин 1 бета

РНК рибонуклеиновая кислота

ДНК дезоксирибонуклеиновая кислота

кДНК комплементарная дезоксирибонуклеиновая кислота

рДНК рибосомальная дезоксирибонуклеиновая кислота

ПЦР-РВ полимеразная цепная реакция в режиме реального времени

PRR pattern recognition receptor - патоген распознающий рецеп-

тор

IgA иммуноглобулин класса А

sIgA секреторный иммуноглобулин класса А

OPG oocyst per gram - метод определения количества ооцист эй-

мерий в 1 грамме помета ИЭЛ интраэпителиальные лимфоциты

LP lamina propria - собственная пластинка слизистой оболочки

кишечника

ВВ:ГК соотношение высоты ворсин к глубине крипт

НК натуральные киллеры

АПК антигенпрезентирующие клетки

МНС major histocompatibility complex - главный комплекс гисто-

совместимости

MALT mucosal associated lymphoid tissues - мукозо-ассоциирован-

(МАЛТ) ная лимфоидная ткань

Th1, Т-х 1 Т-хелперы 1 типа, способствуют развитию клеточного иммунного ответа

Th2, Т-х 2 Т-хелперы 2 типа, способствуют развитию гуморального иммунного ответа

GALT gut associated lymphoid tissues - лимфоидные ткани, ассоци-

(КАЛТ) ированные со слизистой оболочкой кишечника

SPF specific pathogen free - свободный от специфических пато-

генных контаминантов ДК дендритные клетки

МФ Макрофаги

IgA иммуноглобулины класса А

sIgA секреторные иммуноглобулины класса А

IgM иммуноглобулины класса М

IgG иммуноглобулины класса G

ПБ пейровы бляшки

IgY иммуноглобулины класса Y

ИЛ - 1 интерлейкин

ИЛ - 2 интерлейкин

ИЛ - 6 интерлейкин

ИЛ - 10 интерлейкин

ИЛ - 16 интерлейкин

ВАФ(БАЕЕ) B-клеточный активационный фактор

НК натуральные киллеры

ФНО-а фактор некроза опухоли альфа

CD3 cluster of differentiation 3 - мультипротеиновый комплекс на

поверхности Т-лимфоцитов CD4 cluster of differentiation 4 - мономерный трансмембранный

гликопротеин, является маркером T-хелперов CD8 cluster of differentiation 8 - трансмембранный гликопротеин,

является маркером цитотоксических T-лимфоцитов РАМР pathogen-associated molecular patterns - консервативные

структуры микроорганизмов, общие для разных патогенов ИНФ-у интерферона гамма

TCRaP+ T-cell receptor ap - Т клеточный рецептор альфа бета

ТФР-Р трансформирующий фактор роста - бета

RAPD(nAn5) random amplified polymorphic DNA

произвольно амплифицированная полиморфная ДНК ITS1 и ITS2 internal transcribed spacers 1, 2 - внутренний транскрибируемый спейсер 1,

SCAR мар- sequence-characterized amplified region - характерная после-керы довательность амплифицируемого участка

LAMP loop-mediated isothermal amplification - изотермальная петле-

вая амплификация Mic 1 microneme protein 1 - протеин микронемы

SOCS Supressors of Cytokine Signaling - супрессоры передачи сиг-

нала цитокинами

STAT Signal Transducer and Activator of Transcription - активатор

транскрипции, участвующий в передаче сигнала PIAS Protein Inhibitors of Activated Stats - белки-ингибиторы ак-

тивированных молекул STAT

ВВЕДЕНИЕ

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Паразитология», 03.02.11 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Сравнительная эффективность живых вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» против эймериоза кур»

Актуальность и степень разработанности проблемы

Птицеводство в России и по всему миру, занимает лидирующее положение среди всех отраслей животноводства. Развитие промышленного птицеводства ежегодно обеспечивает растущую популяцию людей главным источником белка. Нельзя не отметить и высокую скороспелость птицы по сравнению с другими сельскохозяйственными животными.

Однако интенсивному развитию птицеводства во многом препятствуют заболевания, в том числе паразитарной этиологии, среди которых на первое место выходит эймериоз кур. По единогласному мнению отечественных и зарубежных ученых и практиков, эймериоз кур широко распространен во всех странах мира с развитым птицеводством [8, 23, 26, 51, 52, 59, 61, 92, 114, 116, 135].

Эймериоз кур, возбудителем которого являются паразитические простейшие, значительно отличается от вирусных и бактериальных инфекций рядом особенностей. Возбудитель имеет сложный многостадийный цикл развития в организме птицы (без промежуточного хозяина); профилактика и терапия заболевания дорогостоящая и трудоемкая; из-за особой устойчивости возбудителя во внешней среде и к дезинфектантам, проводимые мероприятия по уничтожению эймерий, малоэффективны.

Эймериоз является одним из наиболее экономически значимых заболеваний в промышленном птицеводстве с предполагаемым ущербом более 800 миллионов долларов в год в Соединенных Штатах Америки и более 3 миллиардов долларов каждый год по всему миру [46, 61, 115, 129, 130]. По меньшей мере, 70% от этой стоимости - это ущерб от субклинического эймериоза, характеризующегося снижением продуктивности поголовья птицы, включая снижение среднесуточного прироста массы и повышенную конверсию корма.

Экономический ущерб от клинического эймериоза складывается из резкой потери в продуктивности, гибели молодняка птицы, ухудшения качества мяса бройлеров, увеличения конверсии корма и затрат на лечебно-профилактические мероприятия [52, 61, 135].

Широкое распространение эймерий, высокая устойчивость ооцист эйме-рий к антикокцидийным средствам, возможность паразитирования одновременно нескольких видов эймерий у кур требует тщательного изучения инвазии в условиях промышленного птицеводства [50, 52, 127, 138].

Кроме того, в 2006 году в Европейском Союзе был введен запрет на использование кормовых антибиотиков при выращивании животных, после чего был сделан глобальный акцент на сокращение общего использования антибиотиков в животноводстве и резервирование их использования только для терапевтических целей [2, 6]. В США также произошли значительные изменения и, крупные производители ограничили использование антибиотиков [5].

В России в 2017 году правительство утвердило стратегию предупреждения распространения резистентности микроорганизмов к антимикробным препаратам в Российской Федерации на период до 2030 года. Основными причинами появления и распространения резистентности к антимикробным препаратам указаны: «...нерациональное и (или) бесконтрольное применение про-тивомикробных препаратов, химических и биологических средств в здравоохранении, сельском хозяйстве, в том числе животноводстве...», а также «недостаточная доступность средств диагностики устойчивости микроорганизмов к лекарственным препаратам в практическом здравоохранении и ветеринарии» [1]. В качестве решения проблемы были предложены мероприятия, направленные на ужесточение контроля применения антимикробных препаратов в гуманной медицине и ветеринарии, повышение уровня подготовки специалистов по вопросам, связанным с резистентностью к антимикробным препаратам и совершенствование мер по предупреждению и ограничению распространения возбудителей с резистентностью к антибиотикам [1].

В связи с глобальными изменениями в области применения антимикробных препаратов возникла необходимость пересмотреть производственную практику и оценить стратегии, которые могут способствовать снижению профилактического использования антибиотиков.

Несмотря на то, что антикокцидийные препараты пока не попали под запреты в России, Европе и США, тем не менее, запрет на использование кормовых антибиотиков способствует увеличению частоты возникновения и интенсивности эймериоза и бактериозов, в частности некротического энтерита [71]. Кроме того, сейчас во всем мире остро стоит проблема мультирезистент-ности эймерий к антикокцидийным препаратам, которые активно применяются для контроля данного заболевания [16, 22, 25, 29, 30, 39, 49, 108, 138].

Таким образом, перед производителями встала необходимость фундаментального пересмотра способов выращивания и менеджмента в птицеводстве, а также более тщательного рассмотрения альтернативных средств профилактики эймериоза. В связи с этим в настоящее время на первое место в качестве борьбы с эймериозом кур выходит иммунопрофилактика.

Племенные стада кур и кур-несушек при напольном содержании, в отличие от бройлеров, уже несколько десятилетий вакцинируют против эймери-оза, не применяя антикокцидийные препараты. Это связано с необходимостью формирования устойчивого иммунитета у птицы, чей цикл выращивания значительно превосходит по времени таковой у бройлеров. Кроме того, некоторые антикокцидийные препараты обладают эмбриотоксичностью, и потому недопустимы для применения в племенном стаде [52, 61, 88, 91, 116, 126].

Эймерии относятся к внутриклеточным паразитам и проявляют троп-ность к эпителиальным клеткам кишечника кур, что обуславливает активное взаимодействие эймерий с факторами мукозального иммунитета кишечника птицы [91, 114, 116, 125, 137]. Эпителиальные клетки слизистой оболочки кишечника кур служит не только местом паразитирования эймерий, но и первым значимым барьером врожденного иммунитета, препятствующим инвазии.

Как правило изучение локального иммунитета сводилось к количественному определению секреторных антител, однако существование у животных лимфоидной ткани, ассоциированной с кишечником (GALT - gut associated lymphoid tissues), подразумевает активную стимуляцию вакцинными штаммами эймерий не только факторов локального гуморального, но и клеточного иммунитета [42, 46, 53, 61, 102, 114, 131, 137]. При этом ключевую роль в противостоянии эймериям отводят локальному клеточно-опосредованному иммунитету, так как он способен эффективно бороться с пораженными паразитами клетками эпителия слизистой оболочки кишечника птицы [38, 46, 50, 59, 61]. При этом системный гуморальный иммунитет не играет существенной роли против эймерий [91, 101, 106, 114, 116, 125].

Иммунная система имеет основополагающее значение для здоровья птицы, и большое внимание сегодня уделяется оптимизации конструкции вакцин, таким образом, чтобы не ставить под угрозу, а улучшать продуктивность птицы и стада в целом. Достижение этой цели требует хорошего понимания поствакцинальных процессов в организме птицы после вакцинации, умения регулировать формирование иммунного ответа в нужном направлении. В связи с этой тенденцией в настоящее время создаются вакцины против эйме-риоза нового поколения, которые призваны стимулировать мукозальный клеточный иммунитет птицы с помощью добавления специальных адъювантов [81, 125, 135]. Внедрение адъювантов может позволить снизить антигенную нагрузку на организм и значительно упростить процесс вакцинации в связи со свойством адъювантов индуцировать защитные свойства слизистых оболочек, способности удерживать антиген в месте экспонирования лимфоцитам и увеличения иммуногенности «слабых» антигенов.

Однако на сегодняшний день существует недостаточно зарубежных и практически отсутствуют отечественные исследования и рекомендации по оценке поствакцинальной реакции и методам оценки мукозального иммунитета после вакцинации кур против эймериоза.

Комплексная оценка эффективности вакцин позволит всесторонне оценить формирование протективных механизмов мукозального иммунитета и их побочные эффекты на морфологию кишечника кур и его функциональное состояние, а значит позволит спрогнозировать потерю продуктивности птицы и повышение ее восприимчивости к вторичным бактериозам в зависимости от выбранной вакцины.

Цель и задачи исследований

Цель исследования - комплексная сравнительная оценка поствакцинальной реакции тонкого и толстого отделов кишечника кур и эффективности ат-тенуированных вакцин против эймериоза «Ливакокс Р» и «Эвалон».

В задачи исследования входили:

1. Вакцинация кур кросса Хайсекс Браун живыми аттенуирован-ными вакцинами «Ливакокс Р» и «Эвалон».

2. Оценка динамики прироста живой массы птицы и конверсии корма после вакцинации кур исследуемыми вакцинами.

3. Определение динамики выделения ооцист эймерий, входящих в состав исследуемых вакцин в окружающую среду.

4. Оценка патологоанатомических и гистоморфологических данных поствакцинальной реакции слизистой оболочки кишечника.

5. Гистоморфометрическая оценка функционального состояния слизистой оболочки кишечника кур.

6. Детализация воспалительного фона и направленности иммунного ответа в тонком и толстом отделах кишечника кур путем количественного определения экспрессии генов цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИНФ-у, ИЛ-10.

7. Оценка нарастания общего пула секреторного и б1§Л+ клеток в тонком и толстом отделах кишечника кур.

8. Создание биологической модели эймериоза кур для оценки эффективности исследуемых вакцин.

Научная новизна работы

Впервые в сравнительном аспекте оценена эффективность и поствакцинальные реакции вакцины против эймериоза кур нового поколения «Эвалон» (Hipra Lab., Испания) на основе живых ооцист эймерий E. acervulina, E. tenella, E. maxima, E. necatrix и E. brunetti с мукозальным адъювантом Montanide™, предназначенным для стимуляции локального иммунитета слизистых кишечника, и вакцины, традиционно используемой в хозяйствах России - «Ливакокс Q» (Biopharm, Чешская республика), содержащей живые ооцисты эймерий E. acervulina, E. tenella, E. maxima и E. necatrix.

Впервые в России оценены патологоанатомические, гистоморфологиче-ские и гистоморфометрические данные поствакцинальных изменений слизистой оболочки тонкого и толстого отделов кишечника кур под действием живых эймерий, в результате формирования иммунного ответа, а также их информативная значимость.

Получены новые данные по экспрессии генов цитокинов ИЛ-lß, ИЛ-2, ИЛ-10, ИНФ-у и проведен мониторинг уровней их экспрессии в клетках слизистой оболочки кишечника методом ПЦР-РВ с целью оценки уровня воспалительного фона, необходимого для активации адаптивного специфического иммунитета и прогноза направленности иммунитета, формирующегося в ответ на вакцинацию исследуемыми вакцинами.

Разработан метод, позволяющий оценить общий пул секреторного IgA и содержания клеток-продуцентов секреторного IgA в слизистой оболочке тонкого и толстого отделов кишечника кур, с помощью иммуногистохимической реакции.

Получены новые данные, касающиеся экспериментального заражения племенной птицы, вакцинированной аттенуированными вакцинами против эй-мериоза «Эвалон» и «Ливакокс Q» в возрасте 16 недель с целью оценки длительности и напряженности поствакцинального иммунитета на фоне умеренной иммуносупрессии.

Теоретическая и практическая значимость результатов

исследований

Предложена комплексная оценка поствакцинальных процессов, определяющих эффективность аттенуированных вакцин «Ливакокс Q» (Biopharm, Чешская республика) и «Эвалон» (Hipra Lab., Испания).

Получены новые данные о патологоанатомических, гистоморфологиче-ских и гистоморфометрических изменениях слизистой оболочки кишечника, позволяющих оценить воспалительный фон и функциональное состояние слизистой оболочки кишечника кур после вакцинации против эймериоза.

Получена новая информация, касающаяся экспрессии генов цитокинов ИЛ-ip, ИЛ-2, ИНФ-у и ИЛ-10 кур и их функций в слизистой оболочке кишечника методом количественной ПЦР с реакцией обратной транскрипции.

Получены данные по динамике накопления плазмоцитов, секретирую-щих IgA и общему пулу sIgA в секрете слизистых оболочек кишечника с помощью иммуногистохимического метода с использованием моноклональных антител к sIgA кур (Southern Biotechnology, США).

Оценена иммуногенность аттенуированных вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» путем экспериментального заражения кур Хайсекс Браун на 16 неделе после вакцинации на фоне иммуносупрессии, что представляет теоретический интерес для профилактики эймериоза кур у племенной птицы.

Полученные данные поствакцинальных изменений в организме кур позволяют оценить баланс между безопасностью вакцин и их иммуногенностью. Учитывая, что при однотипной динамике прироста живой массы тела кур, конверсия корма в группе «Эвалон» существенно ниже, а вакцинные штаммы эй-мерий обладают меньшим репродуктивным потенциалом и вызывают умеренные гистоморфологические и гистоморфометрические изменения в отделах кишечника, начиная с 14 суток (с 7 суток в группе «Ливакокс Q»); что установлен незначительный общий индекс поражений кишечника, низкий ин-

декс общего состояния кишечника; умеренный воспалительного фон, достаточный для формирования протективного адаптивного иммунитета, незначительная иммуносупрессия ИЛ-10 ведущих клеточных механизмов адаптивного иммунитета, повышенное количество в]£Л+ клеток в двенадцатиперстной кишке на 7 и 23 сутки после вакцинации, не выполняющих ведущей роли в протективном иммунитете; и учитывая высокую клиническую эффективность вакцины «Эвалон», где зафиксировали незначительное поражение двенадцатиперстной кишки и умеренное поражение подвздошной кишки у 12% птицы и отсутствие повреждений в слепых отростках кишечника при экспериментальном заражении, рекомендуем к применению живую аттенуированную вакцину «Эвалон как вакцину, оказывающую щадящее действие на слизистую оболочку кишечника кур и обладающую высокой протективной активностью для кур Хайсекс Браун в возрасте 16 недель, даже на фоне иммуносупрессии.

Полученные данные поствакцинальной реакции в организме кур позволят ветеринарным врачам планировать возможное проведение патогенетической терапии после вакцинации кур против эймериоза, направленную на минимизацию экономических затрат при возникновении нарушений пищеварения, развития бактериозов и увеличения конверсии корма.

Предложены методические положения «Современные методы оценки мукозального иммунного ответа кур после вакцинации против эймериоза», утвержденные руководителем секции зоотехнии и ветеринарии отделения сельскохозяйственных наук РАН, академиком РАН Калашниковым В.В. [18].

Подана заявка на патент «Методы оценки локального иммунного ответа после вакцинации против эймериоза кур путем выявления секреторного иммуноглобулина класса А в слизистой оболочке кишечника с помощью имму-ногистохимического исследования срезов замороженного материала». Номер заявки 2018120640, дата приоритета 04.06.2018.

Использованная в диссертации гистоморфометрическая оценка слизистой оболочки различных отделов кишечника кур может быть использована в

научных целях при дальнейшем изучении локального иммунитета кишечника кур и воздействия патогенов на состояние его слизистой.

Материалы диссертации могут быть использованы в научных целях при дальнейшем изучении локального иммунитета против эймерий и воздействия вакцинных штаммов эймерий на состояние слизистой оболочки кишечника

кур.

Полученные данные об особенностях развития локального иммунного ответа после вакцинации против эймериоза могут быть использованы в учебном процессе на кафедрах паразитологии и ветеринарно-санитарной экспертизы, эпизоотологии и микробиологии, иммунологии и биотехнологии, а также при написании соответствующих разделов учебников, учебных пособий и монографий.

Методология и методы исследований

При выполнении работы были применены методы зоотехнической оценки продуктивности птицы: взвешивание, оценка потребления и конверсии корма. Паразитологические методы исследования: флотационный метод Фю-ллеборна, подсчет инвазионных элементов в камерах МакМастера и Горяева, изоляция, концентрирование и накопление ооцист эймерий из помета. Пато-логоанатомические и патоморфологические методы исследования: гистомор-фология и гистоморфометрия сегментов кишечника птицы. Иммунологический метод: иммуногистохимическое исследование. Молекулярно-генетиче-ский метод: количественная ПЦР с реакцией обратной транскрипции в режиме реального времени. Биологический метод: экспериментальное заражение с целью оценки протективных свойств вакцин. Применены методы научного познания: наблюдение, интерпретация, обобщение.

Степень достоверности исследований

Достоверность результатов подтверждается большим объемом патоло-гоанатомических, гистоморфологических, гистоморфометрических, иммунологических, молекулярно-биологических исследований материала. Результаты работы определяются достаточным количеством проведенных исследований на животных. Экспериментальные исследования проведены автором по общепринятым методикам и обработаны методом статистического анализа c помощью программного обеспечения STATISTICA 7 и Microsoft Excel 2016.

Соответствие представленной работы паспорту специальности

Диссертационная работа соответствует паспорту специальности 03.02.11. - паразитология и содержит материалы исследований в следующих областях:

1. Изучение взаимоотношений в системе: хозяин - паразит (иммунология, патология, иммуногенетика хозяев).

2. Изучение клиники болезней животных, возникающей вследствие поселения паразитов в их органах, тканях и полостях.

3. Изыскание наиболее эффективных мер борьбы и профилактики паразитарных болезней животных.

Апробация и публикации результатов исследований

По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, в том числе 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ, 6 статей в сборниках научных трудов конференций, 1 методическое положение, 2 статьи в журналах.

Материалы по результатам исследований диссертации представлены на следующих региональных, международных научных конференциях и симпозиумах: Международная научно-практическая конференция, посвященная 95-летию со дня основания кафедры паразитологии и ветеринарно-санитарной

экспертизы МГАВМиБ им. К.И. Скрябина, Москва, 2015 год; I, II этапы Всероссийского конкурса на лучшую научную работу среди студентов, аспирантов и молодых ученых высших учебных заведений Минсельхоза России, Москва, Иваново, 2016 год; III Международный научно-практический симпозиум «Инновации в области повышения сохранности, кормления и технологии выращивания птицы», Черногория, 2016 год; IV Международный научно-практический симпозиум «Инновации в области повышения сохранности, кормления и технологии выращивания птицы», Кипр, 2017 год; II Международный паразитологический симпозиум, Санкт-Петербург, 2017 год; V Международный научно-практический симпозиум «Инновации в области повышения сохранности, кормления и технологии выращивания птицы», Турция, 2018 год; Международная конференция «Диагностика и профилактика болезней птиц в промышленном птицеводстве», Москва, 2019 год; 6 Международная конференция по вопросам здоровья кишечника птицы «ШБЮ», Рим, 2019 год; 4 Международный симпозиум по паразитарным болезням птицы, Вена, 2019 год.

Материалы диссертации были представлены на заседаниях ученого совета ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина.

Личный вклад автора при выполнении работы

Основной объем диссертационной работы проведен автором самостоятельно и включал в себя анализ отечественной и зарубежной литературы, планирование исследований, экспериментальная часть работы, анализ полученных данных и формулирование выводов. По данным системы «Антиплагиат» степень оригинальности работы составляет 84,88%.

В выполнении отдельных этапов работы принимала участие Стаффорд В. В. - к.б.н., старший научный сотрудник сектора патоморфологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко РАН (интерпретация резуль-

татов гистологических и иммуногистохимических исследований), а также сотрудники ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России под руководством Шиловского И. П. - заведующего лабораторией противовирусного иммунитета № 75 (консультации по ПЦР).

Благодарность

Автор выражает благодарность кафедрам паразитологии и ВСЭ во главе с Василевичем Ф.И., эпизоотологии и организации ветеринарного дела МГАВ-МиБ - МВА им. К.И. Скрябина и лично Сидорчуку А.А., сотрудникам ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ им. К.И. Скрябина и Я.Р. Коваленко РАН к.б.н. Стаффорд В. В. и Надточему Г.А. за готовность к сотрудничеству и помощи, заведующему лаборатории противовирусного иммунитета ФГБУ ГНЦ Институт иммунологии ФМБА России Шиловскому И. П., Камышникову О.Ю.

Структура и объем работы

Диссертация изложена на 191 страницах компьютерного набора и содержит следующие разделы: список сокращений и условных обозначений, введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, состоящие из глав материалы и методы и результаты исследований, обсуждение результатов исследования, заключение и список используемой литературы. Последний включает в себя 141 источника, из которых 106 зарубежных. Работа иллюстрирована 48 рисунками, включает 15 таблиц и 10 страниц приложений.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту

1. Комплексная оценка поствакцинальной реакции слизистых оболочек различных отделов кишечника кур на вакцинацию аттенуированными вакцинами против эймериоза кур «Ливакокс Р» и «Эвалон».

2. Сравнительный анализ конверсии корма, прироста живой массы птицы, динамики выделения ооцист эймерий в окружающую среду после вакцинации кур против эймериоза вакцинами «Ливакокс Р» и «Эвалон».

3. Патологоанатомические, гистоморфологические и гистоморфометриче-ские изменения слизистой оболочки кишечника кур в результате вакцинации «Ливакокс Р» и «Эвалон» и их информативная значимость.

4. Оценка нарастания общего пула sIgA и содержания клеток-продуцентов sIgA в слизистой оболочке тонкого и толстого отделов кишечника кур.

5. Мониторинг уровней локальной экспрессии генов цитокинов ИЛ-1Р, ИЛ-2, ИНФ-у, ИЛ-10 кур в кишечнике с целью оценки провоспалительного фона и прогноза направленности иммунного ответа, формирующегося в ответ на вакцинацию аттенуированными вакцинами «Ливакокс Р» и «Эвалон».

6. Оценка длительности иммунитета и иммуногенности вакцин «Ливакокс Р» и «Эвалон» на биологической модели эймериоза кур Хайсекс Браун в возрасте 16 недель на фоне иммуносупрессии дексаметазоном.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Ключевые данные этиологии и патогенеза эймериоза кур

Эймериоз кур (Eimeriosis avium, кокцидиоз) - протозойная болезнь, вызываемая паразитами семи разных видов эймерий. По мнению Бакулина В.А., Вершина И.И., Кириллова А.И., Мишина В.С., Chapman H.D., Dalloul R.A., Lillhoj H.S., Williams R.B., среди паразитарных болезней, эймериоз кур является основной причиной высокой смертности и низких показателей продуктивности в промышленном птицеводстве [8, 12, 23, 25, 52, 59, 92, 134].

Возбудителями заболевания являются паразитические простейшие - эй-мерии, относящиеся к типу Apicomplexa, классу Sporozoa, отряду Coccidia, семейству Eimeriidae, роду Eimeria [8, 10, 12, 13, 26].

Цикл развития эймерий представлен двумя стадиями: эндогенной, протекающей в организме хозяина и экзогенной, проходящей во внешней среде.

Эндогенная часть цикла развития эймерий делится на два этапа:

1. Препатентный период - с момента попадания и проникновения возбудителя в эпителий кишечника до появления первых ооцист, период протекает скрытно без проявления клинических признаков болезни. По Кириллову А. И. и другим авторам, в зависимости от вида он может длиться 4-6 суток (E. acer-vulina - 97 часов, E. tenella - 118, E. maxima- 123, E. brunetti- 120, E. necatrix -138, E. praecox- 84, E. mitis - 101).

2. Патентный период - период выделения ооцист с пометом при исключении возможной реинвазии птицы, длится от 10 до 18 суток в зависимости от вида эймерии [8, 10, 12, 13, 23, 26, 35, 36].

В фундаментальных трудах по эймериозу кур авторы Бакулин В. А., Вершин И. И., Кириллов А. И., Кэлнек Б. У., Chapman H. D. описывают условия, необходимые для споруляции ооцист эймерий, которая проходит во внешней среде в течение 24-96 часов при наличии кислорода, влажности и оптимальной температуры 18-29°С [8, 10, 12, 23, 38]. При низких температурах

время споруляции увеличивается. В зависимости от вида, ооцисты имеют круглую, овальную или яйцевидную форму, окруженную двухконтурной оболочкой, содержащей пигмент, цвет которого колеблется от слабожелтого до коричневого, у некоторых видов оболочка имеет серый или зеленоватый оттенок.

Инвазионная ооциста содержит четыре спороцисты, каждая спороциста формирует два спорозоита (рис. 1).

Рисунок 1 - Схема строения ооцисты [88]: 1 - полярная шапочка, 2 -микропиле, 3 - наружная оболочка, 4 - внутренняя оболочка, 5 - полярная гранула, 6 - штидовское тельце, 7 - спора, 8 - спорозоит, 9 - ядро спорозоита, 10 - полярное тельце спорозоита, 11 - остаточное тело споры, 12 - остаточное тело ооцисты

Заражение птиц происходит алиментарным путем в момент заглатывания спорулированных ооцист. Эндогенный цикл включает в себя 2-3 генерации бесполого (шизогония или мерогония) и половое (гаметогония) размножение. После проглатывания стенки ооцисты разрушаются в мускульном желудке, затем под действием химотрипсина и желчных солей в двенадцатиперстной кишке высвобождаются спрозоиты [8, 10, 12, 13, 23, 26, 35, 36].

Похожие диссертационные работы по специальности «Паразитология», 03.02.11 шифр ВАК

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Брылина Мария Александровна, 2019 год

- 14 с.

34. Сафиуллин Р. Т. Эффективность и экономичность Монлара, Кокци-сана и Элонкограна при эймериозе цыплят / Р. Т. Сафиуллин, А. П. Забашта // Труды ВИГИС. - М., 2002. - Т.38. - С.30-35.

35. Хейсин Е. М. Жизненные циклы кокцидий домашних животных : монография. Ленинград : Наука. Ленингр. отд-ние, 1967. — 194 с.

36. Хованских А. Е. Кокцидиоз сельскохозяйственной птицы / А. Е. Хованских, Ю. П. Илюшечкин, А. И. Кириллов; Л. : Агропромиздат, 1990. - 152 с.

37. Ятусевич А. И., Бирман Б. Я., Сандул А. В. Проблема эймериоза цыплят и пути ее решения / А. И. Ятусевич, Б. Я. Бирман, А. В. Сандул // Эпизоотология, иммунология, фармакология, санитария. - 2005. - № 1. -С. 11-14.

38. A Selective Review of Advances in Coccidiosis Research. Advances in Parasitology. V. 83. - Ch. 2. / H. D. Chapman, R. B. John [et al.]. Academic Press. -2013. - 376 p.

39. Adewole S. O. The efficacy of drugs in the treatment of coccidiosis in chicken in selected poultries / S. O. Adewole // Acad. Res. Intern. - 2012. - V.2, № 1. - P. 20-24.

40. Amer M. M. Isolation and Identification of Eimeria from Field Coccidiosis in Chickens / M. M. Amer, M. H. H. Awaad, M. Rabab // Journal of American Science. - 2010. - 66. Р. 1107-1114.

41. Akhtar M. Some Observations on The Sporulation of Oocysts of Genus Eimeria / M. Akhtar, I. U. J. Zafar, M. A. Hafeez // Pak. j. life soc. Sci. - 2003. - 1. -Р. 78 -79.

42. Ayaz M. M. Immunoglobulin producing cells in chickens immunized with Eimeria tenella gametocyte antigen vaccines / M. M. Ayaz, M. Akhtar, I. Hussain // Veterinarni medicina. - 2008. - 53. - P. 207-213.

43. Barkway C. P. Loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assays for the species-specific detection of Eimeria that infect chickens / C. P. Barkway, R. L. Pocock, V. Vrba, D. P. Blake // BMC Vet. Res. - 2011. - 7. - P. 1-14.

44. Blake D. P. Development and validation of real-time polymerase chain reaction assays specific to 4 species of Eimeria / D. P. Blake, Z. Qin, J. Cai, A. L. Smith // Avian Pathol. - 2008. - 37. P. 89-94.

45. Blake D. P. Securing poultry production from the ever-present Eimeria challenge / D. P. Blake, F. M. Tomley // Trends Parasitol. - 2014. - 30. - P. 12-19.

46. Byrnes S. Dynamics of cytokine production during coccidial infections in chickens: colony-stimulating factors and interfero / S. Byrnes, K. Emerson, M. H. Kogut // FEMS Immunology and Medical Microbiology. - 1992. - 6. - P. 45-52.

47. Castanona C.A.B. Biological shape characterization for automatic image recognition and diagnosis of protozoan parasites of the genus Eimeria / C. A. B. Castanona [et al.] // Pattern Recognition. - 2007. - 40. - P. 1899 - 1910.

48. Cervantes H. M. Incidence of subclinical diseases and pathological conditions in clinically normal broilers from 3 production complexes sorted by sex and age / 143rd Annual Convention of the American Veterinary Medical Association and 50th Annual Meeting of the American Association of Avian Pathologists. - Hawaii Convention Center, Honolulu, Hawaii. - 2006 July 15-19.

49. Chang W. H. Effects of glucocorticoid-induced stress on absorption of glycylsarcosine in jejunum of broilers / W. H. Chang [et al.] // Poultry Science. - 2015.

- 94. - P. 700-705.

50. Chapman H. D. A landmark contribution to poultry science-prophylactic control of coccidiosis in poultry/ H. D. Chapman // Poult. Sci. - 2009. - 88. - P. 813815.

51. Chapman H. D. Sustainable coccidiosis control in poultry production: the role of live vaccines / H. D.Chapman [et al.] // International Journal for Parasitology.

- 2002. - 32. - P. 617-629.

52. Chapman H. D. Forty years of monensin for the control of coccidiosis in poultry / H. D. Chapman, K.T. Jeffers, R. Williams // Poultry science. - 2010. - 89. -P. 1788-1801.

53. Chapman H. D. Vaccination of chickens against coccidiosis ameliorates drug resistance in commercial poultry production / H. D. Chapman, K.T. Jeffers // International Journal for Parasitology: Drugs and Drug Resistance. - 2014. -4.- P. 214 -217.

54. Choi K. D. Changes in local IFN-gamma and TGF-beta4 mRNA expression and intraepithelial lymphocytes following Eimeria acervulina infection / K. D. Choi, H. S. Lillehoj, D. S. Zarlenga // Vet. Immunol. Immunopathol. - 1999. - 71. - P. 263 - 275.

55. Choi K. D. Role of chicken IL-2 on gammadelta T-cells and Eimeria acervulina-induced changes in intestinal IL-2 mRNA expression and gammadelta T-

cells / K. D. Choi, H. S.Lillehoj // Veterinary immunology and immunopathology. -2000. - V. 73. - P. 309 - 321.

56. Conway D. P. Relationship of coccidial lesion scores and weight gain in infections of E. acervulina, E. maxima and E. tenella in broilers / D.P. Conway, M.E. Mckenzie, A.D. Dayton // Avian Pathology. - 1990. - 19. - P. 489-496.

57. Cruikshank W. W. Interleukin-16 / W. W. Cruikshank, H. Kornfeld, D. M. Center // J. Leukoc. Biol. - 2000. - 67. - P. 757 - 766.

58. Dalloul R. A. Unique responses of the avian macrophage to different species of Eimeria / R. A. Dalloul [et al.] // Molecular Immunology. - 44. - 2007. - P. 558

- 566.

59. Dalloul R. A. Recent Advances in Immunomodulation and Vaccination Strategies Against Coccidiosis / R. A. Dalloul, H. S. Lillihoj // Avian diseases. - 2005.

- 49. - P. 1 - 8.

60. Damer P. B. Securing poultry production from the ever-present Eimeria challenge / P. B. Damer, M. T. Fiona // Trends in parasitology. -2014. - V. 30, Is. 1. -P. 12 - 19.

61. De Gussem M. Coccidiosis in poultry: Review on diagnosis, control, prevention and interaction with overall gut health / M. De Gussem // 16th European Symposium on Poultry Nutrition. Materials. - 2007. P. 1 - 9.

62. Degen W. Th1/Th2 polarization by viral and helminth infection in birds / W. Degen [et al.] // Veterinary microbiology. - 2005. - 105. - P. 163-167.

63. Deng W. The probiotic Bacillus licheniformis ameliorates heat stress-induced impairment of egg production, gut morphology and intestinal mucosal immunity in laying hens / W. Deng [et al.] // Poultry science. - 2012. - 91. - P. 575 - 582.

64. Ding X. Protective immunity against Eimeria acervulina following in ovo immunization with a recombinant subunit vaccine and cytokine genes / X. Ding [et al.] // Infect. Immun. - 2004. - 72. Р. 6939 - 6944.

65. Dohms J. E. Metabolism and passive transfer of immunoglobulins in the turkey hen / J. E. Dohms, Y. M. Saif, W. L. Bacon // Am. J. Vet. Res. - 1978. - 39. - P. 1472 - 1481.

66. Dome J. L. Risk assessment of coccidostatics during feed cross-contamination: Animal and human health aspects / J. L. Dorne [et al.] // Toxicology and Applied Pharmacology. - 2011. - 270. - P. 196 - 208.

67. Du A. Efficacy of a DNA vaccine delivered in attenuated Salmonella typhimurium against Eimeria tenella infection in chickens / A. Du, S. Wang // Int J Parasitol. - 2005. - 35. - P. 777 - 785.

68. Fernandez S. A multiplex PCR assay for the simultaneous detection and discrimination of the seven Eimeria species that infect domestic fowl / S. Fernandez [et al.] // Parasitology. - 2003. - 127. - P. 317 - 325.

69. Gasser R. B. High-throughput capillary electrophoresis for the identification and differentiation of seven species of Eimeria from chickens / R. B. Gasser [et al.] // Electrophoresis. - 2005. - 26. - P. 3479 - 3485.

70. Hamidinejat H. Characterization of Eimeria species in commercial broilers by PCR based on ITS 1 regions of rDNA / H. Hamidinejat [et al.] // Iran J. Parasitol.-2010. - 5. - P. 48 - 54.

71. Harris G. U.S. Tightens Rules on Antibiotics Use for Livestock / G. Harris // The New York Times. - 2012. - 12 April.

72. Heriveau C. Inhibition of Eimeria tenella replication after recombinant IFN-g activation in chicken macrophages, fibroblasts and epithelial cells / C. Heriveau [et al.] // Veterinary Parasitology. - 2000. - 92. - P. 37 - 49.

73. Hoerr F. J. Clinical Aspects of Immunosuppression in Poultry / F. J. Hoerr // Avian diseases. - 2010. - 54. - P. 2 - 15.

74. Hoerr F. J. Histopathologic Assessment of Gut for Poultry Production and Applied Research / F. J. Hoerr, J. Schrader // Arkansas Nutrition Conference. Materials. Sep. 9, 2016.

75. Hong, Y. H. Analysis of chicken cytokine and chemokine gene expression following Eimeria acervulina and Eimeria tenella infections / Y. H. Hong, H. S. Lillehoj [et al.] // Vet. Immunol. Immunopathol. - 2006. - 114. - P. 209 - 223.

76. Isobe T. Effects of Corticosteroids on Lymphocyte Subpopulations and Lymphokine Secretion in Chickens / T. Isobe, H. S. Lillehoj // Avian diseases. - 1992. - 36. - P. 590 - 596.

77. Isobe T. Dexamethasone suppresses T cell-mediated immunity and enhances disease susceptibility to Eimeria mivati infection / T. Isobe, H. S. Lillehoj // Veterinary immunology and immunopathology. - 1993. - 39. - P. 431 - 446.

78. Jeongmi Y. Effects of Simple and Disposable Chicken Cages for Experimental Eimeria Infections / Y. Jeongmi, H. K. Sung, J. Jipseol // Korean J Parasitol. -V. 49. - 2011. - P. 299 - 302.

79. Johnson W. T. Avian coccidiosis / W. T. Johnson // Poult. Sci. - 1923. -2. -P. 146 - 163.

80. Johnson J. Anticoccidial drugs: Lesion scorings techniques in battery and floor-pen experiments with chickens / J. Johnson, W. Reid // Amer. Experimental Par-asitology. - 1970. - 28. - P. 30 - 36.

81. Kadykalo S. The value of anticoccidials for sustainable global poultry production / Kadykalo S. [et al.] // International Journal of Antimicrobial Agents.-2017. - 51. - P. 3 - 7.

82. Kaiser P. Differential cytokine expression in avian cells in response to invasion by Salmonella typhimurium, Salmonella enteritidis and Salmonella gallinarum / Kaiser P. [et al.] // Microbiology. - 2000. - 146. - P. 3217 - 3226.

83. Kaspers B. Investigations on the transfer of maternal immunoglobulins and the ontogenesis of immunoglobulin synthesis in the domestic chicken / B. Kaspers // Dissertation thesis, University of Munich, Munich, Germany. - 1989. - 116 p.

84. Khalafalla R. E. Single oocyst infection: a simple method for isolation of Eimeria spp. from the mixed field samples / R. E. Khalafalla, A. Daugschies // Parasitol Res. - 2010. - 107. - P. 187 - 198.

85. Kogut M. H. Priming by recombinant chicken interleukin-2 induces selective expression of IL-8 and IL-18 mRNA in chicken heterophils during receptor-mediated phagocytosis of opsonized and nonopsonized Salmonella enterica serovar

enteritidis / M. H. Kogut, L. Rothwell, P. Kaiser // Mol Immunol. - 2003. - 40. - Р. 603 - 610.

86. Laurent F. Analysis of chicken mucosal immune response to Eimeria ten-ella and Eimeria maxima infection by quantitative reverse transcription-PCR / F. Laurent [et al.] // Infect. Immun. - 2001. - 69. - P. 2527 - 2534.

87. Leroith D. Knock your SOCS off! / D. Leroith, P. Nissley // J Clin Invest. - 2005. - 115. - P. 233 - 236.

88. Levine N. D. Coccidiosis. Review / N. D. Levine // Annual Rev. Microbiol. - 1963. - 17. - P. 179 -198.

89. Lillehoj H. S. Recombinant chicken interferon-gamma-mediated inhibition of Eimeria tenella development in vitro and reduction of oocyst production and body weight loss following Eimeria acervulina challenge infection / H. S. Lillehoj, K. D. Choi // Avian Dis. - 1998. - 42. - P. 307 - 314.

90. Lillehoj H. S. Recent progress on the cytokine regulation of intestinal immune responses to Eimeria. Review / H. S. Lillehoj, W. Min, R.A. Dalloul // Poult. Sci. - 2004. - 83. - P. 611 - 623.

91. Lillehoj H. S. Avian gut associated lymphoid tissues and intestinal immune responses to Eimeria parasites / H. S. Lillehoj, J. M. Trout // Clinic Microbial Review. - 1996. - 9. - P. 349 - 360.

92. Lillehoj H. S. Recent progress in understanding host mucosal response to avian coccidiosis and development of alternative strategies to mitigate the use of antibiotics in animal production / H. S. Lillehoj [et al.] // Korean J. Poult. Sci. - 2012. -38. - P. 275 - 284.

93. Long P. L. The Biology of the Coccidia / P. L. Long // University Park Press, Baltimore. - 1982. - 54 p.

94. MacMicking J. Nitric oxide and macrophage function / J. MacMicking, Q. W. Xie, C. Nathan // Annual Rev. Immunol. - 1997. - 15. - Р. 323 - 350.

95. MacPherson J. M. Differentiation of seven Eimeria species by random amplified polymorphic DNA / J. M. MacPherson, A. A. Gajadhar // Vet. Parasitol. -1993. - 45. - P. 257 - 266.

96. Mahmood A. Effect of Ionophores on Some Parameters of Broilers Experimentally Infected with Eimeria Species / A. Mahmood, A. Mumtaz [et al.] // International journal of agriculture & biology. - 2001. - 4. - P. 469 - 471.

97. Marugan-Hernandez V. Viral proteins expressed in the protozoan parasite Eimeria tenella are detected by the chicken immune system / V. Marugan-Her-nandez [et al.] // Parasites & Vectors. - 2016. - 9:463. - P. 1 - 14.

98. Mathis G. F. Increased level of Eimeria sensitivity to diclazuril after using a live coccidial vaccine / G. F. Mathis, Broussard C. // Avian Diseases. - 2006. - 50. -P. 321 - 324.

99. McDonald V. Eimeria mitis: A comparison of the endogenous developmental stages of a line selected for early maturation and the parent strain / V. McDonald, M. Shirley // Parasitology. - 1984. - 88. - P. 37 - 44.

100. McLoughlin D. K. The influence of dexamethasone on attempts to transmit Eimeria meleagridis to chickens and E. tenella to turkeys / D. K. McLoughlin // J. Protozool. - 1969. - 16. - P. 145 - 148.

101. Min W. Recent progress in host immunity to avian coccidiosis: IL-17 family cytokines as sentinels of the intestinal mucosa / W. Min [et al.] // Developmental and Comparative Immunology. - 2013. - 41. - P. 418 - 428.

102. Mockett A. P. Immune responses to Eimeria: Quantification of antibody isotypes to Eimeria tenella in chicken serum and bile by means of the ELISA / A. P. Mockett, M. E. Rose // Parasite Immunol. - 1986. - 8. - Р. 481 - 489.

103. Momburg F. Modulation of Transporter Associated with Antigen Processing (TAP)-Mediated Peptide Import into the Endoplasmic Reticulum by Flavivirus Infection / F. Momburg, A. Müllbacher, M. Lobigs // Journal of virology. - 2001. - 75. - P. 5663 -5671.

104. Morgan J. A. T. Real-time polymerase chain reaction (PCR) assays for the specific detection and quantification of seven Eimeria species that cause coccidiosis in chickens / Morgan J.A.T. [et al.] // Mol Cell Probes. - 2009. - 23. - P. 83-89.

105. Morris G. M. Biotechnological advances in the diagnosis of avian coccidiosis and the analysis of genetic variation in Eimeria / G. M. Morris, R. B. Gasser // Biotechnology Advances. - 2006. - 24. - P. 590 - 603.

106. Muir W.I. Immunity, vaccination and the avian intestinal tract / W.I. Muir, A.J. Bryden, A.J. Husband // Developmental & Comparative immunology. -2000. - № 24. - P. 325 - 342.

107. Novick D. Receptor Isolation and Characterization. In: De Ley M. (eds) Cytokine Protocols / D. Novick, M. Rubinstein // Methods in Molecular Biology. -2004. - V. 249. - Р. 65 - 80.

108. Peek H. Resistance to anticoccidial drugs of Dutch avian Eimeria spp. field isolates originating from 1996, 1999 and 2001 / H. Peek, W. Landman // Avian Pathology. - 2003. - 32. - P. 391 - 401.

109. Perdigon G. Immunimodulating effects of lactic acid bacteria on mucosal and tumor immunology / G. Perdigon [et al.] // Int. J. Immunotherapy. - 1993. - № 9. - Р. 29 - 52.

110. Post J. Physiological Effects of Elevated Plasma Corticosterone Concentrations in Broiler Chickens. An Alternative Means by Which to Assess the Physiological Effects of Stress / J. Post, J. M. J. Rebel, A. A. H. M. Huurne // Poultry Science. -2003. - 82. - P. 1313-1318.

111. Rothwell L. Cloning and Characterization of Chicken IL-10 and Its Role in the immune response to Eimeria maxima / L. Rothwell [et al.] // The Journal of Immunology. - 2004. - 173. - P. 2675-2682.

112. Rose-John S. IL-6 trans-signaling: The heat is on / S. Rose-John, M. F. Neurath // Immunity. - 2004. - 20. - P. 2 - 4.

113. Ryan R. Mapping and expression of microneme genesin Eimeria tenella / R. Ryan, M. Shirley, F. Tomley // Int. J. Parasitol. - 2000. - 30. - Р. 1493 - 1499.

114. Schat K. Avian Immunology 2nd Edition / K. Schat, B. Kaspers, P. Kaiser; Academic Press. - London. - 2013. - 456 p.

115. Sharman P. A. Chasing the golden egg: vaccination against poultry coccidiosis / P. A. Sharman [et al.] // Parasite Immunology. - 2010. - 32. - P. 590 - 598.

116. Shirley M. W. The long view: a selective review of 40 years of coccidio-sis research / M. W. Shirley, H. S. Lillehoj // Avian Pathology. - 2012. - 41:2. - P. 111-121.

117. Smith A. L. An aß T-cell-independent immunoprotective response towards gut coccidia is supported by y5 cells / A. L. Smith, A. C. Hayday // Immunology.

- 2000. - 101. - P. 325 - 332.

118. Stafford V.V. Application of immunohistochemestry in diagnostics / V.V. Stafford // Russian journal of Agricultural and Socio-Economic Sciences. - 2016.

- V.56. - №8. - P. 18 - 21.

119. Strober W. The immunology of mucosal models of inflammation / W. Strober, I.J. Fuss, R. S. Blumberg / Annu. Rev. Immunol. - 2002. - 20. - P. 495 - 549.

120. Strober W. Reciprocal IFN-y and TGF-ß responses regulate the occurrence of mucosal inflammation / W. Strober [et al.] // Immunol. Today. - 1997. - 18.

- P. 61-64.

121. Stucki U. Eimeria tenella: characterization of a 5S ribosomal RNA repeat unit and its use as a species-specific probe / U. Stucki, R. Braun, I. Roditi // Exp. Par-asitol. - 1993. - 76. - P. 68 - 75.

122. Swaggerty C. L. Selection for pro-inflammatory mediators produces chickens more resistant to Eimeria tenella / C. L. Swaggerty, I. Y. Pevzner, M. H. Kogut // Poultry Science. - 2015. - V. 94, Is. 1. - P. 37 - 42.

123. Tang X. Transgenic Eimeria tenella as a vaccine vehicle: expressing TgSAG1 elicits protective immunity against Toxoplasma gondii infections in chickens and mice / X.Tang [et al.] // Scientific Reports. - 2016. - 6. - P. 1 - 9.

124. Teirlynck E. Morphometric evaluation of "dysbacteriosis" in broilers / E. Teirlynck, M. De Gussem [et al.] // Avian pathology: journal of the W.V.P.A. - 2011.

- 40. - P. 139 - 144.

125. Tellez G. Coccidiosis: recent advancements in the immunobiology of Eimeria species, preventive measures, and the importance of vaccination as a control tool against these Apicomplexan parasites / G. Tellez [et al.] // Veterinary Medicine: Research and Reports. - 2014. - 23. - P. 23 - 34.

126. Tewari A. K. Control of poultry coccidiosis: changing trends / A. K. Tewari, B. R. Maharana // J. Parasit. Dis. - 2011. - 35:1. - Р. 10 - 17.

127. Tyzzer E. Coccidiosis in Gallinacecus Birds / E. Tyzzer // Amer. J. Hyg. - 1929. - V. 10. - P. 269 - 283.

128. Vrba V. Quantitative real-time PCR assays for detection and quantification of all seven Eimeria species that infect the chicken / V. Vrba, D. P. Blake, M. Poplstein // Vet. Parasitol. - 2010. - 174. - P. 183 - 190.

129. Wade B. The true cost of necrotic enteritis / B. Wade, A. Keyburn // World Poultry. - 2015. - 31. - P. 16 - 17.

130. Waldenstedt L. An estimation of the cost of coccidiosis to Swedish broiler production / L. Waldenstedt // Proceedings of XII World's Poultry Congress, 8-13 June 2004. - Istanbul, Turkey.

131. Wallach M. Role of antibody in immunity and control of chicken coccidiosis / M. Wallach // Trends in Parasitology. - 2010. - 26. - P. 382 - 387.

132. Wallach M. Maternal immunization with gametocyte antigens as a means of providing protective immunity against Eimeria maxima in chickens / M. Wallach [et al.] // Infect Immun. - 1992. - 60. - P. 2036 - 2039.

133. Williams R. B. Quantification of the crowding effect during infections with the seven Eimeria species of the domesticated fowl: its importance for experimental designs and the production of oocyst stocks / R. B. Williams // Int. Journal for parasitology. - 2001. - 31. - P. 1056-1059.

134. Williams R. B. Anticoccidial vaccines for broiler chickens: pathways to success / R. B. Williams //Avian Pathology. - 2002. - 31. - Р. 317 - 353.

135. Williams R. B. Fifty Years of Anticoccidial Vaccines for Poultry (19522002) / R. B. Williams // Avian Diseases. - 2002. - 46:4. - P. 775 - 802.

136. Young H. A. Current Prospects of Type II Interferon Gamma Signaling and Autoimmunity / H. A. Young, D. S. Green, J. C. Valencia // JBC Papers in Press. Published as Manuscript R116.774745. - 2017. - 26. - P. 475 - 481.

137. Yun C. H. Intestinal immune responses to coccidiosis / C. H. Yun, H. S. Lillehoj, E. P. Lillehoj // Dev Comp Immunol. - 2000. - 24. - P. 303 - 324.

138. Zhao X. A simple method of DNA extraction for Eimeria species / X. Zhao, D. W. Duszynski, E. S. Loker // J. Microbiol. Methods. - 2001. - 44. - P. 131 -137.

139. Zhang J. J. Investigation into the prevalence of coccidiosis and madu-ramycin drug resistance in chickens in China / J. J. Zhang [et al.] //Veterinary parasitology. - 2012. - 191. - P. 29 - 34.

140. Национальный центр биотехнологической информации США : [сайт]. URL : https://www.ncbi.nlm.nih.gov/snp (дата обращения 27.02.2019).

141. База данных изображений ооцист эймерий COCCIMORPH : [сайт]. URL: www.coccidia.icb.usp.br/coccimorph (дата обращения 27.02.2019).

ПРИЛОЖЕНИЯ

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РФ Фыерымо« Госумрстаиим Бюджете** Обраюитедио» Учреи«лм Выел»го Обрл ювлни

■■МОСКОВСКАЯ ТОО"ДАРСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ВЕГЕИШАИГОЙ МЕДИЦИНЫ И БИОТЕХНОЛОГИИ - МВА иеяяКИ СКРЯБИНА..

M(IQJD4«(KU( ПОЛОЛ.?HU*

К АСЕЕВ А МА. ВАСИЛЕЭИЧ ФИ

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ОЦЕНКИ МУКОЗАЛЬНОГО ИММУННОГО ОТВЕТА КУР ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ

IVniKUirreibtctiftH wtiimwn и

■стер1т1шр#м лгд*тгино £СЛЬС<ИСПЮ11*ГГИН|Ш1I'Ail,

itt>« I'Ail, lULKKHb PAH K^idii.ti II». I.i В В

ПРОШВ ЭНМЕРН01А

Моим. 201S

ИНСТРУКЦИЯ

по применению вакцины Ливакокс Q против кокцидиоза птиц аттенуированной

(организация-разработчик; «BIOPHARM, Research Institute of Biopharmacy and Veterinary Drugs, a.s.», Чешская республика)

I. Общие сведения

1. Торговое наименование: Ливакокс® О (Livacox® О)

Международное непатентованное наименование - вакцина против кокцидиоза птиц аттенуированная.

2. Лекарственная форма: суспензия для выпаивания и спрей-метода (живая вакцина).

Вакцина изготовлена из апггенуированных спорулированных кокцидий (эймерий) птиц 4 вариантов (E.tcnelia, E.acervulma, E.maxima и Е.necatrix), суспендированных в 1% растворе хлорамина К.

По внешнему виду вакцина представляет собой бесцветную сусиензию.

Вакцина расфасована по 10; 20; 50 и 100 мл (1000; 2000; 5000 и 10000 прививных доз) в пластиковые флаконы соответствующей вместимости. Флаконы укупорены завинчивающимися крышками с контролем первого вскрытия.

3. Флаконы с вакциной упакованы в картонные коробки. В каждую коробку вкладывают инструкцию по се применению на русском языке.

Срок годности вакцины - 9 месяцев с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования, lio истечении срока годности вакцина к применению не пригодна.

4. Вакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2°С до 8°С. Не допускается замораживание вакцины,

5. Вакцину следует хранить в местах, недоступных для детей,

6. Флаконы е вакциной без этикеток, е истекшим сроком годности, с нарушением целостности и/или герметичности укупорки, с измененным цветом и/или консистенцией содержимого, с наличием посторонней примеси, подвергшиеся замораживанию, а также остатки вакцины, неиспользованные в день вскрытия, подлежат выбраковке и обеззараживанию путем кипячения в течение 20 минут или обработки 2% раствором щелочи или 5% раствором хлорамина (1:1) в течение 20 минут.

Утилизация обеззараженной вакцины пе требует соблюдения специальных мер предосторожности.

II. Биологические свойства

7, Вакцина вызывает формирование иммунного ответа к возбудителям кокцидиоза (Е. fenella, E.acervulina, E.maxima, Е.necatrix) через 10-14 дней после применения, который сохраняется пожизненно.

В 1 Mil вакцины содержится по 30000-50000 спорулированных ооцист Е. tenella, E.acervulina и Е.maxima и 10000 спорулированных ооцист E.necatrix.

Вакцина безвредна, лечебными свойствами пс обладает.

1П. Порядок применения

8. Вакцина предназначена для профилактики кокцидиоза кур.

9. Запрещается прививать клинически больную и/или ослабленную птицу.

10. Вакцинируют цыплят в возрасте 1-10 суток однократно энтерально с питьевой водой и методом распыления (спрей-метод).

Метод выпаивания

Вакуумные поилки, используемые для выпаивания вакцины, тщательно моют без применения дезсредств. Количество поилок должно обеспечивать свободный доступ к вакцине всего иммунизируемого поголовья.

Для приготовления рабочего раствора вакцины используют чистую питьевую воду, свободную от иолов хлора и железа, охлажденную до комнатной температуры.

Количество воды, необходимое для разведения вакцины, рассчитывают по формуле: количество прививаемых цыплят умножают на 1 мл и возраст цыплят в сутках. Например: для вакцинации 5000 голов цыплят 4-х суточного возраста необходимо 20 литров воды (5000 х 1,0 х 4=20000 мл, куда добавляют 50 мл вакцины (5000 х 0,01=50 мл). Во избежание попадания эймерий в центральную систему водоснабжения подготовленный раствор вакцины наливают в поилки вручную из расчета 0,01 мл па I подлежащую прививке птицу. Перед применением флакон с вакциной аккуратно встряхивают п течение 30 секунд для обеспечения равномерного распределения ооцист.

Перед вакцинацией птицу выдерживают без воды и корма в течение 2 часов. Кормление и поение разрешается после полного потребления вакцинного раствора (примерно через 1-2 часа).

Спрей- метод

Метод вакцинации путем круп но ди спер с hoi о распыления применяют для цыплят суточного возраста в инкубаторах.

Рабочий раствор вакцины готовят непосредственно перед применением, используя чистую питьевую воду, свободную от ионов хлора и железа из расчета 1 мл (100 доз) вакцины на 19 мл воды для каждых 100 цыплят. Во время вакцинации необходимо отключить систему вентиляции и обогрева, закрыть вентиляционные отверстия, снизить уровень освещения.

Цыплят, помещенных в ящики, обильно опрыскивают и выдерживают минимум 3 часа после вакцинации. Вакцинацию проводят при помощи распылителей любой конструкции, генерирующих монодисперсные частицы диаметром 20-50 мкм. Распылители должны быть коррозийно-устойчивы, не содержать остатков дезинфектантов и использоваться только для вакцинации. Контролем правильно проведенной вакцинации будет служить слегка намокшее оперение птицы.

Через 15 минут после вакцинации следует включить систему вентиляции и отопления, восстановить уровень освещения.

11. Симптомов проявления кокцидиоза или других патологических признаков при передозировке вакцины не установлено. В случае пропуска введения вакцины необходимо провести иммунизацию как можно скорее.

12. Особенностей иоетвакцннальной реакции при однократной иммунизации не установлено.

13. Следует избегать нарушений схемы проведения вакцинации, поскольку тго может привести к снижению эффективности иммунопрофилактики кокцидиоза.

14. При применении вакцины в соответствии с настоящей инструкцией побочных явлений и осложнений, как правило, не отмечается.

15. Запрещено применять вакцину Ливакокс® О одновременно с другими лекарственными средствами против кокцидиоза и химиогерапевтическими препаратами, использовать с кормом и водой кокцидиостатики и антибиотики, обладающие антикокцидийной активностью, включая тетрациклины, сульфа- и нитрофураны за 2 дня перед вакцинацией, во время ее проведения и в течение 14 дней после ее окончания.

16. Продукты убоя и яйцо от вакцинированной птицы реализуют без ограничений.

IV, Меры личной профилактики

17. При проведении вакцинации следует соблюдать правила личной гигиены и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами ветеринарног о назначения.

18. Вес лица, участвующие в проведении вакцинации, должны быть одеты в спецодежду (резиновые сапоги, халат» брюки, головной убор, резиновые перчатки) и обеспечены индивидуальными средствами защиты: очками закрытого типа. После работы следует тщательно вымыть руки с мылом и переодеться. В местах работы должна быте. аптечка первой доврачебной помощи.

19. При попадании вакцины на кожу и/или слизистые оболочки их рекомендуется промыть большим количеством водопроводной воды. В случае разлива вакцины, зараженный участок пола или почвы заливают 5% раствором хлорамина или едкого натрия.

20. Организация-производитель: «ВЮРНАКМ, Research Institute of Rio pharmacy and Veterinary Drugs, a.s.», Pohori-Chotoun, 254 49 Jilove u Prahy, Czech Republic.

Инструкция разработана компанией «Vetnet Europe Ltd.», Соединенное Королевство совместно с организацией-производителем компанией «BIOPHARM, Research Institute of Biopharmacy and Veterinary Drugs, a.s.». Чешская республика.

С утверждением настоящей Инструкции утрачивает силу Инструкция по применению вакцины «Ливакокс® О», утвержденная 14 января 2010 г.

Рекомендовано к регистрации в Российской Федерации ФГБУ «ВГПКИ».

Номер регистрационного удостоверения

СОГЛАСОВАНО Заместитель Руководителя Россельхознагш

iff^-y

III ГТП"'

-V 1 Ь- Ob: 2i )lß

т

ИНСТРУКЦИЯ

по применению вакцины ЭВАЛОН против кокцидиоза птиц живой

с разбавителем

Организация - разработчик: «Лабораторное Хипра С,А.», адрес: Авда ла Сельва, 155

17170 Амер (Жирона) Испания

1. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ

1. Торговое наименование: ЭВАЛОП (EVALON).

Международное непатентованное наименование: Вакцина против кокцидиоза птиц живая с разбавителем.

2. Лекарственная форма: вакцина - суспензия для применения методом крупнодисперсного распыления; разбавитель - раствор для подготовки вакцины к применению методом крупнодисперсного распыления.

Одна прививная доза вакцины (0.007 мл) содержит не менее 332 - 450 ооцист Eimeria acervulina (штамм 003), 213-288 ооцист Eimeria brunette (штамм 034), 196-265 ооцист Eimeria maxima (штамм 013), 340-460 ооцист Eimeria necatrix (штамм 033) и 276374 ооцист Eimeria tenella (штамм 004). суспензированных в фосфатно-буферном растворе (pH 7,0-8.0).

Вакцина поставляется к комплекте со специальным разбавителем Хипрамун Т (HIPRAMUNE Т), содержащим красители Brilliant Blue (Е 133) и Allura Red АС (Е 129), адьювант Montanide и ароматизатор ванилин,

3. По внешнему виду вакцина представляет собой белую непрозрачную жидкость, а разбавитель - темно-коричневую непрозрачную жидкость.

Срок годности вакцины 11 месяцев, разбавителя 12 месяцев с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. Допускается использование вакцины в течение 10 часов после вскрытия флакона. По истечении срока годности вакцина и разбавитель к применению не пригодны.

4. Вакцина расфасована по 1000 прививных доз (объем 7,0 мл), 50U0 прививных доз (объем 35,0 мл) или 10000 прививных доз (объем 70,0 мл), а разбавитель - но 50 мл (для 1000 прививных доз вакцины), 250 мл (для 5000 прививных доз вакцины) или 500 мл (для 10000 прививных доз вакцины) в стеклянные и пластиковые флаконы соответствующей вместимости. Флаконы герметично укупорены резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками. Флаконы с вакциной и разбавителем упакованы в картонные коробки. В каждую коробку вкладывают инструкцию по применению вакцины на русском языке.

5. Вакцину и разбавитель хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2°С до 8°С. Замораживание вакцины и разбавителя не допускается,

6. Вакцину и разбавитель следует хранить в недоступном для детей месте.

7. Флаконы с вакциной и разбавителем без этикеток, с истекшим сроком годности, с нарушением целостности и/или герметичности укупорки, с измененным цветом и/или консистенцией содержимого, с наличием посторонней примеси, подвергшиеся замораживанию, а также остатки вакцины, не использованные в течение 10 часов после пскрыгим флаконов, подлежат выбраковке и обеззараживанию путем кипячения в течение 20 минут или обработке 2% раствором едкой щелочи или 5% раствором хлорамина (1:1) в

течение 30 минут.

Утилизация разбавителя и обеззараженной вакцины не требует соблюдения специальных мер предосторожности.

8.Отпускается без рецепта ветеринарного врача.

II. БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА

% Фармакотерапевтическая группа: Живые противопаразитарные вакцины против кокцидий.

10 Вакцина вызывает формирование иммунного ответа у цыплят к возбудителям кокцидиоза птиц в течение 3 недель после однократного применения, который сохраняется не менее 60 недель. Вакцинация предотвращает проявление клинических признаков, поражений кишечника и выделения ооцист при эймериозе, вызванном Eimeria aeervulina, Eimeria brunetti, Eimeria maxima, Eimeria necatrix и Eimeria Icnellu.

Вакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.

III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ

11. Вакцина предназначена для профилактики кокцидиоза птиц в племенных и товарных птицеводческих хозяйствах различного направления выращивания.

12. Запрещено прививать клинически больную и/или ослабленную птицу.

13. Цыплят вакцинируют однократно 1 дозой вакцины, начиная с суточного возраста, методом крупнодисперсного распыления (спрей-метод).

Вакцинацию проводят при помощи специальных распылителей любой конструкции, генерирующих монодисперсные частицы диаметром > 200 цт. Распылители должны быть коррозийно-устойчивы, не содержать остатков дезинфектантов и использоваться только для вакцинации.

Флакон с разбавителем тщательно встряхивают и разводят в чистой свежей воде 23)ПС свободной от ионов железа н хлора, из расчета: 50 мл и 223 мл воды (общий объем т мл)' 250 мл и 1115 мл воды (общий объем 1365 мл); 500 мл и 2230 мл воды (общии

объем 2730 мл).

Флакон с вакциной встряхивают разбавителем по следующей схеме.

содержимое смешивают с подготовленным

Количество доз вакцины во флаконе

1000

5000

10000

Объем раствора вакцины па 100 голов цыплят

28 мл

¿а мл

28 мл

Объем воды

223 мл

1365 мл

2730 мл

Объем вакцины

7 мл

J5 мл

70 мл

Объем разбавителя

50 мл

250 мл

500 мл

Общий объем вакцины и

подготовленного разбавителя

280 мл

1400 мл 2800 мл

Подготовленным раствором вакцины заполняют емкость для распыления для спрей-кабинетов. спрей-машин и распылителей любой конструкции из расчета 28 мл раствора на 100 гопов цыплят. Вакцину разбрызгивают над соответствующим количеством цыплят с расстояния 30-40 см. Обеспечивают гомогенизацию раствора вакцины в процессе обработки цыплят, периодически встряхивая (помешивая) емкость с препаратом.

Для повышения эффективности вакцинации цыплят выдерживают в транспортной таре до I часа после обработки с целью обеспечения максимального потребления

препарата.

В первые 3 недели после вакцинации система содержания цыплят должна обеспечивать их контакт с фекалиями для повторного потребления вакцинных ооцист.

Дтя предупреждения потери протективных свойств вакцины запрещается в течение

3 недель после иммунизациии использовать противоэймериозные препараты или другие «Тва'Гвные в отношении эймерий, которые отрицательно влияют на размножение вакцинных ооциСТ и ре инфицирование ими поголовья.

Ши Симптомов проявления кокцидиоза или других Х -

прпетозиоовке вакцины не установлено. Высокая передозировка (более чем 10-ти кратная) м о >к ет принее 1ик временному снижению суточных привесов в течение первой недели в! .нашивания не оказывающих влияния на итоговую продуктивность.

Т оГбсиносгей поствакцинальной реакции при иммунизации не установлено ,6. Возможно применение для цыплят, начиная с суточного возраста, всех пород и

нарушений установленного срока проведения вакцинации,

поскольку это может привести к снижению ее эффективности.

Тпри при-нении вакцины ЭВАЛОН в соответствии с настоящей инструкцией

" АЛ ОН на формирование иммунитета при

одновременном применении с другими профилактическими ==" *

20. Продукты убоя и яйцо, полученные от вакцинированной птицы, реализуют ограничений, независимо от сроков вакцинации.

IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ при работе с вакциной следует соблюдать общие правила личной гигиены, и техники безопасности, предусмотренные при работе с лекарственными средствами

Вет^™Г™уюгцие в проведении вакцинации, должны быть в спецодежде (хала г "брюки или комбинезон, резиновые сапоги, головной убор, резиновые п=) и вспенены индивидуальными средствами защиты (очки закрытого типа, респираторы). В ивгтях паботы должна быть аптечка первой доврачеонои помощи.

23 При попадании вакцины на кожу и/или слизистые оболочки, их Р=™ует

ТШ заливают 5% раствором хлорамина или едкого натрия.

участок пола или почвы :

Наименования и адреса производственныX площадок производителя лекарственного препарата для ветеринарного применения.

«Лабораторное Хипра С.А.» адрес: Авда ла Сельва, 135-17170 Амер (Жирона). Испания

Наименование, адрес организации, уполномоченной держателем или владельцем

регистрационного удостоверения лекарственного препарата на принятие претензий от потребителя.

«Лабораторное Хипра С.А.» адрес: Авда ла Сельва, 135-17170 Амер (Жирона), Испания

С утверждением настоящей инструкции утрачивает силу инструкция по применению вакцины ЭВАЛОН против кокцидиоза птиц живой с разбавителем, утвержденной Заместителем Руководителя Россельхознадаора 18 августа 2015 года.

Номер регистрационного удостоверения 724-1-5.15-2742 № ПВИ-1-5.15/045УЗ

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКО! О ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

Федеральное государственное бюджетное обран»вательное учреждение

высшего образования «Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К\И. Скрябина»

В диссертационный совет Д.220.042.06 на базе ФГБОУ ВО МГАВМиБ -МВА имени К.И. Скрябина

СПРАВКА

о внедрении результатов диссертационной работы Брылиной М. А, «Сравнительная эффективность живых вакцин «Л ива кокс Q» н «Эвалон» против жчериоза кур»

Настоящим подтверждаем, что материалы диссертации Брылиной М. А. на тему: «Сравнительная эффективность живых вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» против эймериоза кур», обладают высокой актуальностью, представляют большой практический интерес и внедрены в учебный процесс в ФГБОУ ВО МГАВМиБ - МВА имени К.И. Скрябина. В частности: Внедрены в учебный процесс при изучении студентами факультета «Ветеринарной медицины» дисциплин «Паразитология» и «Ветеринарная иммунология»:

I. «Паразитология»: использованы новые данные о патологоанатомических, гистоморфологических и

гистоморфометрических изменениях слизистой оболочки кишечника, позволяющих оценить состояние слизистой оболочки кишечника кур после вакцинации против эймериоза; данные оценки иммуногенности аттенуироваппых вакцин «Ливакокс Q» и «Эвалон» путем экспериментального заражения кур Хайсекс Браун на 16 неделе после вакцинации.

Проректор по учебной работе ФГБОУ ВО МГАВМиБ -МВА нменн К,И. Скрябина

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ НАУЧНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ФЕДЕРАЛЬНЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВСЕРОССИЙСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ВЕТЕРИНАРИИ ИМЕНИ К.И. СКРЯБИНА И Я.Р. КОВАЛЕНКО РОССИЙСКОЙ АКАДЕМИИ НАУК» <ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН)

ФГБПУ ФНЦ ВИЭВ РАН В диссертационный совет

г. Москва, ул. Рязанский Д.220.042.06 на базе

о внедрении результатов диссертационной работы Брыл иной М. А.

«Сравнительная эффективность живых вакцин «Ливакоке О» и «Эвалон» против эймерйоза кур» в научно-исследовательской

деятельности

Подтверждаем, что результаты диссертационного исследования Брыл и ной М.А. нашли отражение в выполнении научно-исследовательских работ, проводимых н секторе патоморфологии ФГБНУ ФНЦ ВИЭВ РАН при гистологическом исследовании кишечника кур, а также при иммуногистохимических исследованиях общего пула секреторного 1§А с целью оценки мукозального иммунитета кишечника кур.

проспект, д. 24. к. 1 Е-таП: admin@viev.ru Тел: +7 (495) 970-03-68 +7 (495) 970-03-69

ФГБОУ ВО МГАВМиБ МВД имени К,И. Скрябина г. Москва, ул. Академика Скрябина, д. 23

СПРАВКА

« Jd » __2019 г.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.