Цито-биохимические маркеры воспаления при обострении хронической обструктивной болезни легких на фоне противовоспалительной терапии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.43, Дементьева, Елена Александровна

• Дементьева, Елена Александровна
• 2005

Оглавление диссертации Дементьева, Елена Александровна

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. ХРОНИЧЕСКАЯ ОБСГРУКТИВНАЯ БОЛЕЗНЬ ЛЕГКИХ: СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ.

1.1. Некоторые вопросы этиологии ХОБЛ.

1.2. Современные представления о патогенезе ХОБЛ.

1.2.1. Миелопероксидаза, ее функции и место в патогенезе ХОБЛ.

1.2.2. Протеиназы, значение в норме и при патологии.

1.2.3. Регуляция активности протеолитических ферментов.

1.3. Проблемы и перспективы медикаментозного лечения хронической обструктивной болезни легких.

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.L Объект исследования.

2.1.1. Клиническая характеристика групп исследования.

2.1.2. Лабораторные и инструментальные методы.

2.2. Характеристика лечения.

2.3. Специальные методы исследования.

2.3.1. Цитохимическое определение активности миелопероксидазы нейтрофилов в мазках крови и мокроты.

2.3.2. Определение активности эластазоподобных протеиназ.

2.3.3. Определение активности трипсиноподобных протеиназ в плазме крови и мокроте.

2.3.4. Определение активности ai-протеиназного ингибитора и ci2-макроглобулина плазмы 1фови и мокроты.

2.3.5. Определение активности кислотостабильных ингибиторов плазмы крови и мокроты.

2.4. Статистическая обработка результатов.

ГЛАВА 3. АНАЛИЗ АКТИВНОСТИ МИЕЛОПЕРОКСИДАЗЫ НЕЙТРО-ФИЛОВ, ПРОТЕИНАЗ, ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНАЗ В КРОВИ И МОКРОТЕ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКШВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ КУРЕНИЯ, ЭТИОЛОГИИ ОБОСТРЕНИЯ.

3.1. Характеристика реакции на миелопероксидазу в нейтрофилах у больных хронической обструктивной болезнью легких в зависимости от фактора курения и этиологии обострения.

3.2. Активность протеиназ и ингибиторов при хронической обструктивной болезни легких в фазе обострения.

ГЛАВА 4 ХАРАКТЕРИСТИКА ЦИТОБИОХИМИЧЕСКИХ МАРКЕРОВ ВОСПАЛЕНИЯ В ПРОЦЕССЕ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЬНЫХ С ОБОСТРЕНИЕМ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ.

4.1. Сравнительная оценка цитобиохимических маркеров в зависимости от наличия клинического эффекта при терапии обострения ХОБЛ.

4.2. Клиническая эффективность терапии фенспиридом.

4.3. Сравнительная динамика активности миелопероксидазы нейтрофилов в зависимости от вида базисной терапии.

4.4. Сравнительная динамика активности протеиназ и ингибиторов протеиназ в зависимости от вида базисной терапии.

ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Цито-биохимические маркеры воспаления при обострении хронической обструктивной болезни легких на фоне противовоспалительной терапии»

Актуальность работы. Хроническая обструктивная болезнь легких относится к числу наиболее распространенных заболеваний человека. В структуре заболеваемости она входит в число лидирующих по числу дней нетрудоспособности, причинам инвалидности и занимает четвертое место среди причин смертности. Как ожидается, это заболевание станет третьей по причине смерти в общей заболеваемости и пятой по причине инвалидности в мире к 2020 г. (Айсанов З.Р. и соавт., 2001; WHO workshop (GOLD), 2001; Барнес ПД, 2003). Хроническая обструктивная болезнь лёгких у подавляющего большинства больных развивается постепенно, под влиянием различных факторов риска Среди них главную роль играют ингаляции табачного дыма при курении, частые респираторно-вирусные инфекции и экологический кризис (Новожёнов В.Г., Белоногов М.А., 1996; Овчаренко С.И., 2001; Кокосов А.Н., 2000). Одним из важнейших механизмов развития и прогрессирования хронической обструкгивной болезни лёгких является воспаление, которое играет первичную роль в формировании всего комплекса патологических изменений (Ollerenshaw S.L., Woolcock A.J., 1992; Barnes P.J., 1995). Биомаркёрами этого воспаления, особенно в фазу обострения заболевания, являются нейтрофилы с высокой активностью миелопероксидазы, нейгрофильной эластазы (Чучалин АГ.,2000; Hoidal J.R., Jeffery Р.К., 1998; Barnes P.J., 2000).

Нейтрофилы тя эластаза участвует в разрушении компонентов тканевого матрикса, приводя к формированию эмфиземы лёгкого (JanofF А., 1985; Stockley R.A., 1999). Основными регуляторами активности этого агрессивного фермента являются плазменные ai-протеиназный ингибитор и агмакроглобулин, а также внесосудистые кислотостабильные ингибиторы, которые определяют атжцютеолитическую активность бронхиального секрета (Оглоблина О.Г., 1982; Дубровин С.М, 2000; Веремеенко КН., 1988; Stockley R.A., 2000,2002).

При взаимодействии протеолигических ферментов и их ингибиторов должно сохраняться определённое равновесие, которое нарушается при хронической обструкгивной болезни лёгких из-за несовершенства эндогенных ангипротеиназных механизмов (Barnes P.J., 2003; Stockley R.A., 2001). В тггературе имеются данные об активности эластазы, кислотостабильных ингибиторов, ai-протеи-назного ингибитора в бронхоальвеолярных смывах, плазме крови при различных бронхолёгочных заболеваниях (Веремеенко КН., 1971-1988; Stockley R.A. 2000, 2002; Макинский А.И. и соавт., 2000; Оглоблина О.Г., 1982). Вместе с тем, данные об активности миелопероксидазы нейтрофилов, протешшз и ингибиторов в мокроте у больных хронической обструкгивной болезнью лёгких практически отсутствуют, а сведения об этих показателях в крови при этом заболевании ограничены. Учитывая вышеизложенное, изучение биологических маркёров воспаления в крови и мокроте у больных хронической обструкгивной болезнью лёгких весьма актуально, так как позволит выяснить диагностическую ценность каждого из них.

Важнейшим направлением исследований по проблеме хронической обструк-тивной болезни лёгких является поиск лекарственных средств, способных тормозить воспаление, лежащее в основе этого заболевания. В последние годы появился противовоспалительный препарат фенспирид, который по химическому строению и фармакологическим свойствам отличается от стероидных и несгероидных средств. Эффективность фенспирида при лечении хронической обструкгивной болезни лёгких показана в ряде зарубежных и отечественных клинических исследований (Овчаренко С.И., 2001, Evard Y., Kato G. et aL, 1991, Akoun G. Et aL, 1991, Melloni В., 2002; Безлепко A.B., 2001). Исследование активности миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в крови и мокроте при лечении этим препаратом позволит охарактеризовать эффективность его противовоспалительного действия у больных хронической обструктивной болезнью лёгких.

Цель исследования

Оценить активность миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в крови и мокроте при обострении хронической обструктивной болезни лёгких, изучить влияние противовоспалительной терапии на клинические и цито-био-химические показатели.

Задачи исследования

1. Изучить активность миелопероксидазы нейтрофилов, эластазы, трипсино-подобных протеиназ, агпротеиназного ингибитора, агмакроглобулшш и кислото-сгабильных ингибиторов в крови у больных хронической обструктивной болезнью лёгких.

2. Изучить показатели активности миелопероксидазы нейтрофилов, протеииаз и ингибиторов в мокроте у больных хронической обструктивной болезнью лёгких.

3. Изучить влияние курения на активность миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в крови и мокроте больных хронической обструктивной болезнью лёгких.

4. Изучить влияние инфекции на активность миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в крови и мокроте больных с обострением хронической обструктивной болезни лёгких.

5. Выявить циго-биохимические показатели, являющиеся критериями эффективности лечения обострения хронической обструктивной болезни лёгких.

6. Провести сравнительный анализ эффективности терапии фенспиридом и ипратропиума бромидом обострения хронической обструктивной болезни лёгких.

Научная новизна

Впервые дана характеристика активности миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в мокроте больных хронической обструктивной болезнью лёгких. Установлено, что в патогенезе обострения хронической обструктивной болезни лёгких существенное значение имеет повышение активности миелопероксидазы нейтрофилов, эластазы, трипсиноподобных протеиназ, ai-протеиназного ингибитора, агмакроглобулина и снижение активности кислотостабильных ингибиторов мокроты. В крови активность миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов не изменяется. Показано, что курение у здоровых приводит к повышению активности трипсиноподобных протеиназ в плазме крови и мокроте, у больных хронической обструктивной болезнью лёгких сопровождается увеличением числа активных нейтрофилов, повышением активности трипсиноподобных протеиназ и снижением активности ai-протеиназного ингибитора в мокроте. Обострение хронической обсгрукгивной болезни лёгких инфекционной этиологии приводит к повышению активности аг-макроглобулина в мокроте.

Выявлено, что определение активности миелопероксвдазы нейгрофилов, эластазы, ai-протеиназного ингибитора и кислотосгабильных ингибиторов в мокроте позволяет контролировать эффективность лечения больных с обострением хронической обсгрукгивной болезнью лёгких, при этом установлено более выраженное действие противовоспалительного препарата фенспирида по сравнению с ипратропиума бромидом.

Теоретическая и практическая значимость

Изучена проблема взаимодействия протеиназ и их ингибиторов плазмы крови и мокроты больных хронической обсгрукгивной болезнью лёгких. Важное значение для характеристики состояния больных имеют цито - биохимические показатели мокроты. Установлено, что обострение хронической обсгрукгивной болезни лёгких сопровождается активацией нейгрофилов, протеиназ и ингибиторов, участвующих в воспалительных и деструктивных процессах бронхолёгочной системы. Цитохимическое и биохимическое исследование мокроты у больных хронической обсгрукгивной болезнью лёгких позволяют оценивать эффективность лечения обострения этого заболевания. При эффективной терапии обострения хронической обсгрукгивной болезни лёгких уменьшается число активных нейгрофилов, активность эластазы, ai-протеиназного ингибитора, повышается активность кислотосгабильных ингибиторов в мокроте. Полученные данные вносят вклад в понимание роли воспаления в патогенезе хронической обструктивной болезни лёгких и эффективности противовоспалительной терапии.

Основные положения, выносимые на защиту 1. При хронической обструктивной болезни лёгких наблюдаются существенные изменения цито-биохимических показателей в мокроте. Для обострения заболевания характерна высокая активность миелопероксвдазы нейгрофилов мокроты, коррелирующая с выраженностью основных симптомов обострения заболевания.

В мокроте больных повышена активность протеиназ и ингибиторов на фоне низкой активности кислотосгабильных ингибиторов. У курящих больных хронической обструкшвной болезнью лёгких активность ai-протеиназного ингибитора в мокроте снижена

2. Активность миелопероксидазы нейтрофилов, эласгазы, ai-протеиназного и кислотосгабильных ингибиторов мокроты являются показателями эффективности лечения обострения хронической обструкшвной болезни легких. После лечения происходит снижение активности миелопероксидазы нейтрофилов, эласгазы, а также восстанавливается активность ai-протеиназного и кислотосгабильных ингибиторов в мокроте больных.

3. Применение противовоспалительного препарата фенспирида при лечении обострения хронической обструкшвной болезни легких способствует более выраженному, по сравнению со стандартной терапией, улучшению клинической картины, снижению активности миелопероксидазы нейтрофилов, эласгазы, нормализации активности ai-протеиназного и кислотосгабильных ингибиторов в мокроте.

Апробация диссертации

Основные материалы опубликованы в 21 печатной работе, доложены на IV международном конгрессе молодых учёных и специалистов «Науки о человеке», Томск, 15-16 мая 2003 г., на ХШ национальном конгрессе по пульмонологии в Санкт-Петербурге (2003), на Европейских респираторных конгрессах в Стокгольме (2002) и в Вене (2003).

Внедрение

Результаты исследования внедрены в практическую работу пульмонологического отделения городской больницы №3 г. Томска, в практическую деятельность ООО «Центр иммунопатологии» г. Томска, в учебный процесс кафедры иммунологии с аллергологией СибГМУ.

Объем и структура диссертации.

Работа изложена на 127 листах машинописного текста, состоит из введения, пяти глав, выводов, практических рекомендаций. Содержит 17 рисунков, 22 таблицы. Список литературы включает 48 отечественных и 99 зарубежных источников.

Заключение диссертации по теме «Пульмонология», Дементьева, Елена Александровна

ВЫВОДЫ

1. Выраженность воспаления в бронхах при обострении хронической обструктивной болезни легких отражают циго-биохимические маркеры в мокроте. Активность миелопероксидазы нейтрофилов, протеиназ и ингибиторов в крови при обострении заболевания не изменяется.

2. Активность миелопероксидазы нейтрофилов мокроты коррелирует с выраженностью основных симптомов обострения хронической обструктивной болезни легких. Количество активных нейтрофилов в мокроте выше у курящих, чем у некурящих больных, и при инфекционной этиологии обострения заболевания.

3. Обострение хронической обструктивной болезни легких характеризуется высокой активностью эластазы, триписноподобных протеиназ, арпротеиназного ингибитора и (Хг-макроглобулина в мокроте на фоне низкой активности кислотостабильных ингибиторов. Активность эластазы мокроты коррелирует с выраженностью симптомов заболевания.

4. Курение при обострении хронической обструктивной болезни легких приводит к повышению активности трипсиноподобных протеиназ и снижению активности арпротеиназного ингибитора в мокроте. Наличие инфекции в бронхах влияет на активность <Х2-макроглобулина в мокроте.

5. Снижение активности миелопероксидазы нейтрофилов, эластазы, а также нормализация активности арпротеиназного и кислотостабильных ингибиторов в мокроте, являются показателями эффективности терапии обострения хронической обструктивной болезни легких.

6. Применение противовоспалительного препарата фенспирида при лечении обострения хронической обструктивной болезни легких способствует более выраженному снижению активности миелопероксидазы, эластазы, нормализации активности аг протеиназного и кислотосгабильных ингибиторов в мокроте и улучшению клинической картины.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

Для оценки эффективности лечения больных с обострением ХОБЛ рекомендуется цитохимическое и биохимическое исследование мокроты. При поступлении в клинику и в процессе лечения необходимо исследовать в мазках мокроты процент нейгрофилов с отрицательной и слабовыраженной реакцией на миелопероксидазу, а также активность эластазы, ai-протеиназного ингибитора, кислотостабильных ингибиторов мокроты. При эффективной терапии указанные показатели нормализуются, а при отсутствии эффекта не изменяются.

Учитывая то, что фенспирид способствует нормализации активности МПО нейгрофилов, протеиназ и ингибиторов в мокроте больных ХОБЛ, показано его назначение в составе базисной терапии этого заболевания

Список литературы диссертационного исследования Дементьева, Елена Александровна, 2005 год

1. Безлепко А. В. Опыт длительного применения эреспала при лечении больных хроническим обструкгивным бронхитом / А. В. Безлепко // Пульмонология. 2001. - № 2. - С. 80-84.

2. Боровиков В. П. Популярное введение в программу STATTSTICA / В. П. Боровиков. М: КомпьютерПресс, 1998. - 267 с.

3. Веремеенко К Н. а 1-Ингибитор протеиназ и его исследование в клинике / К. Н. Веремеенко // Клинич. медицина -1985. № 12. - С. 21-27.

4. Веремеенко К Н. Исследование ферментов протеолиза при хроническом тонзиллите/ К Н. Веремеенко, А. И. Кизим, С. П. Грома // Вестн. оториноларингологии. 1975. - № 6. - С. 13-17.

5. Веремеенко К Н. Протеолиз в норме и при пшшогии // К Н. Веремеенко, О. П. Голобородько, А. И. Кузин. Киев: Здоровья, 1988. -199 с.

6. Веремеенко К. Н. Протеолиз и его регуляция/ К. Н. Веремеенко // Биохимия животных и человека. Киев, 1983. - Вып. 7. - С. 37-46.

7. Веремеенко К Н. Ферменты протеолиза и их ингибиторы в медицинской практике /К. Н. Веремеенко. Киев, 1971. - 342 с.

8. Видаль. Лекарственные препараты в России: Справочник. М: OVPEE -АстраФарм Сервис, 2000. -1408 с.

9. Влияние окружающей среды на здоровье человека. — Женева: ВОЗ, 1974. — 215 с.

10. Войлок А. А. Квантово-химическое исследование "каталитической триады" протеиназ / А. А. Войлок, В. В. Васильев // Молекулярная биология. — 1987. Т. 21, Вып. 3. - С. 807-813.

11. П .Гембицкая Т. Е. Уровень сывороточного а 1 -протеиназного ингибитора при бронхолегочных заболеваниях/ Т. Е. Гембицкая // Терапевт, архив. — 1984. -№ 3. С. 70-73.

12. Гланц С. Медико-биологическая статистика: Пер. с англ. / С. Гланц. М.: Практика, 1999. - 459 с.

13. Гудь М. В. Определение al-ПИ при массовохм обследовании больных первичной эмфиземой легких/ М. В. Гудь // Клинич. медицина. — 1978: № 12.-С. 102-105.

14. Дворецкий JI. И. Инфекция и хроническая обструктивная болезнь легких / JI. И. Дворецкий // Consilium medicum. 2001. - Т. 3, № 12. - С. 587-593.

15. Дубровин С. М а2-макроглобулин: современное состояние вопроса / С. М. Дубровин, А. В. Муромцев, JL И. Новикова // Клинич. лаб. Диагностика -2000.-№6.-С. 3-7.

16. Каминская Г. О. a 1 -протеиназный ингибитор в клинической практике/ Г. О. Каминская, Т. А. Муминов, Н. Л Жукова // Клинич. медицина. — 1984. № 12.-С. 89-91.

17. Ларионова Н. И. Ингибирование катепсина В и эластазы 1ранулоцитов человека множественными формами соевого игибитора типа Баумана-Бирк / Н. И. Ларионова, И. П. Гадышев // Бихимия. -1993. Т. 58, № 9. - С. 14371444.

18. Локшина Л. А. Регуляторная роль протеолитических ферментов / Л.А. Локшина//Молекуляр. биология. 1979. -Т. 13., № 6. - С. 1205-1229.

19. МашковскийМ Д. Лекарственные средства: В 2-х т. /М.Д. Машковский.- 13-е изд. М: Медицина, 1996. -Т. 1. -736 с.

20. Машковский М Д. Лекарственные средства: В 2-х т. / М. Д. Машковский.- 13-е изд. М.: Медицина, 1996. - Т. 2. - 685 с.

21. Маянский А. Н. Клинические аспекты фагоцитоза / А Н. Маянский, О. И. Пикуза Казань, 1993. -192 с.

22. Меньшиков В. В. Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / В. В. Меньшиков. М.: Медицина, 1987. - 234 с.

23. Нартикова В. Ф. Унифицированный метод определения активности al-ангитрипсина и а2-макроглобулина в сыворотке (плазме) крови человека / В. Ф. Нартикова, Т. С. Пасхина // Вопр. мед. химии. 1979. - Т. 25, № 4. - С. 494-499.

24. Овчаренко С. И. Хронические обструктивные заболевания легких (Современные концепции и перспективные направления) / С. И. Овчаренко // Терапевт, архив. 1996. - № 8. - С. 86-88.

25. Оглоблина О. Г. Кислотостабильные белки — ингибиторы протеиназ млекопитающих. Структура, свойства, биологическая роль О. Г. Оглоблина // Биохимия. 1982. - Т. 47, № 10. - С. 1587-1598.

26. Плуса Т. Эффективность и переносимость фенспирида у взрослых больных с острыми респираторными зоболеваниями / Т. Плуса, Д. Навацка // Лечащий врач. 2000. - № 1. - С. 12-15.

27. Протеиназы и метаболизм соединительной ткани/ В. Н. Орехович, Л. Л. Локшина, Ю. Е. Елисеева и др. // Веста. АМН СССР. 1984. - № 8. - С. 3-11.

28. Протеолиз и а2-макроглобулин/ П. А. Михаилов, Л. И Симонова, В. Д. Садчиков и др. // Эксперим. и клинич. радиология. 1978. - Вып. 10. - С. 1720.

29. Роговин В. В. Пероксидазосомы / В. В. Роговин, Л. А. Пирузян, Р.А. Муравьева М, 1977. -127 с.

30. Роль ингибиторов протеолигических ферментов в развитии и возникновении хронических обструктивных заболеваний легких / А. М. Убайдулаев, К. С. Казаков, И. В. Меверко, М Б. Черник // Терапевт, архив. -1994. Т. 66, № 3. -С. 42-45.

31. Ромоданов А. П. Уровень al-ПИ у больных с тяжелой черепно-мозговой травмой / А. П Ромоданов, К. Н. Веремеенко, П. А. Мельниченко // Вопр. нейрохириругии. 1972. - № 6. - С. 18-21.

32. Сенкевич Н. Ю. Качество жизни при хронической обструктивной болезни легких / Н. Ю. Сенкевич // Хроническая обструктивная болезнь легких / Под ред. А. Г. Чучалина. -М, 1998. С. 171 - 191.

33. Тодоров И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии / Й. Тодоров. София: Медицина и физкультура, 1968. -1064 с.

34. Хронический обструктивный бронхит / В. И. Коваленко, А. В. Кононов, Е. Л. Казачков, В. В. Полосухин. Новосибирск: Изд-во СО РАМН, 1998. - 384 с.

35. Черняев А. Л. Патологическая анатомия хронических обструктивных заболевании легких / А. Л. Черняев, М. В. Самсонова // Хроническаяобструктивная болезнь легких / Под ред. А. Г Чучалина. М., 1998. — С. 366401.

36. Чучалин А. Г. Анализ эффективности современных методов лечения больных хроническим бронхитом / А. Г. Чучалин // Хронический бронхит в амбулаторной практике: Матер, симпозиума СПб., 2000. - С. 245

37. Чучалин А. Г. Хронические обструктивные болезни легких / А. Г. Чучалин. — СПб.: Невский диалект, 1998. 345 с.

38. Шафран М. Г. Ферменты нейтрофила/ М. Г. Шафран, JI. Ф. Шабанова, И. П. Ашмарин // Биохимия. 1976. - Т. 41, № 3. - С. 496-499.

39. Шварц Г. Я. Ангихолинергические средства в лечении больных хронической обструктивной болезнью легких / Г. Я. Шварц, А. Н. Цой // Хроническая обструктивная болезнь легких / Под ред. А. Г. Чучалина. М, 1998. — С. 234-248.

40. Шмелев Е. И. Хронический обструктивный бронхит / Е. И. Шмелев // Хроническая обструктивная болезнь легких / Под ред. А. Г. Чучалина. — М., 1998.-С. 39-56.

41. Шувалова Е. П. Сывороточные ингибиторы протеолиза при хроническом гепатите / Е. П Шувалова, А. Г. Рахманова, Р. В. Ситкевич и др. // Успехи гепатологии: Сб. науч. ст. Рига, 1988. - Вып. 14. - С. 204-209.

42. Эластаза лейкоцитов плазмы крови у пациентов с туберкулезом и ее роль в нарушении регуляции процессов свертывания крови/ В. JI. Доценко, А. Я. Спирина, А. И Макинский и др. // Вопр. мед. химии. 2000. - Т. 46, № 2. - С. 176-183.

43. Activated neutrophils impair gastric cytoprotection role of neutrophil elastase / N. Harada, K. Okajima, W. Liu, M. Uchiba // Dig. Dis. Sci. 2000. - Vol. 45, № 6. -P. 1210-1216.

44. Akoun G. EfFet du fenspiride sur la fonction respiratore et la gazametrie de patients presentat une bronchopathie chronique obstructive stable / G. Akoun // Eur. Respir. Rev. 1991. - Rev. 2 (French version). - P. 51-65.

45. Akutsu H. Concentrative relationship between polymorphonuclear elastase and urinary trypsin inhibitor in amniotic fluid / H. Akutsu, H. Iwama // Arch. Gynecol. Obstet 2000. - Vol 263, № 4. - P. 156-165.

46. Astaldi G., Verga L. // Acta Haematol. 1957. - Vol. 17. - P. 129-136.

47. Bacterial adherence to airway ephithelium / S. De Bentzman, E. Mogodin, P. Roger, E. Puchelle // Eur. Resp. Rew. 2000. - Vol. 7. - P. 50-57.

48. Barnes P. J. New Concepts in Chronic Obstructive Pulmonary Disease / P. J. Barnes // Ann. Rev. Med. 2002. - VoL 17. - P. 1122-1167.

49. Barnes P.J. Bronchodilators: basic pharmacology//Chronic obstructive pulmonary disease / P. J. Barnes. London, 1995. - P. 391-417.

50. Barret A. J. Synthesis and secretion of alpha 2-macroglobulin by human glioma established cell lines./ A. J. BaiTet, P. M Starkey // Biochem. J. 1973. - № 4. - P. 709-724.

51. Bonnefoy A. Proteolysis of subendothelial adhesive glycoproteins (fibronectin, thrombospondin, and von Willebrand factor) by plasmin, leukocyte cathepsin G, and elastase / A. Bonnefoy, C. Legrand // Thromb. Res. 2000. - Vol. 98, № 4. -P. 323-332.

52. BTS guidelines for the management of chronic obstructive pulmonary disease // Eur. Resp. J. 1997. - Vol. 11. -P. 1-28.

53. Buhannic L. Interet de Pneumorel 80 mg dans Ie traitement de rinflammation dans les otites chroniques de l'adulte / L. Buhannic, D. Shutz // Propos. Biopharma. -1988. -№73. -P. 18-25.

54. Buist A. S. Risk factors for COPD / A. S. Buist // Eur. Respir. Rev. 1996. - № 6. -P. 253-261.

55. Burge P. S. Occupation and chronic obstructive pulmonary disease (COPD) / P. S. Burge//Eur. Respir. J. 1994. 7.-P. 1032-1066.

56. Burnett D. Serum and sputum alpha 2 macroglobulin in patients with chronic obstructive airways disease./ D. Burnett, A. R. Stockley // Thorax. 1981. - № 7. -P. 512-516.

57. Changes in chromatin organization at the neutrophil elastase locus associated with myeloid cell differentiation / E. T. Wong, D. E. Jenne, M. Zimmer et al. // Blood. -1999. Vol 94, № 11. - P. 3730-3736.

58. Cuneant G. Efficacy of Pneumorel 80 mg (fenspiride) in the treatment of chronic sinusitis. Double-blind, placebo-controled study / G. Cuneant // Rhinology. 1988. -Suppl. 4.— P. 21-29.

59. Drug treatment of chronic obstructive pulmonary disease / C. van Herwaarden, P. Dekhuyzen, C. van Schayck et al. // Ned. T. Geneesk. 1996. - Vol. 140, № 14. -P. 761-766.

60. Early diagnosis and treatment of malignant lung neoplasms (according to material from the IVth All-Union conference of oncologists)/ V. Vagner, M. Wagncrooa, I. Kriz et al. // Experientia. 1976. - Vol. 32. - P. 1369-1371.

61. Effect of fenspiride on exercise performance in chronic obstructive pulmonary disease patients / C. Tardif, G. Ohenne, P. Patron et al. // Eur. Resp. J. 1993. -Vol. 6, Suppl. 17. - P. 426.

62. Effets du fenspiride in vitro sur la production des radicaux libres oxygenes, de prostaglandines et de leucotri nes par des macrophages alveolaires de cobayes / P. Carre, B. Pipy, E. Pinelh et al. // Eur. Respir. Rev. 1991. - Vol. 1, № 2 - P. 17-23.

63. Efficacy of fenspiride on alleviating SO- induced chronic bronchitis In rats and allergic rhinitis in guinea-pigs / A. Broillet, R. White, R. Ventrone, N. Giessinger // Fihinology. 1988. - Suppl. 4. - P. 77-86.

64. Evidence for a crucial role of neutrophil-derived serine proteases in the inactivation of interleukin-6 at sites of inflammation / U. Bank, B. Kupper, D. Reinhold et al. // FEBS Lett. 1999. - Vol. 461, № 3. - P. 235-275.

65. Extended therapy with ipratropium is associated with improved lung function in patients with COPD. A retrospective analysis of data from seven clinical trials / S. L. Rennard, C. W. Serby, M. Ghafoun et al. // Chest. 1996. - Vol. 110, № 1. - P. 62-70.

66. Fenspiride and inflammation in experimental pharmacology / Y. Evrard, G. Kato, M. C. Bodinier, B. Chapelain // Eur. Resp. Rev. 1991. - Vol.1, Rev. 2. - P. 93100.

67. Fenspiride et inflammation en pharmacologic experi-mentale / Y. Evrard, G. Kato, H. Bodinier et al. // Eur. Respir. Rev. -1991. Vol. 1, № 2. - P. 33-40.

68. Fenspiride inhibits calcium influx by hexachlorocyclohexane in mouse inflammatory peritoneal macrophages / E. Pinelli, C. Cambon, O. Crambes, B. Pipy // Eur. Resp. J. -1993. Vol. 6, Suppl. 17. - P. 3055-3076.

69. Fenspiride inhibits phosphatidylinositol hydrolysis in mouse inflam-matory macrofages / P. Sozzani, C. Cambon, M. F. Frisach et al. // Eur. Resp. J. 1993. -Vol. 6, Suppl. 17.-P. 55-76.

70. Frenoy J. P. Subunit structure of human alpha 2-macroglobulin (alpha 2-MG) with respect to its interaction with trypsin./ J. P. Frenoy, R. Boiirtillion // J. Biol. Chem. -1977. Vol. 252. - P. 1129-1133.

71. Freyria J. Inte ret de la therapeutique anti-exsudative en pathologie respiratoire et ORL de Tenfant A proposde 489 observations / J. Freyria, S. Lubin, C. Mallet // Acta Therapeutica. -1976. № 2. - P. 89-99.

72. Functional importance of connective tissue repair during the development of experimental abdominal aortic aneurysms / M. D. Huffman, J. A. Curci, G. Moore et al. // Surgery. 2000. - Vol. 128, №3. - P. 429-438.

73. Gewitrs G. Big ACTH: conversion to biologically active ACHTH by tripsin / G. Gewitrs, B. Schneider, D. Krieger//J. Clin. Endocrinol. Metabol. 1974. - Vol. 38, №2.-P. 227-230.

74. Giacchero G. Pneumorel 80 mg au long cours dans le traitement des bronchites chroniques / G. Giacchero, J. Taranger // La Vie Medicate. -1982. № 2. - P. 791794.

75. Global Initiative for Chronic Obstructive Lund Disease (GOLD). Global strategy for the diagnosis, managment, and prevention of chronic obstructive pulmonary disease. NHBLI. WHO workshop report (publ N2701). - 2001.

76. Grossman R. Guidelines for the treatment of acute exacerbations of chronic bronchitis / R. Grossman // Chest 1997. - № 112. - P. 310-313.

77. Human neutrophil elastase regulates the expression and secretion of elafin (elastase-specific inhibitor) in type II alveolar epithelial cells / P. T. Reid, M. E. Marsden, G. A. Cunningham // FEBS Lett 1999. - Vol. 457, № 1. - P. 33-40.

78. Inhibition of LPS-induced TNFa production in mouse inflammatory macrofages by fenspiride / J. F. Thardin, M. Beraud, M. H. Seguelas et al. // Eur. Resp. J. 1993. - Vol. 6, Suppl. 17. - S. 268.

79. Intracellular location of SNAP-25 in human neutrophils/ S. Nabokina, G. Egea, I. Blasi, F. Mollinedo // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1997. - Vol. 239, № 2. -P. 592-597.

80. Jarvis M. J. Smoking cessation / M J. Jarvis // Eur. Respir. Rev. 1997. - Vol. 7, №45.-P. 230-234.

81. Johnson D. Human alpha-1 -antichymotrypsin: purification and properties./ D. Johnson, J. Travis // J. Biol. Chem. 1978. - Vol 253. - P. 7142-7144.

82. Kaplow L. // Blood. 1955. - Vol. 10, № 10. - P. 1023-1029.

83. Kips J. C. The effect of fenspiride on the allergen induced airway — response in sensitized rats / J. C. Kips, G. F. Joos, R. A. Pauwells // Eur. Resp. J. 1993. - Vol. 6, Suppl. 17.-P. 254-267.

84. Kuppers F. //Proc. Soc. Exp. Biol 1966. - Vol. 121. -P. 1207-1209.

85. Laurell С. B. // Scand. J. Clin. Lab. Invest. 1963. - Vol. 15. - P. 132-140.

86. Le fenspiride et Ie systeme bronchopulmonaire nouvelle approch pharmacologique / Y. Evrard, F. Lhote, C. Advenier et al. // Sem. Hop. Paris. 1986. - Vol. 62, № 19. -P. 1375-1381.

87. M alpha-1-antitrypsin at term of pregnancy in an African population: concentration and microheterogeneity/ D. Houvet, J. P. Brettes, M. Sangaret et al. //Ann. Biol. Clin. 1980. - Vol. 38. - P. 9-14.

88. Martorana P. A. Effect of human alpha-antitrypsin in papain-induced emphysema in the hamster./ P. A. Martorana, N. N. Share // Amer. Rev. Resp. Dis. -1976. Vol. 113.-P. 607-612.

89. Mediators of inflammation and antagonism of experimental pleurisy in the rat byfenspiride / M C. R. Lima, M. Hatmi, M. A. Martins et al. // Rhinology. 1988. -Suppl. 4.-P. 87-95.

90. Melloni B. Bronchial inflammation during chronic bronchitis, importance of fenspiride / B. Melloni // Presse Med. 2002. - Sep. 31, Spec № 1. - HS. 11-16

91. Modulation of elastase binding to elastin by human alveolar macrophage-derived lipids / J. Fujita, С. M. Skold, D. M. Daughton et al. //Am. J. Respir. Crit Care Med. 1999. - Vol. 160, № 3. - P. 802-809.

92. Molecular characteristics of the inhibition of human neutrophil elastase by nonsteroidal antiinflammatory drugs / K. Kang, S. J. Bae, W. M. Kim et al. // Exp. Mol. Med. 2000. - Vol; 32, № 3 . - P. 146-254.

93. Morihara K. Semi-synthesis of human insulin by trypsin-calalysed replacement of Ala-B30 by Thr in porcine insulin./ K. Morihara, H. Tsiizuki, K. Oda // Infect, and Immun. 1979. - Vol. 24. - P. 188-193.

94. Mulloy E. Theophylline improves gas exchange during rest, exercise and sleep in severe chronic obstructive pulmonary disease / E. Mulloy, W. T. McNicholas // Amer. Rev. Respir. Dis. 1993.-№ 148. - P. 1030-1036.

95. Murphy T. F. Bacterial infection in chronic obstructive pulmonary disease / T. F. Murphy, S. Sethi //Am. Rew. Respir. Dis. 1992. - № 46. - P. 1067-1083.

96. Neutrophil elastase and oxygen radicals enhance monocyte chemoattractant protein- expression after ischemia/reper&sion in rat liver / Y. Yamaguchi, F. Matsumura, J. Liang et aL // Transplantation 1999. Vol. 68, № 10. - P. 14591468.

97. Neutrophil elastase inhibition reduces cerebral ischemic damage in the middle cerebral artery occlusion / A. Shimakura, Y. Kamanaka, Y. Ikeda et aL // Brain. Res. 2000. - Vol. 858, № 1. - P. 55-60.

98. Neutrophil elastase inhibitor (ONO-5046) attenuates reperfusion-induced hepatic microcirculatory derangement, energy depletion and lipid peroxidation in rats / H. M Chen, J. C. Chen, M. H. Shyr et al.// Shock.- 1999. -Vol. 12,№6.-P. 462-469.

99. Neutrophil elastase may play a key role in developing symptomatic disseminated intravascular coagulation and multiple organ failure in patients with head injury / H. Takahasi, T. Urano, N. Nagai et aL // J. Trauma. 2000. - Vol. 49, 1. - P. 8691.

100. Olivieri D. Efficacy of fenspiride on mucociliary transport. Double-blind with placebo trial / D. Olivieri, M Del Donno // Bull. Eur. PhysiopathoL Respir. 1987. - Vol. 23, Suppl. 12.-P. 122-129.

101. Olivieri D. Etude de Faction du fenspiride (pneumorel 80 mg) sur la clairance mucociliare chez le bronchitique chronique / D. Olivieri, M Del Donno // J. Intern. Med. -1987. № 96. - P. 395-403.

102. Ollerenshaw S. L. Characteristics inflammation in biopsies from large airways ofs with asthma and subjects with chronic airflow lim / S. L. Ollerenshaw, A. I. Woolcock // Eur. Resp. J. 1992. - Vol. 5. - P. 922-927.

103. Optimal assessment and management of chronic obstructive pulmonary disease (COPD). A consensus statement of the European Respiratory Soiety (ERS) / N. M. Siafakas, P. Vermeire, N. B. Pride et al. // Eur. Respir. J. 1995. - № 8. - P. 13981420.

104. Pare P. D. Patophysiological process in chronic obstructive pulmonary disease / P. D. Pare // The Role of Anti-cholinergics in COPD and Chronic Asthma. -London, 1997.-P. 19-30.

105. Pathogenesis of IgA 1 protease producing and nonproducing Haemophilus influence in human nasopharingeal organ cultures / M. M Farley, D. S. Stephens, M H. Mulkus et al. // J. Infect Dis. 1986. - Vol. 154. - P. 752-759.

106. Pipy B. Inflammation experimentale et effets du fenspiride sur les cytokines, les metabolites de Facide arachi-doniqueetia migration cellulaire / B. Pipy, Y. Evrard // LaLettre du Pharmaiogue. 1992. - Vol. 6, SuppL 7. - P. 13-19.

107. Podlich D. Different susceptibility of human tissue prokallikrein to cleavage by neutrophil proteinases / D. Podlich, M. Kemme // Immunopharmacology. 1999. — Vol.45, №1-3.-P.95-101.

108. Postma D. S. Epidemiology of COPD risk factors. COPD: Diagnosis and treatment Excerpta Medica, 17 Report Chronic bronchitis in Great Britain / D. S. Postma//BMJ. -1996. P. 12-973.

109. Pre- and postjunctional inhibitory effects of fenspiride on guinea-pig bronchi / V. Girard, E. Naline, O. Crambes et al. // Eur. Resp. J. 1997. - Vol 10, № 5. - P. 1015-1035.

110. Ptusa N. Ocena skutecznosci i toleransji fenspiiydu u dorosoych chorych na ostre zapalenie drdg oddechowych / N. Ptusa, K. Nawacka // Pol. Merk. Lek. -1998.-Vol. 5,№30.-P. 368.

111. Puchelle E. Airway epithelium injury and repair / E. Puchelle // Eur. Resp. Rew. -1997. Vol.7, № 43. - P. 136-141.

112. Quartulli F. Le fenspiride inhibe les re ponsesinduites par Fhistaminedaus unelignee cellulaire epitheliale pulmonaire / F. Quartulli, E. Pinelli // Eur. J. Phannac. 1998. -Vol 348 -P. 297-304.

113. Randomised controlled trial oftheophylline in patients with severe chronic obstructive pulmonary disease / D. Murciano, M. H. Auclair, R. Panente, M. A. Aubier // New Engl. J. Med. 1989. - № 320. - P. 1521-1525.

114. Receveur M Interet de Pneumorel 80 mg dans le traitement de Tinflammation de la muqueuse respiratoire en pathologie ORLaigue / M Receveur // Tribune Medicate. 1985. -№ 129. - P. 47-48.

115. Repine J. E. Oxidative stress in chronic obstructive pulmonary disease / J. E. Repine, A. Bast, L. Lankhorst // Amer. J. Respir. Crit Care Med. 1997. - Vol. 156.-P. 341-357.

116. Rosen H. Role of metal-catalyzed oxidation reactions in the early pathogenesis of scleroderma/ H. Rosen, B. R. Michel // Infect and hranun. 1997. - VoL 65, № 10.-P. 4173-4178.

117. Sallebert L. Value of Pneumorel 80 mg in the treatment of chronic otitis in adults. Multi-centre study of 696 cases / L. Sallebert, D. Schutz // Rhinology. -1988.-Suppl. 4.-P. 43-58.

118. Serum elastase activity is elevated in migraine / C. Tzourio, M El Amrani, L. Robert, A. Alperovitch//Ana Neurol. 2000. - Vol. 47, №5. -P. 648-751.

119. Serum elastase inhibitors in cardio-vascular diseases./ M. Rabaud, F. Lefebore, V. M Dauiel et aL // Clin. Chem. Acta 1978. - Vol 90 - P. 53-60.

120. Standards for the diagnosis and care of patients with chronic obstructive pulmonary disease ATS statement // Amer. J. Respir. Crit Care Med. 1995. -Vol 152.-P. 77-120.

121. Steinbuch M Isolation of human Clq as a by-product of routine fractionation/ M Steinbuch // Coll. Ges. Biol Chem. -1979. № 30. - P. 207-222.

122. Stockley R. A. Alpha-1-antitrypsin deficiency: what next? / R. A. Stockley // Thorax. 2000. - № 55. - P. 614-618.

123. The natural history of chronic bronchitis and emphysema / С. M. Fletcher, R. Peto, C. Tinker, F. E. Speizor. N.Y: Oxford University Press, 1976. - 250 p.

124. The possible role of plasma kallikrein-kinin system and leukocyte elastase in pathogenesis of schizophrenia /1. Shcherbakova, E. Neshkova, V. Dotsenko et al. // Immunopharmacology. 1999. - Vol.43, № 2-3. - P. 273-282.

125. Thurlbeck W. M Chronic airflow obstruction / W. M. Thurlbeck // Pathology of Lung / Ed. by W. M. Thurlbeck, A. M Chung. 2-nd Ed. -Stuttgart; N.Y., 1995.-P. 739-825.

126. Travis J. Lung cancer / J. Travis, G. S. Salvesen // Ann. Rev. Biochem. 1983. -Vol. 52. - P. 655-709.

127. Value of fenspiride (Pneumorel 80 mg) in the preoperative treatment of chronic open tympanum otitis. Double-blind, placebo-controlled study / B. Fraysse, H. Calvet, P. Faure, D. Shutz // Phinology. 1988. - Suppl. 4. - P. 31-41;

128. Value of theophylline treatment in patients handicapped by chronic obstructive pulmonary disease / S. E. McKay, C. A. Howie, A. H. Thomson et al. // Thorax. -1993.-Vol. 48.-P. 27-32.

129. Van Furth It Presence of the factor increasing monocytopoiesis (FIM) in rabbit peripheral blood during an acute inflammation./ R. Van Furth, J. A. Kramps, V. I. Diesselhof-Dendulk // Clin. Exp. Immunol. 1983. - Vol. 51. - P. 551-557.

130. Visser L. The use of p-nitrophenyl N-tert-butyloxycarbonyl-L-alaninate as substrate for elastase./ L. Visser, E. R. Blout // Biochim. Biophys. Acta. 1972. -Vol. 268.-P. 257-260.

131. Wilson R. The role of infection in COPD/R. Wilson //Chest.-1998.-№ 113. -P. 242-248