ДНК-полиморфизм генов пролактина и гормона роста у ярославской и черно-пестрой пород крупного рогатого скота тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Хатами Саид Реза

• Хатами Саид Реза
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Хатами Саид Реза

Введение

Обзор литературы 8

1.1.Пролактин и гормон роста: структура и биологическая роль 8

1.1.1. Биологическая роль пролактина 10

1.1.2. Биологическая роль гормона роста. 12

1.1.3. Структура генов пролактина и гормона роста 14

1.2. Полиморфизм гена пролактина и методы его определения 18

1.3. Изучение полиморфизма гена гормона роста (bGH) 27-3 0 Материалы и методы 31

2.1. Краткая характеристика исследуемых выборок пород крупного рогатого скота.

2.2. Выделение ДНК из цельной крови 32

2.3. Определение концентрации ДНК

2.4. Условия проведения полимеразной цепной реакции 34

2.5. Hot Start 35

2.6. Рестрикция продуктов амплификации

2.7. Приготовлениеполиакриламидногогеля

2.8. Электрофорез продуктов амплификации, 37

2.9. Клонирование и секвенирование

2.10. Статистическая обработка данных. 38

2.11. Использованные в работе компьютерные программы и базы данных. 39

Результаты и обсуждение 41

3.1. Полиморфизм гена пролактина (bPRL) у ярославской и черно-пестрой пород крупного рогатого скота 42

3.1.1. Рестрикционный полиморфизм гена bPRL 42

3.1.2.Микросателлитный анализ полиморфизма гена bPRL 47

3.1.3. Анализ нуклеотидной последовательности анализируемого фрагмента 5' -нетранслируемой области гена bPRL 51

3.1.4. Сравнительный анализ ледуемых выборок к.р на гетерогеннь рределения генотипов по двум маркерам

3.2. Полиморфизм гена гормона роста (bGH) у ярославской и черно-пестрой пород крупного рогатого скота 55

3.3. Межпородное и внитрипородное генетическое разнообразие ярославского и черно-пестрого скота по локусам пролактина и гормона роста 64

3.4. Поиск ассоциаций полиморфных вариантов генов burl и bGH с различными признаками молочной продуктивности 69

Выводы 74

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «ДНК-полиморфизм генов пролактина и гормона роста у ярославской и черно-пестрой пород крупного рогатого скота»

Актуальность проблемы.

Пролактин (PRL) и гормон роста (GH) представляют собой семейство белковых гормонов, которые принимают участие в инициации и поддержании лактации у млекопитающих и могут рассматриваться как потенциальные генетические маркеры молочной продуктивности крупного рогатого скота (к.р.с.). Однако сведения о полиморфизме генов пролактина (bPRL) и гормона роста (bGH), которые могли бы послужить основой для создания таких маркеров, крайне ограничены.

К настоящему времени исследован рестрикционный полиморфизм в экзоне III гена bPRL с использованием рестриктазы Rsal, обусловленный транзицией A-G в кодоне для 103 аминокислоты, у трех пород к.р.с. и двух родственных видов (сахивальского зебу и буйвола). Тестированы два аллеля, однако, достоверных ассоциаций частот этих аллелей с признаками молочной продуктивности выявлено не было. У 20 различных популяций к.р.с. Африки, Европы и Азии был также исследован полиморфизм по микросателлитному локусу, расположенному в гене пролактина. Этот маркер был использован, наряду с другими микросателлитными маркерами для изучения эволюционного родства и молекулярной биогеографии исследованных популяций, но не исследовался как маркер молочной продуктивности.

При исследовании ДЕЖ-полиморфизма гена bGH у к.р.с. показано, что полиморфный Mspl-стт, локализованный в интроне III гена bGH, информативен для изучения связей с признаками молочной продуктивности. В ряде работ была показана ассоциация Мур1(-)-аллеля с высоким уровнем жирности молока, а также с повышением процента белка в молоке. Однако в других работах эта ассоциация не подтвердилась. Для Alul- полиморфизма гена bGH у голштинского канадского скота была описана ассоциация с молочной продуктивностью (Sabour, Lin, 1996). (Нуклеотидная замена, приводящая к появлению полиморфного сайта для эндонуклеазы Alul, приводит и к замене в белковом продукте аминокислоты Val на Leu). Показана также корреляция генотипа V/V с большим выходом гормона роста в кровь (Lucy et al., 1993; Lee et al., 1993, 1996; Grochowska et al., 1999).

Активное участие продуктов генов bGH и bPRL в формировании признака молочной продуктивности служит основанием для продолжения поиска значимых ассоциаций полиморфных вариантов указанных генов с конкретными параметрами молочной продуктивности и создания на их основе тест-систем, пригодных для использования в генетико-селекционной работе. Российские породы практически не изучены в этом отношении. Остается также мало изученным вопрос о влиянии селекционного давления на распределение частот аллелей генов bPRL и bGH в стадах к.р.с. Все эти вопросы нуждаются в дальнейшем исследовании.

Целью данной работы было изучение полиморфизма генов пролактина и гормона роста как маркеров молочной продуктивности и сравнительный анализ по этим параметрам пород к.р.с. российской и зарубежной селекции.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Исследовать полиморфизм гена пролактина по двум типам маркеров (ПЦР-ПДРФ и микросателлитный анализ) у черно-пестрой породы российской и немецкой селекции и у ярославской породы к.р.с.

2. Исследовать полиморфизм гена гормона роста по двум маркерам, локализованным в разных областях генов (ПЦР-ПДРФ с использованием рестрицирующих эндонуклеаз Mspl и AluT) на тех же выборках к.р.с.

3. Оценить частоты аллелей и генотипов по тестируемым локусам (по каждому маркеру, по двум маркерам для каждого гена) и по частотам совокупных генотипов по двум локусам в исследованных выборках.

4. Провести сравнительный анализ распределения различных аллелей генов bPRL и bGH и совокупных генотипов в разных породах и в выборках к.р.с. одной породы, но с различным типом селекции.

5. Провести поиск ассоциаций полиморфных вариантов генов bPRL и bGH с различными признаками молочной продуктивности.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Генетика», Хатами Саид Реза

ВЫВОДЫ

1. Проведен сравнительный анализ полиморфизма гена пролактина (<bPRL) по двум типам ДНК-маркеров (ПЦР-ПДРФ и микросателлитный анализ) у черно-пестрой породы российской и немецкой селекции и у ярославской породы к.р.с. Показано, что различия в частотах аллелей и генотипов по исследуемым локусам выражены как на межпородном, так и на внутрипородном уровнях. Отмечен низкий уровень гетерозиготности по ifoal-маркеру (9,4%) у российского черно-пестрого скота и по микросателлитному маркеру гена bPRL (от 3,2 до 24%) для всех исследованных пород.

2. Впервые у европейских пород Bos taurus (немецкой черно-пестрой и ярославской пород) обнаружены животные гомозиготные по В-аллелю гена bPRL, ранее описанные только у зебувидного и монгольского скота

3. Описан новый тип микросателлитного повтора (TG)6TA(TG)3TA(TG)2 (для аллеля 162 п.н.) в 5'-области гена bPRL, встречающийся только у ярославского скота и отличающийся транзицией G/A в 11-ом звене от повтора (TG)6TA(TG)6, присутствующего у других пород к.р.с. У немецкого черно-пестрого скота обнаружена ранее не описанная трансверсия (С/А) в уникальной части 5'-области гена bPRL.

4. Показаны достоверные межпородные и внутрипородные различия по частотам аллелей и генотипов по ПЦР-ПДРФ-маркерам, локализованным в разных областях (М?р1-маркер в интроне III и у4М-маркер в экзоне 5) гена гормона роста {bGH). Уровень гетерозиготности по ^М-маркеру выше, чем по Мур1-маркеру гена bGH и достигает 55% у ярославского скота.

5. Впервые описаны совокупные генотипы по четырем маркерам генов bPRL и bGH (по двум маркерам для каждого гена) и определены их частоты у черно-пестрого и ярославского скота. Показано, что исследуемые выборки различались как по спектру представленных генотипов, так и по их частотам. Из 22 выявленных совокупных генотипов только пять относятся к широко распространенным и присутствуют более чем у половины исследованных животных.

6. Изучены связи аллелей исследуемых генов с показателями молочной продуктивности: впервые выявлены значимые ассоциации ^4/гЛ-маркера гена bGH с жирностью молока у ярославского (F=4,50 р= 0,014) и немецкого черно-пестрого скота (F=4,l р=0,041).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Хатами Саид Реза, 2004 год

1. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

2. Айала Ф. Введение в популяционную генетику. / М.: Мир. 1984.

3. Алтухов Ю. П. Генетические процессы в популяциях. / М.: Наука. 1989.

4. Алтухов Ю. П. Внутривидовое генетическое разнообразие мониторинг и принципы сохранения //Генетика 1995.Т.31.№.10.С.1331-1357.

5. Алтухов Ю. П., Салменкова Е.А. Полиморфизм ДНК в популяционной генетике//Генетика. 2002.Т.38.Ж9.С.1173-1195.

6. Джинчарадзе А.Г., Иванов П.Л., Рысков А.П. Геномная «дактилоскопия» -.Характеристика клонированной последовательности генома человека, обладающей в составе вектора М13 свойствами высокополиморфного маркера ДНК//Докл. АН СССР.1987. Т.295. С. 230-233.

7. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование / М.: Мир. 1984.

8. Марри Р. Биохимия человека / М.: Мир. 1993.

9. Рокицкий П.Ф. Основы вариационной статистики для биологов. // Минск:БГУ.1961.

10. Рысков А.П. Диагностические возможности мультилокусных маркеров ДНК в систематике диких копытных животных//Генетика. 1997. Т.ЗЗ. С.961-966.

11. Сулимова Г.Е. Полиморфизм длин рестрикциейных фрагментов ДНК у сельскохозяйственных животных: методы изучения и перспективы использования // Успехи соврем, генетики. 1993. Вып. 18. С.3-35.

12. П.Туркова С.О. Пол полиморфизм гена BoLA-DRB3, пролактина и гормона роста у крупного рогатого скота в связи с устойчивостью к лейкозу и молочной продуктивностью //диссертация 2003.С.72-75

13. Удина И.Г., Туркова С.О., Костюченко М.В., Лебедева Л.А., Сулимова Г.Е. Полиморфизм гена пролактина (микросателлиты, ПЦР-ПДРФ) у крупного рогатого скота // Генетика. 2001. Т. 37. С. 511-516.

14. Akers R.M., Bauman D.E., Capuco A.V., Goodman G.T. & Tucker H.A. Prolactin regulation of milk secretion and biochemical differentiation of mammary epithelial cells in periparturient cows // Endocrinology. 1981. V. 109. P. 23 -30.

15. Antoniou E., Hirts В J., Grosz M., Skidmore C.J. A single strand conformation polymorphism in the bovine gene STAT5AJ/Amm.Genet. 1999.Y.30.P.225-244.

16. Argetsinger L.S., Carter-Su C. Growth hormone signalling mechanisms: involvement of the tyrosine kinase JAK2.// Horrn. Res.l996.V. 45.P. 2224.

17. Bazan J. F. A novel family of growth factor receptors: a common binding domain in the growth hormone, prolactin, erythropoietin and IL-6 receptors, and the p75 IL-2 receptor beta-chain. // Biochem. Biophys. Res. Cornmun. 1989. V. 164.P. 788-795

18. Ben-Jonathan, N., Mershon, J. L., Allen, D. L., and Steinmetz, R. W. Extrapituitary prolactin: distribution, regulation, functions, and clinical aspects. //Endocr. Rev.l996.V. 17.P. 639-669.

19. Bishop M.D.,Kappes S.M.,Keele J.W., Stone RT., Sunden S.L.F., Hawkins G.A., Toldo S.S.,Fries R,Grosz M.D., Yoo J., Beattie C.W. A genetic linkage map for cattle .//Genetics 1994.V.136.p.619-639.

20. Blott S. C., Williams J. L. & Haley C. S. Genetic relationships among Europaen cattle breeds.//Anim. Genet. 1998.V. 29.P.273-282.

21. Blott S. C., Williams J. L. & Haley C. S. Discriminating among cattle breeds using genetic markers.// Heredity 1999.V.82 .P. 613-619.

22. Bole-Fey sot, C., Goffm, V., Edery, M., Binart, N„ and Kelly, P. A. . Prolactin (PRL) and its receptor: actions, signal transduction pathways and phenotypes observed in PRL receptor knockout mice.// Endocr. Rev. 1998.Y. 19.P. 225-268

23. Botstein D., White R.L., Skolnik M., and Davis R.W. Construction of genetic linkage map in man using restriction fragment length polymorphism // Am. J. Genet. 1980. V. 32. P. 314-331.

24. Bowcock A.M., Ruiz-Linares A., Tomfohrde J., Minch E., Kidd J.R., Cavalli-Sforza L.L.High resolution of human evolutionary trees with polymorphic microsatellites. //Nature. 1994. V. 368.№.6470.P.455-7.

25. Bretting P.K.,Widerlechner M.P., Genetic markers and horticultural germplasm management.//Hort. Science 1995 .V.30. P. 1349-1356

26. Burgess, J. W., Bevan, A. P. and Bergeron, J. J. M. Intracellular trafficking and processing of ligand-receptor complexes in the endosomal system.//Exp. Clin. Endocrinol.l992.V. 11.P. 67-78.

27. Camper S.A., Lyck D.N., Yao Y., Woychik R.P., Goodwin R.G., Lyons RH. Jr., Rottman P.M. Characterization of the bovine prolactin gene // DNA. 1984 V. 3.P. 237-249.

28. Chen E.Y.,Liao Y.C., Smith D.H., Barrera-saldana H.A., Gelinas R.E., Seeburc P.H. The human growth hormone locus: Nucleotide sequence, biology and evolution.// Genomics 1989.4: 479-497.

29. Chrenek P., Vasicek D., Bauerovf M., and Bulla J. Simultaneous analysis of bovine growth hormone and prolactin alleles by multiplex PCR and RFLP // Czech J. Anim. Sci. 1998. V.43. P. 53-55.

30. Cowan С. M., Dentine M. R., Ax R. L., Schuler L. A., Restriction fragment length polymorphism associated with growth hormone and prolactin genes in Holstein bulls: evidence for a novel growth hormone allele // Anim. Genet. 1989.V. 20.P. 157- 165.

31. Cowan C.M.,Dentine M.R. ,Ax R.L. and Schuler L. A. Structural variation around prolactin gene linked to quantitative traits in an elite Holstein sire family.// Theor. Appl. Genet .1990 .V.79. P.577-582

32. Darnell J.E., Jr, Kerr I.M. Stark G.R. JAK-STAT pathways andtrancriptional activation in response to IFNs and other extracellular signalling proteins.// Science 1994.V.264.P.1415-1421.

33. Del Bo L., Polli M., Longeri M.,Ceriotti G.,Looft G.,Barre-Dirie A., Dolf G.,Zanotti M. Genetic diversity among some cattle breeds in the alpian area.//J.Anim.Breed.Genet. 2001.V.118.P.317-325.

34. Dietz А. В., Georges M, Threadgill D. W., Womack J. E., Schuler L. A. Somatic cell mapping, polymorphism, and linkage analysis of bovine prolactin-related proteins and placental lactogen//Genomics. 1992. Y. 14. P. 137-143.

35. Dietz A.B., Cohen N.D., Timms L., Kehrli M.E. Jr. Bovine lymphocyte antigen class II alleles as risk factors for high somatic cell counts in milk of lactating dairy cows // J. Dairy Sci. 1997a V. 80. P. 406-412.

36. Dietz A.B., Detilleux J., Freemann A. et al. Genetic association of bovine lymphocyte antigen DRB3 alleles with immonological traits of Holstein cattle//J. Dairy Sci. 1997b. V. 80. P. 400-405.

37. Eding H. and Meuwissen Т. H. E. Marker-based estimates of between and within population kinships for the conservation of genetic diversity .// J. Anim. Breed. Genet. 2001.V.118 .P. 141-159.

38. Flisikowski K.,Zwierzchowski Polymerase chain reaction-heteroduplex (PCR-HD) polymorphism within the bovine STATS A gene.// J.Appl.Genet.2003.V. 44. No. 2. p. 185-189

39. Goffin, V. and Kelly, P. A. The prolactin/growth hormone receptor family structure/function relationships.// J. Mam. Gland Biol. Neoplasia 1997.V.2.P. 7-17.

40. Grochowska R., Zwierzchowski L., Snochowski M., Reklewsld Z. Stimulated growth hormone (GH) release in Friesian cattle with respect to GH genotypes.//Reprod. Nutr. Dev. 1999 .V.39. No.2. P.171-80.

41. Hallerman E. M., Theilman J. L., Beckman J. S., Seller M., Womaclc E. Mapping of bovine prolactin and rhodopsin genes in hybrid somatic cells // Anim. Genet. 1988. V. 19. P. 123.

42. Hanslik S., Harr В., Brem G., Schlotterer C. Microsatellite analysis reveals substantial genetic differentiation between contemporary New World and Old World Holstein Friesian populations .//Anim. Genet. 2000. V.31.P.31-38

43. Harr В., Weiss S., David J.R., Brem G. & Schlotterer C. A microsatellite-based multilocus phylogeny of the Drosophila melanogaster species complex. //Current Biology 1998.Y. 8. P. 1183-6.

44. Hart G.L., Bastiaansen J., Dentine M.R., Kirkpatrick B.W. Detection of a four- allele single strand conformation polymorphism (SSCP) in the bovine prolactin gene 5' flank//Anim. Genet. 1993. V. 24. P. 149.

45. Hediger R., Jonson S.E., Barendse W., Drinkwater R.D., Moore S.S., Hetzel J. Assignment of the growth hormone gene.locus to 19q26-qter in cattle and to 1 Iq25- qter in sheep by in situ hybridization // Genomics. 1990 V. 8. P. 171-174.

46. Hennighausen, L., Robinson, G. W., Wagner, K. U. and Liu, W. Prolactin signaling in mammary gland development.// J. Biol. Chem. 1997.V.272.P.7567-7569.

47. Hoj S., Fredholm M., Larsen N.J., Nielsen V.H. Growth hormone gene polymorphism associated with selection for milk fat production in lines of cattle // Anim. Genet .1993. V.24. P.91-96.

48. Jeffreys A.J., Wilson V., Thein S.L. Hypervariable 'minisatellite1 regions in human DNA.//Nature. 1985. V.314. P. '67-73.

49. Jeffreys A.J., Wilson V., Thein SL, Weatherall D.J., Ponder B.A. DNA" fingerprints" and segregation analysis of multiple markers in human pedigrees.//Am.J. Hum. Genet 1986. V.39.№.1.P. 11-24.

50. Karin M., Castrillo J.L., Theill E.Growth hormone gene regulation: a paradigm for cell-type-specific gene activation.// Trends Genet. 1990. V.6.P. 92-96.

51. Kaiser G. G., Sinowatz F. and Palma G. A. Effects of Growth Hormone on Female Reproductive Organs.//Anat.Histol.Embryol.2001 .V.30.P.265-271.

52. Lagziel A., DeNise S., Hanotte O., Dhara S., Glazko V., Broadhead A., Davoli R. Geographic and breed distribution of an Mspl PCR-RFLP in the bovine growth hormone (bGH) gene // Anim. Genet. 2000. V.31. P.210 -213.

53. Lagziel A., Lipkin E., Seller M. Association between SSCP haplotypesat the bovine growth hormone gene and milk protein percentage // Genetics. 1996.V. 142. P. 945-951.

54. Lagziel A., Lipkin E., Ezra E., Soller M., Veller J.I. An Mspl polymorphism at the bovine growth hormone (bGH) gene is linked to a locus affecting milk protein percentage // Anim. Genet. 1999a. V.30. P.296-299.

55. Lagziel A., Soller M. DNA sequence of SSCP haplotypes at the bovine growth hormone (bGH) gene // Anim. Genet. 1999b. V. 30. P. 362-365.

56. Lee B.K., Lin G.F., Crocker B.A., Murtauth M.P., Hansen L.B., Chester

57. Jones H. Association of somatotropin (bST) gene polymorphism with selection for milk yield in Holstein cows // J. Dairy Science. 1993. V. 76 Suppl.l. P. 149.

58. Lee B.K., Lin G.F., Crocker B.A., Murtaugh M.P., Hansen L.B., Chester-Jones H. Association of somatotropin (bST) gene polymorphism at the 5th exon with selection for milk yield in Holstein cows. // Domest. Anim. Endocrinol. 1996. V. 13. P. 373-81.

59. Lewin H.A., Ming-Che Wu., Steawart J.A., Nolan T.J. Association between BoLA and subclinical bovine leukemia virus infection in a herd of Holstein- Friesian cows // Immunogenetics. 1988.V.25. P. 338-344.

60. Lewin H.A., Schmitt К., Hubert R., Vanelik M. I. Т., Arnheim N., Close linkage between bovine prolactin and BoLA-DRB3 genes mapping in cattle by single sperm typing // Genomics. 1992. V. 13. P. 44-48.

61. Lkhider M., Petridou В., Aubourg A. and Ollivier-Bousquet M. Prolactin signalling to milk protein secretion but not to gene expression depends on the integrity of the Golgi region//J.Cell Sci. 2001.V.114. p.1883-1891

62. Lucy M.C., Hauser S.D., Eppard P.J., Krivi G.G., Clark J.H., Bauman D.E., Collier R.J. Variants of somatotropin in cattle: gene frequencies in major dairy breeds and associated milk production. //Domest Anim Endocrinol. 1993. V. 10. P. 325-333.

63. Lucy, M. С., T. L. Curran, R. J. Collier, and W. J. Cole, Extended function of the corpus luteum and earlier development of the second follicular wave in heifers treated with bovine somatotro-phir.// Theriogenology 1994b .V.41.P.561-572.

64. MacHugh D.E., Molecular biogeogeraphy and genetic structure of domesticated cattle.//Ph.D Thesis. 1996. university of Dublin, Ireland

65. MacHugh D.E., Shriver MD., Loftus R.T., Cunningham P., Bradley D. Microsatellite DNA variation and the evolution, domestication and phylogeography of Taurine and Zebu cattle (Bos taurus and Bos indicus) //Genetics. 1997. V. 146. P. 1071 1086.

66. MacHugh, D.E., Loftus, R.T., Cunningham, P. & Bradley, D.G. Genetic structure of seven European cattle breeds assessed using 20 micro-satellite markers .//Anim. Genet. 1998. V. 29.P. 333-40.

67. Maurer R.A. Transcriptional regulation of prolactin synthesis and prolactin messenger RNA accumulation in cultured pituitary cells // Nature. 1981. V. 294. P. 94-97.

68. Mitra A., Schlee P., Balakrishnan C.R., Pirchner F. Polymorphism at growth hormone and prolactin loci in Indian cattle and buffalo // J. Anim. Breed. Genet. 1995.V. 112. P. 71 -74.

69. Moisio S., Elo K., Kantanen J., Vill T. Polymorphism within the 3' flanking region of the bovine growth hormone receptor gene.// Anim. Genet. 1998.V. 29. P.55-57

70. Mullis K.B.The polymerase chain reaction in an anemic mode: how to avoid cold oligodeoxyribonuclear fusion. // PCR Methods Appl. 1991. V. 1. P. 1-4.

71. Nakamura Y. The Japan Society of Human Genetics Award Lecture. Application of DNA markers to clinical genetics. // Jpn. J. Hum. Genet. 1996. V. 41. P. 1-10.

72. Niall H.D., Hogan M.L., Sayer R., Rosenblum I.Y., and Greenwood F.C. Sequences of pituitary and placental lactogenic and growth hormones: Evolution from a primordial peptide by gene reduplication. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1977. V. 68. P. 866-869.

73. Ollivier-Bousquet, M. Transferrin and prolactin transcytosis in lactating mammary epithelial cell. // J. Mam. Gland Biol. Neoplasia 1998.V.3. P.303-313.

74. Orita M, Iwahana H, Kanazawa H, Hayashi K, Sekiya T. Detection of polymorphisms of human DNA by gel electrophoresis as single-strand conformation polymorphisms.// Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1989a V.86.№ 8.P.2766-70

75. Orita M, Suzuki Y., Sekiya Т., Hayashi K. A rapid and sensitive detection of point mutation and genetic polymorphism using polymorphism chain reaction.//Genomics 1989b.V.5.P.874-879.

76. Potter L.M., Shelton J.R., McCarthy J.P. Lysine and protein requirements of growing turkeys. //Poult. Sci. 1981. V. 60. P. 2678-2686.

77. Ritz L.R., Glowatzki-Mullis M.L., MacHugh D.E., Gaillard C. Phylogenetic analysis of the tribe Bovine using microsatellites // Animal Genetics. 2000. V. 31. P. 178-185.

78. Rocha J.L., Baker J.F., Womfck J.T., Sanders J.O., Naylor J.F., Statistical associations between restriction fragment length polymorphisms and quantitative traits in beef cattle //J. Anim. Sci. 1992. V. 70. P. 33603370.

79. Rubtsov,P.M. Oganesyan,R.G., Gorbulev,V.G., Skryabin,K.G. and Baev,A.A. Genetic engineering of peptide hormones. II. Possible polymorphism of preprolactin in cattle. Data of molecular cloning // J.Mol. Biol. (Mosk.) 1988.V.22.P.117-127

80. Saiki R. K., Gelfand P. H., Staffel S. et al., Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA Polymerase // Science. 1988. V. 239. P. 487-491.

81. Sabour M.P., Lin C.Y., Lee A.J., McAllister A.J. Association between milk protein genetic variants and genetic values of Canadian Holstein bulls for milk yield traits.// J Dairy Sci. 1996 .V.79. № .6. P. 1050-6.

82. Schindler C., Darnell J.E., Jr Transcriptionalresponses to polypeptide ligands. The JAK- STAT pathway. //Ann. Rev. Biochem. 1995. V.64.P.621-651.

83. Sinha, Y. N. Structural variants of prolactin: occurrence and physiological significance.//Endocr. Rev. 1995.V.16.P.354-369.

84. Slatkin M. A measure of population subdivition based on mocrosatellite allele frequencies.//Genetics 1995.V139.P.457-462.

85. Tanaka M., Minoura H., Ushiro H., Nakashima K. A novel cDNA clone encoding a prolactin-like protein that lacks the two C-terminal cystein residues isolated from bovine placenta. //Biochim. Biophys. Acta 1991.V. 1088.P.385-389.

86. Tautz D. & Schlotterer C.Simple Sequences.//Current Op General and Development 1994.V.4.P. 832-837.

87. Takezaki N.,Nei M. Genetic distances and reconstruction of phylogenetic trees from microsatellite data. // Genetics 1996.V144.P.389-399.

88. Tomoko Ohta, Pattern of Nucleotide Substitutions in Growth Hormone-Prolactin Gene Family: A Paradigm for Evolution by Gene Duplication.//Genetics 1993 .V. 134.P. 1271 -1276

89. Unanian M.M., DeNise S.K., Zhang H.M., Ax R.L. Rapid communication: polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism in the bovine growth hormone gene. // J. Anim. Sci. 1994. V. 72. P. 2203.

90. Van Eijk M.J., Beever J.E., Da Y., Stewart J.A., Nicholaides G.E., Green C.A., Lewin H.A. Genetic mapping of BoLA-A, CYP21, DRB3, DYA, and on PRL BTA23. //Mamm. Genome. 1995. V. 6. P. 151-152.

91. Waters, M. J., C. A. Shang, S. N. Behncken, S. P. Tarn, H. Li, B. Shen, and P. E. Lobie. Growth hormone as a cytokine.// Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 1999 .V.26.P. 760-764.

92. Wolf D.V.A., and Deutch A.U. Identification of distal regulatory element in 5' flanking region of bovine prolactin gene // Nucleic Acids Res. 1990. V. 18. P.4905-4912.

93. Woychik,R.P., Camper,S.A., Lyons,R.H., Horowitz.S., Goodwin,E.C. and Rottman,F.M. Cloning and nucleotide sequencing of the bovine growth hormone gene //Nucleic Acids Res. 1982. V. 10 . P. 7197-7210.

94. Xu A., Lewin H.A. Characterization of bovine malor histicompatibility complex class II genes using the polymerase reaction // Anim. Genet. 1991. V.22. Suppl. l.P. 61-62.

95. Xu A., Van Eijk M.J.T., Park Ch. and Lewin H.A. Polymorphism in BoLA-DRB3 Exon 2 correlates with resistance to persistent lymphocytosis caused Bovine by Leukemia Virus // J. Immunol. 1993. V. 151. P. 6977-6985.

96. Zhang H.M., DeNise S.K., Ax R.L. Rapid communication: Diallelic single- stranded conformational polymorphism detected in the bovine prolactin gene // J. Anim. Sci. 1994. V. 72. P. 256.1. Благодарности

97. Ъ заключение, прежде всего, я хочу выразить признательность и благодарность моей семье; моим родителем за все, что они сделали для меня, моей жене Мэйщан за ее терпение и доброту, моей сестре Малине за ее неоценимую помощь.