Изучение молекулярно-генетических изменений, ассоциированных с развитием злокачественных новообразований щитовидной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Васильев, Евгений Витальевич

• Васильев, Евгений Витальевич
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Васильев, Евгений Витальевич

Список используемых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Клиническая характеристика злокачественных опухолей ЩЖ.

1.1.1. Гистологическая классификация РЩЖ.

1.1.2. Клинико-эпидемиологическая характеристика РЩЖ.

1.2. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза МРЩЖ.

1.3. Молекулярно-генетические аспекты патогенеза опухолей ЩЖ фолликулярного происхождения.

1.3.1. Рецептор тиреотропного гормона.

1.3.2. Протоонкоген RET.

1.3.3. Перестройка PAX-8/PPARy.

1.3.4. Протоонкоген NTRK1.

1.3.5. Протоонкогены семейства RAS.

1.3.6. Протоонкоген BRAF.

1.3.7. Протоонкоген МЕТ.

1.3.8. Гены-супрессоры роста опухолей.

1.4. Резюме.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

2.1. Характеристика клинического материала.

2.2. Забор крови и операционного материала.

2.3. Выделение геномной ДНК.

2.4. Выделение РНК из крови и операционного материала.

2.5. Спектрофотометрическое определение концентрации РНК.

2.6. Синтез кДНК.

2.7. Полимеразная цепная реакция.

2.7.1. ПЦР кодирующих районов гена RET.

2.7.2. Сравнительный анализ экспрессии ЕС- и ТК- доменов RET методом полуколичественной RT-PCR.

2.7.3. Идентификация перестроек RET/PTC1, RET/PTC2, RET/PTC и ARFP/RET методом RT-PCR.

2.7.4. Аллель-специфическая амплификация мутантного аллеля BRAF.

2.8. Рестриктный анализ.

2.9. Электрофоретическое разделение ДНК.

2.9.1. Электрофорез ДНК в неденатурирующем ПААГ.

2.9.2. Электрофорез ДНК в агарозном геле.

2.10. Детекция точковых мутаций методом SSCP.

2.11.Окрашивание ПААГ нитратом серебра.

2.12. Определение нуклеотидной последовательности.

2.13. Программное обеспечение.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Молекулярно-генетический анализ гена RET у больных с наследственной и спорадической формами МРЩЖ.

3.2. Перестройки RET/PTC в тканях ПРЩЖ и других узловых образований ЩЖ.

3.3. Спектр и частота соматических мутациий гена BRAF при ПРЩЖ и других узловых образовниях ЩЖ.

3.4. Молекулярно-генетический анализ протоонкогенов RET и BRAF у больных с семейным ПРЩЖ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изучение молекулярно-генетических изменений, ассоциированных с развитием злокачественных новообразований щитовидной железы»

Рак щитовидной железы (РЩЖ) является наиболее распространенной злокачественной опухолью эндокринных желез (90%) и составляет около 1% всех диагностируемых злокачественных новообразований. Ежегодно в России регистрируется более 6 тыс. новых случаев и отмечается тенденция к увеличению заболеваемости РЩЖ. Смертность в результате злокачественных новообразований ЩЖ превышает совокупную летальность от онкопатологий всех остальных эндокринных органов.

В настоящее время методом выбора при лечении злокачественных опухолей ЩЖ, диагностированных клинически и цитологически, является тотальная тиреоидэкгомия в сочетании с хирургическим удалением лимфатических узлов, расположенных по путям возможного метастазирования опухоли. Эффективность терапии РЩЖ напрямую зависит от распространенности опухолевого процесса, поэтому первостепенное значение имеет проблема усовершенствования существующих и внедрения новых методов ранней дооперационной диагностики РЩЖ. Несмотря на то, что РЩЖ занимает скромное место в общей статистике онкологических заболеваний человека, пальпируемые узловые образования ЩЖ различного генеза выявляются в популяции довольно часто (у ~1% лиц в возрасте 20 лет и у ~5% лиц в возрасте 60 лет), а при скрининговом ультразвуковом исследовании частота обнаружения узлов ЩЖ достигает 20-50%. Онкологическая настороженность при наличии любого узла в ЩЖ обусловливает необходимость применения современных и более эффективных молекулярно-генетических методов исследования, позволяющих проводить раннюю и досимптоматическую диагностику злокачественных опухолевых образований, а также прогнозировать риск малигнизации узлового образования.

Существует четыре основных гистологических варианта РЩЖ, которые составляют 98% злокачественных опухолей ЩЖ: папиллярный РЩЖ (ПРЩЖ), фолликулярный РЩЖ (ФРЩЖ), анапластический (недифференцированный) РЩЖ и медуллярный (МРЩЖ).

Идентификация генетических факторов, ассоциированных с патогенезом каждого их перечисленных типов РЩЖ, является актуальной задачей современной молекулярной онкологии. С точки зрения фундаментальной науки, дифференцированные опухоли ЩЖ фолликулярного происхождения (ПРЩЖ и ФРЩЖ) представляют собой уникальную модель для изучения закономерностей патогенеза различных морфологических и клинических типов опухоли, происходящих из одного типа клеток. Становится все более очевидным, что неопластическая трансформация тиреоцита, особенности гистогенеза опухоли, темпы её роста и прогрессия определяются структурными и функциональными нарушениями клеточного генома.

Особая роль в молекулярной этиологии медуллярной и папиллярной тиреокарцином принадлежит протоонкогену RET. Активирующие точковые мутации RET являются причиной 95% случаев семейных форм МРЩЖ. В связи с этим стала возможной досимптоматическая и пренатальная диагностика заболевания в семьях с отягощенной наследственностью методами молекулярной генетики. ДНК-диагностика наследственного МРЩЖ широко применяется во многих медицинских центрах мира, однако не достаточно распространена в практике отечественных эндокринологических и онкологических клиник.

Значительный интерес представляет изучение соматических нарушений генома, маркирующих злокачественные опухоли ЩЖ. Среди таких нарушений наибольшего внимания заслуживают онкогенные перестройки гена RET (RET/PTC) и соматические мутации протоонкогена BRAF, которые, по данным исследований последних лет, специфичны для наиболее распространенного варианта злокачественных опухолей ЩЖ - ПРЩЖ. Настоящее исследование посвящено разработке методических подходов к их выявлению, а также оценке диагностической значимости этих нарушений как потенциальных маркеров ПРЩЖ для российских больных.

Принимая во внимание медицинскую, социальную и научную значимость проблемы злокачественных новообразований ЩЖ, изучение генетических нарушений в опухолевой клетке представляется крайне перспективным направлением в молекулярной и клинической онкологии и позволит расширить наши знания о природе РЩЖ на генетическом уровне.

Цель и задачи исследования

Цель работы - изучение наследственных и соматических молекулярно-генетических изменений, ассоциированных с развитием наиболее частых вариантов РЩЖ и разработка экспериментальных подходов к ранней и досимптоматической диагностике злокачественных новообразований ЩЖ.

Достижение поставленной цели предусматривает решение следующих экспериментальных задач:

1. Провести поиск и характеристику терминальных мутаций протоонкогена RET у пациентов с различными формами МРЩЖ.

2. Разработать скрининговый метод выявления химерных онкогенов RET/PTC в тканях узловых образований ЩЖ на основе определения гиперэкспрессии тирозинкиназного домена RET с помощью полуколичественной RT-PCR.

3. Определить частоту химерных онкогенов RET/PTC в узловых образованиях ЩЖ и провести идентификацию наиболее распространенных вариантов перестроек в RET/PTC-положительных образцах.

4. Определить частоту мутаций протоонкогена BRAF в тканях различных узловых образований ЩЖ.

5. Оценить диагностическую значимость перестроек RET/PTC и соматических мутаций BRAF в качестве потенциальных маркеров злокачественности новообразований ЩЖ.

Научная новизна

В результате проведенного исследования изучен спектр мутаций протоонкогена RET у больных с семейной и спорадической формами МРЩЖ. Выявлено 11 различных мутаций протоонкогена RET у 46 человек из 25 семей. Впервые идентифицирована комплексная терминальная мутация (делеция с инсерцией без сдвига рамки считывания) 18951907 delins4 в 11 экзоне RET и впервые в России обнаружена редкая геминальная трансверсия G1891T (D631Y). Установлено, что преобладающим типом терминальных мутаций в гене RET у российских больных с наследственными формами МРЩЖ являются миссенс-мугации внеклеточного цистеин-богатого домена. Впервые выявлена "молчащая" мутация G2673A (S891S) в семье с наследственным ПРЩЖ.

Впервые в России охарактеризована частота соматических перестроек RET/PTC и мутаций гена BRAF в выборке спорадических узловых образований ЩЖ и показана специфичность этих нарушений для ПРЩЖ. В двух случаях ПРЩЖ выявлены редкие или не охарактеризованные варианты перестроек RET/PTC, а также обнаружен новый онкоген ARFP/RET в ткани радиационно-индуцированного ПРЩЖ. Помимо стандартной замены Т1796А, впервые при ПРЩЖ описаны две новые соматические мутации гена BRAF: G1753A

Е585К) и делеция del 18001811. Механизм онкогенного действия последней мутации, затрагивающей "активирующий сегмент" киназы B-RAF может представлять теоретический интерес для изучения регуляции ее активности.

Практическая значимость

В результате проведенного исследования разработаны подходы для молекулярной диагностики и характеристики микроструктурной патологии гена RET при наследуемых формах МРЩЖ. Проведена ДНК-диагностика у 72 больных с МРЩЖ из 64 неродственных семей, а также у 30 их здоровых родственников. Практическая значимость работы связна с возможностью досимптоматической диагностики МРЩЖ среди лиц повышенного риска, а также выявления новых семейных случаев МРЩЖ. У 13 человек терминальные мутации RET обнаружены до начала клинической манифестации заболевания, а профилактическое хирургическое лечение проведено четырем из них. У 17 обследованных здоровых родственников носительство мутации было исключено. Наследственный характер заболевания установлен для пациентов со "спорадическим" МРЩЖ из 10 семей.

Высокая частота перестроек RET/PTC и мутаций гена BRAF в обследованных тканях ПРЩЖ (75.8%), а также их абсолютная специфичность для ПРЩЖ делает эти генетические нарушения перспективными молекулярными маркерами злокачественности для дооперационной дифференциальной диагностики ПРЩЖ. Именно ПРЩЖ составляет большинство случаев РЩЖ (60-80%) и поражает людей трудоспособного возраста (30-50 лет). С этим связана социально-экономическая значимость результатов настоящего исследования.

Методы, использованные в данной работе, вполне доступны и могут быть адаптированы к применению в клинических лабораториях. Результаты исследования внедрены в практику МРНЦ РАМН (Обнинск) и ЭНЦ РАМН.

Положения, выносимые на защиту

1. Определены частота и спектр мутаций протоонкогена RET при различных формах МРЩЖ; наибольшую диагностическую значимость имеют мутации цистеин-богатой области внеклеточного домена RET.

2. Разработан эффективный скрининговый метод выявления химерных онкогенов RET/PTC с помощью сравнительного анализа экспрессии внеклеточного и каталитического доменов RET.

3. Соматические перестройки RET/PTC и мутации гена BRAF - специфические молекулярные маркеры ПРЩЖ, которые представляют собой альтернативные механизмы активации RAS-RAF-MEK-ERK МАР-киназного каскада в этиопатогенезе ПРЩЖ.

4. Соматические мутации гена BRAF при ПРЩЖ достоверно чаще встречаются у пациентов старшей возрастной группы.

Заключение диссертации по теме «Генетика», Васильев, Евгений Витальевич

выводы

1. Определена частота и спектр молекулярной патологии протоонкогена RET при обследовании 72 пациентов из 64 неродственных семей с различными клиническими формами МРЩЖ. Идентифицировано 11 различных мутаций RET у 33 больных из 25 семей. Впервые выявлена и охарактеризована терминальная делеция с инсерцией 18951907delins4 в 11 экзоне гена RET. У 13 человек мутации обнаружены до начала клинической манифестации заболевания; у 17 носительство мутаций гена RET исключено.

2. Разработан эффективный метод выявления химерных онкогенов RET/PTC с помощью сравнительного анализа экспрессии внеклеточного и каталитического доменов протоонкогена RET. В 14.1% (12/85) папиллярных тиреокарцином обнаружен дисбаланс экспрессии ТК- и ЕС- доменов, указывающий на наличие перестроек RET/PTC. Среди них - 7 случаев RET/PTC1, 2 - RET/PTC3, 1 - ARFP/RET и 2 неидентифицированных онкогена RET/PTC.

3. Определена частота соматических мутаций гена BRAF в выборке папиллярных карцином ЩЖ. В 60% (55 из 91) образцов ПРЩЖ обнаружена трансверсия Т1796А. Показано достоверное преобладание мутации Т1796А у пациентов старшей возрастной группы. Впервые при ПРЩЖ описаны транзиция G1753А и делеция del 18001811.

4. Отсутствие случаев перекрывания мутаций гена BRAF и онкогенов RET/PTC позволяет считать эти два события альтернативными механизмами активации МАР-киназного сигнального каскада в этиопатогенезе папиллярных карцином ЩЖ. Суммарная частота мутаций BRAF и перестроек RET/PTC в обследованных образцах ПРЩЖ составила 75,8% (69/91). В связи с высокой частотой и специфичностью эти маркеры могут быть использованы для предоперационной диагностики ПРЩЖ.

5. Проведен скрининг точковых мутаций протоонкогена RET у 6 пациентов из 3 семей с наследственным ПРЩЖ. У 2 пациентов из одной семьи обнаружена однонуклеотидная замена G2673A (S891S). Терминальных перестроек RET/PTC и мутаций гена BRAF в случаях семейного ПРЩЖ не обнаружено.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Информация о генетических основах наследственных и спорадических форм РЩЖ, накопленная за последние годы благодаря достижениям молекулярной медицины, позволяет успешно применять методы молекулярной биологии в целях своевременной диагностики этих заболеваний. Результаты представленной работы свидетельствуют о том, что использование молекулярных маркеров может иметь практическое значение в клинической онкологии.

Исследование молекулярных нарушений протоонкогена RET позволило выполнить ДНК-диагностику наследственного МРЩЖ у больных из 64 семей. В общей сложности в 25 семьях было выявлено И различных мутаций, одна из которых описана впервые. Практическое значение ДНК-диагностики МРЩЖ связано с возможностью идентификации носителей мутации задолго до начала клинической манифестации заболевания. В настоящей работе в 4 из 13 таких случаев досимптоматическое выявление мутации RET послужило основанием для профилактической тиреоидэктомии.

При изучении соматических маркеров злокачественности были проанализированы частоты перестроек RET/PTC и мутаций гена BRAF в тканях узловых образований ЩЖ. С этой целью нами разработан метод полуколичественной RT-PCR, который позволил определять гиперэкспрессию каталитического домена RET и выявить химерные онкогены RET/PTC в 14% исследованных тканей ПРЩЖ. Среди RET/PTC-положительных опухолей идентифицировано 3 известных перестройки - RET/PTC1, RET/PTC3 и ARFP/RET, а также обнаружено два редких или не охарактеризованных онкогена RET/PTC. В 62% исследованных образцов ПРЩЖ выявлена мажорная мутация протоонкогена BRAF и описаны две новые соматические мутации. В связи с отсутствием случаев перекрывания соматических мутаций BRAF и RET/PTC сделан вывод о том, что эти генетические нарушения являются альтернативными механизмами активации RAS-RAF-MEK-ERK МАР-киназного каскада в тиреоцитах при патогенезе ПРЩЖ. Высокая суммарная частота перестроек RET/PTC и мутаций BRAF (75%), показанная в настоящей работе, и абсолютная специфичность для папиллярных карцином позволят в будущем использовать эти генетические маркеры для дооперационной диагностики ПРЩЖ, используя материал ТАБ. Проведение молекулярно-генетического исследования может быть особенно важным в случаях неоднозначного результата цитологического исследования подозрительных узлов ЩЖ.

Таким образом, на сегодняшний день очевидно, что для решения задачи ранней диагностики новообразований ЩЖ, а также разработки новых критериев оценки течения заболевания и выбора оптимальных лечебных мероприятий, необходимо объединение традиционных клинических, инструментальных и лабораторных алгоритмов диагностики с современными методами молекулярно-генетического тестирования.

Кроме того, достижения науки последних лет в области молекулярной онкологии позволяют надеяться на скорейшую разработку новых фармакологических и генотерапевтических подходов к лечению злокачественных новообразований ЩЖ.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Васильев, Евгений Витальевич, 2005 год

1. Амосенко Ф.А., Бржезовский В.Ж., Любченко Л.Н., Шабанов М.А., Козлова В.М., Ванушко В.Э., Казубская Т.П., Гарькавцева Р.Ф., Калинин В.Н. Анализ мутаций в протоонкогене RET у больных с медуллярным раком щитовидной железы. Генетика 2003; 39(6): 847-854.

2. Демидчик Е.П., Цыб А.Ф., Лушников Е.Ф., Аверкин Ю.И. Рак щитовидной железы у детей (последствия аварии на чернобыльской АЭС). // М.: Медицина, 1996 208 с.

3. Океанов А.Е., Демидчик Е.П., Анкундович М.А. Заболеваемость раком щитовидной железы в Республике Беларусь. Радиация и риск. 1995; 6: 236 239.

4. Adams G.E., Сох R. Radiation carcinogenesis. In: Franks L.M., Teich N.M. (eds.) Cellular and molecular biology of cancer. Third edition. Oxford University Press. Oxford, New York, Tokyo. 130-150.

5. Alberti L., Carniti C., Miranda C., Roccato E., Pierotti M.A. RET and NTRK1 Proto-oncogenes in human diseases. J. Cell. Physiol. 2003; 195: 168-186.

6. Anders J., Kjar S., Ibanez C.F. Molecular modeling of the extracellular domain of the RET receptor tyrosine kinase reveals multiple cadherin-like domains and calcium-binding site. J. Biol. Chem. 2001; 276: 35808-35817.

7. Asai N., Iwashita Т., Matsuyama M., Takahashi M. Mechanism of activation of the ret proto-oncogene by multiple endocrine neoplasia 2A mutations. Mol. Cell Biol. 1995; 15: 1613-1619.

8. Bachelot A., Lombardo F., Baudin E., Bidart J.M., Schlumberger M. Inheritable forms of medullary thyroid carcinoma. Biochimie 2002; 84: 61-66.

9. Baloh R.H., Enomoto H., Johnson E.M., Milbrandt J.Jr. The GDNF family ligands and receptors— Implications for neural development. Curr. Opin. Neurobiol. 2000; 10:103-110.

10. Bardelli A., Parsons D.W., Silliman N., Ptak J., Szabo S., Saha S., Markowitz S., Willson J.K., Parmigiani G., Kinzler K.W., Vogelstein В., Velculescu V.E. Mutational analysis of the tyrosine kinome in colorectal cancers. Science 2003; 300: 949.

11. Barnier J.V., Papin C., Eychene A., Lecoq O., Calothy G. The mouse B-raf gene encodes multiple protein isoforms with tissue-specific expression. J. Biol. Chem. 1995; 270: 23381-23389.

12. Barr F. Translocations, cancer and the puzzle of specificity. Nat. Genet. 1999; 19: 121-124.

13. Beimfohr С., Klugbauer S., Demidchik E.P., Lengfelder E., Rabes H.M. NTRK1 rearrangement in papillary thyroid carcinomas of children after the Chernobyl reactor accident. Int. J. Cancer 1999; 80: 842-847.

14. Blum H., Beier H., Gross H.J. Improved silver staining of plant proteins, RNA and DNA in polyacrylamide gels. Electrophoresis 1987; 8: 93-99.

15. Bongarzone I., Vigneri P., Mariani L., Collini P., Pilotti S., Pierotti M.A. RET/NTRK1 rearrangements in thyroid gland tumors of the papillary carcinoma family: correlation with clinopathological features. Clin. Cancer Res. 1998; 4: 223-228.

16. Borrello M.G., Mercalli E., Perego C., Degl'Innocenti D., Ghizzoni S., Arighi E., Eroini В., Rizzetti M.G., Pierotti M.A. Differential interaction of Enigma protein with the two RET isoforms. Biochem. Biophys. Res. Commun. 2002; 296: 515-522.

17. Bos J.L. Ras oncogenes in human cancer: a review. Cancer Res. 1989; 49: 4682-4689.

18. Brauckhoff M., Gimm O., Hinze R., Ukkat J., Brauckhoff K., Dralle H. Papillary thyroid carcinoma with RET proto-oncogene germline mutation. Thyroid 2002; 12: 557-561.

19. Brose, M.S., Volpe P., Feldman M., Kumar M., Rishi I., Gerrero R., Einhorn E., Herlyn M., Minna J., Nicholson A., Roth S.M., Albelda S.M., Davies H. BRAF and RAS mutations in human lung cancer and melanoma. Cancer Res. 2002; 62: 6997-7000.

20. Bullow, С., Bullow, S., Group, L.C.P. Is screening for thyroid carcinoma indicated in familial adenomatous polyposis? International Journal of Colorectal Disease 1997; 12: 240-242.

21. Bunone G., Uggeri M., Mondellini P., Pierotti M.A., Bongarzone I. RET receptor expression in thyroid follicular epithelial cell-derived tumors. Cancer Res. 2000; 60: 2845-2849.

22. Busca R. et al. Ras mediates the cAMP-dependent activation of extracellular signal-regulated kinases (ERKs) in melanocytes. EMBOJ. 2000; 19: 2900-2910.

23. Cai D., Shen Y., De Bellard M., Tang S., Filbin M.T. Prior exposure to neurotrophins blocks inhibition of axonal regeneration by MAG and myelin via a cAMP-dependent mechanism. Neuron 1999; 22: 89-101.

24. Cai W-I, Lukes Y., Burch H.B., Djuh Y-Y, Carr F., Wartofsky L., Rhooms P., D'Avis J., Baker J.R. Jr., Burman K.D. Analysis of human TSH receptor gene and RNA transcripts in patients with thyroid disorders. Autoimmunity 1992; 13: 43-50.

25. Canzian F., Amati P., Harach H.R., Kraimps J.L., Lesueur F., Barbier J., Levillain P., Romeo G., Bonneau D. () A gene predisposing to familial thyroid tumors with cell oxyphilia maps to chromosome 19pl3.2. Am. J. Hum. Genet. 1998; 63: 1743-1748.

26. Carlson K.M., Bracamontes J., Jackson C.E., Clark R., Lacroix A., Wells S.A., Goodfellow P.J. Parent-of-origin in multiple endocrine neoplasia type 2B. Am. J. Hum. Genet.\99A\ 55: 1076-1082.

27. Cartegni L., Chew S.L., Krainer A.R. Listening to silence and understanding nonsense: exonic mutations that affect splicing. Nat Rev Genet. 2002; 3: 285-298.

28. Challeton C., Bounacer A., Du Villard J.A., Caillou В., De Vathaire F., Monier R., Schlumberger M., Suarez H.G. Pattern of ras and gsp oncogene mutations in radiation-associated human thyroid tumors. Oncogene 1995; 11: 601-603.

29. Chong H., Vikis H.G., Guan K-L. Mechanisms of regulating the Raf kinase family. Cell. Signal. 2003; 15: 463-469.

30. Ciampi R., Knauf J.A., Kerler R., Gandhi M., Zhu Z., Nikiforova M.N., Rabes H.M., Fagin J.A., Nikiforov Y.E. Oncogenic AKAP9-BRAF fusion is a novel mechanism of МАРК pathway activation in thyroid cancer. J. Clin. Invest. 2005; 115: 94-101.

31. Cohen Y., Xing M., Mambo E., Guo Z., Wu G„ Trink В., Beller U., Westra W.H., Ladenson P.W., Sidransky D. BRAF mutation in papillary thyroid carcinoma. J. Natl. Cancer Inst. 2003; 95: 625627.

32. Conard R.A., Knudsen K.D., Dobyns B.M. A 20-year review of medical findings in a Marshallese population accidentally exposed to radioactive fallout // BNL 50424. Upton, NY, Brookhaven National Laboratory, 1975, p. 1-154.

33. Conde E., Martin-Lacave I., Utrilla J.C., Moreno A., Gonzales-Campora R., Galera-Davidson H. Mitotic activity of the edocrine cells in rat thyroid glands during postnatal life. Endocrinology 1992; 131:436-440.

34. Corvi R., Berger N., Balczon R., Romeo G. RET/PCM-1: A novel fusion gene in papillary thyroid carcinoma. Oncogene 2000; 19: 4236-4242.

35. Corvi R., Martinez-Alfaro M., Harach H.R., Zini M., Papotti M., Romeo G. Frequent RET rearrangements in thyroid papillary microcarcinoma detected by interphase fluorescence in situ hybridization. Lab. Invest. 2001a; 81: 1639-1645.

36. Corvi R., Lesueur F., Martinez-Alfaro M., Zini M., Decaussin M., Murat A., Romeo G. RET rearrangements in familial papillary thyroid carcinomas. Cancer Lett. 2001b; 170: 191-198.

37. Daley G.Q., McLaughlin J., Witte O.N., Baltimore D. The CML-specific P210 bcr/abl protein, unlike v-abl, does not transform NIH/3T3 fibroblasts. Science 1987; 237: 532-535.

38. DeCourcy J.L., DeCourcy C.B. Phaeochromocytoma and the general practitioner. Barclay Newman, Cincinnati; 1952.

39. Delbridge L., Robinson B. Genetic and biochemical screening for endocrine disease: III. Costs and logistics. World J. Surg. 1998; 22: 1212-1217.

40. Demidchik E., Tronko M. et al. in Radiation and Thyroid Cancer (eds Thomas, G., Karaoglou, A. & Williams, E. D.) P. 51-70. (World Scientific, Singapore, 1999).

41. Di Renzo M.F., Olivero M., Ferro S., Prat M., Bongarzone I., Pilotti S., Belfiore A., Constantino A., Vigneri R., Pierotti M.A., Comoglio P.M. Overexpression of the c-MET/HGF receptor in human thyroid carcinomas. Oncogene 1992, 7: 2549-2554.

42. Dibb N.J., Dilworth S.M., Mol C.D. Switching on kinases: oncogenic activation of BRAF and the PDGFR family. Nat. Rev. Cancer 2004; 4: 718-727.

43. Donghi R., Longoni A., Pilotti S., Michieli P., Delia Porta G., Pierotti M.A. Gene p53 mutations are restricted to poorly differentiated and undifferentiated carcinomas of the thyroid gland. J. Clin. Invest. 1993; 91: 1753-1760.

44. Donis-Keller H., Dou S., Chi D. Carlson K.M., Toshima K., Lairmore T.C., Howe J.R., Moley J.F., Goodfellow P.,Wells S.A. Mutations in the RET proto-oncogene are associated with MEN 2A and FMTC. Hum. Mol. Genet. 1993; 2: 851-856.

45. Du Villard, Wicker R., Crespo P., Filetti S., Gutkind J.S., Sarasin H.G. Role of the cAMP and МАРК pathways in the transformation of mouse 3T3 fibroblasts by a TSHR gene constitutively activated by point mutation. Oncogene 2000; 19: 4896-4905.

46. Duffy B.J., Fitzerald P. Thyroid cancer in childhood and adolescence: a report on twenty-eight cases. Cancer 1950; 10: 1018 1032.

47. Dumont J.E., Maenhaut C., Pirson I., Baptist M., Roger P.P. Growth factors controlling the thyroid gland. Bailliere's Clin. Endocrinol. Metab. 1991; 5: 727-754.

48. Elisei R., Shiohara M., Koeffler H.P., Fagin J.A. Genetic and epigenetic alterations of the cycl independent kinase inhibitors pl5INK4b and pl6INK4a in human thyroid carcinoma cell lines and primary thyroid carcinomas. Cancer 1998; 83: 2185-2193.

49. Eng C. RET proto-oncogene in the development of human cancer. J. Clin. Oncol. 1999; 17: 380393.

50. Esapa С., Foster S., Johnson S., Jameson J.L., Kendall-Taylor P., Harrrris P.E. G protein and thyrotropin receptor mutations in thyroid neoplasia. J. Clin. Endocrinol. Metab. 1997; 82: 493496.

51. Fagin J.A. How thyroid tumors start and why it matters: kinase mutants as targets for solid cancer pharmacotherapy. J. Endocrinol. 2004,183: 249-256.

52. Fagin J.A., Matuso K., Karmakar A., Lin Chew D., Tang S-H, Koeffler H.P. High prevalence of mutations of the p53 gene in poorly differentiated human thyroid carcinoma. J. Clin. Invest. 1993; 91: 179-184.

53. Farid N.R., Shi Y., Zou M. Molecular basis of thyroid cancer. Endocr. Rev. 1994; 15: 202-232.

54. Fitze G., Schierz M., Bredow J., Saeger H.D., Roesner D., Schackert H.K. Various penetrance of familial medullary thyroid carcinoma in patients with RET protooncogene codon 790/791 germline mutations.Ann. Surg. 2002; 236: 570-575.

55. Fuhrer D. A nuclear receptor in thyroid malignancy: is PAX8/PPARy the Holy Grail of follicular thyroid cancer? Eur. J. Endocrinol. 2001; 144: 453-456.

56. Fukuda Т., Kiuchi K., Takahashi M. Novel mechanism of regulation of Rac activity and lamellipodia formation by RET tyrosine kinase. J. Biol. Chem. 2002; 211: 19114-19121.

57. Fukushima Т., Suzuki S., Mashiko M., Ohtake Т., Endo Y., Takebayashi Y., Sekikawa K., Hagiwara K., Takenoshita S. BRAF mutations in papillary carcinomas of the thyroid. Oncogene 2003; 22:6455-6457.

58. Fusco A., Grieco M., Santoro M., Berlingieri M.T., Pilotti S., Pierotti M.A., Delia Porta G., Vecchio G. A new oncogene in human papillary thyroid carcinomas and their lymph-nodal metastases. Nature 1987; 328: 170-172.

59. Gimm O. Thyroid cancer. Cancer Lett. 2001; 163: 143-156.

60. Gire V., Wynford-Thomas D. RAS oncogene activation induces proliferation in normal human thyroid epithelial cells without loss of differentiation. Oncogene 2000; 19: 737-744.

61. Goldgar D.E., Easton D.F., Cannon-Albright L.A., Skolnick M.H. Systematic population-based assessment of cancer risk in first-degree relatives of cancer probands. J. Natl. Cancer Inst. 1994; 86: 1600-1608.

62. Grant B.D., Hemmer W., Tsigelny I., Adams J.A., Taylor S.S. Kinetic analyses of mutations in the glicine-rich loop of cAMP-dependent protein kinase. Biochemistry 1998; 37: 7708-7715.

63. Greco A., Miranda C., Pagliardini S., Fusetti L., Bongarzone I., Pierotti M.A. Chromosome 1 rearrangements involving the genes TPR and NTRK1 produce structurally different thyroid-specific TRK oncogenes. Genes Chrom. Cancer 1997; 19: 112-123.

64. Hall P., Mattsson A., Boice J.D. Thyroid cancer after diagnostic administration of iodine-131. Radiat. Res. 1996; 145:86-92.

65. Hansford J.R., Mulligan L.M. Multiple endocrine neoplasia type 2 and RET: from neoplasia to neurogenesis. J. Med. Genet. 2000; 37: 817-827.

66. Harach H.R., Franssila K.O., Wasenius V.M. Occult papillary carcinoma of the thyroid. A "normal" finding in Finland. A systematic autopsy study. Cancer 1985; 56: 531-538.

67. Heldin C.H., Westermark B. Mechanism of action and in vivo role of platelet-derived growth factor. Physiol. Rev. 1999; 79: 1283-1316.

68. Herfarth K.K., Bartsch D., Doherty G.M., Wells S.A.Jr., Lairmore T.C. Surgical management of hyperparathyroidism in patients with multiple endocrine neoplasia type 2A. Surgery 1996; 120: 966-973; discussion P. 973-974.

69. Herrmann M.A., Hay I.D., Bartelt D.H., Ritland S.R., Dahl R.L., Grant C.S. Cytogenetic and molecular genetic studies of follicular and papillary thyroid cancers. J. Clin. Invest. 1991; 88: 1596-1604.

70. Hoelting Т., Tezelman S., Siperstein A.E., Duh Q-Y., Clark O.H. Thyrotropin stimulates invasion and growth of follicular thyroid cancer cells via PKC-rather than РКА-activation. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1993; 195: 1230-1236.

71. Hoppner W., Ritter M.M. A duplication of 12 bp in the critical cysteine rich domain of the RET proto-oncogene results in a distinct phenotype of multiple endocrine neoplasia type 2A. Hum. Mol. Genet. 1997; 6: 587-590.

72. Hoppner W., Dralle H., Brabant G. Duplication of 9 base pairs in the critical cysteine-rich domain of the RET proto-oncogene causes multiple endocrine neoplasia type 2A. Hum. Mutat. 1998; Suppl 1: S128-S130.

73. Ichihara M., Murakumo Y., Takahashi M. RET and neuroendicrine tumors. Cancer Lett. 2004; 204: 197-211.

74. Ikawa S., Fukui M., Ueyama Y., Tamaoki N., Yamamoto Т., Toyoshima K. B-raf, a new member of the raf family, is activated by DNA rearrangement. Mol. Cell Biol. 1988; 8: 2651-2654.

75. Her M.A., King D.R., Ginn-Pease M.E., O'Dorisio T.M., Sotos J.F. Multiple endocrine neoplasia type 2A: a 25-year review. J. Pediatr. Surg. 1999; 34: 92-96; discussion P. 96-97.

76. Ito Т., Seyama Т., Mizuno Т., Tsuyama N., Hayashi Т., Hayashi Y., Dohi K., Nakamura N., Akiyama N. Unique association of p53 mutations with undifferentiated but not differentiated carcinomas of the thyroid gland. Cancer Res. 1992, 52: 1369-1371.

77. Ito Т., Seyama Т., Iwamoto K.S., Hayashi Т., Mizuno T. Tsuyama N. In vitro irradiation is able to cause RET oncogene rearrangement. Cancer Res. 1993; 53: 2940-2943.

78. Ivan M., Wynford-Thomas D., Jones C.J. Abnormalities of the P16INK4A gene in thyroid cancer cell lines. Eur. J. Cancer 1996; 32A: 2369-2370.

79. Iwamoto Т., Taniguchi M., Asai N., Ohkusu K., Nakashima I., Takahasi M. cDNA cloning of mouse ret proto-oncogene and its sequence similarity to the cadherin superfamily. Oncogene 1993; 8: 1087-1091.

80. Jansen H.W., Lurz R., Bister K., Bonner T.I., Mark G.E., Rapp U.R. Homologous cell-derived oncogenes in avian carcinoma virus MH2 and murine sarcoma virus 3611. Nature 1984; 307: 281284.

81. Jindrichova S., Vcelak J., Vlcek P., Neradilova M., Nemec J., Bendlova B. Screening of six risk exons of the RET proto-oncogene in families with medullary thyroid carcinoma in the Czech Republic J. Endocrinol., Nov 2004; 183: 257 265.

82. Johnson L.N., Lowe E.D., Noble M.E., Owen D.J. The Eleventh Datta Lecture. The structural basis for substrate recognition and control by protein kinases. FEBS Lett. 1990; 430: 1-11.

83. Kacinski B.M. CSF-1 and its receptor in breast carcinomas and neoplasms of the female reproductive tract. Mol. Reprod. Dev. 1997; 46: 71-74.

84. Kawamoto Y., Takeda K., Okuno Y., Yamakawa Y., Ito Y., Taguchi R., Kato M., Suzuki H., Takahashi M., Nakashima I. Identification of RET autophosphorylation sites by mass spectrometry. J. Biol. Chem. 2004; 279: 14213-14224.

85. Kazakov V.S., Demidchik E.P., Astakhova L.N. Thyroid cancer after Chernobyl. Nature 1992; 359:21.

86. Kemmer K. Corless C.L., Fletcher J.A., McGreevey L., Haley A., Griffith D., Cummings O.W., Wait C., Town A., Heinrich M.C. KIT mutations are common in testicular seminomas. Am. J. Pathol. 2004; 164: 305-313.

87. Klugbauer S., Lengfelder E., Demidchik E.P., Rabes H.M. High prevalence of RET rearrangement in thyroid tumors of children from Belarus after the Chernobyl reactor accident. Oncogene 1995; 11: 2459-2467.

88. Klugbauer S., Demidchik E.P., Lengfelder E., Rabes H.M. Detection of a novel type of RET rearrangement (PTC5) thyroid carcinomas after Chernobyl and analysis of involved RET-fused gene RFG5. Cancer Res. 1998; 58:198-203.

89. Klugbauer S., Rabes H.M. The transcription coactivator HTIF1 and a related protein are fused to the RET receptor tyrosine kinase in childhood papillary thyroid carcinomas. Oncogene 1999; 18: 4388-4393.

90. Klugbauer S., Jauch A., Lengfelder E., Demidchik E., Rabes H.M. A novel type of RET rearrangement (PTC8) in childhood papillary thyroid carcinomas and characterization of the involved gene (RFG8). Cancer Res. 2000; 60: 7028-7032.

91. Kobayashi K., Shaver J., Liang W., Siperstein A.E., Duh Q-Y, Clark O.H. Increased phospholipase С activity in neoplastic thyroid membrane. Thyroid 1993; 3: 25-29.

92. Kroll T.G., Sarraf P., Pecciarini L., Chen C.J., Mueller E., Spiegelman B.M. PAX8-PPARgammal fusion oncogene in human thyroid carcinoma. Science 2000; 289: 1357-1360.

93. La Perle K.M., Jhiang S.M., Capen C.C. Loss of p53 promotes anaplasia and local invasion in ret/PTC 1-induced thyroid carcinomas. Am. J. Pathol. 2000; 157: 671-677.

94. Lackey K., Cory M., Davis R., Frye S.V., Harris P.A., Hunter R.N., Jung D.K., McDonald O.B., McNutt R.W., Peel M.R., Rutkowske R.D., Veal J.M., Wood E.R. The discovery of potent cRafl kinase inhibitors. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2000; 10: 223-226.

95. Lang J., Boxer M., MacKie R. Absence of exon 15 BRAF germline mutations in familial melanoma. Hum. Mutat. 2003; 21: 327-330.

96. Laugwitz K-L, Allgeier A, Offermanns S, Spicher K, Van Sande J, Dumont JE, Schultz G. The human thyrotropin receptor a heptahelical receptor capable of stimulating members of all four G protein families. Proc. Natl. Acad. Sc.i USA 1995; 93: 116-120.

97. Leboulleux S., Baudin E., Travagli J.P., Schlumberger M. Medullary thyroid carcinoma. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2004; 61: 299-310.

98. Loh K-C. Familial nonmedullary thyroid carcinoma: a meta-review of case series. Thyroid 1997; 7: 107-113.

99. Luckett J.C., Huser M.B., Giagtzoglou N., Brown J.E., Pritchard C.A. Expression of the A-raf proto-oncogene in the normal adult and embryonic mouse. Cell Growth Differ. 2000; 11: 163-171.

100. Machens A., Holzhausen H.J., Thanh P.N., Dralle H. Malignant progression from C-cell hyperplasia to medullary thyroid carcinoma in 167 carriers of RET germline mutations. Surgery 2003; 134:425-431.

101. Malchoff C.D., Malchoff D.M. The genetics of hereditary nonmedullary thyroid carcinoma. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2002; 87: 2455-2459.

102. Manie S., Santoro M., Fusco A., Billaud M. The RET receptor: function in development and dysfunction in congenital malformation. Trends in Genetics 2001; 17: 580-589.

103. Marsh D.J., Andrew S.D., Learoyd D.L., Pojer R., Eng C., Robinson B.G. Deletion-insertion mutation encompassing RET codon 634 is associated with medullary thyroid carcinoma. Hum. Mutat. 1998; Suppl. 1: S. 3-4.

104. Martin-Zanca D, Hughes SH, Barbacid M. A human oncogene formed by the fusion of truncated tropomyosin and protein tyrosine kinase sequences. Nature 1986; 319: 743-748.

105. Matsuo S.E., Martins L., Leoni S.G., Hajjar D., Ricarte-Filho J.C.M., Ebina K.N., Kimura E.T. Marcadores biologicos de tumores tiroidianos. Arq. Bras. Endocrinol. Metab. 2004; 48: 114-125.

106. Mclver В., Goellner J.R., Hay I.D. Mixed medullary-papillary thyroid carcinoma in a patient with multiple endocrine neoplasia type 2B (MEN-2B). Thyroid 1996; 6 (Suppl 1): 16.

107. Mehta R.G., Williamson E., Patel M.K., Koeffler H.P. A ligand of peroxoisome proliferator-activated receptor y, retinoids, and prevention of preneoplastic mammary lesions. J. Natl. Cancer Inst. 2000; 92:418-423.

108. Mercer K.E., Pritchard C.A. Raf proteins and cancer: B-Raf is identified as a mutational target. Biochim. Biophys. Acta 2003; 1653: 25-40.

109. Mizuno Т., Iwamoto K.S., Kyoizumi S., Nagamura H., Shinohara Т., Koyama K., Seyama Т., Hamatani K. Preferential induction of RET/PTC 1 rearrangement by X-ray irradiation. Oncogene 2000; 19: 438-443.

110. Mulligan L.M., Kwok J.B., Healey C.S., Elsdon M.J., Eng C., Gardner E., Love D.R., Mole S.E., Moore J.K., Papi L. Germ-line mutations of the RET proto-oncogene in multiple endocrine neoplasia type 2A. Nature 1993; 363: 458-460.

111. Musholt T.J., Musholt P.В., Khaladj N., Schultz D., Scheumann G.F.W., Klempnauer J. Prognostic significance of RET and NTRK1 rearrangements in sporadic papillary thyroid carcinoma. Surgery 2000; 128: 984-993.

112. Myers S.M., Eng С., Ponder B.A.J., Mulligan L.M. Characterization of RET proto-oncogene 3' splicing variants and polyadenylation sites: A novel C-terminus for RET. Oncogene 1995; 11: 2039-2045.

113. Nakamura Т., Ishizaka Y., Nagao M., Ishikawa T. Expression of the ret proto-oncogene product in human normal and neoplastic tissues of neural crest origin. J. Pathol. 1994; 172: 255-260.

114. Nakata Т., Kitamura Y., Shimizu K., Tanaka S., Fujimori M., Yokoyama S., Ito K., Emi M. Fusion of a novel gene, ELKS, to RET due to translocation t(10;12)(qll;pl3) in a papillary thyroid carcinoma. Genes Chrom. Cancer 1999; 25: 97-103.

115. Newton C. R., Graham A., Heptinstall L.E., Powell S.J., Summers C., Kalsheker N., Smith J.C., Markham A.F. Analysis of any point mutation in DNA. The amplification refractory mutation system (ARMS). Nucleic Acids Res. 1989; 17: 2503-2516.

116. Nikiforov Y.E., Gnepp D.R. Pathomorphology of thyroid gland lesions associated with radiation exposure: the Chernobyl experience and review of the literature. Adv. Anat. Pathol. 1999; 6: 78-91.

117. Nikiforov Y.E., Nikiforova M.N., Gnepp D.R., Fagin J.A. Prevalence of mutations of ras and p53 in benign and malignant thyroid tumors from children exposed to radiation after the Chernobyl nuclear accident. Oncogene 1996; 13: 687-693.

118. Nikiforova M.N., Stringer J.R., Blough R., Medvedovic M., Fagin J.A., Nikiforov Y.E. Proximity of chromosomal loci that participate in radiation-induced rearrangements in human cells. Science 2000; 290: 138-141.

119. O'Sullivan C.O., Barton C.M., Staddon S.L., Brown C.L., Lemoine N.R. Activating point mutations of the gsp oncogene in human thyroid adenomas. Molecular Carcinogenesis 1991; 4: 345-349.

120. Oliveira A.M., Fletcher J.A. Translocation breakpoints in cancer. Encyclopedia of the human genome 2003; http://www.ehgonline.net

121. Orita M., Suzuki Y., Sekiya T, Hayashi K. Rapid and sensitive detection of point mutations and DNA polymorphisms using the polimerase chain reaction. Genomics 1989; 5: 874-877.

122. Oyama Т., Ichimura E., Sano Т., Kashiwabara K., Fukuda Т., Nakajima T. c-Met expression of thyroid tissue with special reference to papillary carcinoma. Pathol Int. 1998; 48: 763-768.

123. Pachnis V., Mankoo В., Costantini F. Expression of the c-ret proto-oncogene during mouse embryogenesis. Development 1993; 119: 1005-1017.

124. Papin C., Denouel-Galy A., Laugier D., Calothy G., Eychene A. Modulation of kinase activity and oncogenic properties by alternative splicing reveals a novel regulatory mechanism for B-Raf. J. Biol. Chem. 1998; 273: 24939-24947.

125. Perkel V.S., Gail M.H., Lubin J., Pee D.Y., Weinstein R., Shore-Freedman E., Schneider A.B. Radiation-induced thyroid neoplasms: evidence for familial susceptibility factors. J. Clin. Endocrinol Metab. 1988; 66: 1316-1322.

126. Pritchard C.A., Samuels M.L., Bosch E., McMahon M. Conditionally oncogenic forms of the A-Raf and B-Raf protein kinases display different biological and biochemical properties in NIH 3T3 cells. Mol. Cell Biol. 1995; 15: 6430-6442.

127. Qi H., Gervais M.L., Li W., DeCaprio J.A., Challis J.R., Ohh M. Molecular cloning and characterization of the von Hippel-Lindau-like protein. Mol. Cancer Res. 2004; 2: 43-52.

128. Rajagopalan, H., Bardelli A., Lengauer C., Kinzler K.W., Vogelstein В., Velculescu V.E. Tumorigenesis: RAF/RAS oncogenes and mismatch-repair status. Nature 2002; 418: 934.

129. Rapp U.R., Goldsborough M.D., Mark G.E., Bonner T.I., Groffen J., Reynolds F.H.Jr., Stephenson J.R. Structure and biological activity of v-raf, a unique oncogene transduced by a retrovirus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1983; 80: 4218-4222.

130. Reilly J.T. Class III receptor tyrosine kinases: role in leukaemogenesis. Br. J. Haematol. 2002; 116: 744-757.

131. Rey J.M., Brouillet J.P., Fonteneau-Allaire J., Boneu A., Bastie D., Maudelonde Т., Pujol P. Novel germline RET mutation segregating with papillary thyroid carcinomas. Genes Chromosom. Cancer 2001;32:390-391.

132. Robertson, S. С., Tynan, J. A., Donoghue, D. J. RTK mutations and human syndromes: when good receptors turn bad. Trends Genet. 2000; 16: 265-271.

133. Ron E., Lubin J.N., Shore R.E. , Mabuchi K., Modan В., Pottern L.M., Schneider A.B., Tucker M.A., Boice J.D.Jr. Thyroid cancer after exposure to external radiation: a pooled analysis of seven studies. Radiat. Res. 1995; 141: 259-277.

134. Rone J.K., Lane A.G., Grinkemeyer M.D. Papillary thyroid carcinoma, parathyroid adenoma, and unexplained hypercalcitoninemia: an unusual presentation of multiple endocrine neoplasia type 2a? Thyroid 1998; 8: 781-785.

135. Roque L., Castedo S., Clode A., Soares J. Deletion of 3p25—>pter in a primary follicular thyroid carcinoma and its metastasis. Genes Chrom. Cancer 1993; 8: 199-203.

136. Ruco L.P., Stoppacciaro A., Ballarini F., Prat M., Scarpino S. Met protein and hepatocyte growth factor (HGF) in papillary carcinoma of the thyroid: evidence for a pathogenetic role in tumourigenesis. J. Pathol. 2001; 194: 4-8.

137. Russo D., Arturi F., Shlumberger M., Caillou В., Monier R., Filetti S., Suarez H.G. Activating mutations of the TSH receptor in differentiated thyroid carcinomas. Oncogene 1995; 11: 19071911.

138. Russo D., Arturi F., Suarez H.G., Shlumberger M., Du Villard J.A., Crocetti V., Filetti S. Thyrotropin receptor gene alterations in thyroid hyperfunctioning adenomas. J. Clin. Endocrinol. Metab. 1996; 81: 1548-1551.

139. Said S., Shlumberger M., Suarez H.G. Oncogenes and anti-oncogenes in human epithelial thyroid tumors. J. Endocrinol. Invest. 1994; 17: 371-379.

140. Sambrook J., Fritsch E.F., Maniatis T. 1989. Molecular cloning: A laboratory manual, 2nd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.

141. Santoro M., Melillo R.M., Carlomagno F., Fusco A., Vecchio G. Molecular mechanisms of RET activation in human cancer. Ann. N.Y. Acad. Sci. 2002; 963:116-121.

142. Sarlis N.J. Expression patterns of cellular growth-controlling genes in non-medullary thyroid cancer: basic aspects. Reviews in Endocrine & Metabolic Disorders 2000; 1: 183-196.

143. Sarraf P., Mueller E., Smith W.M., Wright H.M., Kum J.B., Aaltonen L.A., de la Chapelle A., Spiegelman B.M., Eng C. Loss-of-function mutations in PPAR gamma associated with human colon cancer. Molecular Cell 1999; 3: 799-804.

144. Schimke R.N., Hartmann W.H. Familial amyloid-producing medullary thyroid carcinoma and phaeochromocytoma. A distinct genetic entity. Ann. Intern. Med. 1965; 63: 1027-1039.

145. Schmidt P.H., Dransfield D.T., Claudio J.O., Hawley R.G., Trotter K.W., Milgram S.L., Goldenring J.R. AKAP350, a multiply spliced protein kinase A-anchoring protein associated with centrosomes. J. Biol. Chem. 1999; 274: 3055-3066.

146. Schuchardt A., D'Agati V., Larsson-Blomberg L., Costantini F., Pachnis V. Defects in the kidney and enteric nervous system of mice lacking the tyrosine kinase receptor Ret. Nature 1994, 367: 380-383.

147. Segouffin-Cariou C., Billaud M. Transforming ability of MEN 2A-RET requires activation of the phosphatidylinositol 3-kinase/AKT signaling pathway. J. Biol. Chem. 2000; 275: 3568-3576.

148. Shi Y., Zou M., Farid N.R., al-Sedairy S.T. Evidence of gene deletion of p21 (WAF1/CIP1), a cyclin-dependent protein kinase inhibitor, in thyroid carcinomas. Br. J. Cancer 1996; 74: 13361341.

149. Shi Y., Zou M.J., Schmidt H., Juhasz F„ Stensky V., Robb D., Farid N.R. High rates of ras codon 61 mutation in thyroid tumors in an iodide-deficient area. Cancer Res. 1991; 51: 2690-2693.

150. Simpson N. E., Kidd К. K., Goodfellow P. J., McDermid H., Myers S., Kidd J.R., Jackson C.E., Duncan A.M., Farrer L.A., Brasch K. Assignment of multiple endocrine neoplasia type 2A to chromosome 10 by linkage. Nature 1987;328:528-530.

151. Smith D.P., Houghton C., Ponder B.A.J. Germline mutation of RET codon 883 in two cases of de novo MEN 2B. Oncogene 1997; 15: 1213-1217.

152. Soares P., Trovisco V., Rocha A.S, Lima J.,Castro P., Preto A., Maximo V., Tiago Botelho, Seruca R., Sobrinho-Simoes M. BRAF mutations and RET/PTC rearrangements are alternative events in the etiopathogenesis of PTC. Oncogene 2003; 22: 4578-4580.

153. Socolow E.L., Hashizume A.,Neriishi S., Niitani R. Thyroid carcinoma in man after exposure to ionizing radiation. A summary of the findings in Hiroshima and Nagasaki. N. Engl. J. Med. 1963; 268:406-410.

154. Steiner A.L., Goodman A.D., Powers S.R. Study of a kindred with phaeochromocytoma, medullary thyroid carcinoma, hyperparathyroidism and Cushing's disease: multiple endocrine neoplasia, type 2. Medicine (Baltimore) 1968; 47: 371-409.

155. Stirewalt D.L., Radich, J.P. The role of FLT3 in haematopoietic malignancies. Nat. Rev. Cancer 2003; 3: 650-665.

156. Stork P.J.S., Schmitt J.M. Crosstalk between cAMF and MAP kinase signaling in the regulation of cell proliferation. Trends in Cell Biology 2002; 12: 258-266.

157. Storm S.M., Brennscheidt U., Sithanandam G., Rapp U.R. raf oncogenes in carcinogenesis. Crit. Rev. Oncol. 1990; 2: 1-8.

158. Studer H., Peter H.J., Gerber H. Natural heterogeneity of thyroid cells: the basis for understanding thyroid function and nodular goiter growth. Endocr. Rev. 1989; 10: 125-135.

159. Suarez H.G., du Villard J.A., Severino M., Caillou В., Schlumberger M., Tubiana M., Parmentier C., Monier R. Presence of mutations in all three ras genes in human thyroid tumors. Oncogene 1990; 5: 565-570.

160. Suarez H.G. 1998. Genetic alterations in human epithelial thyroid tumors. Clin. Endocrinol. 1998; 48:531-546.

161. Takahashi M., Ritz J., Cooper G.M. Activation of a novel human transforming gene, ret, by DNA rearrangement. Cell. 1985; 42: 581-588.

162. Tallini G., Asa S.L. RET oncogene activation in papillary thyroid carcinoma. Adv. Anat. Pathol. 2001;8:345-354.

163. Tannapfel A., Sommerer F., Benicke M., Katalinic A., Uhlmann D., Witzigmann H., Hauss J., Wittekind C. 2003. Mutations of the BRAF gene in cholangiocarcinoma but not in hepatocellular carcinoma. Gut 52: 706-712.

164. Tricoli J.V., Gumerlock P.H., Yao J.L., Chi S.G., D'Souza S.A., Nestok B.R., de Vere White R.W. Alterations of the retinoblastoma gene in human prostate adenocarcinoma. Genes Chrom. Cancer 1996;15: 108-114.

165. Trovisco V., Vieira de Castro I., Soares P., Maximo V., Silva P., Magalhaes J., Abrosimov A., Guiu X.M., Sobrinho-Simoes M. BRAF mutations are associated with some histological types of papillary thyroid carcinoma. J. Pathol. 2004; 202: 247-251.

166. Tuttle R.M., Becker D.V. The Chernobyl and its consequences: update at the millennium. Semin. Nucl. Med. 2000; 30:133-140.

167. Van Sande J., Parma J., Tonacchera M., Swillems S., Dumont J., Vassart G. Somatic and germline mutations of the TSH receptor gene in thyroid diseases. J. Clin. Endocrinol. Metab 1995; 80: 2577-2585.

168. Van Weering D.H., Bos J.L. Glial cell line-derived neurotrophic factor induces Ret-mediated lamellipodia formation. J. Biol. Chem. 1997; 272: 249-254.

169. Vassart G., Dumont J.E. The thyrotropin receptor and the regulation of thyrocyte function and growth. Endocr Rev 1992; 13: 596-611.

170. Viglietto G., Chiappetta G., Martinez-Tello F.J., Fukunaga F.H., Tallini G., Rigopoulou D., Visconti R., Mastro A., Santoro M., Fusco A. RET/PTC oncogene activation is an early event in thyroid carcinogenesis. Oncogene 1995; 11: 1207-1210.

171. Wan P.T., Garnett M.J., Roe S.M., Lee S., Niculescu-Duvaz D., Good V.M., Jones C.M., Marshall C.J., Springer C.J., Barford D., Marais R. Mechanism of activation of the RAF-ERK signaling pathway by oncogenic mutations of B-RAF. Cell 2004; 116: 855-867.

172. Weir-Thompson E., Condie A., Leonard R.C., Prosser J. A familial RBI mutation detected by the HOT technique is homozygous in a second primary neoplasm. Oncogene 1991; 6: 2353-2356.

173. Williams D. Cancer after nuclear fallout: lessons from the Chernobyl accident. Nat. Rev. Cancer 2002; 2: 543-549.

174. Williams E.D. A review of 17 cases of carcinoma of the thyroid and phaeochromocytoma. J. Clin. Pathol. 1965; 18: 288-292.

175. Williams E.D. Mechanisms and pathogenesis of thyroid cancer in animals and man. Mutat. Res. 1995;333:123-129.

176. Wynford-Thomas D. Molecular basis of epithelial tumorigenesis: the thyroid model. Crit. Rev. Oncog. 1993; 4: 1-23.

177. Xu X., Quiros R.M., Gattuso P., Ain K.B., Prinz R.A. High prevalence of BRAF gene mutation in papillary thyroid carcinomas and thyroid tumor cell lines. Cancer Res. 2003; 63:4561-4567.

178. Yane K., Konishi N., Kitahori Y., Naito H., Okaichi K., Ohnishi Т., Miyahara H., Matsunaga Т., Hiasa Y. Lack of pl6/CDKN2 alterations in thyroid carcinomas. Cancer Lett. 1996; 101: 85-92.

179. Zou M., Shi Y., Farid N.R. p53 mutations in all stages of thyroid carcinomas. J. Clin. Endocrinol. Metab. 1993; 77: 1054-1058.

180. Zuo L., Weger J., Yang Q., Goldstein A.M., Tucker M.A., Walker G.J., Hayward N., Dracopoli N.C. Germline mutations in the pl6INK4a binding domain of CDK4 in familial melanoma. Nat. Genet. 1996; 12: 97-99.

181. Zurzolo C., Gentile R., Mascia A., Garbi C., Polistina C., Aloj Awedimento V.E., Nitsch L. The polarized epithelial phenotype is dominant in hybrids between polarized and unpolarized rat thyroid cell lines. J. CellSci. 1991; 98:65-73.