Почвенные анаэробные бактерии рода Clostridium, географическое распространение и азотфиксирующая активность тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.07, кандидат биологических наук Шелли, Шираджул Ислам

• Шелли, Шираджул Ислам
• кандидат биологических наук
• 1985

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шелли, Шираджул Ислам

ВВЕДЕНИЕ

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль анаэробных бактерий рода

Clostridium в почвенных процессах

1.2. География и экология анаэробных азотфиксаторов рода Clostridium

1.3. Морфология, физиология и изменчивость анаэробных бактерий рода Clostridium

1.4. Фиксация молекулярного азота атмосферы анаэробными бактериями рода Clostridium

1.5. Цитология анаэробных спорообразующих бактерий рода Clostridium

ЧАСТЬ 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1, Объекты и методы исследования

2.1.1. Мшфобиологические методы исследования

2.1.2. Методы создания анаэробных условий культивирования микроорганизмов

2.1.3. Биохимические методы: определение нитрогенезной активности микроорганизмов

2.1.4. Цитологические методы исследования

2.2. Изучение географического распространения почвенных анаэробных бактерий рода

Clostridium

2.2.1. Распространение маслянокислых и адетонобутиловых бактерий в почвах разных почвенно-климатических зон

2.2.2. Распространение сахаролитических железовоостанавливающих бактерий в почвах разных почвенно-климатических зон

2.2.3. Влияние почвенно-климатических условий на некоторые морфологические и физиологические особенности анаэробных бактерий рода Clostridium

2.3. Изучение азотфиксирущей активности почв разных почвенно-климатических зон

2.3.1. Потенциальная азотфиксирущая активность почв

2.3.2. Актуальная и потенциальная азотфиксирущая активность почв Бангладеш

2.4. Фиксация молекулярного азота атмосферы анаэробными бактериями рода Clostridium выделенными из почв разных почвенно-климатических зон

2.4.1. Изучение эффективности азотфиксации у экологических рас Clostridium

2.4.2. Изучение влияния условий роста и стадий развития культур Clostridium на их азотфиксирующую активность

2.5. Изучение цитологических особенностей клеток и процесса спорообразования азотфиксирующих Clostridium выделенных из тропических почв НО

2.5.1. Цитологические особенности бактериальных клеток С.butyricum

С .pasteurianum и C.flavum НО

2.5.2. Цитология спорообразования

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Почвенные анаэробные бактерии рода Clostridium, географическое распространение и азотфиксирующая активность»

Актуальность проблемы. В настоящее время биологическая фиксация азота и фотосинтез выделены в число основных физиологических процессов, от которых зависит все цроизводство продуктов в мире. Поэтому интерес к биологическому азоту в сельском хозяйстве, т.е. к азоту, связываемому из воздуха почвенными микроорганизмами-азотфиксаторами, во всех странах быстро повышается. Основные причины: во-первых, несмотря на быстрый рост цроизводства минеральных азотных удобрений, в сельском хозяйстве все еще наблюдается недостаток азота, особенно для зерновых; во-вторых, биологически связанный азот, в отличие от минерального, не только не требует затрат на его производство, но и дает богатую полноценным белком продукцию и обогащает почву азотом; в-третьих, что особенно важно в интенсивном сельском хозяйстве, биологический азот не загрязняет окружающую среду. Следовательно, биологический азот должен рассматриваться как мощный фактор формирования потенциального плодородия почвы. Он создает благоприятный фон для земледелия и позволяет более экономно расходовать минеральные азотные удобрения.

Роль различных групп ми1фоорганизмов в суммарном процессе азотфиксации в почве изучена неодинаково. Способность клубеньковых бактерий в симбиозе с бобовыми обогащать почву связанным азотом известна хорошо. Однако в масштабе биосферы их роль относительно невелика, поскольку даже в агробиогеоценозах в настоящее время бобовые растения занимают пока с*фомное место -около 10$ от всей площади посева сельскохозяйственных культур (Петербургский, 1985).

Деятельность свободноживущих (несимбиотических) азотфикси-руюпдах микроорганизмов в почве оставалась до последнего времени мало изученной, а о масштабах ее имелись крайне разноречивые мнения. Основываясь на результатах лабораторных наблюдении, а также данных, полученных для чистых культур микроорганизмов, полагали, что свободноживущие азотфиксаторы связывают не более 3-5 кг азота на гектар в год в почвах умеренной зоны.

Полученные к настоящему времени (при использовании современных методов исследований) данные показывают, что продуктивность несимбиотической азотфиксадаи в почве более значительна, чем считалось прежде, и составляет для почв умеренной зоны 25-94 кг/га/ /год (по данным советских исследователей) и 18-110 кг/га/год (по данным зарубежных исследователей), а в тропических районах -90-600 кг/га/год (Дарт, Дей, 1979).

Среди свободноживущих азотфиксирующих микроорганизмов, существенное МесТО ЗаНИМаЮТ анаэробные баКТерИИ рода Clostridium. Однако несмотря на значительное количество исследований, посвященных Clostridium, полученные данные еще далеки от исчерпывающего освещения биологии этих весьма интересных, с теоретической точки зрения, и очень важных в практическом отношении, азотфик-сирующих бактерий.

В литературе недостаточно освещены вопросы качественного и количественного состава анаэробной флоры в почвах различных поч-венно-кпиматических зон, морфолого-физиологических особенностей составляющих ее видов и их азотфиксирующей способности, а также условия, в которых осуществляется активное связывание молекулярного азота атмосферы.

В связи с изложенным, в основу нашэй работы было положено изучение географического распространения, морфолого-физиологических особенностей и азотфиксирующей активности анаэробных бактерий рода Clostridium. При этом, существенное внимание было уделено изучению этих микроорганизмов в тропических почвах Бангладеш, где, как выяснилось в результате проведенных экспериментов, они повсеместно обнаруживаются в значительных количествах, а поэтому могут играть определенную роль в накоплении азота.

Цель и задачи исследовании. Целью исследовании было сравнительное изучение ареалов распространения представителей сахаро-литических азотфиксаторов рода Clostridium в почвах различных почвенно-климатических зон, их морфолого-физиологических особенностей и азотфиксирующей активности. Для выполнения работы были поставлены следующие задачи:

1. Изучить ареалы распространения сахаролитических азотфиксаторов рода Clostridium в почвах разных почвенно-климатических зон Советского Союза, Бангладеш, а также ряда других стран.

2. Определить актуальную и потенциальную азотфиксирующую активность почв разных почвенно-климатических зон.

3. Выделить чистые культуры анаэробных бактерий рода Clostridium из почв разных почвенно-вдиматических зон и определить их азотфиксирующую активность.

4. Исследовать цитологические особенности клеток чистых культур анаэробных азотфиксаторов.

Научная новизна. В работе впервые получены количественные данные о численности и азотфиксирующей активности анаэробных бактерий рода Clostridium в почвах разных географических широт. Из разнообразных почв выделено 310 штаммов анаэробных бактерий рода Clostridium, у которых выявлены различия в активности фиксации азота атмосферы. Наибольшей активностью обладали штаммы, выделенные из субтропических и тропических почв.

Впервые изучена актуальная азотфиксирущая активность почв Бангладеш. Установлено, что в зависимости от характера возделываемой сельской-хозяйственной культуры, фиксация азота может варьировать.: в пределах 25-75 кг на I га за вегетационный период. Потенциальная азотфиксация была в 3-5 раз выше актуальной, в особенности в почве ризосферы риса.

Показано изменение уровня азотфиксирущей активности анаэробных бактерий в течение онтогенетического развития культур Clostridium. В большинстве случаев в начале стадии спорообразования наблюдается самый высокий уровень азотфиксации. Изучена

СубМИКрОСКОПИЧеСКаЯ ОргаНИЗаЦИЯ И СПОрООбраЗОВаНИе у Clostridium на электронно-микроскопическом уровне. Впервые установлены некоторые цитологические отличия (наличие двух спор в одной клетке, содержание большого количества гранулезы в спорах, образование параспоральных телец белковой природы и др.), характерные для азотфиксирующих Clostridium," выделенных из тропических почв.

Практическая ценность. Результаты исследований могут быть использованы для разработки приемов рационального и экономного использования азотных удобрений с учетом возможности почв накапливать азот микробиологическим путем.

Кроме того, результаты методических разработок, осуществленных при выполнении диссертационной работы, могут быть использованы в лабораториях научно-исследовательских институтов сельского хозяйства и сельскохозяйственных ВУЗов.

Работа выполнена на кафедре микробиологии Московской ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени сельско-хозяй-ственной академии им.К.А.Тимирязева и в отделе физиологии споро-образующих бактерий института микробиологии АН СССР.

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

I.I. РОЛЬ АНАЭРОБНЫХ БАКТЕРИЙ РОДА CLOSTRIDIUM В ПОЧВЕННЫХ ПРОЦЕССАХ

Прошло более ста лет с того момента, когда Л.Пастер (1861) установил возможность жизни без кислорода и доказал, что на некоторые бактерии кислород оказывает токсичное действие. По его данным такими микроорганизмами были возбудители маслянокислого брожения, относящиеся к роду Clostridium.

В результате этого важнейшего отбытия все организмы по их отношению к присутствию воздуха, а точнее кислорода, который в нем находится, были разделены на три группы: аэробы, факультативные анаэробы и анаэробы. Последняя группа объединяет организмы двух типов, а именно: формы, которые являются строгими или облигатными анаэробами и организмы, которые могут расти в присутствии молекулярного кислорода, но в метаболизме его не используют.

Анаэробы, особенно строгие, - это главным образом бактерии, принадлежащие к разным систематическим группам. Согласно имеющимся данным, можно выделить не менее пятидесяти родов бактерий, представленных строгими анаэробами. Среди них есть и сапрофиты, и паразиты. Немало анаэробов являются возбудителями разных заболеваний.

Согласно Бьюкенену ( Buchanan, 1949) роль анаэробных микроорганизмов в сельском хозяйстве может быть представлена следующей схемой: I. В почве: а) удобрения и навоз; б) разложение органических веществ: I) разложение целлюлозы, 2) разложение белковых веществ, 3) фиксация молекулярного азота атмосферы,

4) специфическое отношение к нитратам и сульфатам, 5) образование метана и С02. П. В разложении органических остатков (выжив отных гребные ямы и пр.). Ш. В пищеварении домашних и птиц: а) жвачных животных; б) травоядных животных; в) других животных. 1У. В получении и хранении продуктов сельского хозяйства.

Исследование анаэробов имеет важное значение для решения многих практических задач медицины, сельского хозяйства, технической и геологической микробиологии. На основании использования некоторых анаэробов, образующих горючие газы (метан и водород), могут быть пополнены энергетические ресурсы, что является одной из актуальных проблем настоящего времени. Деятельность многих анаэробов весьма важна для очистки окружающей среды от загрязнений.

Интерес к анаэробам, особенно возросший за последние годы, связан с различными проблемами общебиологического характера. Исследование анаэробов дает весьма много для выяснения условий, в которых может проявляться и сохраняться жизнь, что особенно существенно в связи с развитием космических исследований и установлением возможности жизни на других планетах. С другой стороны, изучение анаэробов важно для понимания эволюции жизни на Земле. В этой связи обращает на себя внимание то, что среди строгих анаэробов встречается немало термофилов, тогда как псих-рофилы весьма редки.

Многие проблемы экологии также связаны с исследованием различных анаэробов, часто образующих тесные ассоциации с другими микроорганизмами, которые активно участвуют в круговороте веществ. Весьма показательна и важна, например, деятельность таких анаэробных микробных ассоциаций как бактерии, разлагающие клетчатку, и метанобразукицие формы.

За несколько последних десятилетий в области изучения анаэробных бактерий были достигнуты значительные успехи. Сегодня мы уже знаем, что бактерии рода Clostridium - наиболее многочисленная и широко распространенная группа среди анаэробов (Пошон, Де Баржак, I960; Мишустин, Емцев, 1974; Бабайцева, 1978; Скин-нер, 1979)• Они обнаружены в различных климатических поясах, в самых разнообразных почвах, воде и грунтах озер, рек, морей и океанов (Емцев, 1971).

Экологические условия оказывают определенное влияние на количество и состав анаэробной микрофлоры. Среди факторов, которые влияют на распространение бактерий рода Clostridium особенно большую роль играет наличие источников энергии и питательных веществ, величина рН, Еь, аэрация, влажность, температура и другие (Мишустин, Емцев, 1974).

Накопление в почве свежих растительных остатков приводит к интенсивному размножению маслянокислых клостридий (Лазарев, 1949; Пошон,:. Де Баржак, I960). Свежие органические вещества являются источником энергии, питательных веществ, витаминов, факторов роста, микроэлементов для Clostridium (Емцев, I96I6).

Масляно кислые бактерии рода Clostridium вызывают в почве процессы превращения и распада растительных остатков, прежде всего, их углеродистых составных частей, образуя в результате своей жизнедеятельности гуминовые вещества (Лазарев, 1949). Обнаружение и определение клостридий в почве и ризосфере дает представление об интенсивности данного процесса, имеющего в конечном счете большое значение в образовании сложного природного вещества - гумуса почвы (Скалон, 1965).

Б.Р.Волобуев (1963) указывает на тесную зависимость разложения органических остатков от гидротермических условий. Возможно, что увеличение влажности почвы способствует растворению и доступности органических веществ для анаэробных бактерий.

Анаэробные бактерии рода Clostridium :■( C.pasteurianum, С. butyiicum) в первую очередь расщепляют простые сахара и растворимые в воде соединения (Емцев, 1971). Клостридии, способные разлагать целлюлозу в анаэробных условиях, широко распространены в почве, но они редко изобилуют, исключая случаи со строгим и длительным анаэробиозом ( skinner, 1965). Клостридии, разлагающие пектин, известны с давних времен по процессу мочки льна. По данным В.Т. Емцева с соавторами (1969), пектинолитические формы Clostridium широко распространены в различных почвенных типах СССР.

В последние годы внимание исследователей привлекли протео-литические анаэробы (Емцев, 1974; skinner, 1968, 1979). А.К. Горовой (1979) изучено распространение цротеолитических анаэробных бактерий рода Clostridium в основных типах почв СССР. Выявлена способность цротеолитических клостридий трансформировать белковые вещества в почве (Емцев, 1982). Обнаружено, что Clostridium из дерново-подзолистой почвы и чернозема осуществляли неглубокий протеолиз и образовывали много пептидов и других белковых фрагментов. В то же время у культур анаэробов из светло-каштановой почвы и серозема гидролиз указанных соединений характеризовался глубиной, дающей мало пептидов и много низкомолекулярных продуктов.

Многочисленными исследованиями установлено, что анаэробные азотфиксаторы хорошо развиваются в ризосфере различных растений (Виноградова, 1955; Емцев, 1958, 1961; Львов, 1964; Скалон, 1965; Исакова, Бойцева, 1969; Редькина, Калининская, 1981; Калининская, Редькина, 1981; Hauke—Pacewiczowa, Balandreau, Dommer^ques, 1970).

Модельные опыты (Емцев, 1981) показали, что сахаролитичес

КИ6 анаэробы ( С. pasteurianum, С. butyricum) ЭНврГИЧНО раЗВИВЗЮТся в первый период распада растительных: остатков, а цротеолити

ЧеСКИб ( С. acetobutylicum, С. sporogenes) — на ЗЗВерШаЮЩвМ• Очв— видно последние, предпочитающие белковую среду, могут успешно размножаться лишь на массе органических остатков, обогащенных микробным протеином и биологически активными соединениями.

При изучении динамики количества анаэробных бактерий в ризосфере риса (Дебривная, 1970) выявлено их постепенное нарастание в течение вегетации с максимумом к моменту созревания риса (14,5 ш). Автор объясняет такую закономерность тем, что рис во время цветения аэрирует почву и тем самым способствует росту аэробов и задержке роста анаэробов. В период же его полной зрелости с началом отмирания корневой системы количество анаэробов резко увеличивается. На корнях риса количество клеток Clostridium достигало 21,8 шн/г корней.

По данным Т.А.КалинйЬкой и Т.В.Редькиной (1981) число бактерий рода Clostridium на корнях риса составило от 156 ДО3 до 490ДО3 клеток на одно растение. Наиболее высокое количество

Clostridium обнаружено В рИЗОСфере ЗаТОПЛеННОЙ КУКУРУЗЫ ( Hauke-Pacewiczowa; Balandreau, Dommerques, 1970).

Й.С.Скалон (1965) также отмечает достаточно обильное развитие Clostridium pasteurianum В рИЗОСфере раСТИТвЛЬНЫХ СООбЩвСТВ. о с

Количество клеток в летний период составляло 10 -10 на I г почвы. Однако автор не наблюдал ярковыраженного сезонного изменения численности Clostridium. Погодные условия при наблюдении в течение нескольких лет также не оказали столь сильного действия, которое могло бы дать значительные отклонения в численности популяции микробов.

X.Зимни ( zimny, I960, 1961) и И.Х#Войнова-Райкова (vojnova-Raykova, 1965) считают, что тип почвы оказывает более сильное влияние на численность И ВИДОВОЙ состав бактерий рода Clostridium1," чем растительный покров.

Не меньшее значение имеет участие почвенных анаэробных мшфоорганизмов и в процессах мобилизации и восстановления соединений железа, марганца, различных соединений серы и других элементов, а также синтез этими микроорганизмами биологически активных веществ, ингибирующих или активирующих рост растений. Изучение этой активности анаэробов становится все более актуальным в связи с интенсификацией орошаемого земледелия во многих странах мира.

В периодически орошаемых и затопляемых почвах создаются условия, благоприятствующие развитию восстановительных процессов, отсутствующих или слабо выраженных в суходольных почвах. Эти условия стимулируют развитие ми1фоорганизмов, способных использовать вместо свободного кислорода связанный кислород некоторых минеральных соединений, элементов с переменной валентностью, таких как сера, железо, марганец и другие. Орошение и затопление также приводят к увеличению численности облигатных анаэробов, энергетический метаболизм которых основан не на анаэробном дыхании, а на различного типа брожениях.

Особый интерес для сельского хозяйства представляет способность ряда ВИДОВ рода Clostridium СВЯЗЫВаТЬ МОЛвКуЛЯрНЫЙ азот атмосферы. В настоящее время известно двенадцать анаэробных азотфиксаторов рода Clostridium (С. aceticum, С. acetobutyliс cum, С. beijerirr.ku, С. butyricum, С. butylicum, С. felsineugy С. kluyveri, С. lactoacetopbalum, С. madisonii, С. pasteurianum, С, pectinovorum,

С. tetanomorphum). БОЛЬШИНСТВО уКаЗЭННЫХ ВИДОВ почвенных анаэробных азотфиксаторов относится к сахаролитичес-кой группе Clostridium, в которую входит ряд физиологических подгрупп - маслянокислые, ацетонобутиловые и бутиловые бактерии, бактерии, сбраживающие пектиновые вещества, смесь уксусной кислоты и этилового спирта, и друтие. Из указанных физиологических подгрупп сахаролитических анаэробов наибольшее внимание исследователей привлекали маслянокислые и ацетонобутиловые бактерии, как наиболее активные азотфиксаторы.

Заключение диссертации по теме «Микробиология», Шелли, Шираджул Ислам

выводы

Б [заботе исследовали географическое распространение и аз о фиксирующую активность почвенных анаэробных бактерии рода Clostridium . На основании проведенных экспериментов можно сделать следующие выводы:

1. Изучено географическое распространение анаэробных бактерий рода Clostridium в почвах разных почвенно-климатичес-ких зон. Указанные бактерии обнаружены во всех исследованных почвах. Их количество было наименьшим в арктических почвах

0.Шпицбергена и наибольшим в тропических почвах Бангладеш и Кубы.

2. Почвенно-климатические условия оказывают определенное влияние на соотношение видов или подгрупп почвенных анаэробных бактерий. Тропические почвы характеризуются широким диапазоном видового состава анаэробов. Среди них особое значение имеют сахаролитические железовосстанавдивающие бактерии рода Clostridium;

С. saccharobu^yricum, С. tyrobutyricum , С. multifermentons , с. acetobutyiicum , С.pasteurianum и др.). В арктических почвах указанные бактерии слабо развиты.

3. Впервые проведено сравнительное изучение потенциальной азотшиксирующей активности почв различных географических широт. Наименьшая азотфиксирующая активность обнаружена в арктических почвах О.Шпицбергена и наибольшая в субтропических (Египет) и тропических (Бангладеш, Куба) почвах.

4.- Установлено, что в тропических окультуренных почвах Бангладеш под рисом, хлопком, маисом, тыквой и чайным кустом актуальная фиксация азота достигала до 25 кг на га, а в почвах под сахарным тростником и ананасовыми плантациями - до 72 кг азота на га за вегетационный период. Потенциальная азотфиксации была в 3-5 раз выше актуальной, в особенности в почве ризосферы риса.

5.- Из почв различных типов Советского Союза, Бангладеш и других стран выделено 310 штаммов разнообразных представителей сахаролитической группы Clostridium , существенно различающихся по СЕоей активности связыватв молекулярный азот из воздуха. Большей активностью обладали штаммы, выделенные из субтропических и тропических почв. Причем, штаммы,выделенные из окультуренных почв, характеризуются более высокой азотшиксирующей активностью, чем штаммы, выпаленные из целинных почв, как северных, так и тропических.

6. Показано, что динамика азотфиксирующей активности в процессе онтогенетического развития культур Clostridium определяется как почвенно-климатическими, так и антропогенными факторами. Как правило, более интенсивный процесс азотфиксации наблюдается у культур, выделенных из тропических почв, главным образом, из ризосферы риса, сахарного тростника и некоторых других тропических растений.

7. Установлено, что уровень азотфиксирующей активности анаэробных бактерий изменяется в течение онтогенетического развития культур Clostridium . Б большинстве случаев в начале стадии спорообразования наблюдается наиболее высокий уровень азотфиксации.

8. Изучена субмикроскопическая организация и спорообразойз вание у анаэрооных Clostridium , выделенных тропических почв Бангладеш. Установлено наличие в почвах Бангладеш двух вариангов азотфиксирующих с. butyricum , различающихся по ряду цитологических признаков. В частности, впервые обнаружены в культуре с. butyricum штаммов 91,93,90 клетки с двумя спорами и с большим количеством гранулезы в спорах. Выявлены также параспо-ральные тельца, белковой природы, формирующиеся при спорообразовании ТОЛЬКО У азотфиксирующих Clostridium ИЗ ТрОПИЧеСКИХ ПОЧВ.

9. Полученные фактические материалы по определению количественных характеристик численности и азотфиксирующей активности анаэробных бактерий рода Clostridium в природных условиях и обобщение литературных данных, свидетельствуют, что анаэробная азотфиксация может быть отнесена к числу важных составляющих баланс азота во всех почвенно-климатических зонах, в особенности южных широт (субтропические и тропические почвы).

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Шелли, Шираджул Ислам, 1985 год

1. Авакян А.А., Кац Л.Н., Павлова И.Б.Атлас анатомии бактерий патогенных для человека и животных.-М.:Медицина.

2. Афанасьева Г.А., Курбанчалина Ф.Х., Майер X. Ультраструктура Clostridium tetani. I. г Особенностистроения поверхностных структур вегетативных клеток. 1978, №3,Микробиологическая эпидемиология и иммунология, с.112.

3. Аристовская Т.В.Микробиология процессов почвообразования. -Л.:Наука,1980.

4. Бабайцева В.А. Почвенные анаэробные бактерии рода Clostridium и их роль в транформации пуриновых и пиримидиновых соединений.-Автореф.канд.дисс.,1978.

5. Бирюзова В«И. Мембранные структуры микроорганизмов.-М.: Наука,1973.

6. Браун М.Э. Микроорганизмы ризосферы приспособленцы, грабители или благоделтели,-Почвенная микробиология,1979, пер. с анг., -36-57с.

7. Вавуло Ф.П. Микрофлора почв Белорусской ССР.В сб. Микрофлора почв северной и средней части СССР, 1966-М.:Наука,

8. Ванек 3., Винтер В. Микробная дифференциация, споруляцияи образование метаболитов.-Микробиологический журнал, 1977, 39, 275.

9. Вайсман И.Ш. Оболочечные структуры вегетативных клеток Clostridium tetani. В сб. Криогенные методы в электронной микроскопии. Тезисы докл.Пущино, 1977,18.

10. Вайсман И.Ш.Доринко В.Н. К морфологии клостридиум септи-кум производственного штамма 59 при росте на жидких и плотных средах. Тр. Перм. с/х ин-та, 1972, 85,131,

11. Ю.Виноградова Т.А. Микробиологические процессы в почвах культурных пастбищ и активизация их при внесении органических удобре-ний.-Изв. АН Эст. ССР,сер.биол., 1955, 5,152.

12. Виноградский С.Н. Микробиология почвы.- Проблемы и методы.-М.: йзд-во АН СССР, 1954.

13. Виноградский С.Н. Микробиология почвы. Проблемы и методы.-М.: Изд-во АН СССР, 1952.

14. Волобдев В.Р. Экология почв.Баку. Изд-во Аз.ССР. 1963.

15. Головачева Р.С.Некоторые данные о влиянии удобрений на развитие азотфиксирующих бактерий в почве.Бюлл. научно-техн. информ. Эстонск. НИИ земледелия и мелиорации, 1960,5,46.

16. Громов Б.В. Ультраструктура синезеленых водорослей.-Л.:Наука, . 1976.

17. Гудков А.В. Биология споровых анаэробов, вызывающих порчу съиров. -Автореф.канд.дисс.Вологда. 1965.

18. Гудков А.В. Фазы развития популяций некоторых видов клостриди-ум.-Тр.Вологодс.мол.инс-та,1966,49,121.

19. Гурфель Д.,Ластинг В. Об изменении микрофлоры верхового болота при окультивировании. -В сб. научн. трудов Эстонск. НИИ земледелия и мелиорации, -Микробиология. 1966,т.8,-Т.,-60с.

20. Гатаулин A.M. Издержки производства сельскохозяйственной продукции. Методология измерения и пути снижения. -М.:Экономика, 1983. 183 с.

21. О.Дарзниек Ю.О. Развитие Clostridium pasteuiianumв зависимости от уровня увлажнения и способа обработки почвы. Изв.АН Туркм.ССР, серия биол., 1962, 4,42. 21.Дарт П.Дх., Дей Дж. М. Несимбиотическая фиксация азота в почве.

22. В кн. "Почвенная микробиология" под ред. Никитина Д.И. -М.: Колос, 1979.

23. Дебривная И.Е. Азотфиксирующие бактерии ризосферы риса, культивируемого в условиях юга УССР. Автореф. канд. дисс.-Киев, 1970.

24. Дуда В.И. Анаэробные спорообразующие бактерии рода клостри-диум (Clostridium и десульфотомакулум (Desultotomaculum ). В кн. Жизнь растений.ред. Красильников Н.А., Уранов А.А., Просвещение, т.1, 1974, 226.

25. Дуда В.И. Облигатно-анаэробные бактерии: многообразие, классификация, методы выделения и культивирования. В сб. "Теоретические и методические основы изучения анаэробных микроорганизмов", Пущно, 1978.

26. Дуда В.И. 1980. Почвенные анаэробные бактерии рода С tost-tidily . Автореф. докт.дисс. М.: ШМИ АН СССР.

27. Доспехов Б.А. Вопросы обработки почв. Научн.тр.ВАСХНИЛ. М.: Колос, 1979. - 223 с.

28. Омелянский В.Л. Избранные труды. -М.:Изд-во АН СССР, 1953, т.1.

29. Емцев В.Т. Распространение бактерий группы Clostridiumи роль этих бактерий в питании растений.-Научные труды ин-та земледелия, 1958, 18, I47-I7Ii.

30. Емцев В.Т. Некоторые вопросы морфологии и физиологии азотфиксирующих Clostridium. .-М.: Изд. НИИ земледелия Центр, р-нов нечерн. полосы, 1959, вып.18,с*147^.

31. Емцев В,Т. О биологии азотфиксирующих бактерий рода ciostii-• **dium и питании растений.- Тр. ин-та микробиол. АН СССР,1961, вып.П £.^9I-I0Iw•

32. Емцев В.Т. Об источниках углеродного питания для азотфикси-рующих микроорганизмов рода Clostridium. -Микробиология, 31, 1, 18, 1962.

33. Емцев В.Т. Методы количественного учета различных видов маслянокислых и ацетонобутиловых бактерий в почве. -Докл. ТСХА, в.109, 123f 1965.

34. Емцев В.Т. Влияние некоторых экологических факторов на количественный и видовой состав анаэробных бактерий рода Clostridium в почве. -Докл. ТСХА, вып.119, 211» 1966.

35. Емцев В.Т. Систематика Clostridium. . Успехи микробиологии, вып.5, 3» 1968.

36. Емцев В.Т., Дзадзамия Т.Д. Эколого-геогррфическая изменчивост: анаэробных азотфиксаторов рода Clostridium .-Изв.1. ТСХА, вып.6, 125, 1970.

37. Емцев В.Т., Захарова С.Н. Влияние условий культивирования и состава питательных сред на фиксацию молекулярного азо

38. TaCl. pasteurianum u CI. acetobutylicum. --Докл. ТСХА, вып.160, 174, 1970.

39. Емцев В.Т. Почвенные анаэробы рода Clostridium. . -Автореферат докт. дисс. -М., 1971.

40. Емцев В.Т., Дзадзамия Т.Д., Мурзаков Б.Г. Изменчивость некоторых физиологических свойств анаэробных азотфиксаторов рода Clostridium. В сб. "Новое в биологической фиксации молекулярного азота". -М.: Наука, 1971, с.160.

41. Емцев В.Т., Развожевская З.С. Влияние географических факт гторов на изменчивость анаэробных маслянокислых ( ci. butyricum ) и бутиловых ( ci. butyiicum ) азотфиксирующих бактерий. -Изв. ТСХА, вып.4, 18, 1971

42. Емцев В.Т., Захарова С.Н. Анаэробная фиксация азота в почвах Советского Союза. -Микробиология и научно-технический прогресс. Тезисы докл. 1У съезда Всес. микробиол. об-^ва. -Минск, 1971, с.31.

43. Емцев В.Т., Дзадзамия Т.Д. Некоторые вопросы азотного питания почвенных анаэробных бактерий рода Clostridium. -Докл. ТСХА, вып.162, 251, 1971.15

44. Емцев В.Т., Захарова С.Н. Анаэробная фиксация N2 в почве. -Изв. ТСХА, вып.З, 108, 1973.

45. Емцев В.Т. Почвенные анаэробные азотфиксаторы рода Clostridium Успехи микробиологии. 1974, Наука, №9, с.ПЗ-182.

46. Емцев В.Т. Ассоциации анаэробных бактерий почв различных типов. В сб.:и Микробные сообщества и их функционирование в почве. -К.: Наукова Думка, 1981, с. 23-30.

47. Емцев В.Т. Микроорганизмы и регулирование их деятельности в почве. -Изв.ТСХА, 1982, вып.б, с. I04-II3.

48. Емцев В.Т., Мухаметдинова А.К. Экологическая изменчивость почвенных протсолитических анаэробов. -Изв. АН СССР, сер. биол., 1983, №4, с. 569-577.

49. Емцев В.Т., Мухаметдинова А.К. Разложение белковых веществ протеолитическими анаэробными бактериями в почве. Изв. АН СССР,cap.биол., 1984, N£, с. 315-319.

50. Емцев В.:Т., Ницэ Л.К., Гбдова Г.В., Моторина И.В. Эффективность фотосинтеза и активность фиксации азота в корневой зоне сельскохозяйственных растений. -В сб. Минеральный и биологический азот вс^ешеделии СССР. -М.: Наука, 1985.

51. Емцев В. Т., Ницэ Л.К., Покровский Н.П. Несимбиотическая азотфиксация и закономерности ее функционирования в почве. В сб. "Минеральный и биологический азот в земледелии СССР" -М.:Наука, 1985, с. 213-221.

52. Заварзин Г.А. Литотрофные микроорганизмы. -М.: Наука, 1972, 263.

53. Захарова С.Н., Саркисян, Емцев В.Т. Кетокислоты продуцируемые культурой CI.pasteurianum. Изв. ТСХА, 1971, вып.З, 20.

54. Звягинцев Д.Г., Асеева И.В., Бабьева И.П., Мирнинк Т.Г. Методы почвенной микробиологии и биохимии. -М.: Изд.МГУ, 1980.

55. Зубко И.К. Изучение активности несимбиотической фиксации атмосферного азота в почвах ацетиленовым методом. -Авто-реф. канд.дисс., Л., 1975.

56. Иерусалимский Н.Д. Онтогенетическое развитие культуры маслянокислых бактерий. -Микробиология, 1951, 12, 3,

57. Иерусалимский Н.Д. Физиология развития чистых бактериальных культур. -Автореф. докт.дисс., М., 1952.

58. Иерусалимский Н.Д. Основа физиологии микробов. -М.: Изд. АН СССР, 1963.

59. Имшенецкий А.А. Микробиология целлюлозы. -М.: Изд-во АН СССР, 1953.

60. Имшенецкий А.А. Споры 1У. Новые книги зарубежом. 1970, 5,17.

61. Исакова А.А., Бойцова Э.С. Развитие анаэробных азотфик-сирующих бактерий в корневой зоне льна в зависимости от предшественникова. -Тр. Костромск.с.-х. ин-та "Караваево", 1969, вып.21, 9-13.

62. Исаченко Б.Л. Избранные труды. -М.: Изд-во АН СССР, 1951, т.1.

63. Калининская Т.А., Редькина Т.В. Микрофлора семян риса как источник азотфиксирующих микроорганизмов в его ризосфере. Изв. АН СССР, сер.биол., 1981, №4, с, 617-621.

64. Кац Л.Н. Мембранный аппарат бактериальной клетки. Успехи микробиологии. 1974, 9, 25.

65. Комарова Н.А. Распространение микроорганизмов, фиксирующих азот в анаэробных условиях под различными культурами и их значение в обогащении почвы азотом. -Автореф. канд. дисс. Саратов. 1965.

66. Красильников Н.А., Дуда В.И., Соколов А.А. Новые типы спороношения у бактерий анаэробов. 1964, Докл. АН СССР, 159, 434.

67. Лазарев Н.М. Типы биоорганоминеральных систем различных почв.-Тр. ВНИИ с.-х. микробиологии за 1941 1945 г.г. 1949, вып.1, 23-45.

68. Лория Ж.К., Амосова Н.В., Егоров Н.С. О зависимости между спорообразованием и синтезом протеолитических ферментов. -Науч. докл. высш. школы, сер. Биол. науки, 1976, 4, 13.

69. Л ьвов Н.П. Свободнонивущие азотфиксирующие микроорганизмы дерново подзолистой почвы. -Автореф. канд. дисс., М. 1964.

70. Малахова П.Г. Ризосферная микрофлора некоторых растений пустыни Кызылкума. В сб. "Почвенная и сельскохозяйственная микробиология". Ташкент. Изд-во АН Узб.ССР, 1963, 170.

71. Мантейфель А.Я. Спорообразование у бактерий. Выяснение условий спорообразования у ацетоно^-бутиловых бактерий. Микробиология. 1940, 9, 89.

72. Мейнелл Дж. Г., Мейнелл Э. Экспериментальная микробиология ( теория и практика). -М.: Мир, 1967.

73. Уваров М.М. Ассоциативная азотфиксация. -Автореф. докт.дисс.1. M.s Изд-во МГУ, 1983.

74. Мишустин Е.Н. Почвенные типы и специфика их микронаселения В сб. "Физика, химия, биология и минералогия почв СССР". Докл. к УШ международному конгрессу почвоведов. М. 1964, 229.

75. Мишустин Е.Н., Емцев В.Т. Почвенные азотфиксирующие бактерии рода Clostridium. -М.: Наука, 1974.

76. Мишустин Е.Н. Микробные ассоциации почвенных типов. В сб. "Проблемы и методы биологической диагностики и индикации почв". -М.: Наука, 1976.

77. Непомилуев В.Ф., Козырев М.А. Роль микроорганизмов в процессе оглеения почв. -В кн. "Микроорганизмы в сельском хозяйстве". Изд-во МГУ. 1970, с.273.

78. Ницэ Л.К., Годова Г.В. Несимбиотическая фиксация азота атмосферы в корневой зоне растений. В сб. "Микроорганизмы как компонент биогеоценоза". Алма-Ата. Изд-во Каз.ГУ. 1982.

79. Петербургский А.В. 1985. Исторические аспекты развития учения об азотном питании растений. В сб.: Минеральныйи биологический азот в земледелии СССР", М., Изд."Наука", 66.

80. Поликар А. 1972. Молекулярная цитология мембранных систем животной клетки. М., Изд."Мир".

81. Пономарева Н.С. 1959. Микрофлора поливных и старопахотных солонцов племсовхоза "Омский". Тр.Омского с.-х.ин-та им.Кирова, в.34, с.91-107.

82. Пошон Ж. и Де Баржак Г. I960. Почтенная микробиология. М. Изд.Ин.лит.

83. Пресяотт С., Дэн С. 1952. Техническая микробиология, М., Ино.издат,

84. Работнова И.Л., Егорова Б.К., Озолина Г.К., Елецкий И.К. 1952. 0 некоторых особенностях физиологии Cl.pasteurianum. Микробиология, 21 (4), 429.

85. Работнова И.Л. 1957. Роль физико-химических условий (рН и ТН2) в жизнедеятельности микроорганизмов. М. Изд.АН СССР.

86. Редькина Т.В., Калининская Т.А. 1981. Зпифитная микрофлора семян риса как источник азотфиксирующих микроорганизмов в его ризосфере. Микроб.сообщества и их функционир. в почве. Киев. с.215-220.

87. Рунов Е.В. 1926. Восстановление окисных соединений железа биологическим путем. Бестн.бактериол.агрон.станции, 24.

88. Рокицкий П.Ф. Биологическая статистика (учебное пособие для биол. фак. ун-тов) Минск: Высшая школа, 1967, 327 с.

89. Рыбалкина А.В. 1957. Микрофлора тундровых, подзолистых и черноземных почв. В кн."Микрофлора почв Европейской части СССР". - М., изл-бо АН СССР.

90. Рыыс 0. 1966. Об эколого-географическом распространении некоторых свободноживущих азотфиксирующих бактерий в почвах Эстонской ССР. Автореф.канд.дис. Таллин.

91. Скалон И.С. 1965. Микробиологическая характеристика ризосферы растений естественных сообществ сухостепной и пустынно-степной подзол центрального Казахстана. Тр.Бот.ин-та АН СССР, 3, 151.

92. Скиннер Ф.А. 1979. Анаэробные бактерии и их роль, деятельность б почве. Почвенная микробиология. Пер. с англ.М. Колос, 12-35.

93. Сидорова В.В. 1971. Влияние растительных остатков на поч4-венно-микробиологические условия питания растений. В сб. Микробиологическая основы повышения плодородия почв. Л., стр.133.

94. Тарвис Т.В. I960. Основные закономерности в развитии микрофлоры каштановой почеы Заволжья и ее агрономическое значение. Бюлл.научно-техн.информ.по? с.х.микробиологии, 8(11),37.

95. Тильба В.А., Голодяев Г.П. 1966. Об азотфиксирующих бактериях пахотных почв Приморья. В сб."Проблемы биологии на Дальнем Востоке". Владивосток, стр.52.149.

96. Тильба В.А. 1968. Азотфиксирующие бактерии ризосферы сои в почвах.Приморья. Автореф.канд.дис. Владивосток.

97. Горова А.К. 1979. Протеолитические анаэробы рода Clostridium и их роль в трансформации белковых веществ в почве. -Автореф.канд.дисс. М., 1979.

98. Тюрин И.В. 1946. О количественном участии живого веществав составе органической части почв. Почвоведение, № I, II. ЮО.Федоров М.В. 1952. Биологическая фиксация азота атмосферы. М. Сельхозгиз.

99. Федоров М.В. 1957. Руководство к праятическим занятиям по микробиологии. М. Изд.Сельхозгиз.

100. Федорова Р.Й., Милехина Е.И., Илькина Н.И., Бражников В.В. К вопросу ацетиленового метода для определения азотфиксирующей способности почв. Изв.АН COOP, сер.биол.,1,106.

101. Alexander M. 1971. Microbial ecology. J. Wiley, USA.

102. Angier L. 1957. A propos de la fixation biologique del'azote atmospherique et de la numeration des Clostridium fixations dans les soils. Ann, Idist. Pasteur, 92, 817.

103. Aranki A., Freter R. 1972. Use of anaerobic glove boxes for the cultivation of strictly anaerobic bacteria. Am. J. Clin. Nuti., 25, 1329.

104. Aranki A., Syed S.A., Keiney E.B., Freter R. 1969. Isolation of anaerobic bacteria from human gingiva and mouse cecum by means of a simplified glove box procedure. Appl. Microbiol. 17, 568.

105. Barrow N.J., Jenkinson D.S. 1962. !Ehe effect at water -logging of fixation of nitrogen by soil incubated with straw. Plant a. Soil, 16, 268.

106. Barthel Chi. 1918. Recheich.es bacteiiologiques sur le sol du Greenland. Septentrional. XI Thule Exped. til Gioen-lands Nordkyst. Kobenhavn, Bd. 1, S. 26.

107. Basilevich N.I. Energy flow and biogeochemical regularities of main world ecosystems. In "Proc. I. Intern. Congr. Ecol. Hague, Netherlands, £974.

108. Bergey's manual of Determinative Bacteriology. 1974. The Williams and Wilkins Company, Baltmore, 8ed.

109. Bergere J.L., Rouseau M., Mercier C. 1975» Polyoside intracellular impligue dans la sporulation de Clostridium butyricum. I. Cytologie production et analyse ensymatique preliminaire. Ann. Inst. Pasteur, 126A, 295.

110. Brouzes R., Ehowles R. 1971. Inhibition of growth of Clostridium by acetylene implication for nitrogen fixation assay. Can. J. Microbiol. 17, 12, 148J.

111. Brouzes R., Knowles R. 1983. Kinetios of nitrogen fixation in a glucose-amended, anaerobically incubated soil. -Soil. Biol. Biochem., 5, 2, 223.

112. Brouzes R., Lasik J., Knowles R. 1969. The effect of organic amendment, water content and oxygen on the incorpora15tion of Ng by some agricultural and forest soils. Canad. J. Microbiol. 15, 899.

113. Brown R.G., Lindberg В., Laishley E.J. 1975. Characterization of a two reserve glucans from Clostridium pasteurianum. Can. J. Microbiol., 21, 1136.

114. Buchanan R. 1949. Role des anaerobies en agronomie. Ann. Inst. Pasteur, 77, 341.

115. Carnahan G.E., Castle G.E. 1958. Some reguirement of biological nitrogen fixation. J. Bacterid. 75 (2) 121.

116. Chang P.C., Knowles R. 1965. Nonsymbiotic nitrogen fixation in some Quebec soils. Canad. J. Microbiol., 11, 29.

117. Cho K.L., Day C.H. 1973. Ultrastructure of obligately anaerobic bacteria Clostridium KLuyveri and Clostridium aceto-butylicum. Austr. J. Biol. Sci., 26, 547.

118. Dalton H., Mortensen L.K. 1972. Dinitrogen (Ng) fixation (with a biochemical emphasic). Bact. Rev. 36, 12, 323i«

119. Day L.E., Costilow R.W. 1964. Physiology of sporulation process in Clostridium botulinum. II. Maturation of fore-spores. J. Bacterid. 88, 695.

120. Dilworth M.J. 1966. Acetylene reduction by nitrogen-fixing preparation from Clostridium pasteurianum. Biochim. et biophys. acta, N 127, 284-285.

121. Di Menna M.E. 1966. The indicence of azotobacter and of notrogen-fixing Clostridium in some New Zealand Soils. If.Z. Agric. Res., 9, 218.

122. Dhar N.K. 1959. Land fertility imprevement. J. Indian Soc. Soil Sci. 7, 1.

123. Edvards 0?., McBridge B.G., 1975. New method for isolation and identification of methanogenic bacteria. Appl. Microbiol., 29, 540.

124. Frolender F., Carlson J.J. 1977. Bactericidal effect of anaerobic broth exposed to atmospheric oxygen tested on Pepto-coccus anaerobius. J. Clin. Microbiol., 6, 117.

125. Fitz-James P., Young E. 19&9. Morphology of sporulation. In: Bacterial spore. Eds. Bould G.W., Hurst A. Acad. Press. London - N.Y., 39.

126. Gourret J.P. Description et interpretation des nucleoides structures observes dans des bacteroides de Rhirobium. Biol. Cellulare. 32, 299.

127. Hamman E., Ottow J-.C.G. 1976. Isolation and characterization of iron-reducing nitrogen-fixing saccharolytic Clostridia from gley soils. Soil Biol. Biochem., 8, 357.

128. Hayke-Pacewiezowa Т., Balandreau J., Dommerques J. 1970. -Fixation microbienne de l'azote dans un soil sctlin tunisien.

129. Soil. Biol. Biochem., 2, 1, 47-53.

130. Hayke-Pacewiezowa Т., Balandreau T. 1969. Effect of floading on microbiol fixation of molecular nitrogen in the mouze rhisosphere. C.R. Acad. Sci. Paris, 269D, 1356.

131. Hamman R., Ottow J.C.G. 1976. Isolation and characterization of iron-reducing nitrogen^fixing saccharolytic Clostridiafrom gley soils. Soil Biol.Biochem., 8, 357.

132. Halvarson H.O., Starky R.L. 1927. Studies on the transformation of iron in nature. Part II. Concerning the inqportance of microorganisms in the solution and reduction of iron. -Soil Sci., 24, 381.

133. Hoeniger J.M., Tquschel H.D. 1974. Sequence of structural changes in cultures of Clostridium tatani grown on a solid medium. J. Med. Microbiol., 7, 425.

134. Hausenbauer J.M., Waites W.M., Setlow P. 1977. Biochemical properties of Clostridium bifermentans spores, J. Bacte-riol., 129, .:1148.

135. Hitchins A.D., Sle*-pecky R.A. 1969. Bacteriol sporulationas a modified procaryotic cell devision. Amer. Soc. Microbiol., 119.

136. Hardy R.W.F., Burns R.C., Hebert R., Hoelsten R.D., Jackson E.K. Biological nitrogen fixation a key to world protein. - Plant Soil. Spoc. vol. 561.

137. Hardy R.W.O)., Holsten R.D., Jackson E.K., Burns R.C. 1968. !Ehe acetylene-ethylene assay, for ^-fixations laboratory and field evaluation. Plant Physiol., 43, p. 1185-1297.

138. Hodgkiss W., Ordal Z.Y., Cann D.C. 1967. Ike morphology and ultrastructure of the spore and exosporium of some Clostridium species. J. Gen. Microbiol. 47, 213.

139. Hungate R.E., 1950. The anaerobic mesophilic cellulolytic bacteria.Bact. rev., 14, 1.

140. Hungatfe R.E., 1969. A role tube method for cultivation of strict anaerobes. In: "Methods in Microbiology, v. JB. Acad, press. L.-N.Y., 117.

141. Hungate R.E., Macy J. 1973. The roll-tube method for cultivation of strict anaerobies. Bull. Ecol. Res. Comm., 17»123.

142. Jensen H.L., Swaby K.J. 1940. Futher investigation on nitrogen-fixing bacteria in soils. Proc. Linnean Soc. N.S. Wales, 65, pt 5-6, :5£Q-557.

143. Jensen H.L. 1940. Contribution to the nitrogen economy of Australian wheat soils with particulary reference to New South Wales. Proc. Linnean Soc. N.S. Wales, 65, pt.1-2, 1.

144. Jensen H.L. 1941. Nitrogen fixation and cellulose decomposition by soil microorganisms. III. Clostridium butyricum in association with aerobic cellulose descomposers. Proc. Linnean Soc. N.S. Wales, 66, 239.

145. Jensen H.L. 1951. Notes on the microbiology of soil from Northern Groenland. Medd. Gronland, 142, 23.

146. Jensen H.L., Spencer D. 1947. The influence of molybdenum and vanadium on nitrogen fixation by Clostridium butyricum and recote organisms. Proc. Linean Soc. N.S. Walso, 72, Pt 1-2, 329, 73.

147. Johnstone K., Holland К.Ф. 1977. Ultrastructural changes during sporulation of Clostridium bifermentans. J. Gen. Microbiol. 100, 217.

148. Jurgensen M.P., Davey C.B. 1970. Non-symbistic nitrogen -fixing microorganisms in acid soil and the rhizosphere. -Soils a. Fertilizers, 3, 435.

149. KLllgore C.E., Starr S.E., Del Bene V.E., Whaley D.N., Do-well Y.R. 1973* Comparison of three anaerobic systems for the isolation of anaerobic bacteria fxom clinical specimens. An. J. Clin. Pathol., 59, 552.

150. KLuyver A., Van Niel C. 1956. The microbes contribution to biology. Harward Univ. Press, Cambridge.

151. Ehowles R., 1972. Study of Kinetics of nitrogen fixation and acetylene reduction in soil system and the effects ofoxygen and acetylene on nitrogen-j-ase activity. Ins Modernmethods in study of microbiol. ecology. Agric. College, Uppsala, Sweden, 19.

152. Khowles R., O'Tolle R. 1973. Evolution of the acetylene reduction assay of ambient p02 in field and forest soils: laboratory and field studies. In "Nitrogen fixation and the Bio^here (Nutman P.S., Stewart W.D.P., etc.) Cambridge Univ. Press.

153. Kohler K.H. 1968. Die Biochemie und Physiologie der Bindungdes atmospharischen sticketoffs. Biol. Rundschau, 6, 167. >

154. Laishley E.J., McAlister T.Y., Clements Y., Young C. 1973. Isolation and morphology of native intracellular polyglucose granules from Clostridium pasteurianum. Can. J. Microbiol., 19, 991.

155. Lehmberg Ch. 1956. Untersuchungen uber die Wirkung von Askorbinsaure Stoffwechselgifton und anderen Faktoren aufden Stoffwechsel von Clostridium butyricum. Prat. Arch. f. Mikrobiol. 24, 323.

156. Line M.A., Loutit M.W. 1971. Non-symbiotic nitrogen-fixing organisms from some New Zeland tussock-grass land soils. J. Gen. Microbiol., 66, 311.

157. Loub W. 1965. Zur Mikrobiologie mittel und nordeuropaischer Podzole. - Z. Pflanzenernahr., Dung., Board enkunde, 3, 157.

158. Lynch L.M. 1972. Identification of substrates and isolation of microorganisms responsable for ethylene production in the soil. Nature, 240, 5375, 45.

159. Mackey B.M. and Morris Y.S. 1971. Ultrastructural champs during sporulation of Clostridium pasteurianum. J. Gen. Microbiol., 66, 1.

160. Mackey B.M., Morris J.G. 1972. The exosporium of Clostridium pasteurianum. J. Gen. Microbiol., 73» 325.

161. Mahmound S.A.Z., Ibrahim A.M. 1971. Non-symbiotic nitrogen fixation as influenced by soil moisture. Acta agron. hung., 20, 39.

162. Mandelstam J. 1976. Bacterial sporulation: a problem in the biochemistry and genetics of a primitive developmental system. Proc. Roy. Soc. London, В 193, 89«

163. McClung L.S. 1916. The anaerobic bacteria, with special reference to the genus Clostridium. Ann. arev. Microbiol.10, 173.

164. McCready R.G.L., Costerton J.W. and Laishley E.Y. 1975. Morphological modifications of cell of Clostridium pasteurianum caused by growth on sulfite. Canad. J. Microbiol., 22, 2£9.

165. McKhight R.M. 1949. Non-symbiotic nitrogen fixing organisms in Queensland soils. Queensland J.Agric. Sci., 6,9.

166. McMinn M.T., Crawford J.J. 1970. Recovery of anaerobic micalroorganisms from clinic specimens in prereduced media versus recovery by routine clinical laboratory methods. Appl. Microbiol., 19, 207.

167. McRae C., Castro T.P. 1967. Nitrogen fixation in some tropical rice soils. Soil Sci. 103, 277.

168. Meiklegohn J. 1964. Some effects of environment on soil bacteria. Trans. 8th Internat. Congr. Soil Sci. Bucharest, 3, 333.

169. Meikegohn J. 1967. Microbiological observations on an experiment with compost. Rhodesia, Zambia, Molawi. - J. Agric. Res., % 43«

170. Mickowsky M. 1954. The possibility of nitrogen fixation in some soil types near Skopje. Ann. Рас. Agric. Skopje, 5, 207, 232.

171. Moore A.W. 1963. Occurence non-symbiotic nitrogen-fixing microorganisms in Nigerian soils. Plant and Soil, 19, 309»

172. Moore A.W. 1966. Non-symbiotic nitrogen fixation in soil and soil plant systems. Soils and Fertilizers. 29, 2, 113.

173. Morris J.G., O'Brien R.W. 1971. In: %>ore research. Eds. Barker A.M., Gould G.W., Wolf J. Acad. Press, London, 1.

174. Nakamura S., Serikawa Т., Yamakawa K., Nishida S., Kozaki S., Sakaguchi G. 1978. Sporulation and С2 toxin production by Clostridium botulinum type С strains producing to C^ toxin.- Microbiol, and Immunol., 22, 591.

175. Meiklejohn J. 1962. Microbiology of the nitrogen cycle in some Ghana soils. J. Exper. Agric. 30, 115.

176. NitaL., Vintu 0. 1964. Influenta differitelor forme de azot asupra capacitatu de fixare a azotului molecular decatri Azotobacter sp. Ann Inst. Cere. Cereale si Plante Tehnice, Fundulea, 32, Ser. B. Romania.

177. Osburn O.L., Brown R.W., Werkman C.H. 1937. The butyl alcoisopropyl alcohol hoi fermentation. J. Biol. Chem., 121, 683.

178. O'Tolle P., Knowles R. 1973. Efficiency of acetylene reduction (mtrogen fixation) in soil: effect of type and concentration of available carbohydrate. Soil Biol. Biochem.6., 789.

179. Otow J.C.G. 1972. Bacterial mechanism of iron reduction andgley formation. In: "Pseudogley and Gley. Transactions of Commisions V and VI of the Int:* Soc. Soil Sci. Verlay Che-mie, GmbH, Weinheins/\Bergstr, >.'

180. Prevot A.R. 1957- Manuel de clasification et de determination de bacteries anaerobies. 3 ed. Paris, Masson.

181. Parker C.A. 1934. Non-symbiotic nitrogen-fixing bacteria in soil I. Studies on Clostridium butyricum. Austrc(l. J. Agric. Res. 3» 90.

182. Pasteur L. 1961. Animalcules infusories vivant sous gas oxy-gene libre et determinant des fermentations. C.r. Acad. Sci. Paris, 32, 344.

183. Proctor M.H., Wilson P.W. 1958. Nitrogen fixation by gram-negative bacteria. Nature, 182, 891.

184. Proctor M.H., Wilson P.W. 1959. Nitrogen fixation by Achro-mobacter sp. Arch. Microbiol. 32, 254.

185. Pulay G., Toth S., Bakos A.R. 1959. Die Bedeutung des Eisens im Stoffwechsel einiger der Milchindustrie vorkommenden Mikroorganismen. 15 Internat. Dairy Congr. 2, 775»

186. Rankow 7. 1964. The salinization of the soil and the development of the nitrogen fixation microorganisms. Agrochimica, 8, 330.

187. Rice W.A., Paul E.A., Wetter L.R. 1967. The role of anaero-biosis in asymbiotic nitrogen fixation. Canad. J. Microbiol. 13, 829.

188. Rice W.A., Paul E.A. 1971. The acetylene reduction assay for messuring nitrogen fixation in water logged soil. Can. J. Microbiol. 17 (8) 1049.

189. Richard 0. 1948. Variation in microbiological and biochemical characteristics of anaerobic bytiric acid bacteria. -Nature, 162, 4116.

190. Richard 0. 1980. Identifizierung der beweglichen Buttersau-rebacterien. Schweiz. Z. allegem. Pathol. 13» 560.

191. Roberts Y. 1947. Reduction of ferric hydroxide by strains of Bacillus polymyxa. Soil Sci., 63, 135.

192. Robinow C.F. 1960. Morphology of bacterial spores, their development and germination. In: "The Bacteria" V.S. Eds. Gunsalus l^c., Stanier R.Y. N.Y., Acad. Press, 207.

193. Rode L.J. 1971. Bacterial spore appendages. CRC Critical Rev. in Microbiol. 1,1.

194. Rode L.3*, Crawford M.A., Williams M.G. 1967. Clostridium spores with ribbon-like appendages. J. Bacteriol., 105» 349.

195. Roefe R.D., Hentges D.Y., Barrett Y.Y., Campbell B.J. 1977. Oxygen tolerance of human intestinal anaerobes. Amer. J. Clin. Nutг., 30, 1762.

196. Rosenblum E.D., Wilson P.W. 1949. Fixation of isotopic nitrogen by Clostridium. J. Bacteriol., 57» 413»

197. Rosenblatt J.E., Fallon A*, Finegold S.M. 1973» Comparison of three anaerobic systems for the isolation of anaerobic bacteria from clinical specimens. Am.J.Clin.Pathol.,59» 552.

198. Rosenblum E.D., Wilson P.W. 1950. Molecular hydrogen and nitrogen fixation by Clostridium. J. Bacterid.,. 59, 83.

199. Rouguerol Th. 1962. Sur le phenomena de fixation de l1 azote dans les rivieres de Camargue. Ann. agron. 13, 325«

200. Ross D.V. 1960. A note of the occurrence non-symbolic nitrogen-fixing bacteria in some introduced-pasture soil. -N.Z.G. Agric. Res., 3, 245.

201. Rousseau M., Hernier J., Bergere J.L. 1971a. Structure de certains Clostridium du groupe butyrique. I. Sporulation de Clostridium butyricum et Clostridium Saccharobutyricum. Ann. Inst. Pasteur, 120, 23.

202. Rousseau M., Hermier J., Bergere J.L. 1971b. Structure de certains Clostridium du groupe butyrique. II. Sporulation de Clostridium tyrobutyricum, Ann. Inst. Pasteur, 120, 33.

203. Ryter A. 1965. Etude morphologique de la sporulation de Bacillus subtilis. Ann. Instit. Pasteur, 108, 40.

204. Ryter A., Kellenberger E., Birch-Anderson A., Madle, 1958. Etude du microscope electronique de plasmas contenant de l'acide desoxyribonucleique. I. Les nucleaides des bacte-ries en croissance active. Z. Naturforschg. 136, 597.

205. Ryter A., Whitehouse R. 1978. Urocil incorporation in the forespore and the mother cell during spore development in Bacillus Subtilis: autoradiographic electron microscopic study. Arch. Microbiol., 118, 127.

206. Sadoff H.L. 1972. The antibiotics of Bacillus species, their possible roles in sporulation. Progr. in Industr. Microbiology, 11, 1.

207. Samsonoff W.A., Hashimoto Т., Conti S.F. 1970. Ultrastruc-tural changes associated with germination and outgrowth of1. T6I.an appendage-bearing Clostridial spore. J. Bacteriol. 106, 269.

208. Samsonoff W.A., Hashimoto Т., Conti S.F. 1971. Appendage development in Clostridium bifermentans. JV Bacterid., 106, 269.

209. Schaeffer P. 1969. Sporulation and the production of antibiotics, exoenzymes and exotoxin. Bact. Rev. 33, 48.

210. Schoehorn R., Burris R.H. 1967. Study of intermediates in nitrogen fixation. Fed. Proc. 24, p. 7Ю.

211. Stanbridge Т., Preston N. 1969. The motility of some Clostridium spe*rces. J. Gen. Microbiol., 55» 29.

212. Sebald M., Tdequet A., Bricout F. 1973. Techniques en bacteriologie. Z. Anaerobies, Mycobacteries, Virologie. Paris, 1173, 30.

213. Seifert J. 1966. Ecology of soil microbes. II. Acta Univ. Carolinae biol. 187.

214. Setlow P., Waites W.M. 1976. Identification of several unique, low-molecular weight basic proteins in dormant spores of Clostridium bitermentans and their degradation during spore germination. J. Bacterial. 127, 1015»

215. Sgolander N.O., McCoy E. 1937. Studies on anaerobic bacteria. XIII. A cultural study of some "Butyric" anaerobes previously described in the literature. Zbl. Bakteriol., Parasitenkunde, Infektionskrankh. U. Hyg. Abt. II 97,14, 280.

216. Skinner F.A. 1965. The enrichment and isolation of anaerobic cellulolytic soil bacteria. Zontrallbl. fur Bakteriol., Parasitink. Infektionskl. uns. Hyg., 1, Suppl. 1, 91-94.

217. Skinner Р. A. 1968. (The anaerobic bacteria of soil. The ecology of soil bacteria. An International symposium. Liverpool Univ. Press, 1968, p. 573-592.

218. Skinner P.A. 1971. The isolation of soil Clostridia. Ins Isolation of .anaerobics. Eds. Shapton D.A., Board R.B. Acad. Press. London, 57.

219. Skinner P. 1975. Anaerobic bacteria and tjaeir activites in soil. In "Soil microbiology. A critical review. Ed. Walker London Boston. Butterworth. N 10, v. 1,

220. Smith L.Ds. and Hobbs G. 1974. Clostridium. Ins "Beigey's Manual of Determinate Bacteriology. The Williams and Wilk-ins Company. Baltimore. 551»

221. Smith K.A., Restall S.W.P. 1971. The occurence of ethylene in anaerobic soil. J. Soil Sci. 22, 4, 430.

222. Stewart W.D.P. 1969. Biological and ecological aspects of nitrogen fixation by free-living microorganism. Proc. Roy.,Soе., B, 172, 367.

223. Stolp H. 1955» Ernahrungs- und entwicklungsphysiologische Untersuchungen an anaeroben Bakterien. I. Zur ErnahrungsAphysiologie der Clostridium. Arch. Mikrobiol. 21, 273.

224. Sudo S.Z., Dworkin M. 1973. Comparative biology of proka-ryotic resting cells. Adv. in Microbiol. Physiol., 10,153.

225. Swaby R.S. 1939. The occurence and activities of Azotobac-ter and Clostridium butyricum in Victorian soils. -&ustrql. J. Exper. Biol, and Med. Sci., 17, 401.

226. Takagi A., Kawata Т., lamamoto Sh., Okita Sh. 1960. Electron microscopic studies an ultrathin sections of spores of

227. Clostridium tetani and Clostridium histolyticum with special reference to sporulation and spore germination process. Japan J.Microbiol., 4, 134.

228. Verwalke J.Y., Van Nevel C.Y. 1972. Compazison of three techniques fox the total count of anaerobes from intestinal contents of pigs. Appl. Microbiol., 24, 313.

229. Vlassak K., Schivashankar K. 1973. Nitrogen fixation from soil cores rhizopshere and exiced roots of centain legums from a highway site. Agriculture (Heverlee), 21, 4, 213.

230. Visser S.A. 1966. The presence of microorganisms in various strata of deep tropical peat deposits. Life Sci.,3, 1061.

231. Vognova-Raflkova J. 1963. In the specifity or rhizosphere microflore. In "Plant microbes relationships. Prague, Czechosi. Acad. Sci., P. 126-133.

232. Watt В., Colles J.G., Вгодо R. 1974. The isolation of strict anaerobes: the use of an anaerobic cabinot compared witha conventional procedure. J. Med. Microbiol., 7» 315.

233. Watt В., Colles J.G., Brown R. 1974. The isolation of strict anaerobes: the use of an anaerobic cabinot compared with a conventional procedure. J. Med. Microbiol., 7, 315.

234. Walker P.D. 1970. Cytology of spore formation and germination. J. Appl. Bacteriol., 33» 1«

235. Weinberg M., Nati-veller, Pievot A. 1937. Les microbes aero-bies. Monogr. Inst. Pasteur, Paris,

236. Willis A.I. 1969. Techniques for the study of anaerobic spore forming Bacteria. In: Methods in microbiology. V. 3B. London. Acad. Press, 79.

237. Young M. 1978. Bacterial endospore development an ardered requence of gene Transcription. TIBS, 3, 55.

238. Yoshida Т., Suzuki M. 1975. Formation and degradation of ethylene in submerged soils. Soil gci. a.Plant Nutr.21,2, 129.

239. Young R.E. , Pratt H.K., Bicle J.A. 1951. Identification of ethylene as a volatile product of the fungus Pe nicillium1 digitatum. Plant Physiol., 26 (3), 304.

240. Zender A.Y.B., Wuhrmann K., 1977. Physiology of a Methano-bacterium strains A.Z. Arch. Microbiol., 111, 199.

241. Zimmy Ы. 1961. Badania nod wystepowenien Clostridium u glebach lakowych. Ekol. Polska, 7, 14, 303-311.

242. Zimny H. 1960. Badania nod .wystepowanian Clostridium w globach lesnych. - Ekol. Polska, 6^. 311-321.

243. Тип. ТСХА. Зак. 1938. Тир. 200&