Синтетические пептиды в изучении антителопродукции к белкам вирусов гепатита С и D тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат биологических наук Пименов, Владимир Константинович

• Пименов, Владимир Константинович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Пименов, Владимир Константинович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1. Исследование антигенных свойств синтетических пептидов, воспроизводящих фрагменты белков вируса гепатита С (взаимодействие с антителами класса 1дв).

3.1.1. Анализ антигенной активности пептидов, соответствующих участкам Е1- и Е2-белков НС\/.

3.1.2. Анализ антигенной активности пептидов, соответствующих участкам соге-белка НС\/.

3.1.3. Анализ антигенной активности пептидов, соответствующих участкам МЭЗ-белка НС\/.

3.1.4. Анализ антигенной активности пептидов, соответствующих участкам Ы84-белка НС\/.

3.1.5. Анализ антигенной активности пептидов, соответствующих участкам Ы85-белка НС\/.

3.2. Исследование антигенных свойств синтетических пептидов, воспроизводящих фрагменты белков вируса гепатита С (взаимодействие с антителами класса 1дМ).

3.3. Диагностическое значение определения антител классов 1дО и 1дМ к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита

3.4. Исследование зависимости между выявлением антител к антигенам вируса гепатита С и обнаружением РНК вируса.

3.5. Диагностические возможности тест-систем "ИФА-НСУ-СПЕКТР" и "ИФА-анти-НС\/-1дМ".

3.6. Антигенные свойства и диагностическое значение пептидов, воспроизводящих фрагменты белка нуклеокапсида вируса гепатита О

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Синтетические пептиды в изучении антителопродукции к белкам вирусов гепатита С и D»

Актуальность проблемы

Вирусные гепатиты традиционно являются одной из наиболее острых проблем мирового здравоохранения. Расчетные данные ВОЗ свидетельствуют, что в разных странах мира вирусными гепатитами инфицированы сотни миллионов человек [64]. Почти повсеместно, в том числе и в России, наиболее пристальное внимание уделяется гепатитам с парентеральной передачей возбудителя. Это связано с резким ухудшением эпидемиологической ситуации по гепатитам В, С и Р, а также частым формированием хронических поражений печени, характерных для данных заболеваний.

Инфекции, вызываемые вирусами гепатитов С и О, характеризуются чрезвычайно высокой частотой хронизации процесса (65-70% при НОУ-ин-фекции и до 80% при НС\/-инфекции). При этом современные лекарственные средства не позволяют эффективно препятствовать развитию инфекции. Это выдвигает на первый план в борьбе с распространением гепатитов С и О профилактические методы, основанные, в первую очередь, на своевременной специфической диагностике этих заболеваний [21].

Серодиагностика, основанная на индикации специфических антител к различным вирусным белкам в ИФА, является одним из основных методов диагностики НСУ- и НЮУ-инфекции. В современных ИФА-тест-системах находят свое отражение последние достижения молекулярной биологии, биотехнологии, химии и др. наук. Однако, разработка новых или совершенствование уже имеющихся тест-систем для диагностики гепатитов С и О по-прежнему остается важной актуальной задачей, решение которой требует детального исследования антигенной структуры возбудителя, а также изучения особенностей его взаимодействия с иммунной системой хозяина. Недостаточно полно исследована структура антигенных сайтов в составе вирусных белков. Мало сведений, касающихся организации и местоположения эпитопов, узнаваемых специфическими антителами класса 1дМ. Гуморальный иммунный ответ, его динамика и структура, хотя и находятся в стадии активного изучения, во многом остаются невыясненными. Не до конца исследованы особенности антителопродукции к отдельным белкам HCV. Это актуально как в теоретическом плане для понимания фундаментальных основ иммуногенеза при HCV- и HDV-инфекциях, так и в практическом аспекте для дифференциальной диагностики, прогноза течения и исходов гепатитов С и D. Принципиально важным методическим подходом в решении этих проблем является использование синтетических пептидов как аналогов антигенных детерминант возбудителей инфекционных заболеваний [23а].

Цель исследования

Формирование панели синтетических пептидов, воспроизводящих антигенные детерминанты белков вирусов гепатита С и D, с последующим использованием полученных данных для изучения особенностей антитело-продукции к вирусным протеинам и конструирования диагностических тест-систем.

Задачи

1. Проанализировать антигенные свойства панели синтетических пептидов и рекомбинантных протеинов, воспроизводящих фрагменты аминокислотной последовательности Е1-, Е2-, core-, NS3-, NS4-, Ы85-белков вируса гепатита С и белка вируса гепатита D (HDAg).

2. Оценить частоту встречаемости антител классов IgG и IgM к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С у больных острым, хроническим гепатитом Сиу бессимптомных доноров-носителей антител к вирусу гепатита С. Проанализировать встречающиеся комбинации антител.

3. Исследовать динамику антителопродукции к вирусным белкам у больных острым гепатитом С на протяжении 6 месяцев после клинической манифестации.

4. Изучить частоту встречаемости антител к белкам вируса гепатита С у больных, содержащих и не содержащих РНК вируса, а также у больных с различными показателями аланинаминотрансферазы.

5. Разработать иммуноферментную тест-систему, позволяющую раздельно определять антитела класса IgG к Env-, core-, NS3-, NS4-, Ы85-бел-кам вируса гепатита С, тест-систему для определения антител класса IgM к соге-протеину вируса гепатита С, а также иммуноферментные тест-системы для определения антител классов IgG и IgM к вирусу гепатита D. Провести лабораторные испытания.

Положения, выносимые на защиту

1. Сформирована панель синтетических пептидов и рекомбинантных белков, отражающих антигенные свойства core-, Е1-, Е2-, NS3-, NS4-, NS5-протеинов вируса гепатита С и белка вируса гепатита D (HDAg).

2. Антителопродукция к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С у больных острым и хроническим гепатитом С значительно различается. Анализ спектра антител классов IgG и IgM дает дополнительные возможности дифференциальной диагностики гепатита С.

3. Наряду с антителами класса IgM к соге-антигену серологическими маркерами репликации вируса гепатита С у больных хроническим гепатитом С являются и антитела класса IgG к NSS-антигену. Тип спектра анти-core+NS3+NS4+NS5-lgG, особенно в сочетании с анти-core-lgM, достоверно чаще обнаруживается у РНК-позитивных больных хроническим гепатитом С с повышенным уровнем аланинаминотрансферазы.

Научная новизна

Определены синтетические пептиды и рекомбинантные белки, а также их комбинации, адекватно отражающие антигенные свойства структурных и неструктурных протеинов вируса гепатита С и белка вируса гепатита D (HDAg).

Исследование антигенных свойств синтетических пептидов показало, что в формирование иммунного ответа, обусловленного иммуноглобулинами класса IgM, основной вклад вносят линейные эпитопы, тогда как в формировании ответа, обусловленного антителами класса IgG, участвуют как линейные, так и конформационные детерминанты.

На основании изучения антителопродукции к структурным и неструктурным белкам вируса гепатита С у больных острым, хроническим гепатитом Сиу бессимптомных доноров с антителами к вирусу гепатита С выявлено, что частоты встречаемости антител к core-, NS3-, NS4- и NSS-антиге-нам, а также комбинаций антител к этим белкам у бессимптомных доноров и у больных хроническим гепатитом С практически совпадают, значительно отличаясь от аналогичных показателей у больных острым гепатитом С.

Установлено, что частота встречаемости антител класса IgG к Env-протеинам у бессимптомных доноров достоверно выше, чем у больных острым и хроническим гепатитом С.

Продемонстрировано, что частота встречаемости антител класса IgM к ЫБЗ-протеину, так же как и к соге-протеину, достоверно выше у больных острым гепатитом С, чем у больных хроническим гепатитом С.

У больных хроническим гепатитом С показана корреляция между наличием РНК вируса и определением антител класса IgG к Ы85-антигену вируса.

У больных хроническим гепатитом С выявление комбинации анти-core+NS3+NS4+NS5-lgG, особенно в сочетании с анти-core-lgM, с высокой долей вероятности указывает на возможность положительной реакции на наличие РНК вируса и повышенный уровень аланинаминотрансферазы. Тип спектра aHTH-core+NS3+NS4-lgG при отсутствии анти-core-lgM, напротив, достоверно чаще обнаруживается среди РНК-негативных образцов.

У больных хроническим гепатитом С антитела класса IgM против белков вируса гепатита С чаще регистрируются при развернутом иммунном ответе, характеризующемся одновременной продукцией антител класса IgG к core- и нескольким NS-протеинам (aHTH-core+NS3+NS4+NS5-lgG, анти-core+NS3+NS4-lgG, aHTH-core+NS3+NS5-lgG, aHTH-core+NS4+NS5-lgG).

Динамика продукции антител классов IgM и IgG к NS3-, NS4-, NSS-белкам имеет ряд общих черт. Пик антител класса IgM наблюдается через месяц после клинической манифестации. Частота обнаружения антител класса IgG минимальна при первичном обследовании и достоверно повышается до второго месяца острой фазы гепатита С.

Практическая значимость работы

На основе синтетических пептидов и рекомбинантных белков, воспроизводящих фрагменты белков вирусов гепатитов С и D, а также конъюгатов моноклональных антител против человеческих иммуноглобулинов классов IgG и IgM, разработан ряд новых иммуноферментных тест-систем для диагностики HCV- и HDV-инфекции. Тест-система "ИФА-НСУ-СПЕКТР" позволяет раздельно определять антитела к Env-, core-, NS3-, NS4- и Ывб-анти-генам HCV и может быть использована в качестве подтверждающего теста на антитела к HCV при скрининговых исследованиях. Тест-система "ИФА-анти-HCV-lgM" позволяет определять антитела класса IgM к соге-антигену HCV. Совместное использование тест-систем "ИФА-НС\/-СПЕКТР" и "ИФА-анти-HCV-lgM" дает возможность дифференциальной диагностики острой и хронической стадий HCV-инфекции. Тест-системы "ИФА-анти-HDV" и "ИФА-анти-HDV-lgM" позволяют определять, соответственно, суммарные антитела и иммуноглобулины класса IgM к вирусу гепатита D и могут быть использованы в этиологической и дифференциальной диагностике HDV-инфекции.

Внедрение полученных результатов

Полученные результаты легли в основу технологии производства ряда тест-систем для диагностики гепатитов С и D: "ИФА-анти-ВГС", "ИФА-НС\/-СПЕКТР", "ИФА-анти-HCV-lgM", "ИФА-анти-HDV" и "ИФА-анти-HDV-IgM". Тест-система "ИФА-анти-ВГС" утверждена в качестве медицинского диагностического препарата и внедрена в производство фирмой "ИмБио", Н.Новгород, (регламент производства № 01898718-30-98, ФС 42-3574-98). Уровень внедрения - Российский. Тест-система "ИФА-анти-ВГС" используется в лабораториях инфекционных стационаров, центров крови, центров СПИД и т.д. Остальные диагностикумы успешно прошли апробацию на базе лабораторий практического здравоохранения и выпускаются в виде экспериментально-производственных серий НПК "Препарат", Н.Новгород. Тест-система "ИФА-HCV-lgM" к настоящему времени прошла Государственные испытания в ГИСК им. J1.A. Тарасевича и находится на утверждении в МЗ РФ. Тест-системы "ИФА-НС\/-СПЕКТР", "ИФА-анти-HDV" и "ИФА-анти-HDV-lgM" находятся в стадии оформления нормативно-технической документации.

Апробация работы

Результаты работы представлены на: IV Российском национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва, 1997), Международных конференциях "СПИД, рак и родственные проблемы" (С.-Петербург, 1996, 1997), на Медико-биологическом конгрессе (С.-Петербург, 1997), научно-практической конференции, посвященной 275-летию Нижегородского военного госпиталя (Н.Новгород, 1997), II и III научно-практических конференциях с международным участием "Гепатиты В, С, D и G - проблемы изучения, диагностики, лечения и профилактики" (Москва, 1997, 1999), конференции молодых ученых России с международным участием "Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины" (Москва, 1998), Межрегиональной научно-практической конференции "Экология и здоровье" (Н. Новгород, 1998), II съезде иммунологов (Сочи, 1999).

По материалам диссертации опубликована 21 печатная работа.

Апробация диссертации состоялась на расширенном заседании кафедры молекулярной биологии и иммунологии биологического факультета Нижегородского Государственного Университета им. Н.И. Лобачевского с участием членов Ученого Совета факультета совместно с Нижегородским областным иммунологическим обществом 17 ноября 1999 г.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа в объеме 154 листов состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, собственных результатов и их обсуждения, заключения, выводов и списка литературы. Диссертация иллюстрирована 5 рисунками и 30 таблицами. Библиографический указатель включает 153 источника литературы (30 отечественных и 123 иностранных авторов).

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Пименов, Владимир Константинович

139 ВЫВОДЫ

1. Показано, что антигенные свойства соге-белка вируса гепатита С наиболее полно воспроизводят синтетические пептиды 11-45 и 3-75; NS3-белка - рекомбинантный протеин и пептид 1363-1454; Ы84-белка - пептид 1689-1738+1921-1940; NSS-белка - комбинация пептидов 2271-2292, 22952313 и 2373-2391.

2. Продемонстрировано, что антигенные свойства белка вируса гепатита D (HDAg) наиболее полно отражают синтетические пептиды, воспроизводящие участок 52-93 аминокислотной последовательности этого белка. При конструировании иммуноферментных тест-систем для диагностики гепатита D необходимо использование нескольких пептидов 52-93, воспроизводящих последовательности, характерные для различных геновариантов вируса гепатита D.

3. Разработаны 2 оригинальные иммуноферментные тест-системы, предназначенные для серодиагностики гепатита С, и 2 новые иммуноферментные тест-системы для серодиагностики гепатита D. Лабораторные испытания продемонстрировали их высокую специфическую активность и возможности использования как в этиологической, так и в дифференциальной диагностике.

4. Картина спектра антител к структурным и неструктурным антигенам вируса гепатита С у больных острым и хроническим гепатитом С значительно различается. Антитела класса IgG к NS3-, NS4-, ИБб-белкам достоверно чаще выявляются у больных ХГС; антитела класса IgM к core- и NS3-белкам достоверно чаще выявляются у больных ОГС. Иммунологической характеристикой острого гепатита С служит наличие антител классов IgG и IgM только к соге-протеину. Как характерные для хронического гепатита С выделены следующие типы спектров антител класса IgG: aHTH-core+NS4, aHTH-core+NS3+NS4, aHTH-core+NS3+NS4+NS5, aHTH-NS4, aHTH-NS3+NS4, aHTH-Env+core+NS3+NS4, aHTH-core+NS3+NS5, aHTH-core+NS4+NS5.

5. Динамика антителопродукции при развитии инфекции у больных эстрым гепатитом С сопровождается увеличением частоты встречаемости

140 антител класса IgG к NS3-, NS4-, Ыв5-белкам и снижением процента обнаружения антител класса IgM ко всем белкам, особенно выраженное в отношение анти-core-lgM.

6. Установлено, что у больных хроническим гепатитом С РНК вируса гепатита С достоверно чаще обнаруживается в образцах сыворотки крови, содержащих антитела класса IgM не только к соге-антигену, но и антитела класса IgG к NSS-антигену. Частота встречаемости развернутого спектра антител (aHTH-core+NS3+NS4+NS5-lgG совместно с анти-core-lgM) достоверно выше у РНК-позитивных больных хроническим гепатитом Сиу больных с повышенным уровнем аланин-аминотрансферазы.

141

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Вирусные гепатиты занимают одно из ведущих мест в инфекционной патологии человека, уступая по распространенности лишь гриппу и другим острым респираторным заболеваниям. В настоящее время установлено, по крайней мере, б нозологически самостоятельных инфекционных агентов вирусной природы, вызывающих поражение печени. В последние годы особенно неблагоприятная эпидемиологическая ситуация сложилась по заболеваемости гепатитами с парентеральным механизмом передачи - гепатитам В, С и Р.

Несмотря на то, что патогенетические механизмы развития поражения печени при гепатитах С и Э сильно различаются, инфекции, вызываемые НС\/ и НОУ, имеют некоторые общие особенности. Оба заболевания характеризуются очень высокой частотой хронизации (до 70% при ГО и до 80% при ГС) [21]. Сами вирусы устойчивы к действию интерферона и других антивирусных препаратов. Иммунитет при обеих инфекциях характеризуется как "субоптимальный", то есть не обеспечивающий контроль за инфекционным процессом. Антитела ко всем белкам НСХ/, за исключением Е2, а также к основному белку НОУ - НРАд - вируснейтрали-зующими свойствами не обладают, являясь этиологическим свидетельством контакта с вирусом. На современном этапе, характеризующимся отсутствием эффективных лекарственных и вакцинных препаратов, предотвращающих развитие НС\/- и НОУ-инфекций, огромная роль в борьбе с распространением гепатитов С и О отводится развитию методов своевременной специфической диагностики.

Иммуноферментный анализ - один из основных методов лабораторной диагностики инфекционных заболеваний. В настоящее время ИФА-тест-системы нашли широкое применение в диагностике гепатитов С и Р. Однако, их совершенствование является актуальной задачей.

На первом этапе работы было проведено исследование антигенных свойств панели синтетических и рекомбинантных пептидов, воспроизводящих фрагменты соге-, Е1-, Е2-, N83-, N84-, N84-, NS5-бeлкoв

НСУ. В серодиагностике ГС используется определение антител именно к этим белкам вируса, что обусловливает необходимость детального изучения их антигенной структуры. Отдельно исследовалось взаимодействие пептидов с антителами классов 1дв и 1дМ.

Изучение взаимодействия синтетических пептидов, воспроизводящих участки 314-329 Е1-белка и 397-414 Е2-белка НС\/, с антителами класса 1дв показало, что оба пептида обладают выраженными антигенными свойствами. Частота положительных реакций с сыворотками, содержащими анти-НС\/, составила для пептида 314-328 - 8,4%, а для пептида 397-414 -4,8%. С сыворотками, не содержащими анти-НС\/, изученные пептиды не взаимодействовали. Таким образом, синтетические пептиды 314-328 и 397414 соответствуют линейным сайтам узнавания для специфических антител класса 1дв и могут быть использованы в серодиагностике ГС для определения антител к Е1- и Е2-белкам НС\/.

Исследование антигенных свойств набора синтетических пептидов, соответствующих участкам последовательности соге-белка НСХ/, показало, что короткие пептиды 3-22, 20-34, 45-58, 56-74, 68-81, 100-117 и 150-169 воспроизводят линейные сайты узнавания для антител класса 1дО. При этом, более высокая антигенная активность пептидов 3-22 и 20-34 свидетельствует, что первые 34 аминокислоты Ы-конца соге-белка НС\/ формируют иммунодоминантные линейные эпитопы, с которыми взаимодействуют большинство анти-НС\/-позитивных сывороток.

Более полно антигенные свойства соге-белка НС\/ при взаимодействии с антителами класса 1дв отражали длинные синтетические пептиды, воспроизводящие фрагменты аминокислотной последовательности 11-45 и 3-75, а также рекомбинантный соге-протеин, включающий 120 Ы-концевых а.о. Все эти антигены частично или полностью перекрывали своей последовательностью иммунодоминантные Ы-концевые линейные эпитопы. Однако, их активность была выше по сравнению с короткими пептидами 322 и 20-34, что указывает на наличие конформационной детерминанты в N1-концевой части соге-белка. Сравнение антигенной активности пептидов 11

45, 3-75 и рекомбинантного белка позволило локализовать конформацион-ный эпитоп между 3-75 а.о.

Таким образом, антигенные свойства соге-белка НС\/ при взаимодействии с антителами класса 1дС могут быть успешно отражены с помощью синтетического пептида, копирующего участок 3-75 аминокислотной последовательности данного протеина. Этот пептид не только перекрывает им-мунодоминантные М-концевые линейные сайты узнавания, но и адекватно воспроизводит специфическую конформацию вирусного белка. Более длинный рекомбинантный соге-протеин не превосходит по антигенной активности синтетический пептид 3-75.

В составе МвЗ-белка НС\/ были локализованы несколько линейных антигенных сайтов для антител класса 1дО, воспроизводимых пептидами 1139-1158, 1274-1280, 1384-1403 и 1483-1502. Однако, активность этих коротких пептидных фрагментов значительно уступала активности длинного пептида 1363-1454 и рекомбинантного ЫЗЗ-протеина. Это свидетельствует о том, что основные антигенные детерминанты этого белка являются кон-формационно-зависимыми и не могут быть достаточно эффективно воспроизведены с помощью коротких синтетических пептидов. Сравнение активности пептида 1363-1454 и рекомбинантного белка показало, что эти антигены воспроизводят эпитопы, независимые полностью либо частично, и имеют самостоятельное диагностическое значение. В связи с этим, антигенные свойства МЭЗ-протеина ИС\/ могут быть отражены или с помощью достаточно длинноразмерного пептида, каким является пептид 1363-1454, или с помощью рекомбинантного ЫвЗ-белка. При конструировании тест-систем, позволяющих полноценно определять антитела класса 1дв к белкам НС\/, представляется необходимым использовать оба антигена: и синтетический пептид 1363-1454, и рекомбинантный ЫвЗ-белок.

Исследование антигенных свойств пептидов и рекомбинантного белка, представляющих фрагменты М84-протеина НС\/, показало, что линейные сайты узнавания для антител класса 1дв локализованы между а.о. 1689-1712, 1713-1732 в Мв4а-белке и 1921-1940 в Ы84Ь-белке. Активность пептида, перекрывающего участок 1689-1738, не уступала активности рекомбинантного Мв4а-протеина и была значительно выше по сравнению со смесью пептидов 1689-1712 и 1713-1732. Это предполагает, что антигенные свойства иммунодоминантного участка 1689-1738 М84а-белка НС\/ определяются не только двумя независимыми линейными эпитопами, но и кон-формационной детерминантой.

Анализ взаимодействия пептидов 1689-1738 и 1921-1940 с анти-НС\/-позитивными образцами позволил выявить самостоятельное диагностическое значение определения антител к Ы84а- и Ы84Ь-белкам НС\/. В целом, антигенные свойства Ы84-протеина НС\/ при взаимодействии с антителами класса 1дО могут быть адекватно отражены с помощью синтетического пептида 1689-1738+1921-1940, объединяющего своей последовательностью иммунодоминантные участки Ы84а- и Ы84Ь-белков. Для определения антител отдельно к М84а- и М84Ь-протеинам вируса эффективно использование синтетических пептидов 1689-1738 и 1921-1940.

Образцы сыворотки, содержащие анти-НС\/, по-разному взаимодействуют с пептидами, соответствующими вариабельным среди разных генотипов вируса фрагментам 1689-1708 и 1710-1728 Ы84а-белка. Это дает принципиальную возможность разграничивать геноварианты НС\/ с помощью серологических методов. Комбинация пептидов, имитирующих фрагменты 1689-1708 и 1710-1728, соответствующие генотипам 1-6 НС\/, в некоторых случаях позволяет более эффективно распознавать антитела к М84а-белку, чем длинный синтетический антиген 1689-1738, воспроизводящий последовательность, характерную только для генотипа 1 вируса. Использование такой комбинации антигенов является перспективным при конструировании тест-систем для серодиагностики НСУ-инфекции.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Пименов, Владимир Константинович, 2000 год

1. Афанасьев А.Ю. Автореф. канд. дисс. С.-Пб. - 1998. - 21 С.

2. Балаян М.С., Михайлов М.И. Энциклопедический словарь -вирусные гепатиты. М. - Амипресс. - 1999. - 302 С.

3. Болотников И.А., Добротина H.A., Лызлова С.Н. Биохимические аспекты иммунологических реакций: Учебное пособие. Петрозаводск. -1989. - 100 с.

4. Вольпина О.М. Теоретические и практические подходы к созданию искуственной противоящурной вакцины на основе синтетических пепти-дов.//Диссертация на соискание уч. ст. доктора биол. наук, в форме научного доклада М. -1992. - 51 с

5. Гольдберг Е.З., Фаворов М.О., Львов Д.К. Вирусный гепатит С.//Вопросы вирусологии. 1992. - №2. - С. 84-90.

6. Дементьева Е.В. Автореф. канд. дисс. М. - 1997. - 20 с.

7. Доклад научной группы ВОЗ. Применение синтетических пептидов для диагностики инфекционных болезней.//ВОЗ. Серия технических докладов. Женева. - 1991. - 75 с.

8. Колонцов A.A. Классификация вирусов человека и животных по материалам 6-ого доклада международного комитета по таксономии виру-сов.//Вопросы вирусологии. 1998. - № 6. - С.38-41.

9. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа. - 1973. - 343 с.

10. Лотшпайх Ф., Хеншен А. Аминокислоты, пептиды, белки. //Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии./Под редакцией Березина И.В. М.:Мир. - 1988. - С.171-260.

11. Мукомолов С.Л. Автореф. докт. дисс. С-Пб. - 1994. - 35 С.

12. Мукомолов С.Л., Валькова И.В., Чайка H.A. Вирусные гепатиты. -С.-Пб. Институт им. Пастера. - 1992. - 96 с.

13. Нго Т.Т., Ленхофф Г.М., Яклич А. и др. Иммуноферментный анализ./Под редакцией Нго Т.Т., Ленхофф Г.М. -М.: Мир. 1988. -445 с.

14. Петров Р.В. Иммунология. М.: Медицина. - 1987. - 368 с.

15. Семилетов Ю.А. Автореф. докт. дисс. М. - 1995. - 49 С.

16. Семилетов Ю.А., Круглов И.В., Карпова В.А. и др. Сравнительное исследование диагностической ценности пептидов, соответствующих различным геномным последовательностям вируса гепатита D.//Мол.генетика, микробиол. и вирусол. 1993. - №4. - С. 34-37.

17. Семилетов Ю.А., Ржанинова A.A., Гараев М.М.//Биоорганическая химия. 1994. - т.20. - №10. - С.1070-1079.

18. Созина И.А. Автореф. канд. дисс. С.-Пб. - 1999. - 20 С.

19. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. С.-Пб.: Теза. - 1997. - 306 с.

20. Соринсон С.Н., Селиванов H.A., Корочкина О.В. и др. Гепатит С: механизмы многолетней персистенции вируса и фазы течения инфекционного процесса.//Клин. Мед. 1997. - №10. - С. 27-30.

21. Степанов В.М. Молекулярная биология. Структура и функция белков. М.: Высш. Шк. - 1996. - 335 с.23а. Хаитов P.M., Лиознер А.Л. // Биотехнология. 1997. - т.З. - С. 284-290.

22. Хаитов P.M., Сидорович И.Г., Павликов С.П., Николаева И.А., Иващенко М.Е., Андреев С.М., Скляров Л.Ю. Использование синтетических пептидов в диагностике ВИЧ-инфекции.//Иммунология. 1990. - №2. - С. 15-20.

23. Ярилин A.A., Добротина H.A. Введение в современную иммуноло--ию. Н. Новгород. - 1997. - 238 с.

24. Alter H.J. To C or not to C: these are the questions.//Blood. 1995. -Vol. 85. - №7. - P. 1681-1695.

25. Alter H.J., Margolis H.S., Krawczynski K., et al. The natural history of community-acquired hepatitis C in the USA. The Santiel Counties Chronic non-A, non-B Hepatitis Study Team.//N. Engl. J. Med. 1992. - Vol. 327. - P. 18991905.

26. Atassi M.Z. Antigenic structures of proteins. Their determination has revealed important aspects of immune recognition and generated strategies for synthetic mimicking of proteins binding sites.//Eur. J. Biochem. 1984. - Vol. 145.-P. 1-20.

27. Barrera J.M., Holland P.V., Ercilla G. // IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 218.

28. Benjamin D.C., Berzofsky J.A., East I.J. et al. The antigenic structure of proteins: a reappraisal.//Ann. Rev. Immunol. 1984. - Vol. 2. - P. 67-101.

29. Berzofsky J.A. Intrinsic and extrinsic factors in protein antigenic struc-ture.//Science. 1985. - Vol. 229. - P. 932-940.

30. Bhattacherjee V., Prescott L.E., Pike I., et al. Use of NS4-peptides to identify type-specific antibody to hepatitis C virus genotypes 1, 2, 3, 4, 5, and 6.//J. of Gen. Virol. 1995. - Vol.76. - P. 1737-1748.

31. Bittle J., Houghten R., Alexander H. et al. Protection against foot-and-mouth desease by immunization with a chemically synthesized peptide predicted from the viral nucleotide sequence.//Nature. 1982. - Vol. 298. - P. 30-33.

32. Bodmer J.G., Marsh S.G.E., Albert E.D. et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 1991.//Tissue antigens. 1992. - Vol. 39. - P. 161-173.

33. Bolognesi L., Tucci A., Landucci G. et al. IgM anti-HCV in patients with and without viraemia and disease activity.//IX Triennial international symposium Dn viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 239.

34. Bouffard P., Bartenschlager R., Ahlborn-Laake L., et al. An in vitro assay for hepatitis C virus NS3 serine proteinase./A/irology. 1995. - Vol. 209. -Mq2. - P. 52-59.

35. Braun H.-B., Albrecht M., Vanderlinden K. et al. // IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 241.

36. Briand J.P., Muller S., Van Regenmortel M. Synthetic peptides as antigens: pitfalls of conjugation methods.//J. Immunol. Methods. 1986. - Vol. 78. -P. 59-69.

37. Brillianti St., Masci C., Miglioli M., et al. Serum IgM antibodies to hepatitis C virus in acute and chronic hepatitis C.//Arch. Virol. 1993. - Vol. 8. (Suppl.). -P. 213-218.

38. Burec V., Macek P. Antibody to HCV of IgM class (IgM anti-HCV) among patients with HCV infection.//IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 238.

39. Casey J.L., Brown T.L., Colan E.J. et al. A genotype of hepatitis D virus that occursin northern South America.//Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1993. -Vol. 90.-P. 9016-9020.

40. Chang K.M., Gruener N.H., Southwood S. et al. Identification of HLA-A3 and -B7- restricted CTL response to hepatitis C virus in patients with acute and chronic hepatitis C.//J. Immunol. 1999. - Vol.162. - P. 1156-1164.

41. Chang K.M., Rehermann B., McHutchison J.G. et al. Immunological significance of cytotoxic T lymphocytes epitope variants in patients chronically infected by hepatitis C virus.//J. Clin. Invest. 1997. - Vol.100. - P.2376-2385.

42. Chang M.F., Baker S.C., Soe L.H. et al. Human hepatitis delta antigen is a nuclear phosphoprotein with RNA-binding activity.//J. Virol. 1988. - Vol. 62. -P. 2403-2410.

43. Chao M., Hsieh S.-Y., Taylor J. Role of form of hepatitis delta virus antigens: evidence for a mechanism of self limiting genome replication.//J. Virol. -1990. Vol. 64. - P. 5066-5069.

44. Chau K.H., Dawson G.L., Mushahwar I.K. IgM antibody response to hepatitis C virus antigens in acute and chronic post-transfusion non-A, non-B hepatitis.//J. Virol. Meth. -1991. Vol. 35. - P. 343-352.

45. Chen M., Sallberg M., Sonnerborg A., et al. Limited humoral immunity in hepatitis C virus infection.//Gastroenterology. 1999. - Vol. 116 (1). - P. 135143.

46. Chen M., Sallberg M., Sonnerborg A., et al. Human and murine antibody recognition is focused on the ATPase/helicase, but not the protease domain of the hepatitis C virus nonstructural 3 protein.//Hepatology. 1998. -Jul.-Vol. 28 (1).-P. 219-224.

47. Chen P.J., Lin M.H., Tai F.K., et al. Immunoglobulin M antibodies against hepatitis C virus antigens.//Gastroenterol. Jpn. 1993. - Vol.28 (Suppl. 5). - P. 67-70.

48. Choo Q.-l., Kuo C., Wiener A.J., et al. Isolation of cDNA clone derived from blood bourne non-A, non-B viral hepatitis genome.//Science. 1989. - Vol. 244. - P. 359-361.

49. Clemens J.M., Tascar S., Chau K., et al. IgM antibody response in acute hepatitis C viral infection.//Blood. 1992. - Vol. 79. - №1. - P. 169-172.

50. Cooreman M.P. Hepatitis C virus: biological and clinical consequences of genetic heterogenity.//Scand J. Gastroenterology. 1996. - Vol.218 (Suppl.). - P.106-115.

51. D'Souza E.D.A., Grace K., Sangar D.V., et al. In vitro cleavage of hepatitis C virus polyprotein substrates by purified recombinant NS3 protease.//J. of Gen. Virol. 1995. - Vol. 76. - №2. - P. 1729-1736.

52. Davidson H.W., Reid P.A., Lanzavecchia A., Watts C. Processed antigen binds to newly synthesized MHC class II molecules in antigen specific B-lymphocytes.//Cell. 1991. - Vol. 67. - P.105-116.

53. Davis M.M. T-cell receptor gene diversity and selection.//Ann. Rev. Biochem. 1990. - Vol. 59. - P. 475-496.

54. De Medina M. Hepatitis C : diagnostic assays.//Sem. In Liver Dis. -1995. Vol. 15. - №1. - P. 33-40.

55. Devlin J.J., Panganiban L.C., Devlin P.E. Random peptide libraries: a source of specific protein binding molecules.//Science. 1990. - Vol. 249. - P. 404-406.

56. Diepolder H.M., Zachoval R., Hottmann R.M. // IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 39.

57. Dubuisson J., Rice Ch. Hepatitis C virus glycoprotein folding disulfi-debond formation and assotiation with calnexin.//J. of Virol. 1996. - Vol.70. -№2. - P. 778-786.

58. Fan X.G., Liu W.E., Li C.Z. et al. Ciculating Th1 and Th2 cytokines in patients with hepatitis C virus infection.//Mediators Inflamm. 1998. - Vol.7. - P. 295-297.

59. Friquet B., Djavadi-Ohaniance L., Goldberg M.E. Some monoclonal antibodies raised with a native protein bind preferentially to the denaturated anti-gen.//Mol. Immunol. 1984. - Vol. 21. - P. 673-677.

60. Gerin J.L., Casey J.L., Bergmann K.F. The molecular biology of hepatitis delta virus: recent advances.//Viral Hepatitis and Liver Disease. 1994. - P. 38-41.

61. Geysen H.,Rodda S.J., Mason T.J. et al. Strategies for epitope analysis using peptide synthesis.//J. Immunol. Methods. 1987. - Vol.102. - P. 259274.

62. Ghendon Y.Z. Wolrd health organization strategy for control of hepatitis B.//ln: Control of virus disease. Ed. E. Kurstak 2d ed. Marcel Dekker Inc. N.-Y.- 1993.-P.141-164.

63. Glenn J.S., White J.M. Trans-dominant inhibition of human hepatitis delta virus genome replication.//. Virol. 1991. - Vol. 65. - P. 2357-2361.

64. Goeser T., Miller H.M., Ye J., et al. Characterization of antigenic determinants in core antigen of the hepatitis C virus.//Virology. 1994. - Vol. 205. -№9. - P. 462-469.

65. Goldberg A.L., Rock K.L. Proteolysis, proteosomes and antigen presentation.//Nature. 1992. - Vol. 357. - P.875-879.

66. Heath T., Martin F. The development and application of protein-liposome conjugation techniques.//Chem. Phys. Lipids. 1986. - Vol. 40 (2-4). -P. 347-358.

67. Hellistrom S., Alter H.J., Buch M., et al. Immunoglobulin M reactivity towards the immunologically active region sp 75 of the core protein of hepatitis C virus (HCV) in chronic HCV infection.//J. of Med. Virol. 1993. - Vol. 39. - P. 325-332.

68. Horal P., Svennerholm B., Jeansson S. et al. Continuous epitopes of HIV -1 transmembrane glycoprotein and reactivity of human sera to synthitic peptides representing various HIV-1 isolates.//J. Virol. 1991. - Vol. 65. - P. 2718-2723.

69. Ibe M., Sakaguchi T., Tanaka K. et al. Identification and characterization of a cytotoxic T cell epitope of hepatitis C virus presented by HLA*3501 in acute hepatitis.//J. Gen. Virol. 1998. - Vol.79. - P. 1735-1744.

70. Janeway Ch.A., Travers P. Immunobiology: the immune system in health and disease. C.B. ltd. - 1994.

71. Jerne N.K. Immunological speculations.//Ann. Rev. Microbiol. 1960. -Vol.14.-P. 341-358.

72. Kanai A., Tanabe K., Kohara M. Poly (U) binding activity of hepatitis C virus NS3 protein, a putative RNA helicase.//FEBS Letters. 1995. - Vol. 376. -№10. - P.221-224.

73. Kato N., Sekiya H., Ootsuyama Y. et al. // J. of Virol. 1993. - Vol.67.- №7. P. 3923-3930.

74. Khudyakov Y.E., Khudyakova N.S., Jue D.L., et al. Linear B-cell epitopes of the NS3-NS4-NS5 proteins of the hepatitis C virus as modeled with synthetic peptides./A/irology. 1995. - Vol. 206. - P. 666-672.

75. Khudyakov Yu. E., Favorov M.O., Fields H.A. A small open reading frame of the hepatitis delta virus antigenomic RNA encodes a protein that elicits antibodies in some infected patients./A/irus Res. 1993. - Vol. 27 (1). - P. 13-24.

76. Khudyakov Yu. E., Makhov A.M. Amino acid sequencesimilarity between the terminal protein of hepatitis B virus and predicted hepatitis delta virus gene products.//FEBS Lett. 1990. - Vol. 262. - P. 345-348.

77. Kikuchi T., Onji M., Michitaka K., et al. Anti-HCV immunoglobulin-M antibody in patients with hepatitis C.//J. Gastroenterol. Hepatol. 1992. - Vol. 7. - P. 246-248.

78. Klein J., Satta YM OhUgin C. The molecular descent of the major histocompatibility complex.//Ann. Rev. Immunol. 1993. - Vol. 11. - P. 637-685.

79. Kolykhalov A.A., Feinstone S.M., Rice Ch.M. Identification of a highly conserved sequence element at the 3'-terminus of hepatitis C virus genome RNA.//J. of Virol. 1996. - Vol. 70. - №6. - P. 3363-3371.

80. Lehtonen O.-P., Viljanen M. Antigen attachment in ELISA.//J. Immunol. Methods. 1980. - Vol. 34 (1). - P. 61-70.

81. Leinikki P., Lehtinen M., Hyoty H. et al. Synthetic peptides as diagnostic tools in virology.//Advances in virus research. 1993. -Vol. 42. - P. 149-186.

82. Lesniewski R.R., Watanabe S., Devare S.G. Expression of HCV envelope proteins and the serological utility of the anti-E2 immune response.//Princess Takamatsu Symp. 1995. - Vol. 25. - P. 129-137.

83. Lin Ch., Lindenbach B.D., Pragai B.M., et al. Processing in the hepatitis C virus E2-NS2 region: identification of p7and two distinct E2-specific products with different C terminal. //J. of Virol. 1994. - Vol. 68. - №8. - P. 50635073.

84. Lin Ch., Pragai B.M., Gracoui A., et al. Hepatitis C virus NS3 serine proteinase: trans-cleavage requirements and processing kinetics.//J. of Virol. -19946. Vol. 68. - P. 8147-8157.

85. Lin Ch., Thomson J.A., Rice Ch.M. A central region in the hepatitis C virus NS4a protein allows formation of an active NS3-NS4a serine proteinase complex in vivo and in vitro.//J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №7. - P. 4373-4380.

86. Lo Sh.-Y., Masiarz F., Hwang S. B., et al. Differential subcellular localisation of hepatitis C virus core gene products./A/irology. 1995. - Vol. 213. -№9. - P. 455-461.

87. Lo Sh.-Y., Selby M., Tong M., et al. Comparative studies of the core gene products of two different hepatitis C virus isolates: two alternative forms determined by a single amino acid substitution./A/irology. 1994. - Vol. 199. -P.124-131.

88. Lunel F., Frangeul L., Perrin M. et al. // IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 230.

89. Luo G., Chao M., Hsieh S.-Y., Sureau C. et al. A specific base transition occurs on replicating hepatitis delta virus RNA.//Nature. 1990. - Vol. 329. -P. 343-346.

90. Lvov D.K., Samokhalov E.I., Tsuda F., et al. Prevalence of hepatitis C virus and distribution of its genotypes in Nothern Eurasia.//Arch. Of Virol. 1996. -Vol. 141,-№5.-P. 1613-1622.

91. Macor A., Specia C., Zucco C. et al. // IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 219.

92. Mahaney K., Tedeschi V., Maertens G., et al. Genotypic analysis of hepatitis C virus in american patients.//Hepatol. 1994. - Vol. 20. - №6. - P. 1405-1411.

93. Makino S., Chang M.F., Shieh C.K. et al. Molecular cloning and sequencing of a human hepatitis delta virus RNA.//Nature. 1987. - Vol. 329. - P. 343-346.

94. Martinelli AL, Brown D, Braun HB, et al. Quantitative assessment of hepatitis C virus RNA and IgM antibodies to hepatitis C core in chronic hepatitis C.//J. Hepatol. 1996.-Jan.-Vol. 24(1).-P. 21-26.

95. Matsumoto M., Hwang S.B., Jeng K-S., et al. Homotypic interactionand multimerization of hepatitis C virus core protein./A/irology. 1996. - Vol. 218. - №2.-P. 43-51.

96. Merrifield R.B. Solid phase peptide synthesis.//J. Am. Chem. Soc. -1963. Vol.85. - P. 2149-2154.

97. Miller R.H., Purcell R.H. Hepatitis C virus shares amino acid sequence similarity with pestiviruses and flaviviruses as well as members of two plant virus supergroups.//Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1990. - Vol. 87. - P. 2057-2061.

98. Mizushima H., Hijikata M., Tanjii Y., et al. Analysis of N-terminal processing of hepatitis C virus nonstructural protein 2.//J. of Virol. 1994. - Vol. 68. -№4. - P. 2731-2734.

99. Monaco J.J. A molecular model of MHC class l-restricted antigen processing.//Immunol, today. 1992. - Vol. 13. - P. 173-179.

100. Mondelli M.U., Cerino A., Boender P., et al. Significance of the immune response to a major conformational B-cell epitope on the hepatitis C virus NS3 region defined by a human monoclonal antibody.//J. of Virol. 1994. - Vol. 68. - №8. - P. 4829-4836.

101. Narvanen A., Korkolainen M., Kontio S. et al. Highly immunoreactive antigenic site in a hydrophobic domain of HIV-1 gp41 which remains undetectable with conventional immunochemical methods.//AIDs. 1988. - Vol.2. -P.119-123.

102. Nasoff M.S., Zebedee S.L., Inhauspe G., Prince A.M.//Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1991. - Vol. 88. - P. 5462-5466.

103. Neefjes J.J., Mombourg F. Cell biology of antigen presentation.//Curr. Opin. Immunol. 1993. - Vol. 5. - P.27-34.

104. Nelson D.R., Marousis C.G., Davis G.L. et al. The role of hepatitis C virus specific cytotoxic T lymphocytes in chronic hepatitis C.//J. Immunol. 1997. -Vol. 158. - P.1473-1481.

105. Nikolaeva L.I., Olenina L.V., Kolesanova E.F. Imunity in different types of hepatitis C.//Russian Journal of Immunology. 1999. - Vol. 4. - №2. -P. 92-112.

106. Nussenzweig M.C., Shaw A.C., Sinn E. et al. Allelic exclusion in transgenic mice that express the membrane form of immunoglobulin.//Science. -1987.-Vol. 236.-P. 816-819.

107. Ohkoshi S., Watanabe M., Kuwana K., et al. Clinical evaluation of the antibody against core protein of the hepatitis C virus.//Gastroenterol. Jpn. 1993. -Vol.28. (Suppl. 5). - P. 80-83.

108. Okamoto H., Kojima M., Okada Sh.-I., et al. Genetic driff of hepatitis C virus during an 8.2-year infection in chimpanzee: variability and stabil-ity.//Virology. 1992. - Vol. 190. - №7. - P. 894-899.

109. Overton H., McMillan D., Gillespie F., et al. Recombinant baculovirus-expressed NS3 proteinase of hepatitis C virus shows activity in cell-based and in vitro assays.//J. of Gen. Virol. 1995. - Vol. 76. - №8. - P. 3009-3019.

110. Pawlotsky J.-M. Measuring hepatitis C viremia in clinical samples: can we trust the assays?//Hepatology. 1997. - Vol.26. - №1. - P. 1-4.

111. Pawlotsky J.-M., Darthuy F., Remire J. et al. Significance of antihepatitis C virus core IgM antibodies in patients with chronic hepatitis C.//J. Med. Virol. 1995. - Vol. 47. - №3. - P. 285-291.

112. Pohl C., Baroudy B.M., Bergmann K.F. et al. A human monoclonal antibody that recognized viral polipeptides and in vitro translated products of the genome of hepatitis D virus.//J. Infect. Dis. 1987. - Vol. 156. - P. 622-629.

113. Quiroga J.A., Herrero M., Castillo I. Long-term follow-up study of serum IgM antibody to hepatitis C virus (HCV), HCV replication and liver disease outcome in chronic hepatitis C.//J. Infect. Dis. 1994. - Vol. 170. - №3. - P. 669-673.

114. Rademarcher T., Parekh R., Dwek R. Glycobiology.//Ann. Rev. Bio-chem. 1988. - Vol. 57. - P. 785-838.

115. Rasenack J. Viral hepatitis diagnostics. Germany: Falk Foundation. - 1993.-52 p.

116. Reed K.E., Gracoui A., Rice Ch. Hepatitis C virus-encoded NS2-3 protease: cleavage-site mutagenesis and requirements for biomolecular cleav-age.//J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №7. - P. 4127-4136.

117. Roivainen M., Narvanen A., Korkolainen M. et al. Antigenic regions of poliovirus type 3 capsid proteins recognized by human sera in the peptide scanning technique./A/irology. 1991. - Vol. 180. - P. 99-107.

118. Sallberg M., Pumpen P., Zhang Z.X., et al. Location of antibody-binding sites within conserved regions of the hepatitis C virus core protein.//J. of Med. Virol. 1994. - Vol. 43. - №1. - P. 3631-3641.

119. Sallberg M., Ruden U., Wahren B., Magnius L.O.//lmmunology Letters. 1992. - Vol. 33. - P. 27-34.

120. Santolini E., Migliaccio G., LaMonica N. Biosynthesis and biochemical properties of the hepatitis C virus core gene protein.//J. of Virol. 1994. - Vol. 68.-P. 3631-3641.

121. Sato A., Sho Y., Nacamura H., et al.//J. of Med. Virol. 1994. - Vol. 44.-P. 88-91.

122. Satoh Sh., Tanjii Y., Hijicata M., et al. The N-terminal region of the hepatitis C virus NS3 protein is essential for stable complex formation with NS4a.//J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №7. - P. 4255-4260.

123. Shaaper W.M.M., Lankhof H., Pujik W.C., Mcloen R.N. Manipulation of antipeptide immune response by varying of the coupling of peptide with the carrier protein.//Mol. Immunol. 1989. - Vol. 26. - P. 81-85.

124. Shimizu Y., Igarashi H., Kyohara T., et al. A hyperimmune serum against a synthetic peptide corresponding to hypervariable region 1 of hepatitis C virus can prevent viral infection in cell cultures./A/irology. 1996. - Vol. 223. -P. 409-412.

125. Shindo M., Di Bisceglu A.M., Akatsuca T. et al. The physical state ofentile negative strand of hepatitis C virus RNA in serum of patients with chronichepatitis C.//Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 1994. - Vol. 91. - №8. - P. 87198723.

126. Simmonds P., Smith D.B., McOmich F., et al. Identification of genotypes of hepatitis C virus by sequence comparisons in the core, E1 and NS5 re-gions.//J. of Gen. Virol. 1994.-Vol. 75. - №1. - P.1053-1061.

127. Stankovic- Djordjevic D., Djordjevic N. Clinical and serological study of HCV infection in patients with acute hepatitis C.//IX Triennial international symposium on viral hepatitis and liver disease. Rome. - April, 1996. - P. 239.

128. Stransky J., Krtek V., Honzakova E. Klinicki viznam stanoveni IgM anti-HCV u chronicke hepatitidy C.//Cas. Lek. Ceckych. 1996. - Vol.135. - №7. -P. 215-219.

129. Tanaca T., Kato N., Cho M-J., et al. Structure of the 3'-terminus of hepatitis C virus genome.//J. of Virol. 1996. - Vol. 70. - P. 3307-3312.

130. Tanjii Y., Hijicata M., Hirowarari Y., et al. Hepatitis C virus polyprotein processing: kinetics and mutagenic analysis of serine proteinase-dependent cleavage.//J. of Virol. 1994. - Vol. 68. - P. 8418-8422.

131. Tanjii Y., Hijicata M.,Satoh Sh., et al. Hepatitis C virus-encoded nonstructural protein NS4a has versatile functions of viral protein processing.//J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №3. - P.1575-1581.

132. Tanjii Y., Kaneco T., Satoh Sh., Shimotohno K. Phosphorylation of hepatitis C virus-encoded nonstructural protein NS5a.//J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №7. - P. 3980-3986.

133. Trowsdale J., Campbell R.D. Complexity in the major histocompatibility complex.//Eur. J. Immunogenet. 1992. - Vol. 19. - P. 45-55.

134. Tsai S.I., Chen Y.M., Chen M.H. et al. Hepatitis C virus variants circumventing cytotoxic T lymphocyte activity as a mechanism of chronic-ity.//Gastroenterology. 1998. - Vol.115. - P. 954-965.

135. Van Regrenmortel M., Daney De Marcillac G. An assesment of prediction methods for locating continuous epitopes in proteins.//lmmunol. Lett. -1988.-Vol.17.-P. 95-107.

136. Wahren B., Rosen J., Sandstrom E. et al. HIV-1 peptides include a proliferative response in lymphocytes from infected persons.//J. Acquired Immune Defic. Syndr. 1989. - Vol.4. - P. 448-456.

137. Wang Ch., Sarnow P., Siddiqui A. A conserved helical element is essential initiation of translation of hepatitis C virus RNA.//J. of Virol. 1994. - Vol. 68.-№11.-P. 7301-7307.

138. Wang J.G., Jansen R.W., Brown E.A., Leson S.M. Immunogenic domains of hepatitis delta antigen: peptide mapping of epitopes recognized by human and woodshuck antibodies.//J. Virol. 1990. - Vol. 64. - №3. - P. 11081116.

139. Wang K.S., Choo Q.L., Weiner A.J. et al. Corrigendum: structure sequence and expression of the hepatitis delta virus genome.//Nature. 1987. -Vol. 328. - P. 456.

140. Wang Y-F., Brotman B., Andrus L., Prince A.M. Immune response to epitopes of hepatitis C virus (HCV) structural proteins in HCV-infected humans and chimpanzees.//J. Infection Dis. 1996. - Vol.173. - P. 808-821.

141. Weiner A.J., Brauer M.J., Rosenblatt J. et al./A/irology. 1991. -Vol.180. - P. 842-848.

142. Wong D.K.H., Dudley D.D., Afdhal N.H. et al. Liver-derived CTL in hepatitis C virus infection: breadth and specificity of responses in a cohort of persons with chronic infection.//J. Immunol. 1998. - Vol.160. - P. 1479-1488.

143. Yamshchikov V.F., Compans R.W. Formation of the flavivirus envelope role of the viral NS2B-NS3-protease.// J. of Virol. 1995. - Vol. 69. - №4. -P. 1995-2003.

144. Zhang Z.X., Sonnerborg A., Sallberg M. Antigenic structure of the hepatitis C virus envelope 2 protein.//Clin. Exp. Immunol. 1994. - Dec. - Vol. 98 (3). - P. 382-387.

145. Zibert A., Schreier E., Roggendorf M. Antibodies in human sera specific to hypervariable region 1 of hepatitis C virus can block viral attach-ment./A/irology. 1995. - Vol. 208. - P. 653-661.