Совершенствование методов ветеринарно-санитарной оценки сырого молока и сырых сливок тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.02.05, кандидат наук Пульчева, Ирина Алексеевна

• Пульчева, Ирина Алексеевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Пульчева, Ирина Алексеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Критерии безопасности и качества сырого молока и сырых сливок

1.2. Методы ДНК-иммунодиагностики и их использование для определения безопасности и качества сырья продукции животноводства

2. СОБСТВЕННЫЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Цель и задачи исследований

2.2. Материалы и методы исследований

2.2.1.Методика подтверждения подлинности и выявления фальсификаций козьего молока и сливок на основе иммуноферментного анализа

2.2.2.Методика определения сальмонелл бактериологическим методом

2.2.3.Методика определения сальмонелл в сыром молоке и сырых сливках с применением иммунохроматографических тест- систем

2.2.4.Методика определения стафилоккового энтеротоксина с применением иммунохроматографических тест- систем

2.2.5.Методика определения микроорганизмов в сыром молоке и сырых сливках на основе ДНК-чипов

2.2.6.Методика выявления антибиотиков и сульфаниламидов в сыром молоке и сырых сливках на основе иммуномикрочиповой технологии

2.2.7. Статистическая обработка результатов

2.3. Результаты исследованиий

2.3.1. Адаптация модифицированной методики ИФА с тест-системой

и , I ,1 , ' < ' , , . »1 I 1 ( »

«ИФА RIDASCREEN Casein» для выявления казеина в козьих сыром молоке и сливках для подтверждения их подлинности и выявления фальсификаций

2.3.2.Совершенствование методов контроля сальмонелл и энтеротоксина золотистого стафилококка в сыром молоке и сырых сливок на основе иммунохроматографических индикаторных элементов

2.3.3. Совершенствование метода определения санитарно-показательных микроорганизмов в сыром молоке и сырых сливках на основе ДНК-чипов

2.3.4. Совершенствование определения остаточных количеств антибиотиков и сульфаниламидов в сыром молоке и сырых сливках на

основне иммуномикрочиповой технологии

З.ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ПРАКТИКИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование методов ветеринарно-санитарной оценки сырого молока и сырых сливок»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Вопросы совершенствования ветеринарно-санитарного контроля безопасности и качества продукции животного происхождения являются весьма актуальными в свете проходящего в нашей стране процесса Технического регулирования и интеграции России в мировую экономику (Романенко Г. А., 2005; Алексеева Е.Ю., Посконная Т.Ф., 2004, Версан В.Г., 2003).

Сырое молоко и сырые сливки в соответствии с Федеральным законом, Техническим регламентом на молоко и молочную продукцию входят в число объектов технического регулирования этой продукции. Все процессы, применяемые при производстве сырого молока, условия содержания, кормления, доения сельскохозяйственных животных, условия сбора, охлаждения, хранения сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок должны соответствовать требованиям ветеринарного законодательства Российской Федерации.

Сырое молоко должно быть получено от здоровых сельскохозяйственных животных на территории, благополучной в отношении инфекционных и других общих для человека и животных заболеваний.

Обладая высокой питательной ценностью, сырое молоко и сырые сливки являются скоропортящимися продуктами. Для эффективного хранения, перевозки и реализации необходимо принимать меры по обеспечению безопасности и сохранения качества данной сельскохозяйственной продукции. Среди этих мер немаловажное значение принадлежит контролю качества и безопасности. Это актуально для служб ветеринарного надзора, для фермерских хозяйств (Фомичев Ю.П.,2004), а также для предприятий по переработке указанного сырья.

Весьма важным при оценке качества является подтверждение подлинности продукции и выявление возможных фальсификаций. На

безопасность молока и молочной продукции могут влиять различные загрязнители: микробные контаминации, токсины, остаточные количества антибиотиков и сульфаниламидов и др. Для определения этих показателей в скрининговых или арбитражных исследованиях необходимо использование ускоренных способов контроля, а также автоматизированных чувствительных методов и тест-систем гармонизированных с международными стандартами (Светличкин В.В., 2000; Смирнов A.M. и др., 2003).

В этом направлении эффективными, специфичными и чувствительными для контроля различных показателей безопасности и качества сырья и продукции животного происхождения зарекомендовали себя методы ДНК-иммунодиагностики (Самуйленко А.Я. и др., 1999; Родин В.И., 2000; Буркин A.A., Кононенко Г.П, 2003; Светличкин В.В. и др., 2010; Бабунова B.C. и др., 2011).

Однако, актуальным остается адаптация известных методик и тест-систем для оценки безопасности и качества сырого молока и сырых сливок, а также разработка и совершенствование новых методов для указанных объектов ветеринарного надзора. Цель исследования

Целью настоящей работы являлось - совершенствование методов ветеринарно-санитарной оценки сырого молока и сырых сливок. В задачи исследования входило:

- усовершенствовать определение подлинности сырых козьих молока и сливок на основе методики иммуноферментного анализа при адаптации тест-системы ИФА RIDASCREEN Casein к указанным объектам технического регулирования;

экспериментально обосновать возможность применения иммунохроматографических индикаторных элементов (ИИХЭ) отечественного производства для ускоренного контроля сальмонелл и энтеротоксина золотистого стафилококка в сыром молоке и сырых сливках;

- усовершенствовать контроль санитарно-показательных микроорганизмов в сыром молоке и сырых сливках на основе ДНК-чипов;

- усовершенствовать определение остаточных количеств антибиотиков и сульфаниламидов в сырых молоке и сливках на основе иммуномикрочиповой технологии;

- провести исследования по определению сульфаниламидов в сыром молоке и сырых сливках, взятых из личных подворий и фермерских хозяйств, а также из оборота торговой сети.

Основные положения, выносимые на защиту 1. адаптация модифицированной методики ИФА с тест-системой «ИФА RIDASCREEN Casein» для выявления казеина в козьих сыром молоке и сливках для подтверждения их подлинности и выявления фальсификаций; 2.экспериментальное обоснование возможности применения иммунохроматографических индикаторных элементов (ИИХЭ) отечественного производства ГосНИИБП для определения в сыром молоке и сырых сливках сальмонелл различных серогрупп и стафилококкового энтеротоксина;

3. разработка и апробация модифицированной методики на основе ДНК-чипов для идентификации санитарно-показательных бактерий в сыром молоке и в сырых сливках;

4. экспериментальное обоснование определения остаточных количеств антибиотиков и сульфаниламидов в сыром молоке и сырых сливках на основе иммуномикрочиповой технологии.

Научная новизна

Экспериментально обоснована возможность применения модифицированной методики ИФА с тест-системой «ИФА RIDASCREEN Casein» для выявления казеина в козьих сыром молоке и сливках для подтверждения их подлинности и выявления фальсификаций.

Экспериментально обоснована возможность применения иммунохроматографических индикаторных элементов (ИИХЭ)

отечественного производства ГосНИИБП для определения в сыром молоке и сырых сливках сальмонелл различных серогрупп и стафилококкового энтеротоксина, для последнего разработана модифицированная методика пробоподготовки.

Разработана модифицированная методика на основе ДНК-чипов и показана возможность ее применения для идентификации санитарно-показательных бактерий в сыром молоке и в сырых сливках.

Экспериментально обоснована возможность применения иммуномикрочиповой технологии для одновременного

дифференцированного определения остаточных количеств антибиотиков (стрептомицина, цефоперазона, цефтриаксона) и сульфаниламидов (сульфадиметоксина, сульфадимезина, сульфаметоксипиридазина) в сыром молоке и сырых сливках. Установлена чувствительность определения.

При исследовании взятой из оборота молочной продукции, выявили наличие определяемых антимикробных веществ, в концентрациях не превышающих нормативные показатели.

Практическая ценность

На основании результатов исследований разработано методическое пособие по определению антибиотиков и сульфаниламидов в сыром молоке и сырых сливках с применением иммуномикрочиповой технологии, утвержденные Отделением ветеринарной медицины Россельхозакадемии.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены:

- на международной конференции студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» МГУПП, Москва 2012 г.

- на расширенном совещании сотрудников лабораторий ГНУ ВНИИВСГЭ Россельхозакадемии (2013 г.).

1.0Б30Р ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Критерии безопасности и качества сырого молока и сырых сливок.

Обеспечение безопасности и качества молока и молочной продукции всегда являлись актуальной проблемой сельского хозйства и перерабатывающих отраслей и весьма важная роль в этом принадлежала ветеринарно- санитарным аспектам [10,33-35,44,57,63,64,71,72,74,97].

Вопросы оценки безопасности и качества продукции получили свое развитие в связи проходящей в нашей стране реформой технического регулирования, а также в связи с вступлением России в ВТО. Государства, являющиеся членми ВТО подписали ряд документов, которые регламентируют правила обеспечения безопасности продукции. К ним относятся «Соглашение по применению санитарных и фитосанитарных мер» (СФС) и «Соглашение по техническим барьерам и торговле» (ТБТ). В этих документах признается важный вклад международных стандартов и систем оценки соответствия качества для повышения эффективности производства и ведения международной торговли. Вопросы обеспечения и качества продукции рассматриваются во многих работах и документах [2,14,24,43,54,59,61,62,68,70,73,80,81].

В соответствии с Федеральным законом, Техническим регламентом на молоко и молочную продукцию в число объектов технического регулирования этой продукции входят сырое молоко и сырые сливки[80]. В этом регламенте даны формулировки объектам технического регулирования. В частности, молоко это продукт нормальной физиологической секреции молочных желез сельскохозяйственных животных, полученный от одного или нескольких животных в период лактации при одном и более доении, без каких-либо добавлений к этому продукту или извлечений каких-либо веществ из него[80].

Сырое молоко - молоко, не подвергавшееся термической обработке при температуре более чем 40 градусов Цельсия или обработке, в результате которой изменяются его составные части[80].

Сливки - молочный продукт, который произведен из молока и молочных продуктов, представляет собой эмульсию жира и молочной плазмы и массовая доля жира в котором составляет не менее чем 9 процентов[80].

Сырые сливки - сливки, не подвергавшиеся термической обработке при температуре более чем 45 градусов Цельсия[80].

Условия получения от сельскохозяйственных животных молока, все процессы перевозки, реализации и утилизации сырого молока, сырого обезжиренного молока и сырых сливок, молочных продуктов непромышленного производства должны соответствовать требованиям законодательства Российской Федерации [80].

Сырое молоко должно быть получено от здоровых коров и других сельскохозяйственных животных на территории, благополучной в отношении инфекционных и других общих для человека и животных заболеваний. Эти требования научно обоснованы россйскими учеными [35,44,71] и гармонизированы с международными требованиями [22, 47,67].

Не допускается использование в пищу сырого молока, полученного в течение первых семи дней после дня отела животных и в течение пяти дней до дня их запуска (перед их отелом) и от больных животных и находящихся на карантине животных[71,80].

Изготовитель должен обеспечивать безопасность сырого молока и не допускать в нем содержания остаточных количеств ингибирующих, моющих, дезинфицирующих и нейтрализующих веществ, стимуляторов роста животных (в том числе гормональных препаратов), лекарственных средств (в том числе антибиотиков), применяемых в животноводстве в целях откорма, лечения скота и (или) профилактики его заболеваний [72,80].

Молоко, получаемое от разных видов сельскохозяйственных животных, за исключением коровьего молока, должно соответствовать показателям, установленным стандартами, нормативными документами федеральных органов исполнительной власти. Показатели качества должны

также соответствовать нормативным требованиям. Массовая доля сухих обезжиренных веществ в коровьем сыром молоке должна составлять не менее чем 8,2 процента. Плотность коровьего молока, массовая доля жира в котором составляет 3,5 процента, должна быть не менее чем 1027 килограммов на кубический метр при температуре 20 градусов Цельсия или не менее чем эквивалентное значение для молока, массовая доля жира в котором другая[80].

К сырому молоку, используемому для производства пищевых продуктов с определенными потребительскими свойствами, могут предъявляться следующие дополнительные требования:

-сырое молоко сельскохозяйственных животных, предназначенное для производства продуктов детского питания на молочной основе, должно соответствовать определенным требованиям [10,67, 80]:

- показатель чистоты должен быть не ниже первой группы, показатель термоустойчивости по алкогольной пробе должен быть не ниже третьей группы в соответствии с требованиями национального стандарта[80];

- количество колоний мезофильных аэробных микроорганизмов и факультативно анаэробных микроорганизмов не должно превышать допустимый уровень, установленный для сырого молока высшего сорта и сырого молока первого сорта[80];

- количество соматических клеток не должно превышать допустимый уровень, установленный для сырого молока высшего сорта [80];

- хранение и перевозка сырого молока, предназначенного для производства продуктов детского питания на молочной основе, осуществляются в отдельных емкостях с соблюдением ветеринарно-санитарных требований[80];

- использование сырого молока, показатели идентификации которого не соответствуют, виду сельскохозяйственных животных, от которых получено молоко, и (или) показатели безопасности которого не соответствуют требованиям Федерального закона, не допускается[80].

и

Важным является соблюдение требований для молока, которое в дальнейшем будет использоваться как сырье для получения продукции.

Сырое коровье молоко, предназначенное для производства молока стерилизованного, в том числе молока концентрированного или молока сгущенного, должно соответствовать таким требованиям, как показатель термоустойчивости по алкогольной пробе не ниже третьей группы, как это указано в национальном стандарте[80].

Сырое коровье молоко, предназначенное для производства сыра, должно отвечать следующим требованиям[80]:

-сычужно-бродильная проба -1 и II классов;

- уровень бактериальной обсемененности по редуктазной пробе I и II классов в соответствии с требованиями национального стандарта, количество колоний мезофильных аэробных микроорганизмов и факультативно анаэробных микроорганизмов должно составлять не более чем 1*106 колониеобразующих единиц в кубическом сантиметре;

Количество спор мезофильных анаэробных лактатсбраживающих маслянокислых микроорганизмов составляет для:

сыров с низкой температурой второго нагревания не более чем 13000 спор в кубическом дециметре;

сыров с высокой температурой второго нагревания не более чем 2500 спор в кубическом дециметре;

кислотность не более 19 градусов Тернера; массовая доля белка не менее 2,8 процента;

Коровье сырое молоко, предназначенное для производства продуктов диетического питания, должно соответствовать следующим требованиям:

- количество колоний мезофильных аэробных микроорганизмов и факультативно анаэробных микроорганизмов не более чем 5*105 колониеобразующих единиц в кубическом сантиметре;

- количество соматических клеток составляет не более чем 5*105 в кубическом сантиметре;

- показатель термоустойчивости по алкогольной пробе не ниже второй группы в соответствии с требованиями национального стандарта.

Показатели микробиологической безопасности и содержания соматических клеток коровьего сырого молока, сырого обезжиренного молока и сырых сливок не должны превышать установленный допустимый уровень[80].

Решение об использовании сырого молока, сырого обезжиренного молока и сырых сливок, не соответствующих требованиям безопасности к допустимым уровням содержания потенциально опасных веществ, микроорганизмов и соматических клеток, принимает изготовитель в соответствии с требованиями ветеринарного законодательства Российской Федерации, законодательства Российской Федерации в области обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения и законодательства в области экологической безопасности[80].

Все технологические процессы, применяемые при производстве сырого молока,4 условия содержания, кормления, доения сельскохозяйственных животных, условия сбора, охлаждения, хранения сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок должны соответствовать требованиям законодательства Российской Федерации о ветеринарии[80].

Сырое молоко после доения сельскохозяйственных животных должно быть очищено и охлаждено до температуры 4 градуса Цельсия плюс-минус 2 градуса Цельсия в течение 2 часов. Допускается хранение сырого молока, сырого обезжиренного молока (включая период хранения сырого молока, используемого для сепарирования) при температуре 4 градуса Цельсия плюс-минус 2 градуса Цельсия не более чем 36 часов с учетом времени перевозки, хранение сырых сливок при температуре не выше 8 градусов Цельсия не более чем 36 часов с учетом времени перевозки, за исключением хранения сырого молока, сырого обезжиренного молока (включая период хранения сырого молока, используемого для сепарирования), сырых сливок, предназначенных для производства продуктов детского питания на молочной

основе (для детей раннего возраста), молочных смесей (в том числе сухих молочных смесей), молочных напитков (в том числе сухих молочных напитков), молочных каш, которые должны храниться при температуре 4 градуса Цельсия плюс-минус 2 градуса Цельсия не более чем 24 часа с учетом времени перевозки. Допускается предварительная термическая обработка, включая пастеризацию, сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок в случаях несоответствия кислотности норматьвным показателям^ также хранения сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок более чем 6 часов; перевозки сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок, продолжительность которой превышает допустимый период их хранения, но не более чем на 25 процентов. При применении предварительной термической обработки сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок, в том числе пастеризации, режимы термической обработки (температура, период проведения) указываются в сопроводительной документации[80].

Фермеры и другие сельскохозяйственные товаропроизводители при производстве сырого молока, сырого обезжиренного молока и сырых сливок должны использовать оборудование и материалы, разрешенные для контакта с молочными продуктами федеральным органом исполнительной власти, осуществляющим функции по контролю и надзору в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения, защиты прав потребителей, включая ветеринарный надзор. Во время перевозки охлажденных сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок к месту переработки вплоть до начала их переработки температура таких продуктов не должна превышать 10 градусов Цельсия. Сырое молоко, сырое обезжиренное молоко и сырые сливки, не соответствующие установленным требованиям к их температуре, подлежат немедленной переработке. Перевозка сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок осуществляется в емкостях с плотно закрывающимися крышками, изготовленных из материалов, разрешенных для контакта с молоком

федеральным органом исполнительной власти, осуществляющим функции по контролю (надзору) в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения, защиты прав потребителей и опломбированных. В транспортных средствах должно быть обеспечено поддержание температуры в соответствии с требованиями, предусмотренными Федеральным законом[80].

Необходимо также соблюдать все требования на других этапах оборота молока.

Хранение сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок, а также молока, обезжиренного молока, сливок, подвергшихся предварительной термической обработке (включая пастеризацию) до начала их переработки, осуществляется изготовителем продуктов переработки молока в отдельных маркированных емкостях при температуре 4 градуса Цельсия плюс-минус 2 градуса Цельсия. Утилизация сырого молока, сырого обезжиренного молока или сырых сливок, не соответствующих требованиям Федерального закона, осуществляется изготовителем или продавцом этих продуктов в порядке, установленном ветеринарным законодательством Российской Федерации, законодательством Российской Федерации в области обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения и законодательством в области экологической безопасности[80].

Весьма важным в ветеринарно-санитарной оценке сырого молока и сырых сливок как и другой продукции животного происхождения является идентификация[29,30,43,51, 80].

Идентификация молока должна проводиться в целях:

- отнесения молока и сливок к сфере применения Федерального закона;

- установления соответствия молока и сливок, в том числе их наименований и идентификационных показателей, требованиям Технического регламента.

>

-установления соответствия молока и сливок сведениям, содержащимся в информации для потребителей, декларации о соответствии или сертификате соответствия, предоставленных изготовителем или продавцом.

Если содержащиеся в сопроводительных документах и на этикетках сведения не соответствует наименованиям и показателям идентификации, установленными Федеральным законом, или являются недостоверными, молоко и сливки признаются фальсифицированными и подлежат принудительному отзыву. Федеральные органы исполнительной власти, осуществляющие функции по контролю и надзору в установленном законодательством Российской Федерации порядке принимают меры по приостановлению производства и реализации фальсифицированных молока и продуктов его переработки и информирует об этом потребителей[80].

Идентификацию молока и сливок, как и другой продукции проводят: органы по сертификации при подтверждении соответствия этих продуктов требованиям Федерального закона; федеральный орган исполнительной власти, осуществляющий функции по контролю (надзору) в сфере обеспечения санитарно-эпидемиологического благополучия населения, защиты прав потребителей, органы исполнительной власти субъектов Российской Федерации, уполномоченные на проведение государственного контроля (надзора) в сфере ветеринарии; юридические или физические лица в инициативном порядке при необходимости установления соответствия этих продуктов предоставленной о них информации, а также при возникновении сомнений в достоверности такой информации или в целях предварительной оценки этих продуктов[30, 51,80].

В качестве описаний молока и сливок могут быть использованы нормативные документы федеральных органов исполнительной власти, международные стандарты, национальные стандарты или стандарты организаций, сопроводительные документы на эти продукты, договоры поставок, контракты, спецификации на эти продукты, информация на

этикетках потребительских упаковок и другие содержащие описание этих продуктов документы.

В соответствии с Техническим регламентом, в зависимости от задач и специфики идентификации молока и сливок используются следующие процедуры идентификации:

- экспертиза документов, в соответствии с которыми произведен конкретный продукт;

- испытания этого продукта.

При недостаточности или недостоверности информации, полученной при экспертизе и молока и сливок проводятся лабораторные исследования (испытания). При необходимости подтверждения факта фальсификации молока и продуктов его переработки проводятся их исследования (испытания), в части следующих установленных Федеральным законом показателей идентификации и других показателей:

- наличие и содержание жиров немолочного происхождения, их массовая доля в молоке и продуктах его переработки в процентах.

В целях идентификации молока, продуктов его переработки, заквасок, пробиотических микроорганизмов и ферментных препаратов применяются следующие группы показателей их свойств[80]:

органолептические - внешний вид, консистенция, вкус, запах, цвет и другие органолептические показатели, указанные в стандартах, нормативных и технических документах на производство конкретного продукта (при их наличии) и в иных содержащих описание такого продукта документах;

физико-химические - массовые доли составных частей молока в молоке и продуктах его переработки, кислотность, плотность, температура, индекс растворимости, вязкость и другие физико-химические показатели, указанные в стандартах, нормативных и технических документах на производство конкретного продукта или в других содержащих описание такого продукта документах;

микробиологические - видовой или родовой состав микроорганизмов, количество микроорганизмов определенного вида или рода в единице массы либо объема конкретного продукта в соответствии с требованиями Федерального закона, стандартов, нормативных и технических документов на производство конкретного продукта (при наличии таких документов) и других содержащих описание этого продукта документов.

При идентификации сырого молока, сырого обезжиренного молока и сырых сливок применяются следующие показатели[80]:

показатели идентификации молока, полученного от различных видов сельскохозяйственных животных, и позволяющие определить его наименование (молоко коровье, молоко козье, молоко овечье, молоко кобылье, молоко буйволиное);

органолептические и физико-химические показатели и по которым проводится идентификация коровьего сырого молока, сырого обезжиренного молока, сырых сливок;

показатели, которые указаны в стандартах, нормативных и технических документах и по которым проводится идентификация молока, полученного от других видов сельскохозяйственных животных.

Показатели безопасности сырого молока и сырых сливок приведены в таблице 1 [ВО].

Допустимые уровни содержания потенциально опасных веществ в сыром молоке, сыром обезжиренном молоке и сырых сливках

Продукт Потенциально опасные вещества Допустимый уровень, мг/кг (л), не более

Сырое молоко, сырое обезжиренное молоко, сырые сливки Токсичные элементы:

Свинец од

Мышьяк 0,05

Кадмий Ртуть Микотоксины: Афлатоксин М1 Антибиотики: 0,03 0,005 0,0005

Левомицетин Менее 0,01

Тетрациклиновая группа Менее 0,01 ед/г

Стрептомицин Менее 0,5 ед/г

Пенициллин Менее 0,01 ед/г

Ингибирующие вещества Не допускаются

Пестициды: Гексахлорциклогексан (альфа-, бета-, гамма-изомеры) 0,05 (1,25 для сливок в пересчете на жир)

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пульчева, Ирина Алексеевна, 2013 год

ЛИТЕРАТУРА

1, Концепций зколого-адалтаиионноЯ теории возникновения, развития массовой патологии и мирты адоровья животных в сельскохозяйственном лроидешетво. - М: ФГНК «Роашформзфвтах», 2000

2 Основные показатели санитарного состояния в Российской Федерации в 1999-2004 гт (аиалиго-чесхий о&юр). - М Федеративный центр госсэнзлцднадзора Ммшдрааэ России, 200-). Н. 2, С. 76 ЗЭ.

3 Постановление Правительства РФ от 21 декабря 2000 г 987 «О государственно-* надзоре ч ехтроле а области обеспечения качества и безопасности пищевых трааупзв»

4. Prats С. et s> Disposition kinetics of tylosin administered irtravenously end trtremuscuiarty и Res in voter Sc.-2002 -Vol 73 -f«2.-P. 141.. t44

Сведения об авторах: ХаЛьницхая Оком» Ивановне, д-р вет. наук, £0Ц. ias. кафедрой вегеринарно-сЕ»*ттарной экспертизы МГУПБ, теп. <95-677-03-55. Чубарое» Елена Анатольевна, все. кафедры еете-»марио<внитарыаи экспертизы МГУПБ. Пупьн*ва Поиия Алексеева, аспирант ла5 санитарии молока ГНУ ВНИИЗСГЗ.

INCREASING AN EFFECTIVENESS OF BIOLOGICAL SAFETY CONTROL. FOR MILK AND MILK PRODUCTS ON A BASE OF THE CONTEMPORARY TECHNOLOGIES EA CHUBAR0VA. О I. KALNITSKAYA, I A. PYLTCHEVA

A possibiiiy tor using the Deivotesi-R memcd and tnwupom'oochip technowgy was demonstrated to м арв«сз«е them for accelerated analysis of milk and rrik products cn a presence of зльлиегоЫэ! substances ш&Ло&ка and sulphafnlamWes) residues

Key worts: safely of mak end miJH products, anilmlcwrfal wbstanees, De.votest-R moibod,

jrvttinortTicKirHiji lacbncJrt^jl«*-

«2К 619 614 31:837.5

МОНИТОРИНГ ЛЕВОМИЦЕТИНА (ХЛОРАМФЕНИКОЛ) В МЯСЕ, МЯСОПРОДУКТАХ И РЫБЕ ИМПОРТНОГО И ОТЕЧЕСТВЕННОГО ПРОИЗВОДСТВА 7.Ф. ПОСКОННАЯ ГНУ ВНИИ ветеринарной сгнитарии. гигиены и экологии

В статье освещены вопросы -исследования мяса, мясопродуктов и рыбы импортного и отечественного производства на наличие антибиотика левсмице-ина (хлорамфечикол!.

Ключевые слоев,- безопасность, мясо, мясопродукты, рыба, лееомицегин (хлор-амйвникол).

до&аний Введение

вдаляяи wyветви- type страны на интеграцию а мировое

iShérmophiluí var. экономическое пространство, подготовка к

вступлению в ВТО определяют необходимость изменения и гармонизации законодательной и нормативной базы в области обеспечения и

17

ÎHPWWW

t i. i v h l i v 1 ' v

* f i i

Л

b\

4 V» '

,1

]

' 1 \ . H 1

1 'I

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

РОССИЙСКАЯ АКАДЕМИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ НАУК

ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ ПИЩЕВЫХ

ПРОИЗВОДСТВ»

АССОЦИАЦИЯ «УНИВЕРСИТЕТСКИЙ КОМПЛЕКС ПРИКЛАДНОЙ

БИОТЕХНОЛОГИИ»

МАТЕРИАЛЫ X МЕЖДУНАРОДНОЙ НАУЧНОЙ КОНФЕРЕНЦИИ СТУДЕНТОВ И МОЛОДЫХ УЧЕНЫХ

«ЖИВЫЕ СИСТЕМЫ И БИОЛОГИЧЕСКАЯ БЕЗОПА СНОСТЬ

НАСЕЛЕНИЯ»

Москва 2012

Нужно отметить, что и диетотерапия составляет основу лечения, так и профилактики уролитиаза, но. если использовать механистический подход, не включающий по показаниям зитибиотикотерапию, а лишь изменять pH мочи с помощью кормов, то результат будет не удовлетворительным.

На сегодняшнем рынке представлено достаточное количество кормов, которые могут эффективно изменять среду мочи от щелочной до кислой и наоборот. Это возможно благодаря тому, что в кормах уменьшено или увеличено количество тех или иных элементов. Это прежде всего кальций, магний, натрий, фосфор и, естественно, белок Например, корм Royal Canin Urinary, за счет увеличения в своем составе Натрия и белка, а » также изменения состава некоторых микроэлементов пуэжет привести щелочную среду мочи в кислую. На этом же основана диета Про Пдани/R. Нужно отметить, что применение, без выраженной необходимости, лечебных кормов меняющих pH мочи в кислую сторону часто приводит к образованию большого количества оксалатов.

Оксалаты. отличаются от струвитов своей острой формой, а также тем, что часто они образуются прежде всего в почках. Таким образом, обычная профилактика мочекаменной болезни на обывательском уровне, например, владельцем, может привести и изменить процесс мочекаменной болезни в более тяжелый процесс и с более серьезным лечением и последствиями.

Мы считаем, что необходимо изучить особое влияние других этиологических факторов при мочекаменной болезни, особенностей течения данной патологии с целью разработки оптимальных алгоритмов лечения и профилактики.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АНТИМИКРОБНЫХ ВЕЩЕСТВ В МОЛОКЕ И МОЛОЧНОЙ

ПРОДУКЦИИ С ПОМОЩЬЮ ИM МУНОМИКРОЧИПОВОГО АНАЛИЗА

И.А. Пульчева лаборатория санитарии молока Научный руководитель H.A. Шурдуба, к.в.н., доц.

ГНУ ВНИИ Ветеринарной санитарии, гигиены и экологии Россельхозакадсмии

Антимикробные препараты широко применяются в качестве лечебно-профилактических средств, а также с целью стимуляции роста и повышения эффективности откорма молчного скота. К таким препаратам относятся антибиотики и сульфаниламиды. В отсутствии контроля за правилами введения лекарственных средств возникает угроза накопления их в молоке и молочных продуктах. Остаточные количества антимикробных веществ с молоком могут попадать к человеку и приводить к отрицательным последствиям. Содержание антимикробных препаратов регламент Hpyeica рекомендацией ФАО-ВОЗ (приложением № 12 к СанПиНу 2.3.2.1078-01). На сегодняшний день, существует также Приказ Роосельхознадзора от 04.02.2011 № 34 «О проведении лабораторных исследований в рамках реализации мероприятий Россельхоз надзора для обеспечения выполнения требований Соглашения ВТО по СФС при вступлении России в ВТО на 2011 год», в котором указано на необходимость контроля остаточных количеств антимикробных веществ в продукции животноводства, в том числе и молоке и молочных продуктах.

Применение методов ветеринарно-санитарной экспертизы по выявлению остаточных количеств антимикробных препаратов в молоке и молочных продуктах способствуют обеспечению безопасности продуктов питания.

Часто используемый микробиологический метод основан на оценке биологического действия антибиотиков на чувствительные штаммы микроорганизмов. Однако он имеет ряд недостатков, такие как: длительность и трудоемкость анализа.

На сегодняшний день, иммуномикрочиповая технология является инновационным методом контроля остаточных количеств антимикробных препаратов в продуктах питания. Она основывается на иммунологической реакции антиген-антитело (АГ-АТ), происходящей на биочипе. Биочип представляет собой керамическую матрицу, на которой происходит

189

л

' V

f l' I^H* ' vfC

ni »

t '

1 , f

H 4

t w} Л .V'i

UJf <rf » '

к

ч t;

"I * i M

* > ч

»M

i'^kify'xx

», i ^ 1

V, 4 '

lli/1' 1

v К f «)< t ;

W i1

•л ' 1 i», 'И \'<

n I

ly

1

M

t

ло

укачанная реакция, а так же регистрация конечного результата хемолюминесценции1

помощью

Перспективность метода

иммуномикрочиповой технологии

полуавтоматизированный качественный и количественный анализ большого числа проб. Кроме того, это экспрессная приборная технология.

В своих исследованиях, для определения ^статочных количеств сульфаниламидов и антибиотиков в молоке, мы использовали тест-системы и сканирующий хемилюминометр.

Объектами исследования служили искусственно контаминированные Рисунок i. Биочип

сульфаниламидами и антибиотиками образцы сырого молока и сырых сливок. Пробы отбирали согласно ГОСТ Р 52842-2007 «Молоко и молочные продукты. Методы иммунологического или бактериально-рецепгорного анализа для определения остатков антибактериальных веществ». Были происследованы. как искусственно контаминированные образцы сырого молока и молочных продуктов, а так же образны продукции взятые из оборота в торговой сети. Методика заключается в конкурентном хемилюминесцентном иммуноанализе. Повышение концентрации антимикробных препаратов в образце приводит к уменьшению их связывания с антителами, при этом наблюдается снижение интенсивности хемилюминесценции.

Световой сигнал из каждой зоны биочипа регистрируется хемилюминометром и сравнивается с полученной ранее калибровочной кривой, позволяя проводить количественную оценку.

При этом для определения сульфаниламидов используются тест-система Evidence investigator Anti Microbial Array 1. а для определения остаточных количеств антибиотиков применяется тсст-система Evidence investigator Anti Microbial Arra\ И.

Чувствительность тест-систем Anti Microbial Array 1 и И составляет 0.03 нг/мл и от 0.61 нг/кг до 8.56 нг/кг соответственно. Время анализа пробоподготовки занимает I - 2 часа. Дчя определения эффективности контроля антимикробных веществ, проводили искусственную контаминацию образцов молока и молочных продуктов. Затем выделяли эти вещества по следующей схеме: отбор проб: добавление буфера: иммобилизация на биочип; ¡срмостагирусмис встряхивание; добавление коньюгата; пятикратная тфомывка; добавление сигнального реагента: считывание результата и обработка результатов.

Результаты обрабатывались автоматически при помощи соответствующего программного обеспечения.

Для изучения возможности иммуномикрочиповой технологии для определения антибиотиков и сульфаниламидов в молоке и молочных продуктах проводили искусственную контаминацию препаратами в определенных количествах. Результаты исследований показали, что во всех случаях мы обнаруживали практически все внесенное количество препаратов (таблицы 1.2)

Таблица 1 - Результаты исследования образцов молока и молочных продуктов, контаминированныхсульфаниламидами

Исследуе сульфадиметоксин сульфадимезин сул ьфа м етокс и 11 ир идаз

мые .......... ин

образцы Виесенн Выявлен Внесенн Выявленно Внесен Выявлен

ое -ное ое е -ное ное

количес количес количест количество количе количест

тво. т-во, во. , мкг/кг ст-во. во.

м кг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг мкг/кг

молоко 2.700 2,697 111,000 110.889 9.000 8, 879

сырое

молоко 2,500 2,499 , 100.000 98.900 7,000 6.980

сырое

обезжире

н-ное

Таблица 2 - Результаты исследования образцов молока и молочных продуктов, контаминированных антибиотиками

Исследуемые образцы стрептомицин цефоперазон (медоиеф) цефтриаксон (лендацин)

Внесенн ое количес тво, мкг/кг Выявлен ное количест во, мкг/кг Внесенн ое количест во, мкг/кг Выявленно е количество , мкг/кг Внесен -ное количе ст-во, vi кг/кг Выявлен ное количест во, мкг/кг

молоко сырое 230,000 229,861 350,000 349,751 13.000 12,899

молоко сырое обезжире нное 218,100 217.900 390,000 388, 990' 8.000 7,989

При определении остаточных количеств сульфаниламидов в молоке и сырых сливках не было обнаружено значимых количеств этих вешеств.превышаюшх допустимые нормы. ПДК (MRL) препаратов в различных странах составляет 0,1 (мг/).

Таким образом, иммуномикрочиповый анализ может быть использован в качестве теста для экспертизы молока и молочных продуктов.

ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СВЕЖЕСТИ МЯСНОГО СЫРЬЯ ПО

СОДЕРЖАНИЮ ГИСТ АМИНА

A.B. Резвых, инженер Научные руководители: А.И. Жаринов, д.т.н, проф.

И.Г. Серёгин, к.в.н, проф.

ФГБОУ ВПО Московский государственный университет пищевых производств

Массовый переход отечественной мясной промышленности на охлажденное российское сырьё, а также вступление России в ВТО обострили задачу по предотвращению попадания в производство недоброкачественного мяса. Существующие стандартные