Фармакогностическое изучение листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill., дикорастущих и культивируемых в Западной Сибири тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Жалнина Людмила Владимировна

• Жалнина Людмила Владимировна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Жалнина Людмила Владимировна

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ботаническая характеристика рода Arctium L

1.2. Степень изученности химического состава листьев Arctii 17 lappae L. и Arctii tomentosi Mill

1.3. Фармакологические свойства, применение в народной медицине листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi

Mill

Выводы по главе

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования

2.2. Методы исследования

2.2.1. Методы морфологического и микроскопического анализа

2.2.2. Товароведческий анализ

2.2.3. Получение экстрактов, суммарных комплексов, фракций

2.2.4. Методы химического исследования

2.2.5. Анализ результатов с использованием статистических 3^

методов

ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ХИМИЧЕСКОГО СОСТАВА ЛИСТЬЕВ ЛОПУХА ВОЙЛОЧНОГО И ЛОПУХА БОЛЬШОГО

3.1. Определение состава основных групп биологически 37 активных веществ

3.2. Оценка содержания биологически активных веществ и 47 установление структуры веществ

3.3. Изучение динамики накопления биологически активных ^3 веществ

3.4. Изучение элементного состава и оценка безопасности ^5

сырья

Выводы по главе

ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ МАКРОСКОПИЧЕСКИХ И МИКРОСКОПИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ЛИСТЬЕВ ARCTII LAPPAE L. И ARCTII TOMENTOSI Mill. И ВОЗМОЖНЫХ ПРИМЕСНЫХ ВИДОВ РАСТЕНИЙ

4.1. Определение подлинности сырья

4.1.1. Морфологические признаки листьев A. lappae и A

tomentosi

4.1.2. Морфологические признаки примесных видов

4.1.3. Микроскопические признаки листьев A. lappae и A. 80 tomentosi

4.1.4. Гистохимическое исследование

4.1.5. Микроскопические признаки примесных видов

Выводы по главе

ГЛАВА 5. РАЗРАБОТКА ПАРАМЕТРОВ СТАНДАРТИЗАЦИИ 98 ЛИСТЬЕВ ARCTIILAPPAE L. И ARCTII TOMENTOSI Mill

5.1. Определение основных групп БАВ

5.2. Разработка методики количественного определения 99 гидроксикоричных кислот

5.3. Разработка методики количественного определения ^3 полисахаридов

5.4. Разработка товароведческих показателей сырья

5.5. Определение микробиологической чистоты

5.6. Содержание остаточных пестицидов

5.7. Содержание радионуклидов

Выводы по главе

ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЯ

Приложение 1. Проект ФС «Лопуха листья»

Приложение 2. Таблица 1. Метаболиты Arctii lappae и Arctii

tomentosi

Приложение 3. Таблица 3. Биологически активные добавки на основе

листьев A. lappae

Таблица 4. Косметические средства на основе листьев A

lappae

Приложение 4. ЯМР-спектры

Приложение 5. Акты внедрения

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакогностическое изучение листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill., дикорастущих и культивируемых в Западной Сибири»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность. Несмотря на частоту назначения и рост производства синтетических, полусинтетических лекарственных средств, внимание и интерес ученых, производителей и потребителей к лекарственному растительному сырью и препаратам на его основе не ослабевает. Потребность в сырье в любой стране удовлетворяется за счет двух основных источников -дикорастущего сырья и сырья востребованных, перспективных видов, введенных в культуру.

К числу перспективных видов лекарственного растительного сырья относятся некоторые виды рода Arctium L. В РФ корни лопуха большого (Arctium lappa L.), лопуха паутинистого (войлочного) (Arctium tomentosum Mill.) и лопуха малого (Arctium minus (Hill) Bernh.) являются фармакопейным сырьем [13]. При этом вся надземная часть этих видов, имеющая соотношение веса надземной части к весу корней 2,5:1 [21], остается невостребованной. Только в Японии и Китае из всей надземной части фармакопейным сырьем являются плоды лопуха большого [58].

Согласно данным литературы, из трех фармакопейных видов лопуха на территории РФ самый обширный ареал имеет лопух войлочный, лопух большой менее широко распространен, к редко встречающимся видам относится лопух малый. Известно, что лопух большой введен в культуру, как в нашей стране, так и за-рубежом, в основном из-за большой потребности в сырье (в Азии и некоторых странах Европы, корни лопуха используются в пищу), а также из-за сложностей заготовки сырья [28, 38, 39, 41, 57]. На Алтае ООО «Вистерра» в промышленную культуру введен лопух войлочный. Компании, занимающиеся заготовкой корней дикорастущего и культивированного лопуха большого и лопуха войлочного, не используют их надземную часть.

Хотя по данным литературы в народной медицине листья лопуха большого и лопуха войлочного применяются в качестве ранозаживляющих,

антибактериальных, противогрибковых, противоопухолевых, мочегонных, детоксикационных и противовоспалительных средств [16, 19, 21, 106, 112, 113].

В официальной медицине в настоящее время листья Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill. не используются, отсутствуют или фрагментарно представлены данные по составу биологически активных веществ, изучению фармакологических свойств, отсутствует нормативная документация на листья лопуха, что создает предпосылки для комплексного фармакогностического исследования листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill., установления требований к их подлинности, качеству, безопасности, оформлению нормативной документации.

Степень разработанности темы исследования. Степень изученности листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill. различна. Так, по данным зарубежной и отечественной литературы, наиболее изучены с точки зрения химического состава и фармакологических свойств листья дикорастущего Arctii lappae L. Известно о том, что они содержат около 200 индивидуальных веществ, относящихся к разным классам соединений. Химический состав листьев дикорастущего Arctii tomentosi Mill. изучен менее детально, и по данным литературы известно о 50 веществах, идентифицированных в этом виде [9, 21, 38, 72, 78, 81, 93, 99, 110, 113, 119].

Химический состав и фармакологическая активность листьев культивируемого Arctii tomentosi Mill. не изучены. В литературе представлена одна зарубежная публикация по определению хлорогеновой кислоты и ее производных в культивируемом Arctium lappa L. Информация по культивируемому в России Arctium lappa L. отсутствует.

В наших скрининговых исследованиях экстракционных комплексов из культивируемых и дикорастущих листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill. определена перспективная диуретическая активность, выраженные антирадикальные, противотревожные свойства, иммунотропная активность.

Результаты этих исследований доложены на конференциях разного уровня и приведены в автореферате в списке опубликованных работ. В НИИ фармакологии и регенеративной медицины им. Е.Д. Гольдберга ТНИМЦ СО РАН (г.Томск) изучается in vitro и in vivo противоопухолевое действие, а также другие виды активности суммарных и очищенных фракций, индивидуальных веществ, выделенных из дикорастущих и культивируемых листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill., собранных в разные фенофазы.

Цель и задачи исследования. Целью исследования является комплексное изучение листьев лопуха большого (Arctii lappae L.) и лопуха войлочного (Arctii tomentosi Mill.), культивируемых и дикорастущих для обоснования перспективности использования нового вида сырья в медицинской практике.

Задачи исследования:

1. Анализ данных литературы по систематическому положению видов, ареалу, биологически активным веществам, фармакологическим свойствам, применению в народной медицине, производстве парафармацевтической продукции из листьев дикорастущих и культивируемых разновидностей A. lappae и A. tomentosi.

2. Исследование химического состава листьев культивируемого и дикорастущего A. lappae и A. tomentosi флоры Сибири, определение мажорных групп биологически активных веществ и изучение динамики накопления веществ для последующей стандартизации сырья.

3. Изучение морфологических, микроскопических диагностических признаков листьев A. lappae, A. tomentosi и возможных примесей, определение товароведческих показателей, безопасности сырья.

4. Оформление проекта фармакопейной статьи на новый вид сырья «Лопуха листья».

Научная новизна. Впервые исследован состав и содержание БАВ, элементный состав, безопасность листьев культивируемых и дикорастущих в

Западной Сибири АтсШ 1аррае и АтсШ tomentosi.

Получены новые данные о химическом составе водно-спиртовых экстрактов, хлороформных и этилацетатных фракций листьев лопуха большого и лопуха войлочного дикорастущих и культивируемых в Алтайском крае и Томской области. С использованием химических и физико-химических методов (качественные реакции, БХ, ТСХ, 1Н-ЯМР-, УФ-спектроскопии, ВЭЖХ-УФ, ВЭЖХ-МС и др.) установлено присутствие 19 веществ, из которых 9 флавоноидов (рутин, гиперозид, кверцитрин, кемпферол 3,7-диглюкозид, кверцетин, лютеолин, апигенин, лютеолин 7-глюкозид, апигенин 7-глюкозид), 1 гидроксибензойная кислота (галловая), 5 гидроксикоричных кислот (кофейная, хлорогеновая, 4-кофеоилхинная, п-кумаровая, протокатеховая), 2 лигнана (арктиин, арктигенин); 2 кумарина (скополин, скополетин); аскорбиновая кислота и инулин. При этом идентифицировано 5 новых, ранее не описанных для этих видов веществ (4-кофеоилхинная кислота, п-кумаровая кислота, скополин, лютеолин 7-глюкозид, апигенин 7-глюкозид). Присутствие 3,4-дикофеоилхинной и протокатеховой кислот установлено методом ВЭЖХ-УФ.

Методом ГЖХ впервые установлено, что мажорными моносахаридами листьев обоих видов лопуха независимо от их происхождения, являются арабиноза, галактоза и глюкоза. Методом эксклюзионной хроматографии установлено, что наименьшей молекулярной массой характеризуются образцы ПС дикорастущего лопуха большого (1,86-23,84). Большую молекулярную массу имеют образцы культивируемого лопуха войлочного (39,15-129,02). Коэффициент полидисперсности показал, что все образцы характеризуются гомогенностью (К=0,1-2,14), при этом наименее гомогенными являются образцы ПСК лопуха большого (К=0,1-0,57).

Изучение динамики накопления основных групп БАВ в листьях культивируемых и дикорастущих разновидностей показало, что она по всем изученным группам веществ идентична. С учетом динамики накопления и

роли в фармакологическом действии для стандартизации сырья выбраны две мажорные группы БАВ - гидроксикоричные кислоты и полисахариды.

Детализированы и уточнены микроскопические признаки листьев ЛгсШ 1аррае и ЛгсШ tomentosi и примесей к ним.

По содержанию тяжелых металлов, радионуклидов, остаточных пестицидов культивируемое и дикорастущее сырье соответствует требованиям НД.

Разработан и оформлен проект Фармакопейной статьи «Лопуха листья».

Теоретическая и практическая значимость работы. В обзоре литературы проведен анализ данных о систематическом положении, распространенности, химическом составе, фармакологической активности, использованию в медицине листьев дикорастущих и культивируемых видов -лопуха большого (ЛгсШ 1аррае L.) и лопуха войлочного (ЛгсШ tomentosiMi\\.).

Результаты исследования расширили фундаментальные знания о химическом составе, динамике накопления биологически активных веществ листьев лопуха, ключевых диагностических особенностях, качестве и безопасности сырья.

По результатам проведенных исследований разработаны и предложены:

- методика качественного анализа гидроксикоричных кислот в листьях лопуха методом ТСХ;

- методики количественного определения в листьях лопуха дикорастущих и культивируемых в Западной Сибири гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту; полисахаридов.

Методики апробированы в условиях производства лабораториями ООО «Фарм-Трейд», ООО «Вистерра»;

- проект ФС «Лопуха листья». Результаты данного исследования внедрены в:

- учебный процесс и научно-исследовательскую работу кафедры

фармацевтического анализа Сибирского государственного медицинского университета и кафедры фармации Кемеровского государственного медицинского университета;

- научно-производственную деятельность компании ООО «Фарм-Трейд» и ООО «Вистерра».

Методология и методы исследования. Методологической основой исследования является использование общенаучных принципов развития, системный подходы. В исследовании использованы теоретические методы (ретроспективный (возвратный) анализ; сравнительный анализ; синтез; обобщение), эмпирические методы, статистические методы обработки информации. На защиту выносятся:

1. Результаты исследования химического, элементного состава, установления структуры веществ, изучения динамики накопления основных групп БАВ листьев АгсШ 1аррае и АШи tomentosi.

2. Результаты изучения специфических диагностических внешних, микроскопических признаков листьев АгсШ 1аррае и АгсШ tomentosi и примесей к ним.

3. Результаты разработки показателей качества, стандартизация и оформление проекта НД «Лопуха листья» для включения в ГФ РФ.

Личный вклад автора заключается в выборе направления исследования, постановке цели, определении задач исследований, заготовке образцов, выполнении исследований, обобщении полученных экспериментальных данных и их статистической обработке. Автор принимал активное участие в оформлении и представлении научных работ, публикации статей, выступлениях на конференциях различных уровней, а также в подготовке и написании диссертации и автореферата.

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы были представлены и обсуждены на XI Международной научно-практической конференции «Здоровье человека с позиции практической медицины:

научный подход» (Казань, 2022 г.); XXIV международном конгрессе «Здоровье и образование в XXI веке» (Москва 2023 г.); XXIII Международной научно-практической конференции «Здоровье человека с позиции практической медицины: научный подход» (Казань, 2023 г.); XXIV Международной научно-практической конференции «Вопросы охраны здоровья с позиции медицины: перспективные научные исследования» (Казань, 2023 г.); XXV Международной научно-практической конференции «Медицина и современные технологические решения: перспективы современной интеграции» (Казань, 2023 г.); XXVII Международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы практического здравоохранения» (Казань, 2023 г.); II, III Международной научно-практической конференции «Разработка лекарственных средств - традиции и перспективы» (Томск, 2023, 2024 г.); IV Международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы и перспективы фармацевтической науки и практики» (Кемерово, 2024 г.).

Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научных исследований кафедры фармацевтического анализа в рамках комплексной темы «Разработка инновационных технологий новых фармацевтических продуктов на основе природных биологически активных комплексов» (Регистрационный № 01201152362).

Соответствие диссертации паспорту научной специальности. Научные положения диссертационной работы соответствуют специальности 3.4.2 - фармацевтическая химия, фармакогнозия (паспорт специальности пункты 5, 6 и 7): п.5 - изучение вопросов рационального использования ресурсов лекарственного растительного сырья с учетом влияния различных факторов на накопление биологически активных веществ в сырье; п.6 - изучение химического состава лекарственного растительного сырья, установление строения, идентификация природных соединений, разработка методов выделения, стан-

дартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе; п.7 - изучение биофармацевтических аспектов стандартизации и контроля качества лекарственного растительного сырья и лекарственных форм на его основе; изучение влияния экологических факторов на химические и биологические свойства лекарственных растений; оценка экотоксикантов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных средствах.

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 15 научных работ, в том числе 3 статьи, 2 из которых в журналах, рекомендованных перечнем ВАК, 1 статья в зарубежном журнале, входящем в перечень Scopus (Q3).

Структура и объем диссертации. Материалы квалификационной работы изложены на 160 страницах машинописного, компьютерного текста. В диссертации содержится 30 таблиц, 38 рисунков. Работа включает введение, пять глав - обзор литературных источников и четыре главы экспериментальной части, а также выводы и пять приложений. Список литературы, включает 120 наименований из них 62 на иностранных языках.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1.1. Ботаническая характеристика рода Arctium L.

Лопух (лат. Arctium) - род двухлетних травянистых растений семейства астровые (Asteraceae Bercht. & J. Presl) или сложноцветные (Compositae), характеризующийся наличием цветочных корзинок с шиловидно-заостренными, крючковатыми на концах наружными листочками. Семейство астровые является крупнейшим семейством цветковых растений, включающим 32 913 видов, объединенных в 1911 родов [68]. Растения семейства имеют широкое распространение по всей Земле и произрастают во всех климатических зонах [96].

Имя на латыни для рода Arctium L. образовано от древнегреческого слова «arctos», означающего север или медведь. Русское название «лопух» происходит от древнерусского слова «лоп» из-за больших листьев этого растения [7]. Известны некоторые другие русские названия лопуха: лопушник, репейник, дедовник. В Белоруссии его называли лопухом вяликим, дзяды, собачником, на Украине - лопухом справжним, репяшником, дидовником, рипяком [47]. В Китае корни лопуха большого известны как «ньюбанг»; в Иране его называют «бнаватом», в Японии - «гобо», а в Италии и Франции — «бардана» [59, 103, 115]. Впервые лопух был упомянут Диоскоридом в его труде «О лекарственных веществах» как лекарственное растение.

Представители рода Arctium - травянистые, двухлетние растения, которые могут достигать высоты до 3 метров. Лопух большой (Arctium lappa) является одним из крупнейших видов этого рода. Большая часть видов рода Arctium произрастают в северных и умеренно-влажных областях и считаются сорняковыми и рудеральными растениями. Они предпочитают произрастать по обочинам дорог, рядом с жилыми зонами, на берегах водоемов, на опушках лесов, в оврагах, у заборов, на свалках и пустошах. Лопухи предпочитают плодородные почвы, богатые азотом. Некоторые

представители данного рода растут только в разреженных лиственных и пойменных лесах. В базе данных The Plant List указано, что в род Arctium входит 19 видов [47, 62].

Ареал рода Arctium обширен: Европа, Российская Федерация, Средняя Азия (Казахстан, Туркменистан, Узбекистан, Таджикистан, Кыргызстан), Малая Азия (Турция, Кипр), Юго-Восточная Азия (Малайзия), Южная Азия (Гималаи, Индия, Непал, Пакистан, Афганистан), Восточная Азия (Китай, Япония, Южная Корея, Монголия, Тайвань), Африка, Америка [9, 28, 38, 39, 79, 86, 61].

Информация о численности и распространенности рода Arctium в зарубежных странах и России значительно разнится в разные временные периоды и по разным источникам. Это объясняется способностью лопухов перемещаться на большие расстояния, цепляясь за шерсть животных и предметы одежды благодаря своим крючковатым листочкам на цветках [38,

41].

Согласно множеству источников, в Российской Федерации встречаются 9 видов рода Arctium, 3 из которых являются гибридными: лопух сомнительный (Arctium ambiguum = A. lappa x A. tomentosum) [56], лопух смешанный (Arctium mixtum = A. tomentosum x A. minus) [45], лопух ложный (Arctium nothum = A. lappa x A. minus) [10]. А так же лопух большой (Arctium lappa) [38], лопух войлочный (Arctium tomentosum) [38], лопух гладкосемянный (Arctium leiospermum) [38], лопух малый (Arctium minus) [38], лопух дубравный (Arctium nemorosum) [38] и лопух Палладина (Arctium palladinii) [38].

Недавние исследования показали, что митохондриальные и хлоропластные геномы A. lappae и A. tomentosi практически идентичны. Размеры обоих геномов и длины обратных повторов схожи. Количество генов и типы повторяющихся последовательностей также сопоставимы у обоих видов [116, 117]. Косвенно это может указывать на близкий химический

состав и фармакологические свойства этих видов.

Лопух войлочный, так же известный как Arctium tomentosum Mill. (рис. 1.1.1) является травянистым растением, достигающим высоты 160 см, имеет массивный стержневой корень. В первый год вегетации формирует розетку листьев, на второй год появляется цветоносный стебель. Стебель прямостоячий, с бороздчатой поверхностью, у основания соцветий разветвляется, опушен, зеленый или красноватый. Листья крупные, с черешком, сердцевидно-яйцевидные, верхняя сторона покрыта редкими волосками, нижняя сторона густо опушена. Листорасположение поочередное. Корзинки цветков шаровидной формы, состоят из трубчатых, лилово-пурпурных цветков, и собраны в щиток. Обёртки корзинок образуют ряды и покрыты паутинистыми волокнами. Наружные листочки обёрток имеют крючочки на концах. Плод - обратнояйцевидная семянка с хохолком, изогнутая и сплюснутая, коричневато-бурая или черная. Цветение - июнь-август, плодоношение - август-сентябрь [7, 49].

A. tomentosum - наиболее широко распространенный вид рода на территории Российской Федерации. Произрастает в Арктической части России, на Дальнем Востоке, в Европейской части нашей страны, на Кавказе, так же в Западной и Восточной Сибири [28, 38].

Рисунок 1.1.1 - Лопух войлочный (паутинистый)

Лопух большой - Arctium lappa L. (рис. 1.1.2) - травянистое растение, достигающее высоты 200см. Имеет мощный стержневой корень. Наружная поверхность корня темно-серая, излом - желто-белый. В первый год развития растения формируется розетка листьев, а на второй год развивается цветоносный стебель. Стебель лопуха прямостоячий, толстый, с ребристой поверхностью, может быть красноватого оттенка, имеет ветвистую, опушенную верхнюю часть. Листья этого растения крупные, с черешком, расположены поочередно и имеют широкосердцевидно-яйцевидную форму. Край листа может быть цельным или с выемчато-зубчатым. Верхняя сторона листа зеленая и покрыта редкими волосками, а нижняя сторона обильно опушена. Прикорневые листья могут быть до 50 см в длину. Стеблевые листья, ближе к верхушке растения, уменьшаются по размеру, а самые верхние имеют слабо-сердцевидную форму у основания. Цветки представлены большими шаровидными корзинками диаметром 3-4,5 см, собранными в щитковидные соцветия, диаметр которых около 10 см. Обвертка корзинок имеет липкую поверхность, на ней нет волосков или ворсинок. Она состоит из черепитчато расположенных крючковатых листочков. Листочки обвертки могут быть голыми или слегка паутинистыми. Цветки лилово-пурпурного цвета, трубчатые. Плод — обратнояйцевидная пятнистая семянка с хохолком, длиной 5-7 мм, слегка сплюснутая и изогнутая, цвет серовато-бурый или коричневатый. Цветение лопуха большого начинается с июня и продолжается до августа. Плоды растения созревают в сентябре-октябре [4, 32].

Ареалом произрастания Arctii lappae является Европейская часть страны, Кавказ, Западная Сибирь, Дальний Восток [28, 38]. Из приведенной выше информации можно сделать вывод, что растения рода Arctium растут в разных климатических зонах, образуя значительные заросли, пригодные для заготовки, что подтверждается различными источниками литературы [28, 41].

Рисунок 1.1.2 - Лопух большой

В научной литературе отсутствуют данные о состоянии запасов дикорастущих видов лопуха. Есть единичные работы, согласно которым, на Алтае «обнаружены значительные заросли лопуха большого». По данным некоторых источников в плотных зарослях продуктивность корней лопуха составляет 730-790 кг/га, а в разреженных - 350-460 кг/га [41, 92].

Из-за сложностей не механизированного ручного сбора корней лопуха (с помощью вил, лопат), многие авторы, заготовители, практики рекомендуют внедрение растения в сельскохозяйственную культуру. Применение современных методов сельского хозяйства может способствовать быстрому росту достаточного количества биомассы лопуха по сравнению с естественными условиями [41, 92].

1.2. Степень изученности химического состава листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill.

Семейство Asteraceae (Compositae), включающее в себя род Arctium, представляет собой одно из высокоорганизованных семейств среди цветковых растений.

В химическом составе семейства Астровые присутствуют производные транс-коричной кислоты, флавоноиды, сескви-, ди- и тритерпеноиды, сесквитерпеновые лактоны, ацетиленовые соединения. Ацетиленовые

соединения и сесквитерпеновые лактоны является важными хемотаксономическими маркерами рода и семейства [100].

Российские ученые исследовали только дикорастущее сырье обоих видов. Зарубежные публикации по изучению культивируемых А. 1аррае и А. tomentosi единичны. Обобщенная информация данных литературы относительно выделенных веществ, идентифицированных групп биологически активных веществ в листьях А. 1аррае и А. tomentosi представлена в таблице 1 (Приложение 2). Всего из листьев лопуха большого идентифицировано около 230 индивидуальных веществ, относящихся к разным классам соединений, а из листьев лопуха войлочного - около 50.

Лопух войлочный. В листьях л. войлочного обнаружены лигнановые гликозиды арктиин и арктигенин [6, 120], флавоноиды (кверцетин, кемпферол, лютеолин и производные апигенина), хлорогеновая кислота, транс-кофейная кислота, лупеол 3-ацетат и в-ситостерол 3-О-глюкозид. В липофильных экстрактах и фракциях найдены в-амирин, токоферол, фитостеролы [107].

Методом масс-спектроскопии в листьях лопуха войлочного были обнаружены макро- и микроэлементы, основные из которых К, Са, Mg, А1, Si, Fe, Sr, Т^ Вг, Мп, Ва, В, 7п, Rb, Си [8].

В соке листьев лопуха войлочного обнаружены летучие вещества и жирные кислоты, ванилин, эвгенол, фуран (1,3-бензодиоксол), 2,2,7,7-тетраметилтрицикло[6.2.1.0(1,6)]ундец-4-ена-3-он, 4-метокси-6-(2-

пропенила), пальмитиновая кислота, этилпальмитат, этиллинолеат и дибутилсебацинат [27].

В исследовании содержания экстрактивных веществ в листьях лопуха войлочного, экстракция водой дала выход 20,38%, в то время как водно-спиртовые растворы показали выход в диапазоне 9,81-13,86% [17].

Лопух большой. Листья лопуха большого содержат калий, кальций, магний, натрий, цинк, железо, марганец, кобальт, медь, молибден,

аминокислоты, арбутин, флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты, дубильные вещества, сахара, каротиноиды, антоцианы, хлорофилл, витамин С, каучук [38, 75, 81, 85].

Его листья и стебли имеют в составе пектиновые вещества, лютеолин, кверцетин, кверцитрин, рамнозид [38, 75]. Жирное масло листьев содержит пальмитиновую и линолевую кислоты, а также их этиловые эфиры. В экстракте листьев, полученном с использованием метанола, были обнаружены лигнаны арктигенин и арктиин [38].

Из этанольного экстракта надземной части А. 1аррае были выделены стигмастерол, в-ситостерол, этилпальмитат, фитол, диоктилфталат и 3-0-ацетиллупеол [110].

Моно- и дикафеоилхиновые кислоты, содержащиеся в листьях лопуха большого, проявляют гастрозащитное действие [85].

Листья лопуха большого содержат хлорогеновую и 1,5-дикаффеоилхинную кислоты, наличие которых установлено благодаря высокоэффективной и ультраэффективной жидкостной хроматографии [81].

В эфирном масле листьев идентифицированы ванилин, миристицин, эвгенол, 2,2,7,7-тетраметилтрицикл [6.21.0(1,6)]ундец-4-ен-3-он, дибутила себацинат [40], в-туйон (11,6%), а-туйон (3.4%), кариофиллена оксид (8.3%), куминальдегид (7.7%), камфора (5.3%), в-ионон (4.7%), дигидроэдулан II (5.3%) [78].

Н.Кнауб изучено содержание экстрактивных веществ в листьях лопуха большого. Автор считает, что наиболее приемлемым экстрагентом является вода, которая обеспечивает максимально полный выход из сырья (заготовленного в период с июня по сентябрь в первый год вегетации) танинов и ПС. Выход экстрактивных веществ, извлекаемых водой, составил от 27,59 до 31,62% [21].

По данным другого исследования, проведенного Биндюк М.А. количество экстрактивных веществ, извлекаемых из листьев водой, составило

36,75%. Сырье собирали в фазу цветения лопуха (второй год вегетации) [3].

Таким образом, основываясь на данных литературы, можно сделать заключение о разной степени изученности химического состава листьев лопуха большого и лопуха войлочного. При этом информация по культивируемым видам лопуха в литературе отсутствует.

1.3. Фармакологические свойства, применение в народной медицине листьев Arctii lappae L. и Arctii tomentosi Mill.

Согласно данным литературы в народной медицине разных стран чаще всего применяются корни лопуха. Значительно меньше сведений об использовании надземной части - плодов и листьев.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Жалнина Людмила Владимировна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Ажикова, А.К. Количественное определение аминокислот в листьях гингко двулопастного (Ginkgo biloba L.) / А.К. Ажикова // Сборник трудов седьмой научной конференции «Современные тенденции развития технологий здоровьесбережения». - Москва, 2019. - Т. 12. - С. 151-155.

2. Беляков, К.В. Определение инулина в корневищах и корнях девясила высокого (Inula helenium) / К.В. Беляков, Д.М. Попов // Фармация.-1998.- № 1.- С. 34-36.

3. Биндюк, М.А. Разработка технологии, стандартизация экстракта и мази из листьев лопуха большого: автореферат на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 15.00.01/ М.А. Биндюк. - Барнаул, 2009. -23 с.

4. Богачева, Н.Г. Стандартизация лекарственного сырья листьев лопуха большого / Н.Г. Богачева, Е.А. Коняева, О.Г. Алентьева // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2015. - №7. - С. 30-33.

5. Боев, Р.С. Химическое исследование корней лопуха как источника биологически активных веществ противоопухолевого действия: диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 15.00.02 / Р.С. Боев. - Томск, 2006. -125 с.

6. Большой энциклопедический словарь лекарственных растений: учебное пособие / под ред. Г.П. Яковлева. - Санкт-Петербург, 2015. - 759 с.

7. Брусенцева, Л.Ю. Лекарственные и пищевые растения семейства Астровые (asteraceae): учебный справочник / Л.Ю. Брусенцева, О.А. Кузовенко. - Самара: Самарский мед. институт «РЕАВИЗ», 2013. - 74 с.

8. Величко, В.В. Элементный состав листьев, корней и экстрактов лопуха войлочного /В.В. Величко, М.А. Ханина // Медицинские и фармацевтические науки. - 2011. - № 5. - С. 17.

9. Величко, В.В. Сравнительное фармакогностическое исследование

лопуха войлочного и лопуха большого: автореферат на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 14.04.02 / В.В. Величко. - Самара, 2012. - 27 с.

10. Гафурова, М.М. Новое поступление в гербарий Чувашского национального музея в 2020 году / М.М. Гафурова // Естественнонаучные исследования в Чувашии. - 2021. - № 7. - С. 126-138.

11. Гончаров, Н.Н. Фармакогностическое изучение кульбабы осенней (Leontodon autumnalis L.) и кульбабы шершавоволосистой (Leontodon hispidus L.): диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 14.04.02 / Н.Н. Гончаров. - Курск, 2015. - 162 с.

12. Государственная Фармакопея Российской Федерации: Т.1. [Электронный ресурс]/ под ред. С.В. Емшанова, О.Г. Потанинп, Е.В. Буданова, В.В. Чистякова. - 14 - е изд. Москва, 2018. - режим доступа: https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol1/ (22.06.2024)

13. Государственная Фармакопея Российской Федерации: Т.2. [Электронный ресурс]/ под ред. С.В. Емшанова, О.Г. Потанинп, Е.В. Буданова, В.В. Чистякова. - 14 - е изд. Москва, 2018. - режим доступа: https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol2/ (12.07.2024)

14. Государственная Фармакопея Российской Федерации: Т.4. [Электронный ресурс]/ под ред. С.В. Емшанова, О.Г. Потанинп, Е.В. Буданова, В.В. Чистякова. - 14 - е изд. Москва, 2018. - режим доступа: https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol4/ (11.08.2024)

15. Гринкевич, Н.И., Сафронич, Л.Н. Химический анализ лекарственных растений / Учебное пособие для фармацевтических вузов // Сафронич Л.Н., Отряшенкова В.Э. и др. Под ред. Гринкевич Н. И., Сафронич Л. Н. - Москва, 1983.- 176 с.

16. Дмитриева, С.О. Исследование химического состава листьев лопуха большого (Arctium Lappa L.) / С.О. Дмитриева, Н.В. Бирюкова // The Scientific Heritage. - 2021. - № 67-2 (67). - С. 22-25.

17. Дудко, В.В. Стандартизация сухого экстракта с

противовоспалительными и анальгетическими свойствами из листьев Arctium tomentosum Mill. / В.В. Дудко, Т.Г. Хоружая, В.Г. Пашинский, Т.Н. Поветьева, Т.П. Новожеева, Н.Е. Коршунова // Бюллетень Сибирской медицины. - 2006. -Т. 5. № 3. - С. 9-13.

18. Кароматов, И.Дж. Лопух, репейник - перспективное растительное лекарственное средство (обзор литературы) / И.Дж. Кароматов, Р.А. Нурмухамедова, М.Н. Бадриддинова // Биология и интегративная медицина. -2017.- №5. - С.163-182.

19. Кароматов, И.Дж. Простые лекарственные средства / И.Дж. Кароматов. - Бухара: Дурдона, 2012.-912 с.

20. Керашева, С.И. Антибактериальные свойства стабилизированного сока лопуха большого / С.И. Керашева, O.K. Шершнева, В.Ф. Турецкова, С.И. Керашева // Сборник научных трудов «Лекарственные растения Алтайского края». - Томск, 1986. - С. 131.

21. Кнауб, Н.Н. Фитохимическое исследование и перспективы использования листьев лопуха большого, произрастающего в Алтайском крае, в качестве лекарственного сырья: диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 15.00.02 / Н.Н. Кнауб. - Пермь, 2006. - 157 с.

22. Кокина, Д.Г. Изучение состава, некоторых физико-химических свойств и биологической активности полисахаридного комплекса листьев лопуха большого / Д.Г. Кокина, И.А. Сычев // Российский медико-биологический вестник имени академика И. П. Павлова. -2017. -Т.25. - №1. -С.42-48.

23. Кокина, Д.Г. Действие полисахарида листьев лопуха большого на эритропоэз в условиях железодефицитной анемии / Д.Г. Кокина, И.А. Сычев // Современные проблемы науки и образования. - 2022. - № 5. - С. 94.

24. Коломиец, Н.Э. Стандартизация листьев крапивы двудомной / Н.Э. Коломиец, Г.И. Калинкина, Н.Н. Сапронова // Фармация. - 2011. - №6. - С. 2224.

25. Коломиец, Н.Э. Химический состав и биологическая активность метаболитов рода Arctium L. / Н.Э. Коломиец, Р.С. Боев, Л.В. Жалнина, В.А. Тихомирова, Д.Р. Кашапов, Р.А. Бондарчук, Т.П. Новожеева, Н.Ю. Абрамец, С.М. Сафронов, А.К.Х. Али // Химия растительного сырья. - 2021.- №2. - С. 29-57.

26. Коломиец, Н.Э. Оценка элементного профиля листьев, корней, семян и сухи экстрактов Arctium lappa и Arctium tomentosum / Н.Э. Коломиец, Р.С. Боев, Л.В. Жалнина, Али Абдуджалил Каид Хасан, А.А. Марьин // Химия растительного сырья. - 2024.- №2. С. 138-147.

27. Копытько, Я.Ф. Состав летучих веществ и жирных кислот сока листьев лопуха войлочного / Я.Ф. Копытько, А.А. Кирьянов, Ю.В. Стихин // Химико-фармацевтический журнал. - 2003.- №6. - С. 46-47.

28. Красноборов, И.М. Флора Сибири. Т. 13. Asteraceae / И.М. Красноборов. - Новосибирск, 1997. - 472 с.

29. Лигостаева, Ю.В. Фармакогностическое исследование бересты и перспективы ее использования в медицине: диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 14.04.02/ Ю.В. Лигостаева. -Новосибирск, 2015. - 192 с.

30. Литвинский, В.А. Атомно-эмиссионная спектроскопия с индуктивно связанной плазмой для определения содержания меди в растениях и продукции растениеводства / В.А. Литвинский, Е.А. Гришина, В.В. Носиков, Л.О. Сушкова // Плодородие. - 2018. - № 5. - С. 57-60.

31. Минаева, В.Г. Лекарственные растения Сибири /В.Г. Минаева. -Новосибирск: Наука, 1970. - 272 с.

32. Официальные лекарственные растения Нахчыванской Автономной Республики/пер. с азерб. С.Г. Марданлы. - Орехово-Зуево: ГГТУ, 2018. - 452 с.

33. 0ФС.1.5.3.0008.15 Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах // Государственная фармакопея Российской Федерации/ Министерство здравоохранения Российской Федерации. XIV изд. Том II.

Москва, 2018. С. 2365-2369. [Электронный ресурс]. - URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 / (Дата обращения 23.10.2023).

34. Писарев, Д.И. Сапонины и их определение в корневищах аралии маньчжурской в условиях Белгородской области / Д.И. Писарев, Н.А. Мартынова, Н.Н. Нетребко, О.О. Новиков, В.Н. Сорокопудов // Химия растительного сырья. -2009. -№4. -С. 197-198.

35. Поветьева, Т.Н. Противовоспалительные свойства сухих экстрактов из корней и листьев Arctium tomentosum Mill. / Т.Н. Поветьева, В.Г. Пашинский, В.В. Дудко // Растительные Ресурсы. - 2001. - №2. - С. 80-85.

36. Поветьева, Т.Н. Механизмы адаптогенного действия лекарственных растений Сибири: автореферат на соискание ученой степени доктора биологических наук: 14.00.25 / Т.Н. Поветьева. - Томск, 2002. - 42 с.

37. Потеряева, О.Н. Изучение гепатопротекторного действия растительных экстрактов при экспериментальном повреждении печени / О.Н. Потеряева, Г.С. Русских, В.В. Иванова, О.Р. Грек, В.И. Шарапов, М.Г. Ханина, М.М. Геворгян, В.В. Величко // Медицина и образование в Сибири. - 2012. -№ 4. - С. 28.

38. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т.5. Семейство Asteraceae (Compositae). Часть 1. Роды Achillea-Doronicum/ ответственный редактор А.Л. Буданцев. - Санкт-Петербург; Москва: Изд-во КМК, 2012. -317 с.

39. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейство Asteraceae. /Под ред. П.Д. Соколова. -Санкт-Петербург: Наука, 1993. -352 с.

40. Ровкина, К.И. Разработка и стандартизация активной фармацевтической субстанции гиполипидемического действия на основе полисахаридов некоторых высших растений флоры Сибири: диссертация на соискание ученой степени кандидата фармацевтических наук: 14.04.02 / К.И. Ровкина. - Томск, 2019. - 134 с.

41. Рудский, В.В. Растительные ресурсы Алтая: учебное пособие для студентов географического факультета / В.В. Рудский. - Барнаул, 1993. - 30 с.

42. Савина, А.А. Сесквитерпеновые лактоны сока из листьев лопуха большого / А.А. Савина, В.И. Шейченко, Ю.В. Стихин, В.А. Стихин, Т.А. Сокольская, О.С. Анисимова, Я.Ф. Копытько, Е.И. Гродницкая, О.А.Черкасов // Химико-фармацевтический журнал. - 2006. - Т. 40. - № 11. -С. 43-45.

43. СанПиН 2.3.2.1078 - 01: [Электронный ресурс] / Гигиенические требования безопасности и пищевой ценности пищевых продуктов // для биологически активных добавок к пище на растительной основе. - режим доступа: http://docs.cntd.ru/document/901806306 (12.05.2023)

44. Сергалиева, М.У. Определение сапонинов в листьях Arctium lappa / М.У. Сергалиева, А.А. Цибизова, Самотруев А.В. // Прикаспийский вестник медицины и фармации. - 2022. - Т.3.- №3.- С. 21-24.

45. Суткин, А.В. Новые находки адвентивных видов сосудистых растений в г. Улан-Удэ и его окрестностях (Западное Забайкалье) / А.В. Суткин // Turczaninowia. - 2021. - Т. 24. № 2. - С. 42-50.

46. Токсанбаева, Ж.С. Исследования фитопрепарата лопуха войлочного на антиоксидантную активность / Ж.С. Токсанбаева // Наука и новые технологии. - 2010. - №5. - С. 105-106.

47. Универсальная энциклопедия лекарственных растений / Сост. Путырский И.Н., Прохоров В.Н. - М.: Махаон, 2000. - 656 с.

48. Фархутдинов, Р.Г. Основы фитохимического анализа: учебное пособие / Р.Г. Фархутдинов, Н. В. Кудашкина, Р. А. Зайнуллин [и др.]. - Уфа: РИЦ БашГУ, 2016. - 288 с.

49. Фисюнов, А.В. Сорные растения. - М.: Колос, 1984. - 320 с.

50. ФС.2.5.0030.15 Календулы лекарственной цветки// Государственная фармакопея Российской Федерации / Министерство здравоохранения Российской Федерации. - XIV изд. - Том IV. - Москва, 2018. - С. 6106-6117. [Электронный ресурс]. - URL:

https://femb.ru/record/pharmacopea14 / (Дата обращения 17.10.2023).

51. ФС.2.5.0019.15 Крапивы двудомной листья // Государственная фармакопея Российской Федерации / Министерство здравоохранения Российской Федерации. -XIV изд. -Том IV. -Москва, 2018. -С. 6134-6143. [Электронный ресурс]. - URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 / (Дата обращения 25.09.2023)

52. ФС.2.5.0032.15 Подорожника большого листья // Государственная фармакопея Российской Федерации / Министерство здравоохранения Российской Федерации. -XIV изд. -Том IV. -Москва, 2018. -С. 6336-6342. [Электронный ресурс]. - URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 / (дата обращения: 25.09.2023).

53. ФС.2.5.0029.15 Мяты перечной листья // Государственная фармакопея Российской Федерации / Министерство здравоохранения Российской Федерации. -XIV изд. -Том IV. -Москва, 2018. -С. 6284-6292. [Электронный ресурс]. - URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 / (Дата обращения 26.10.2023).

54. ФС.2.5.0106.18 Шиповника плоды // Государственная фармакопея Российской Федерации / Министерство здравоохранения Российской Федерации. -XIV изд. -Том IV. -Москва, 2018. -С. 6622-6633. [Электронный ресурс]. - URL: https://femb.ru/record/pharmacopea14 /(дата обращения: 24.10.2023).

55. ФСП 42-0330168301. Донника трава «ангро». - Курск: Курский государственный медицинский университет, 2001. - 11 с.

56. Шипилина, Л.Ю. Дикие родичи культурных растений Калининградской области / Л.Ю. Шипилина // Труды по прикладной ботанике, генетике и селекции. - 2019. - Т. 180. -№ 4. -С. 32-43.

57. Шретер, А.И. Лекарственная флора советского Дальнего Востока / А.И. Шретер. - М.: Медицина, 1975. - 328 с.

58. Японская фармакопея 18 изд. [Электронный ресурс] // Режим достYпа:https://www.pmda.go.ip/english/rs-sb-std/standards-development/ip/

0029.html (дата обращения: 01.11.23).

59. Adham, A.N. Induction of apoptosis, autophagy and ferroptosis by thymus vulgaris and Arctium lappa extract in leukemia and multiple myeloma cell lines / A.N. Adham, M.E.F. Hegazy, A.M. Naqishbandi, T. Efferth // Molecules. -2020. - Vol. 25, № 21. - P. 5016.

60. Ahmadabad, H.N. Comparison of the Immunomodulatory Properties of Root and Leaves of Arctium Lappa (Burdock) in Vitro / H.N. Ahmadabad, M. Behnamfar, M.N. Firizi, S. Saghayan, F. Taghasi, A. Abbaspur // Zahedan J Res Med Sci. - 2017. - Vol. 19, № 10.

61. Al-Snafi, A.E. The Pharmacological Importance and Chemical Constituents of Arctium Lappa. A Review. / A.E. Al-Snafi // Int J for Pharm Res Scholars. - 2014. - Vol. 3, №1. - P. 663-670.

62. Arctium. The Plant List. [Электронный ресурс] // Режим доступа: http://www.theplantlist.org/1.1/browse/A/Compositae/Arctium/ (дата обращения 25.02.2023).

63. Awad, A.B. In vitro and in vivo (SCID mice) e ffects of phytosterols on the growth and dissemination of human prostate cancer PC-3 cells / A.B. Awad, C.S. Fink, H. Williams, U. Kim // European Journal of Cancer Prevention. - 2001. -Vol. 10. № 6. - P. 507-513.

64. Chang, C.-Z. Arctigenin, a Potent Ingredient of Arctium lappa L., Induces Endothelial Nitric Oxide Synthase and Attenuates Subarachnoid Hemorrhage-Induced Vasospasm through PI3K/Akt Pathway in a Rat Model / C.-Z Chang, S.-C. Wu, C.-M. Chang, C.-L. Lin, A.-L. Kwan, // BioMed Research International. - 2015. - Vol. 2015, Article ID 490209. - Р. 10.

65. Chen, F.-A. The influence of different treatments on the free radical scavenging activity of burdock and variations of its active components / F.-A. Chen, A.-B. Wu, C.-Y. Chen // Food Chemistry. - 2004.- Vol. 86, № 4. - P. 479484.

66. Chen, J. The antiviral activity of arctigenin in traditional Chinese medicine on porcine circovirus type 2 / J. Chen, W. Li, E. Jin, Q. He, W. Yan, H.

Yang, S. Gong, Y. Guo, S. Fu, X. Chen, S. Ye, Y. Qian // Res. Vet. Sci. - 2016.- Vol. 106. - P. 159-164.

67. Cho, M.K. Arctigenin, a phenylpropanoid dibenzylbutyrolactone lignan, inhibits MAP kinases and AP-1 activation via potent MKK inhibition: the role in TNF-alpha inhibition / M.K. Cho, Y.P. Jang, Y.C. Kim, S.G. Kim // Int. Immunopharmacol. - 2004. - Vol. 4. - P. 1419-1429.

68. Compositae. The Plant List. [Электронный ресурс] // Режим доступа: http://www.theplantlist.org/1.1/browse/A/Compositae/ (дата обращения 19.03.2023).

69. Cui, J. Burdock (Arctium lappa L.) leaf flavonoids rich in morin and quercetin 3-O-rhamnoside ameliorate lipopolysaccharide-induced inflammation and oxidative stress in RAW264.7 cells / J. Cui, W. Zong, N. Zhao, R. Yuan // Food Sci Nutr. - 2022. - Vol. 10, № 8. - P. 2718-2726.

70. De Almeida, A.B. Antiulcerogenic activity of aqueous fraction from leaves of Arctium lappa L. (Asteraceae) / A.B. de Almeida, A. Luiz-Ferreira, M. Cola, L.M. Batista, L.D.P. Magri, M.R.F. Tiene, L.C. Santos, W. Vilegas, A.R.M. Souza-Brito // Journal of Medicinal Plants Research. - 2012. - Vol. 6, № 9. - P. 1764-1769.

71. De Almeida, A.B. Anti-inflammatory intestinal activity of Arctium lappa L. (Asteraceae) in TNBS colitis model / A.B. de Almeida, M. Sánchez-Hidalgo, A.R. Martín, A. Luiz-Ferreira, J.R. Trigo, W. Vilegas, L. C. dos Santos, A.R. Souza-Brito, C.A. de la Lastra // J. Ethnopharmacol. - 2013. - Vol. 146, № 1. -P. 300-310.

72. De Souza, A.R.C. Extraction of Arctium lappa leaves using supercritical CO2 + ethanol: Kinetics, chemical composition, and bioactivity assessments /A.R.C. de Souza, A.R. Guedes, J.M. Folador Rodriguez, M.C.M. Bombardelli, M.L. Corazza M.L. // Journal of Supercritical Fluids. - 2018. - Vol. 140. - P. 137146.

73. Eich, E. (-)- Arctigenin as a lead structure for inhibitors of human immunodeficiency virus type-1 integrase / E. Eich, H. Pertz, M. Kaloga, J. Schulz,

M.R. Fesen, A. Mazumder, Y. Pommier // J Med Chem. -1996. - Vol. 39 № 1. - P. 86-95.

74. Fan, T. Arctigenin Protects Focal Cerebral Ischemia-Reperfusion Rats through Inhibiting Neuroinflammation / T. Fan, W.L. Jiang, J. Zhu, Y. Feng Zhang // Biol. Pharm. Bull. - 2012. - Vol. 35, № 11. - P. 2004-2009.

75. Ferracane, R. Metabolic profile of the bioactive compounds of burdock (Arctium lappa) seeds, roots and leaves / R. Ferracane, G. Graziani, M. Gallo, V. Fogliano, A. Ritieni // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. - 2010. - Vol. 51, № 2. - P. 399-404.

76. Flavonoids: Advances in Research / Eds J.B. Harborne and T.J. Mabry.-London: New York: Champan and Hall . - 1982.-xii. - 744 p.

77. Gentil, M. In vitro evaluation of the antibacterial activity of Arctium lappa as a phytotherapeutic agent used in intracanal dressings / M. Gentil, J.V. Pereira, Y.T. Sousa, R. Pietro, M.D. Neto, L.P. Vansan, S. de Castro Fran5a // Phytotherapy Research. - 2006. - Vol. 20, № 3. - P. 184-186.

78. Golbaz, F. The Essential oil Composition of Arctium lappa Root and Leaf / F. Golbaz, S. Zare, F. Garakani, F. Mojab // Iranian Journal of Pharmaceutical Sciences. - 2018. - Vol. 14. - P. 1-6.

79. Gun, G. Therapeutic value of Arctium lappa Linn. A review / G. Gun // Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research. - 2019.- Vol. 12. № 7. P. 53-59.

80. Gupta, M. Natural compounds as safe therapeutic options for ulcerative colitis / M. Gupta, V. Mishra, M. Gulati, B. Kapoor, A. Kaur, R. Gupta, M.M. Tambuwala // Inflammopharmacology. - 2022. - Vol. 30, № 2. - P. 397-434.

81. Haghi, G. UPLC and HPLC of caffeoyl esters in wild and cultivated Arctium lappa L. / G. Haghi, A. Hatami, M. Mehran // Food Chemistry. - 2013. -Vol. 138. - P. 321-326.

82. Hayashi, K. Therapeutic effect of arctiin and arctigenin in immunocompetent and immunocompromised mice infected with influenza A virus / K. Hayashi, K. Narutaki, Y. Nagaoka, T. Hayashi, S. Uesato // Biol Pharm

Bull. - 2010. - Vol. 33, № 7 - P. 1199-1205.

83. Horng, C.T. Inhibitory effect of burdock leaves on elastase and tyrosinase activity / C.T. Horng, H.C. Wu, N.N. Chiang, C.F. Lee, Y.S. Huang, H.Y. Wang, J.S. Yang, F.A. Chen // Experimental and Therapeutic medicine. -2017. - Vol. 14. № 4. - P. 3247-3252.

84. Idres, Y.A. A Novel Sesquiterpene Lactone Xanthatin-13-(pyrrolidine-2-carboxylic acid) Isolated from Burdock Leaf Up-Regulates Cells' Oxidative Stress Defense Pathway / Y.A. Idres, D. Tousch, G. Cazals, A. Lebrun, S. Naceri, L.P.R. Bidel, P. Poucheret // Antioxidants (Basel). - 2021. - Vol. 10, № 10. P. 1617.

85. Jaiswala, R. Identification and characterization of five new classes of chlorogenic acids in burdock (Arctium lappa L.) roots by liquid chromatography/tandem mass spectrometry / R. Jaiswala, N. Kuhnert // Food&Function. - 2011.- Vol. 2 №1. - P. 63-71.

86. Javzandolgor, C. Arctium tomentosum (Asteraceae): A new report of a native genus in the flora of Mongolia / C. Javzandolgor, S. Baasanmunkh, Z. Tsegmed, B. Oyuntsetseg, V. Gundegmaa, H.J. Choi // Korean Journal of Plant Taxonomy. - 2021. - Vol. 51, № 4. - P. 391-394.

87. Jiang, Y. Arctigenin Inhibits Glioblastoma Proliferation through the AKT/mTOR Pathway and Induces Autophagy / Y. Jiang, J. Liu, W. Hong, X. Fei, R. Liu // BioMed Research International. - 2020. - Vol. 2020. Article ID 3542613. -Р. 13.

88. Kardosova, A. Antioxidant activity of medicinal plant polysaccharides / A. Kardosova, E. Machova // Fitoterapia. - 2006. - Vol. 77. - P. 367-373.

89. Khatib, N.E. Identification of a Sesquiterpene Lactone from Arctium lappa Leaves with Antioxidant Activity in Primary Human Muscle Cells / N. El Khatib, S. Morel, G. Hugon, S. Rapior, G. Carnac, N. Saint // Molecules. - 2021. -Vol. 26. - P. 1328.

90. Kim, D.H. Suppressive Effect of Arctium lappa L. Leaves on Retinal Damage against A2E-Induced ARPE-19 Cells and Mice / D.H. Kim, Y.R. Choi, J.

Shim, Y.-S. Choi, Y.T. Kim, M.K. Kim, M.J. Kim // Molecules. - 2020. - Vol. 25, № 7. - P. 1737.

91. Kim, Y. K. Inhibitory Effect and Mechanism of Arctium lappa Extract on NLRP3 Inflammasome Activation / Y.K. Kim, S. Koppula, D.W. Shim, E.J. In, S.B. Kwak, M.K. Kim, S.H. Yu, K.H. Lee, T.B. Kang // Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. - 2018. -Vol. 2018. Article ID 6346734. - P. 10.

92. Kolomiets, N.E. Chromatographic and spectral study of Arctium lappa and Arctium tomentosum fructus cultivated in Altai / N.E. Kolomiets, R.S. Boev, L.V. Zhalnina1, Ali Abdujalil Kaid Hasan // Khimiya rastitel'nogo syr'ya. - 2024. -№1. - P. 153-160.

93. Lee, S. Physicochemical Characteristics of Different Parts of Burdock (Arctium sp.) / S. Lee, H.-K. Moon, Il-D. Kim, D.-H. Shin // Current Research on Agriculture and Life Science. - 2014. - Vol. 32. №2. - P 75-78.

94. Li, X. Lappaol F, an anticancer agent, inhibits YAP via transcriptional and post-translational regulation / X. Li, Y.Y. Lin, J.Y. Tan, K.L. Liu, X.L. Shen, Y.J. Hu, R.Y. Yang // Pharmaceutical Biology. - 2021. - Vol. 59, № 1. - P. 619-628.

95. Lin, S.C. Hepatoprotective effects of Arctium lappa on carbon tetrachloride- and acetaminophen-induced liver damage / S.C. Lin, T.C. Chung, C.C. Lin, T.H. Ueng, Y.H. Lin, S.Y. Lin, L.Y. Wang // Am. J. Chin. Med. - 2000. -Vol. 28, № 2. - P. 163-173.

96. Lopes, D.C.D.X.P. Anti-Inflammatory Activity of the Compositae Family and Its Therapeutic Potential Planta / D.C.D.X.P. Lopes, T.B. de Oliveira, A.L. Vi?osa, S.S. Valverde, E. Ricci Júnior // Planta Med. -.2021. -.Vol. 87. - P. 71100.

97. Lou, Z. Metabolomics-based screening of biofilm-inhibitory compounds against Pseudomonas aeruginosa from burdock leaf / Z. Lou, Y. Tang, X. Song, H. Wang // Molecules. - 2015. - Vol. 20. - P. 16266-16277.

98. Machado, F.B. Evaluation of the Antiproliferative Activity of the Leaves from Arctium lappa by a Bioassay-Guided Fractionation / F.B. Machado,

R.E. Yamamoto, K. Zanoli, S.R. Nocchi, C.R. Novello, I.T.A. Schuquel, C.M. Sakuragui, H. Luftmann, T. Ueda-Nakamura, C.V. Nakamura, J.C.P. De Mello // Molecules. - 2012. - Vol. 17. № 2. Р. 1852-1859.

99. Mainka, M. Screening of Antioxidative Properties and Inhibition of Inflammation-Linked Enzymes by Aqueous and Ethanolic Extracts of Plants Traditionally Used in Wound Healing in Poland / M. Mainka, M.E. Czerwinska, E. Osinska, M. Ziaja, A. Bazylko // Antioxidants. -2021. - Vol. 10. - P. 698-712.

100. Mekinica, I.G. Antioxidative / Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Some Asteraceae Plants / I.G. Mekinic, F. Burcul, I. Blazevic, D. Skroza, D. Kerum, V. Katalinic // Natural Product Communications. -2013. - Vol. 8. 4. - P. 471- 474.

101. Nascimento, B.A.C. Arctium lappa extract suppresses inflammation and inhibits melanoma progression / B.A.C. Nascimento, L.G. Gardinassi, I.M.G. Silveira, M.G. Gallucci, M.A. Tomé, J.F.D. Oliveira, M.R.A. Moreira, A.F.G. Meirelles, L.H. Faccioli, C. Tefé-Silva, K.F. Zoccal // Medicines. - 2019. - Vol. 6, № 3. P. 81.

102. Patent 6284289/2001. United States of America. Treatment of herpes infection with composition containing quaternary ammonium compound and an anti-viral agent / D.A.R. Van den Berghe; Filing Date: 5.11.1997; Publication Date: 09/04/2001.

103. Petkova, N. Phytochemical Composition and Antimicrobial Properties of Burdock (Arctium lappa L.) Roots Extracts / N. Petkova, I. Hambarlyiska, Y. Tumbarski, R. Vrancheva, M. Raeva, I. Ivanov // Biointerface Research in Applied Chemistry. - 2022. - Vol. 12. № 3. - Р. 2826 - 2842.

104. Pirvu, L. Burdock (Arctium lappa) Leaf Extracts Increase the In Vitro Antimicrobial Efficacy of Common Antibiotics on Gram-positive and Gramnegative Bacteria / L. Pirvu, I. Nicorescu, C. Hlevca, B. Albu, V. Nicorescu // Open Chem. - 2017. - Vol. 15. - P. 92-102.

105. Shrihastini, V. Plant Derived Bioactive Compounds, Their Anti-Cancer Effects and In Silico Approaches as an Alternative Target Treatment Strategy for

Breast Cancer: An Updated Overview / V. Shrihastini, P. Muthuramalingam, S. Adarshan, M. Sujitha, J.T. Chen, H. Shin, M. Ramesh // Cancers. - 2021. - Vol. 13. - P. 6222-6243.

106. Skowronska, W. Arctium lappa and Arctium tomentosum, sources of arctii radix: Comparison of anti-lipoxygenase and antioxidant activity as well as the chemical composition of extracts from aerial parts and from roots / W. Skowronska, S. Granica, M. Dziedzic, J. Kurkowiak, M. Ziaja, A. Bazylko // Plants. -2021. - Vol. 10 №1. - P. 1-19.

107. Strawa, J. Phytochemical examination of wolly burdock Arctium tomentosum leaves and flower heads / J. Strawa, K. Jakimiuk, M. Waluk, M. Poslednik, J. Nazaruk, M. Tomczyk // Chemistry of Natural Compounds. -2020. -Vol. 56. № 2. - P. 298-300.

108. Studfiles [Электронный ресурс]. - URL: https://studfile.net/preview/1818512/page:41/ (Дата обращения 26.11.2023).

109. Sun, Q. Lappaol F, a novel anticancer agent isolated from plant Arctium lappa L. / Q. Sun, K. Liu, X. Shen, W. Jin, L. Jiang, M.S. Sheikh, Y. Hu, Y. Huang // Mol. Cancer. Ther. - 2014. - Vol. 13, № 1. - P. 49-59.

110. Taleb Agha, M. Proapoptotic and antiangiogenic activities of Arctium Lappa L. on breast cancer cell lines / M. Taleb Agha, H.M. Baharetha, M.A. Al-Mansoub, Y.M. Tabana, N.H. Kaz Abdul Aziz, M.F. Yam, A.M.S. Abdul Majid // Scientifica (Cairo). - 2020. - Vol. 2020. Article ID 7286053. -P. 14.

111. Tang, Y. Screening of antimicrobial compounds against Salmonellaty phimurium from burdock (Arctium lappa) leaf based on metabolomics / Y. Tang, Z. Lou, L. Yang, H. Wang // European Food Research and Technology. - 2015. - Vol. 240. - P. 1203-1209.

112. Umarova, F.A. Development of technology tuning from the plant of the brain of big Arctium lappa L. / F.A. Umarova, N.X. Khabibullayeva, N.S. Kozimjonova, A.X. Mansurov // EPRA International Journal of Research & Development (IJRD). - 2020. - Vol. 5. - №2. - P. 64-66.

113. Wang, D. Arctium Species Secondary Metabolites Chemodiversity and

Bioactivities / D. Wang, A.S. Badarau, M.K. Swamy, S. Shaw, F. Maggi, L.E. da Silva, V. López, A.W.K. Yeung, A. Mocan, A.G. Atanasov // Front. Plant Sci. -2019. - Vol. 10. - P. 834.

114. Wang, M. Arctium lappa leaves based on network pharmacology and experimental validation attenuate atherosclerosis by targeting the AMPK-mediated PPARG/LXRa pathway / M. Wang, B. Cui, M. Gong, Q. Liu, X. Zhuo, J. Lv, L. Yang, X. Liu, Z. Wang, L. Dai // Biomedicine & Pharmacotherapy. - 2022. - Vol. 153. №1. P. 113.

115. Xia, J. Effect of Drying Methods on Volatile Compounds of Burdock (Arctium lappa L.) Root Tea as Revealed by Gas Chromatography Mass Spectrometry-Based Metabolomics / J. Xia, Z. Guo, S. Fang, J. Gu, X. Liang // Foods. - 2021. - Vol. 10, № 4. - P. 868-885.

116. Xing, Y.-P. Comparative analysis of complete chloroplast genomes sequences of Arctium lappa and A. tomentosum / Y.-P. Xing, L. Xu, S.-Y. Chen, Y.-M. Liang, J.-H. Wang, C.-S. Liu, T. Liu and T.-G. Kang // Biologia Plantarum. -2019.- Vol. 63. - P. 565-574.

117. Zhang, D. Comparative analysis of the mitochondrial genome sequences of two medicinal plants: Arctium lappa and A. tomentosum / D. Zhang, Y. Xing, L. Xu, R. Zhao, Y. Yang, T. Zhang, S. Li, G. Bao, W. Ao, T. Liu and T. Kang // Research Square. -2020.

118. Zhang, N. In vivo and in vitro anti-inflammatory effects of water-soluble polysaccharide from Arctium lappa / N. Zhang, Y. Wang, J. Kan, X. Wu, X. Zhang, S. Tang, R. Sun, J. Liu, C. Qian, C. Jin // International Journal of Biological Macromolecules. - 2019. - Vol. 135. - P. 717-724.

119. Zhao, J. Antitubercular Activity of Arctium Lappa and Tussilago Farfara Extracts and Constituents / J. Zhao, D. Evangelopoulos, S. Bhakta, A.I. Gray, V. Seidel // J. Ethnopharmacol. - 2014. - Vol. 155, № 1. - P. 796-800.

120. Zhou, X. Determination of Arctiin and Arctigenin Contents in Arctium tomentosum Mill. by HPLC Method / X. Zhou, H. Zhang, L. Ge, H. Gong, S. Tian // E-Journal of Chemistry. - 2011. - Vol. 8. - P. 372-376.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Лопуха листья Arctii folia

ФС

Вводится впервые

Собранные с июля по октябрь включительно высушенные стеблевые листья двухлетних травянистых дикорастущих и культивируемых растений лопуха большого - Arctium lappa L. и лопуха войлочного — Arctium tomentosum Mill., сем. Сложноцветные - Asteraceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные листья лопуха большого и лопуха войлочного имеют сердцевидную, широко-сердцевидную, широкояйцевидную или широкосердцевидно-яйцевидную форму, верхушка заостренная, остроконечная или тупая, при основании листья сердцевидные, иногда неравнобокие; расставлено выямчето-зубчатые. Верхняя часть листовой пластинки покрыта редкими короткими волосками, нижняя часть густо опушена, жилкование пальчатосетчатое, выражена широкая главная жилка. Черешки ребристые, войлочно-опушенные у обоих видов лопуха. Длина листьев лопуха большого может достигать 60-70 см, ширина 30-50 см, длина черешков может достигать 30см и более. Длина листьев лопуха войлочного может достигать длины 50 см, ширина листовой пластинки 30-40 см, длина черешка до 30 см.

Цвет листьев с верхней стороны - зеленый, с нижней стороны -беловато-серый, цвет черешка - зеленый или часто красновато-коричневый. Запах слабый, специфический. Вкус водного извлечения горьковатый.

Измельченное сырье. Кусочки листьев различной формы, проходящие через сито с размером отверстий 7 мм. При рассмотрении листьев под стереомикроскопом (2х, 4х) видны редкие короткие волоски с одной стороны

ПОДЛИННОСТЬ

и с бело-войлочное опушение с другой стороны листа. Встречаются ребристые, опушенные черешки листьев, а так же их фрагменты. Цвет измельченного сырья светло-зеленый, зеленый, беловато-серый. Запах слабый, специфический. Вкус водного извлечения горьковатый.

Порошок. Кусочки листьев и черешков, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Цвет порошка светло-зеленый, зеленый. Запах слабый, специфический. Вкус водного извлечения горьковатый.

Примечания. Возможные примеси:

1. Мать-и-мачеха обыкновенная (Tussilago farfara L.)

Прикорневые листья черешковые простые, до 15 см длиной, до 10 см шириной. Округло-яйцевидные или широко-яйцевидные, жилкование пальчатое, верхушка острая, основание сердцевидное. Край неравномерно выемчато-зубчатый. Сверху листья без опушения, снизу беловойлочные.

При изучении листьев под стереомикроскопом (10х) видно, что верхняя сторона листа голая, иногда с длинными тонкими спутанными волосками на жилках, нижняя сторона листа покрыта беловойлочным покровом из-за обилия спутанных длинных волосков. Черешки листьев имеют длину до 5 см, они тонкие, округлые или полукруглые в сечении, ребристые, сверху желобоватые и покрыты войлочным опушением.

Листья имеют зеленый цвет с верхней стороны и беловато-серый с нижней; черешки бывают светло-зелеными или беловато-серыми.

2. Белокопытник холодный (Petasites frigidus (L.) Fries)

Прикорневые листья простые, с длинными черешками, треугольно-

сердцевидной формы, верхушка заострена, имеют примерно одинаковую длину и ширину от 3 до 15 см. Листья почти лопастные с глубоко выемчато-зубчатым краем. Сверху листья почти лишены волосков, снизу покрыты войлочным опушением.

При изучении листьев под стереомикроскопом (10х) видно, что верхняя сторона листа немного паутинисто-пушистая, а нижняя сторона густо-серовойлочная. Черешки ребристые, покрыты войлочным опушением.

Цвет верхней стороны листьев зеленовато-бурый или зеленовато-коричневый. Нижняя сторона - серо-зеленая или серо-коричневая, черешки серо-зелено-коричневые.

3. Белокопытник лучистый (Petasites radiatus (J.F. Gmel.))

Прикорневые листья простые, крупные, с длинным черешком, треугольно-

почковидной формы, верхушка коротко заостренная, край широкозубчатый, длина 5-15 см, ширина 10-25 см.

При изучении листьев под стереомикроскоп (10х) видно, что верхняя сторона листа голая, нижняя сторона покрыта редким пушком, черешок ребристый без опушения.

Цвет верхней и нижней стороны зеленовато-бурый, зеленовато-коричневый или серовато-коричневый; черешков - буро-коричневый.

4. Белокопытник войлочный (ненастоящий) (Petasites spürius (Retz.) Rchb.)

Прикорневые листья крупные на длинных черешках, листовая пластинка сердцевидно-треугольная, верхушка заострена, основание сердцевидное, край неравномерно-зубчатый. С нижней стороны листья бело-войлочные, с верхней -зеленые, почти голые или с редким клочковатым пушком. Молодые листья имеют серо-войлочное опушение с обеих сторон, более старые листья имеют войлочное опушение только снизу (с верхней стороны волоски остаются вдоль жилок). Цвет листьев с нижней стороны зеленый или светло-зеленый, с нижней- серовато-зеленый; черешков - коричнево-зеленый или серо-зеленый.

При изучении листьев под стереомикроскоп (10х) видно, что верхняя и нижняя стороны опушены, черешок ребристый, покрыт опушением.

Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении препарата листьев с поверхности видно, что верхний эпидермис A. lappa и A. tomentosum состоит из крупных многоугольных, равномерно утолщенных клеток. Клетки эпидермиса, находящиеся над жилкой листа, имеют удлиненную форму. Нижний эпидермис состоит из более извилистых клеток. Устьица аномоцитного типа, крупные, овальные, погруженные и не погруженные расположены с обеих сторон листа. Внешняя стенка клеток эпидермиса (с обеих сторон листа) имеет складчатую кутикулу, складки которой прямолинейные и вытянуты вдоль клеток. В местах присоединения трихом, складки кутикулы расположены радиально.

На поверхности листа лопуха войлочного и лопуха большого выявлено три вида трихом:

1. Бичевидные тонкостенные, многоклеточные волоски, состоящие преимущественно из 2-6 или более клеток основания и одной очень длинной, извилистой, шнуровидной верхней клеткой, превышающей длину основания в несколько раз. Нижняя клетка основания самая широкая, верхняя клетка основания самая узкая. Этот вид трихом количественно преобладает с нижней стороны листовой пластинки A. lappa и A. tomentosum, образуя густое опушение. Так же этот вид волосков встречается с верхней стороны листовой пластинки в незначительных количествах в основном по краю и жилкам.

2. Простые многоклеточные волоски, состоящие из 4-8 толстостенных клеток, часто с отломанным верхним концом. Конец этих волосков отломан, потому-что 3-4 верхние клетки являются тонкостенными и хрупкими.

Размеры этих трихом в несколько раз превышают размеры бичевидных волосков. Волоски расположены преимущественно вдоль жилок и по краю листа с верхней и нижней стороны.

3. Головчатые волоски, состоящие из многоклеточной ножки и одноклеточной головки встречаются преимущественно с нижней стороны листовой пластинки, редко на верхней части листа. В месте прикрепления многоклеточных трихом виден округлый валик в виде розетки из клеток эпидермиса.

Эфирномасличные железки имеют характерное строение для семейства сложноцветные, состоят из 6-14 выделительных клеток, расположенных попарно, в основном встречаются на нижней стороны листа.

Мезофилл листа состоит из губчатой паренхимы, клетки которой имеют округлую и лопастную форму и содержат капельки эфирного масла желто-зеленого цвета.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка видны фрагменты эпидермиса, устьица аномоцитного типа, эфирно-масличные железки, бичевидные, простые многоклеточные, головчатые волоски.

Примечания. Микроскопия листьев примесных видов растений:

1. Мать-и-мачеха обыкновенная (Tussilago farfara L.). Отличительными микроскопическими признаками листьев является наличие устьиц аномоцитного типа, расположенных с обеих сторон листа, покрытых выростами эпидермиса -криптами. Вокруг устьиц радиально расположенная складчатая кутикула. Под клетками эпидермиса находится аэренхима с крупными воздухоносными полостями. Верхняя сторона листа практически голая, а нижняя сторона покрыта большим количеством бичевидных волосков, образованных тремя-шестью клетками основания и длинной шнуровидной извилистой клеткой. В местах прикрепления волосков видны эпидермальные розетки с круглым валиком посередине. Вокруг мест прикрепления волосков складчатость кутикулы расположена радиально. С верхней и нижней стороны листовой пластинки, вдоль жилок, расположены секреторные канальцы, заполненные желтой жидкостью.

2. Белокопытник холодный (Petasites frigidus (L.) Fries). Устьица овальные крупные, аномоцитного типа, погруженные, расположены только на нижней стороне листа, прикрыты криптами. Под эпидермисом расположена аэренхима с большими воздухоносными полостями. На поверхности листа, с обеих сторон, встречаются волоски трех типов: 1) простые многоклеточные волоски с толстыми стенками, состоящие из двух-четырех широких базальных клеток, верхняя часть у этих волосков, как правило, отсутствует; 2) простые

многоклеточные тонкостенные волоски, основание которых иногда заполнено бурым содержимым. Вокруг места прикрепления этих волосков клетки эпидермиса, заполненные бурым содержимым, образуют розетку. В центре розетки виден округлый валик; 3) тонкостенные волоски бичевидного типа, которые состоят из многоклеточного основания и длинных шнуровидных клеток, которые переплетаются между собой. С верхней и нижней стороны листовой пластинки, вдоль жилок, расположены круглые и овальные вместилища, заполненные желтой жидкостью.

3. Белокопытник лучистый (Petasites radiatus (J.F. Gmel.)). Устьица крупные овальные, погруженные, аномоцитного типа, расположены на верхней и нижней стороне листа, прикрыты криптами. На верхнем и нижнем эпидермисе вокруг устьиц видна лучистая складчатость кутикулы. Под эпидермисом находится аэренхима с крупными воздухоносными полостями. На нижней и верхней стороне листа встречаются простые многоклеточные тонкостенные волоски. Вокруг места прикрепления волосков клетки эпидермиса образуют розетку в центре которой виден округлый валик. С верхней и нижней стороны листовой пластинки, вдоль жилок, расположены круглые и овальные вместилища, заполненные желтой жидкостью.

4. Белокопытник войлочный (ненастоящий) (Petasites spurius (Retz.) Rchb.) Устьица крупные, овальные, аномоцитного типа, расположены с обеих сторон листа, покрыты криптами. Вокруг устьиц видна лучистая складчатость кутикулы. Под эпидермисом находится аэренхима с крупными воздухоносными полостями. На верхней и нижней сторонах листа находятся простые многоклеточные, тонкостенные волоски бичевидного типа, часто с отломанной верхней клеткой, которая очень длинная, тонкая и перекрученная. В местах прикрепления волосков видны эпидермальные розетки с круглым валиком посередине. С нижней стороны волоски образуют густой покров и переплетаются. С верхней и нижней сторон листовой пластинки, вдоль жилок, расположены круглые и овальные вместилища, заполненные желтой или коричневой жидкостью.

Рисунок - Лопуха листья

1- фрагмент верхнего эпидермиса с устьицами аномоцитного типа (100х); 2 -фрагмент нижнего эпидермиса с устьицами аномоцитного типа (400х); 3 -фрагмент эпидермиса над жилкой листа (100х). 4 - фрагмент складчатой кутикулы (100х); 5 - фрагмент кутикулы в месте присоединения волоска (100х); 6 - бичевидный волосок (100х); 7 - опушение нижней части листа (100х); 8 - головчатый волосок (100х); 9 - простые многоклеточные волоски по краю листовой пластинки (100х); 10 - розетка из клеток эпидермиса в месте прикрепления волоска (100х); 11 - эфирно-масличная железка (100х); 12 - паренхимная ткань листа (100х).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Около 1,0 (точная навеска) сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями 1 мм, помещают в коническую колбу со шлифом, вместимостью 50 мл, добавляют 10 мл этилового спирта 96%, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 минут. Затем экстракт охлаждают, фильтруют через бумажный фильтр, высушивают под вакуумом при температуре 40°С до сухого состояния. Затем, для получения испытуемого раствора к сухому остатку добавляли 2 мл 95% этилового спирта.

На линию старта хроматографической пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и раствора СО хлорогеновой кислоты. Пластинку подсушивают в течение 10 минут при комнатной температуре, помещают в камеру с уксусной кислотой 15% (подвижная фаза). После прохождения подвижной фазой 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, просушивают на воздухе. При рассмотрении в УФ-свете на полученной хроматограмме должны проявиться пятна коричневого цвета с Rf около 0,87-088 (хлорогеновая кислота).

Приготовление растворов.

Раствор СО хлорогеновой кислоты. Около 0,001 г вещества растворяют в 10 мл этилового спирта 95% перемешивают. Срок годности СО до 3 месяцев, в прохладном, защищенном от света месте.

Качественные реакции

Около 0,5 г измельченных листьев помещают в колбу вместимостью 50 мл, добавляли 10 мл воды очищенной и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 минут, охлаждают, фильтруют через бумажный фильтр.

К 5 мл фильтрата прибавляют 15 мл этилового спирта 95%. Должен выпасть густой хлопьевидный желтовато-белый осадок (полисахариды).

К 2 мл фильтрата прибавляют 2-3 капли 1% раствора железа (III) аммония сульфата. Должно наблюдаться черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное, измельченное сырье — не более 12%.

Зола общая. Цельное, измельченное сырье — не более 20%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте — не более 3%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 3 мм - в количестве, не превышающем 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 7 мм в количестве, не превышающем 20%; частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм - в количестве, не превышающем 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 2 мм в количестве, не превышающем 5%; частиц, проходящих сквозь сито с диаметром отверстий 0,18 мм - в количестве, не превышающем 5%.

Посторонние примеси. Листьев, изменивших окраску - не более 5%. Органической примеси - не более 3%. Минеральной примеси - не более 1%.

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье. полисахаридов - не менее 3%, сумма гидроксикоричных кислот, в пересчете на хлорогеновую кислоту - не менее 3%, экстрактивных веществ, извлекаемых водой - не менее 35%.

Полисахариды

Методика. Аналитическую пробу сырья измельчали до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Около 10,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещали в колбу со шлифом вместимостью 500 мл, прибавляли 200 мл воды очищенной, нагретой до кипения. Колбу присоединяли к обратному холодильнику и кипятили при перемешивании на электрической плитке в течение 45 мин. Экстракцию повторяли ещё 2 раза, используя по 200 и 100 мл воды соответственно. Время второй и третьей экстракции составило 30 минут. Водные извлечения объединяли и

фильтровали в мерную колбу вместимостью 500 мл через 5 слоёв марли, вложенной в стеклянную воронку и предварительно промытой водой очищенной. Фильтр промывали водой и доводили объём раствора тем же растворителем до метки (раствор А).

25,0 мл раствора А помещали в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляли 75 мл спирта 96%, перемешивали, подогревали на водяной бане в течение 30 мин. Содержимое колбы фильтровали через предварительно высушенный и взвешенный беззольный бумажный фильтр. Осадок на фильтре последовательно промывали 15 мл раствора спирта 96% в воде очищенной (3:1), 10 мл смеси этилацетата и спирта 96% (1:1). Фильтр с осадком сушили сначала на воздухе, затем при температуре 100 - 105 °С до постоянной массы.

Содержание полисахаридов в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляли по формуле:

где т1 - вес фильтра, г; т2 - вес фильтра с осадком, г; а - навеска сырья, г; W - влажность сырья, %.

Сумма гидроксикоричных кислот.

Около 0,5 г (точная навеска), измельченного до 2мм сырья, помещают в плоскодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70%. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане при 80°С в течение 30 минут. После охлаждения извлечение фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл так, чтобы частички сырья не попали на фильтр. Экстрагирование повторяют еще раз в описанных выше условиях.

Полученное извлечение фильтруют в ту же мерную колбу. Объединенные извлечения в мерной колбе доводят спиртом 70% до метки и перемешивают (раствор А).

1,0 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б). Оптическую плотность раствора Б измеряют на спектрофотометре при длине волны 330±5 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют спирт 96%.

Содержание суммы гидроксикоричных кислот в пересчете на хлорогеновую кислоту вычисляют в процентах (Х) по формуле:

где

А - оптическая плотность раствора Б;

Ли°м - удельный показатель поглощения хлорогеновой кислоты при длине волны 330 нм, равный 507;

а - навеска сырья, г;

W - влажность сырья,%.

Определение экстрактивных веществ, извлекаемых водой, проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (навеска сырья 1,0г, экстрагент -вода очищенная).

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных препаратов».

ПРИЛОЖЕНИЕ 2

Таблица 1. Метаболиты АтсШ 1аррае - А1 АтсШ tomentosi - А2

№ Химическое название метаболита Вид лопуха и литература

1 2 3

Гидроксибензойные кислоты и их

производные

1 Галловая кислота А1, А2 [38]

2 О-гидроксибензойная кислота А1 [38]

Гидроксикоричные кислоты и их

производные

3 Кофейная кислота А1, А2 [38]

4 Транс-кофейная кислота А1 [119], А2 [107]

5 Транс-коричная кислота А2 [38]

6 Хлорогеновая кислота А1, А2 [38]

7 Изохлорогеновая кислота А1 [38]

8 1-О-кофеилхинная кислота А1 [81]

9 Производные циннамовой кислоты А1 [38]

10 Цинарин А1 [113]

11 1,3-О-дикаффеоилхинная кислота А1 [85]

12 1,5-дикафеоилхинная кислота А1 [81]

13 Ы-кумаровая кислота А1 [113, 119]

14 М-кумаровая кислота А1, А2 [9]

15 Протокатеховая кислота А1 [38]

16 Метиловый эфир протокатеховой кислоты А1 [38]

17 Метиловый эфир хлорогеновой кислоты А1 [18]

18 3,5-дикафеолихининовая кислота А1 [99]

19 Сукцинат кофеилхининовой кислоты А1 [99]

20 Сукцинат кофеилхининовой кислоты А1 [99]

21 Феруловая кислота А1, А2 [9]

Жирные кислоты и их производные

22 Гексадекановая кислота А1, А2 [113]

23 Декановая кислота А1 [72]

24 Палмитолевая кислота А1 [110]

25 Линолевая кислота А1, А2 [38]

26 Метиловый эфир стеариновой кислоты А1 [72]

27 Метиловый эфир 9-октадеценовой кислоты А1 [72]

28 Метиловый эфир пальмитиновой кислоты А1 [72, 110]

29 Метиловый эфир олеиновой кислоты А1 [110]

30 Этиловый олеат А1 [110]

31 Этиловый эфир пальмитиновой кислоты А1 [110], А2 [27]

32 Этиловый эфир октадекановой кислоты А1 [110]

33 Этиловый эфир линоленовой кислоты А1 [72]

34 Этиловый эфир линолевой кислоты А1 [72], А2 [27]

35 2,3-дигидроксипропилэлеат А1 [110]

36 3-этил-5-(2-этил)октадекан А1 [72]

37 Моноэфир пальмитиновой кислоты А1 [72]

38 Метил-7,10,13Д6-докозатетраэнат А1 [72]

Дубильные вещества

39 Производные пирокатехина А1, А2 [9, 38]

Фенольные соединения и их гликозиды

40 Арбутин А1 [38]

41 Ванилин А1 [38], А2 [27]

Кумарины и их производные

42 Скополетин А1 [9], А2 [38]

43 Кумарин А1 [9], А2 [38]

44 Умбеллиферон А1 [9], А2 [38]

45 Эскулин А1 [9], А2 [38]

46 Эскулетин А1 [9], А2 [38]

47 4,4,5,8-тетраметилхроман-2-он А1 [110]

(дикумарол)

Флавоноиды и их производные

48 Апигенин А1, А2 [38]

49 Генистеин А1 [78]

50 Гиперозид А1 [38]

51 Гесперидин А1 [38]

52 Кверцетин А1 [38], А2 [107]

53 Рутин А1, А2 [38]

54 3-О-рутинозид А1 [38]

55 3-О-рамнозилглюкозид кверцетина А1 [38]

56 Лютеолин А1 [81], А2 [107]

57 3,7-О-диглюкозид кемпферола А1 [38]

58 Кверцитрин А1 [81, 113]

59 Кверцетин-3-О-рамнозид А1 [113], А2 [9]

60 Кемпферол А1 [119], А2 [107]

61 Кемпферол-3-О-глюкозид А1 [119]

62 Кемпферол-3-рутинозид А1 [18]

63 Морин А1 [69]

64 Биоханин А А1 [78]

65 Материсенол А1 [78]

66 Мелитензин А1 [113]

67 Дегидромелитензин А1 [38, 113]

68 Дегидромелитензин-8-(4- А1 [38, 113]

гидроксиметилакрилат)

Антоцианы А1 [38], А2 [27]

69

70

71

72

73

74

75

76

77

78

79

80

81

82

83

84

85

86

87

88

89

90

91

92

93

94

95

96

97

98

99

100

101

102

Аминокислоты и другие азотсодержащие соединения

Аспарагиновая кислота А1, А2 [9]

Валин А1, А2 [9]

Гистидин А1, А2 [9]

Глутамин А1, А2 [9]

Глутаминовая кислота А2 [5]

Лейцин А1, А2 [9]

Лизин А1, А2 [9]

Орнитин А1, А2 [9]

Пролин А1, А2 [9]

Серин А1, А2 [9]

Треонин А1, А2 [9]

Триптофан А1, А2 [9]

Аргинин А1 [18]

2,4,6-триметил-1,3-фенилендиамин А1 [110]

Цистеин А1, А2 [9]

Углеводы / Сахара / Полисахариды

Инулин А1[5], А2 [38]

Слизи А1 [5]

Рамноза, арабиноза, галактоза А1 [22, 38]

Галактуроновая кислота А1 [113]

Глюкоза А1 [22, 113]

Манноза А1 [113]

Производные бензола, фенола

1,3-бензодиоксол Диизооктилфталат Эвгенол Миристицин ( 4-метокси-6-(2-пропенил) Лолиолид А2 [27] А1 [72] А1 [38], А2 [27] А1 [38] А1 [113]

м-ксилол (диметилбензол) А1 [78]

Цис-(-)-2,4а,5,6,9а-гексагидро-3,5,5,9-тетраметил(1Н)-бензоциклогептен А1 [110]

Нафталин А1 [110]

3а-гидроксилано ста-5,15-диен Стигмастерол в-ситостерол Стигмаст-5-эн-3-илацетат в-ситостерол 3-О-глюкозид

А1 [113] А1 [110]

А1 [119], А2 [113] А1 [72] А2 [107]

Тритерпеновые сапонины

103 3а-ацетоксигумулен (3-ацетокси-8-изомер-а-хумулен) А1 [113]

104 9-19-Циклоланостан-3,7-диол А1 [72]

105 Урсоловая кислота А1 [97]

106 Олеаноловая кислота А1 [44]

107 а-амирин А1 [72]

108 в-амирин А1 [113], А2 [107]

109 Амирина ацетат А1 [72]

110 Лупеол 3-ацетат А1 [110], А2 [107]

111 Тараксастерол А1 [119]

112 Тараксастерола ацетат А1 [119]

Стероидные сапонины

113 Тенаксиссозид I А 1 [97]

Органические кислоты

114 Бензойная кислота А1 [113]

115 Фумаровая кислота А1 [38]

116 Дибутиловый эфир себациновой кислоты А1 [38], А2 [27]

Витамины

117 Аскорбиновая кислота А1, А2 [9, 38]

118 Каротиноиды А1 [38]

119 Токоферолы А1 [107]

120 1-(3-Метилциклопент-2-ен-1-ил)циклогексен (а-Кондурен) А1 [72]

Монотерпены, сесквитерпены, дитерпны, политерпены и их производные, альдегиды и кетоны

121 Пиранон А1 [72]

122 ^^^-1,4,4- Триметилциклододека-6,3,1-триен А1 [110]

123 в-костол А1 [78]

124 Фитол А1 [72]

125 Фитол (3,7,11,15-тетраметилгексадецен-2-ол) А1 [110]

126 Гимахала-2,4-диен А1 [110]

127 Изоаромадендрен-эпоксид А1 [113]

128

129

130

131